專(zhuān)利名稱(chēng)：一種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于海洋生物技術(shù)領(lǐng)域，涉及到海洋深層水的綜合利用，具體涉及ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
隨著人們生活水平的不斷提高，生活方式以及飲食結(jié)構(gòu)都發(fā)生了重大的變化，高脂血癥等心腦血管疾病的發(fā)病率也越來(lái)越高。高脂血癥又稱(chēng)為脂質(zhì)代謝紊亂或異常，主要是指血液中的TC、LDL-C及TG高于正常范圍及/或HDL-C水平過(guò)低。脂質(zhì)代謝紊亂可引起血液粘稠度增高，血流緩慢，血液中過(guò)多的脂質(zhì)沉積于動(dòng)脈內(nèi)壁，形成粥樣硬化斑塊，造成動(dòng)脈狹窄，血流受阻，靶器官供血減少進(jìn)而形成損傷。腦部動(dòng)脈硬化可引起腦溢血或腦血栓；心臟冠狀動(dòng)脈硬化可引起胸悶、心慌，嚴(yán)重者可導(dǎo)致心肌梗塞。此外，高脂血也是促進(jìn)高血壓、糖耐量異常、糖尿病的ー個(gè)重要危險(xiǎn)因素。研究發(fā)現(xiàn)在心腦血管疾病的發(fā)病機(jī)理中，高脂血癥是ー個(gè)主要的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，血清脂質(zhì)水平下降1%，冠心病的發(fā)病率就會(huì)降低2%，所以控制高脂血癥的發(fā)生及發(fā)展對(duì)于預(yù)防心腦血管疾病有著重要的意義，高脂血癥的預(yù)防和治療已經(jīng)成為目前的研究熱點(diǎn)。在高脂血癥的治療中，他汀類(lèi)藥物應(yīng)用最廣泛，能夠有效降低血液中LDL-C的濃度，長(zhǎng)期使用后能降低心血管意外事件的發(fā)生率和冠心病死亡率。但是這種藥物具有一定的副作用，諸如肝功能損害、橫紋肌溶解癥、肌肉疼痛、乏力、皮疹等；而且停藥后血脂回升較快，難以達(dá)到長(zhǎng)期治療和預(yù)防的目的。調(diào)整飲食習(xí)慣和改善生活方式是治療各種高脂血癥的基礎(chǔ)，尤其對(duì)于原發(fā)性的高脂血癥患者，應(yīng)首選飲食治療。楊衛(wèi)國(guó)等人的研究表明隨著膳食結(jié)構(gòu)的改變，75%的患者血脂水平有不同程度的下降。美國(guó)近20年來(lái)人群血脂水平的下降與醫(yī)師和患者對(duì)飲食治療的重視程度有夫。因此，研究開(kāi)發(fā)具有降脂作用的食物，對(duì)通過(guò)調(diào)整膳食結(jié)構(gòu)從而改善聞血脂癥具有重要意義。研究表明，礦物元素與高脂血癥等心腦血管疾病的發(fā)生和發(fā)展密切相關(guān)，通過(guò)飲食補(bǔ)充有益礦物元素鎂、鈣、鉻、錳、鋅、硒，同時(shí)減少有毒微量元素汞、鉛等的接觸，以維持體內(nèi)礦物兀素含量的相對(duì)穩(wěn)定，對(duì)預(yù)防聞脂血癥等心腦血管疾病的發(fā)生具有積極意義。海洋深層水通常是指陽(yáng)光照射不到，不能進(jìn)行光合作用，約200m深度以下的海 水。海洋深層水處于無(wú)陽(yáng)光進(jìn)入的海洋無(wú)光層，而且遠(yuǎn)離來(lái)自人類(lèi)、陸地以及大氣的化學(xué)物質(zhì)的影響和污染。研究表明，海洋深層水具有以下幾個(gè)主要特點(diǎn)(I)低溫恒定性-不受陽(yáng)光照射，不像海洋表層水溫度變化無(wú)常，海洋深層水終年溫度不變，恒定于5°C左右；(2)礦物元素豐富且穩(wěn)定性-與海洋表層水相比，海洋深層水富含人體所必需的鈣、鎂、鉀、鈉、鐵、銅、鋰、鑰、錳、鋅、鍺、碘、磷、氟、硒、三價(jià)鉻、硅酸根離子等92種礦物元素，涵蓋了人體新陳代謝所需的元素種類(lèi)。除了其含量豐富外，由于這些水以漫長(zhǎng)的時(shí)光流動(dòng)于“無(wú)光層”的海洋深層，無(wú)光合作用發(fā)生、不受外界影響，因此所含礦物元素的成分十分穩(wěn)定，完美地解決了人體平衡攝取各種所需礦物元素的要求；(3)無(wú)菌清潔性-處于海洋“無(wú)光層”的深層水，除了遠(yuǎn)離人類(lèi)現(xiàn)代文明的影響以及不受陸地、大氣化學(xué)物質(zhì)、病菌的污染外，本身也無(wú)生成病原菌等細(xì)菌的條件。因此，海洋深層水是非常清潔的無(wú)菌自然之水；(4)海洋深層水水質(zhì)呈弱堿性。由于具有以上特點(diǎn)，海洋深層水作為ー種新的天然資源正在受到世人的矚目。海洋深層水富含各種礦物質(zhì)和微量元素，理論上它對(duì)高脂血癥具有很好的改善作用。我國(guó)海域?qū)拸V，海岸線(xiàn)漫長(zhǎng)，海洋資源豐富，但尚無(wú)海洋深層水開(kāi)發(fā)應(yīng)用方面的研究；而且我國(guó)水資源緊缺，水污染嚴(yán)重，開(kāi)發(fā)我國(guó)的海洋深層水資源具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容
針對(duì)目前我國(guó)水資源日益緊缺、水污染日趨嚴(yán)重且高脂血癥發(fā)病率急劇升高等熱點(diǎn)問(wèn)題，本發(fā)明提供了ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥 物或保健品中的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，所述保健飲用液包括A液和B液，所述A液為淡水，所述B液經(jīng)以下步驟制得 海洋深層水經(jīng)反滲透裝置后分離出的濃水部分，將濃水部分進(jìn)行減壓濃縮，使其體積濃縮至原來(lái)體積的0. 67-3. 33%，然后過(guò)濾除去析出的氯化鈉，得到的高度濃縮液即為B液，所述保健飲用液的硬度在200-1000ppm，所述海洋深層水為海平面500m以下且經(jīng)脫鹽處理后的海水。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述保健飲用液中鎂鈣鉀鈉元素的濃度比值為2. 5-3. 5 0.45-1 0.3-1 0. 3-1. 5，不含有機(jī)物，且水質(zhì)呈弱堿性。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述鎂鈣鉀的濃度最優(yōu)比為3 : I : I。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述保健飲用液的水質(zhì)呈弱堿性，25°C測(cè)定的pH值 I. 5±0. 3。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述保健飲用液中的有益元素含量為鋅
0.0325-16. 4 u g/L ;硒 0. 0395-0. 712 y g/L ;鉻 0. 104-4. 54 u g/L ;錳 0. 156-5. 52 u g/L。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述保健飲用液中的有害元素含量為鉛
<5 u g/L ;萊< 0. 5 y g/L ;砷< 5 u g/L ;鎘< I u g/L。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述海洋深層水取自于距離海岸線(xiàn)20km以外。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)所述淡水來(lái)源于海洋深層水經(jīng)反滲透裝置循環(huán)后分尚出的淡水。對(duì)上述技術(shù)方案的進(jìn)ー步改進(jìn)日常飲食對(duì)礦物質(zhì)的攝取較少的高脂血癥患者選用硬度為600-1000ppm的保健飲用液，反之選擇硬度為200-400ppm的保健飲用液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)和積極效果是本發(fā)明提供的含有海洋深層水的保健飲用液富含有益微量元素鎂、鈣、釩、鉻、錳、鋅、硒，而有毒微量元素汞和鉛的含量很低，該保健飲用液可以顯著降低血清脂質(zhì)水平及動(dòng)脈粥樣硬化指數(shù)(LDL-C/HDL-C)，同時(shí)減少肝臟脂質(zhì)蓄積，并且顯著降低空腹血糖含量，提示該保健飲用液能顯著調(diào)節(jié)機(jī)體脂質(zhì)代謝紊亂及其并發(fā)的脂肪肝和糖尿病，對(duì)高脂血癥等代謝性疾病具有較好的預(yù)防和治療作用。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合具體實(shí)施方式
對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案作進(jìn)ー步詳細(xì)的說(shuō)明。實(shí)施例I一、保健飲用液的制備本發(fā)明所述保健飲用液的制備方法如下I)海洋深層水預(yù)處理將取自距離海岸線(xiàn)20km以外，海平面500m以深的海洋深 層水放入儲(chǔ)水罐中，采用濾器過(guò)濾，除去海水中的浮游植物及微生物，并通過(guò)活性炭過(guò)濾器過(guò)濾，進(jìn)ー步除去有機(jī)物。2)淡水和濃水分離將預(yù)處理后得到的海洋深層水通過(guò)高壓泵進(jìn)入反滲透裝置將海洋深層水分為淡水部分和濃水部分(淡水部分水質(zhì)與純浄水相同，或水質(zhì)接近純凈水；濃水部分中各種陰陽(yáng)離子的濃度接近原海水中各種離子濃度的2倍)，分離出的淡水部分即A液進(jìn)入淡水儲(chǔ)水罐，分離出的濃水部分進(jìn)入濃水儲(chǔ)水罐。反滲透裝置的エ藝參數(shù)為運(yùn)轉(zhuǎn)壓4MPa，功率I. 5KW，產(chǎn)水量IT/d。3)濃水脫鈉處理將濃水儲(chǔ)水罐中的濃水部分進(jìn)行減壓濃縮，使其體積濃縮至原來(lái)體積的0. 67-3. 33%，然后過(guò)濾除去析出的氯化鈉，得到高度濃縮的濃縮液即為B液，所述濃縮液中鎂:鈣鉀:鈉元素的濃度比值為2. 5-3. 5 0. 45-1 0. 3-1 0. 3-1. 5，所述鎂、鈣、鉀、鈉元素在濃縮液中的含量濃度單位為mg/L。其中微量元素鉻，鋅，硒，錳等的濃度與濃縮倍數(shù)呈倍比關(guān)系?；蛘撸部梢圆捎眠x擇性電滲析對(duì)反滲透后分離出的濃水部分進(jìn)行脫鈉處理，電滲析裝置采用I價(jià)陽(yáng)離子選擇性透過(guò)膜，陰膜采用普通離子交換膜。在電滲析過(guò)程中所有陰離子都可透過(guò)陰膜，僅單價(jià)陽(yáng)離子透過(guò)陽(yáng)膜，脫鈉之后的濃水中的多價(jià)陽(yáng)離子與原濃水中的濃度相近。4)保健飲用液灌裝將經(jīng)過(guò)步驟I)反滲透裝置出來(lái)的淡水A液和步驟3)所得到的B液可以按照需求混合制得不同硬度的保健飲用液，所述硬度以CaCO3的含量計(jì)算(GB5749-2006生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn))，其計(jì)算公式為硬度=Ca (ppm)) X2. 5+Mg(ppm) X 4. 1，經(jīng)過(guò)高溫滅菌，分裝即可。采用電感耦合等離子質(zhì)譜(ICP-MS)對(duì)保健飲用液中的無(wú)機(jī)元素含量進(jìn)行測(cè)定以硬度為1000的保健飲用液為例，其中幾種主要礦物質(zhì)及微量元素含量為鎂200-224mg/L ;鈣33-67mg/L ;鉀20-67mg/L ;鈉:20_100mg/L(鈉的含量越低越好);鋅
0.0325-16. 4 u g/L ；硒:0. 0395-0. 712 y g/L ;鉻:0. 104-4. 54 u g/L ；錳 0. 156-5. 52 u g/L,鉛< 5 u g/L ;汞< 0. 5 u g/L ;砷< 5 u g/L ;鎘< I y g/L。本發(fā)明所述200-1000硬度下的保健飲用液中礦物質(zhì)及微量元素含量與其硬度成正比。所述保健飲用液中鎂I丐鉀鈉元素的濃度比值為
2.5-3.5 0. 45-1 0.3-1 0. 3-1. 5，富含有益微量元素鋅，硒，鉻，錳，有毒微量元素鉛，汞，神，鎘含量較低，不含有機(jī)物，且水質(zhì)呈弱堿性。所述有益微量元素含量如下鋅:0.0325-16. 4 U g/L； :0. 0395-0. 712 U g/L ；鉻0. 104-4. 54 u g/L M 0. 156-5. 52 u g/L。
所述有毒微量兀素含量如下鉛< 5ii g/L ;萊< 0. 5 U g/L ;砷< 5 ii g/L ；鎘< I U g/L。
使用pH計(jì)對(duì)其pH值進(jìn)行測(cè)定(25°C )，結(jié)果表明保健飲用液pH值在7. 5±0. 3范圍內(nèi)，水質(zhì)呈弱堿性。ニ、保健飲用液預(yù)防高脂血癥的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)-細(xì)胞水平I、實(shí)驗(yàn)方法取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的IfepG2細(xì)胞，經(jīng)胰酶消化后5 X IO5ceIVmL接種于6孔板；待細(xì)胞長(zhǎng)匯合度約70%，換為不含血清的DMEM，饑餓12h ;分別加入不同硬度的保健飲用液(硬度分別為 200，400，600，800，IOOOppm)，I u mol/L 的洛伐他汀(Lovastatin, Lova)作為陽(yáng)性對(duì)照，空白組給予蒸餾水；24h后，吸除剰余培養(yǎng)液，冰PBS洗2適，加入100 u L細(xì)胞裂解液，吹打均勻，冰水中孵30分鐘，期間不斷用細(xì)胞刮涂抹，使裂解液和細(xì)胞充分接觸；將裂解液轉(zhuǎn)移至I. 5mLep管中，低溫超聲破碎IOs ；12000rpm 15min 4°C離心，_80°C冷凍保存，用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)含量；蛋白質(zhì)含量測(cè)定用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定，按試劑盒說(shuō)明書(shū)操作；分別測(cè)定細(xì)胞內(nèi)總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)的含量TC含量按膽固醇測(cè)定試劑盒 Amplex Red Cholesterol Assay Kit 的說(shuō)明書(shū)進(jìn)行測(cè)定；TG 含量按 Infinity Triglycerides Reagent說(shuō)明書(shū)進(jìn)行；單位以姆毫克蛋白質(zhì)中脂質(zhì)含量O g/mg protein)計(jì)算。2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果由表I可以看出，經(jīng)過(guò)24h的孵育，該保健飲用液可以劑量依賴(lài)性地降低H印G2胞內(nèi)脂質(zhì)含量，其中硬度為800和IOOOppm的保健飲用液可以顯著降低H印G2胞內(nèi)的TC的含量，硬度為IOOOppm的保健飲用液可以顯著降低胞內(nèi)TG的含量。表I :保健飲用液對(duì)H印G2細(xì)胞胞內(nèi)脂質(zhì)含量的影響
組別TCTG
空白組59.98±4.1872.64±2.87
20053.98±4.8766.71±1.79
40052.18±4.3065.26±2.35
60049.35±1.2163.16±0.99
80046.84±0.82#58.35±1.62
100042.16±1.25#54.61±2.03#^Lova 組 _35.63±4.32## _ 59.06±1.79 —注與空白組對(duì)比#p< 0. 05，##p < 0. 01 ；三、保健飲用水預(yù)防高脂血癥的藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)-動(dòng)物水平I、實(shí)驗(yàn)方法Wistar大鼠40只，雄性，體重180_220g，隨機(jī)分為空白組、模型組、陽(yáng)性對(duì)照(Lova)組和保健飲用液組，每組10只。實(shí)驗(yàn)期間大鼠自由進(jìn)食普通飼料和飲水，空白組、模型組、Lova組均給予蒸餾水，保健飲用水組給予硬度為IOOOppm的保健飲用液。每天上午Lova組灌胃洛伐他汀(5mg kg_l)，其余各組灌胃5%。CMC-Na ;下午空白組灌胃等體積土溫-80和丙ニ醇混合物(體積分?jǐn)?shù)I : 1)，其余各組灌胃高脂乳劑(25%豬油、10%膽固醇、2 %膽酸鈉、I %丙基硫氧嘧啶，20 %吐溫80，20 %丙ニ醇和22 %水)，灌胃劑量均為10mL*kg-l。毎日觀察大鼠生長(zhǎng)情況，包括行為、毛發(fā)等，準(zhǔn)確記錄攝食量、攝水量；每周固定時(shí)間稱(chēng)量體重。實(shí)驗(yàn)周期為28d。于末次給藥后，大鼠禁食不禁水12h，摘眼球取血，離心取血清，測(cè)定血清中總膽固醇(TC)，甘油三酯(TG)，低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)，丙ニ醛(MDA)，超氧化物歧化酶(SOD)，谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)，谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)和谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)含量；剝離肝臟、腎臟，稱(chēng)重，計(jì)算臟器指數(shù)；制備肝勻漿，離心，取上清液測(cè)定肝臟TC和TG ;動(dòng)物肝臟用固定液固定，石蠟包埋后切片，HE染色，進(jìn)行組織病理學(xué)檢查。2、實(shí)驗(yàn)結(jié)果I)保健飲用液對(duì)高脂血癥大鼠體重、攝食量和飲水量的影響實(shí)驗(yàn)期間空白組大鼠狀況良好，毛色有光澤，活動(dòng)自如，攝食、飲水正常；模型組大鼠開(kāi)始進(jìn)食良好，隨著造模時(shí)間的延長(zhǎng)，大鼠毛色漸偏黃，光澤度差，蜷縮少動(dòng)，體重減輕，進(jìn)食進(jìn)水減少；而給予保健飲用液之后，大鼠的行為、毛發(fā)等都有所改善，而且體重、攝食量和飲水量都有恢復(fù)正常的趨勢(shì)。 表2 :保健飲用液對(duì)高脂血癥大鼠體重的影響(，n = 10，g)
權(quán)利要求
1.ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，所述保健飲用液包括A液和B液，所述A液為淡水，所述B液經(jīng)以下步驟制得海洋深層水經(jīng)反滲透裝置后分離出的濃水部分，將濃水部分進(jìn)行減壓濃縮，使其體積濃縮至原來(lái)體積的0. 67-3. 33%，然后過(guò)濾除去析出的氯化鈉，得到的高度濃縮液即為B液，所述保健飲用液的硬度在200-1000 ppm，所述海洋深層水為海平面500m以下且經(jīng)脫鹽處理后的海水。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述保健飲用液中鎂鈣鉀鈉元素的濃度比值為2. 5-3. 5 :0. 45-1 :0. 3-1 :0. 3-1. 5，不含有機(jī)物，且水質(zhì)呈弱堿性。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述鎂鈣鉀的濃度最優(yōu)比為3:1:1。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述保健飲用液的水質(zhì)呈弱堿性，25°C測(cè)定的pH 值 7. 5±0. 3。
5.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述保健飲用液中的有益元素含量為鋅.0. 0325-16. 4 l^g/L ;硒 0. 0395-0. 712Pg/L ;鉻 0. 104-4. 54 l^g/L ;錳 0. 156-5. 52吒/し
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述保健飲用液中的有害元素含量為鉛〈.5/L ;萊 < 0. 5I^g /L ;砷 < 5Mg/L ;鎘 < IMg /し
7.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述海洋深層水取自于距離海岸線(xiàn)20km以外。
8.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于所述淡水來(lái)源于海洋深層水經(jīng)反滲透裝置循環(huán)后分尚出的淡水。
9.根據(jù)權(quán)利要求I所述的ー種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，其特征在于日常飲食對(duì)礦物質(zhì)的攝取較少的高脂血癥患者選用硬度為600-1000 ppm的保健飲用液，反之選擇硬度為200-400 ppm的保健飲用液。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種含有海洋深層水的保健飲用液在制備預(yù)防或治療高脂血癥的藥物或保健品中的應(yīng)用，保健飲用液包括A液和B液，A液為淡水，所述B液為海洋深層水經(jīng)反滲透裝置分離出的濃水部分，再經(jīng)減壓濃縮得到的高濃度濃縮液，硬度范圍為200-1000ppm。該保健飲用液以自由飲用的方式給予高脂乳劑造模的高脂血癥大鼠，給藥28天后，能顯著降低高脂血癥大鼠的血脂水平，抑制脂質(zhì)過(guò)氧化，并顯著提高脂蛋白代謝酶LCAT，LPL及HL的活性，從而改善高脂血癥大鼠體內(nèi)的脂質(zhì)代謝紊亂狀態(tài)及其并發(fā)的脂肪肝和糖尿病。該保健飲用液來(lái)源于海洋深層水，具有資源豐富，易于產(chǎn)業(yè)化等優(yōu)點(diǎn)，在高脂血癥的防治方面具有廣闊的市場(chǎng)和應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A23L2/38GK102652758SQ20121011460
公開(kāi)日2012年9月5日 申請(qǐng)日期2012年4月18日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月18日
發(fā)明者何珊, 劉紅兵, 李春霞, 李?；? 管華詩(shī), 郝杰杰 申請(qǐng)人:中國(guó)海洋大學(xué)