1.一種建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,
該方法包括如下步驟:
(1)取待測茜草藤藥材0.5~5.0重量份,精密稱定,精密加入體積分數為20%~100%的甲醇水溶液25~100體積份,稱定重量,超聲提取15~60分鐘,放冷,再稱定重量,用體積分數為20%~100%的甲醇水溶液補足損失的重量,搖勻,過濾,取續(xù)濾液,作為供試品溶液;
(2)精密稱取蘆丁對照品,加甲醇制成每1體積份含0.00005~0.00020重量份的溶液,搖勻,作為對照品溶液;
(3)色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈為流動相A、以體積分數為0.05%~0.5%的磷酸水溶液為流動相B按照如下程序進行梯度洗脫:0~5min,A:B為5%:95%;5~40min,A:B為5%:95%→20%:80%;40min,A:B為20%:80%;40~55min,A:B為20%:80%→40%:60%;55min,A:B為40%:60%;55~60min,A:B為40%:60%→80%:20%;60min,A:B為80%:20%;60~70min,A:B為80%:20%;70min,A:B為80%:20%;70~75min,A:B為80%:20%→5%:95%;檢測波長為218~222nm,柱溫25~40℃,流速為0.5~1.5mL/min;
(4)分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液5~20μL,注入高效液相色譜儀,測定,分別得到供試品溶液和對照品溶液的液相色譜;
(5)利用國家藥典委員會中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng),對供試品溶液和對照品溶液的液相色譜分別經過數據導入、多點校正和數據匹配,即得指紋圖譜;
所述重量份與所述體積份的關系為g/mL。
2.根據權利要求1所述的建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,
該方法包括如下步驟:
(1)取待測茜草藤藥材0.5~2.0重量份,精密稱定,精密加入體積分數為30%~70%的甲醇水溶液25~50體積份,稱定重量,超聲提取20~30分鐘,放冷,再稱定重量,用體積分數為30%~70%的甲醇水溶液補足損失的重量,搖勻,過濾,取續(xù)濾液,作為供試品溶液;
(2)精密稱取蘆丁對照品,加甲醇制成每1體積份含0.00005~0.00015重量份的溶液,搖勻,作為對照品溶液;
(3)色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈為流動相A、以體積分數為0.05%~0.2%的磷酸水溶液為流動相B按照如下程序進行梯度洗脫:0~5min,A:B為5%:95%;5~40min,A:B為5%:95%→20%:80%;40min,A:B為20%:80%;40~55min,A:B為20%:80%→40%:60%;55min,A:B為40%:60%;55~60min,A:B為40%:60%→80%:20%;60min,A:B為80%:20%;60~70min,A:B為80%:20%;70min,A:B為80%:20%;70~75min,A:B為80%:20%→5%:95%;檢測波長為220nm,柱溫為30~35℃,流速為0.8~1.2mL/min;
(4)分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液5~15μL,注入高效液相色譜儀,測定,分別得到供試品溶液和對照品溶液的液相色譜;
(5)利用國家藥典委員會中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng),對供試品溶液和對照品溶液的液相色譜分別經過數據導入、多點校正和數據匹配,即得指紋圖譜。
3.根據權利要求2所述的建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,
該方法包括如下步驟:
(1)取待測茜草藤藥材1.0重量份,精密稱定,精密加入體積分數為50%的甲醇水溶液25體積份,稱定重量,超聲提取30分鐘,放冷,再稱定重量,用體積分數為50%的甲醇水溶液補足損失的重量,搖勻,過濾,取續(xù)濾液,作為供試品溶液;
(2)精密稱取蘆丁對照品,加甲醇制成每1體積份含0.00010重量份的溶液,搖勻,作為對照品溶液;
(3)色譜條件:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑,以乙腈為流動相A、以體積分數為0.1%的磷酸水溶液為流動相B按照如下程序進行梯度洗脫:0~5min,A:B為5%:95%;5~40min,A:B為5%:95%→20%:80%;40min,A:B為20%:80%;40~55min,A:B為20%:80%→40%:60%;55min,A:B為40%:60%;55~60min,A:B為40%:60%→80%:20%;60min,A:B為80%:20%;60~70min,A:B為80%:20%;70min,A:B為80%:20%;70~75min,A:B為80%:20%→5%:95%;檢測波長為220nm,柱溫為30℃,流速為1.0mL/min;
(4)分別精密吸取供試品溶液和對照品溶液10μL,注入高效液相色譜儀,測定,分別得到供試品溶液和對照品溶液的液相色譜;
(5)利用國家藥典委員會中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng),對供試品溶液和對照品溶液的液相色譜分別經過數據導入、多點校正和數據匹配,即得指紋圖譜。
4.根據權利要求1~3任一項所述的建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,以250mm×4.6mm、5μm的Agilent HC-C18為色譜柱。
5.根據權利要求1~4任一項所述的建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,所述茜草藤藥材的指紋圖譜中,共有特征峰為:1號峰、2號峰、3號峰、4號峰、5號峰和6號峰蘆??;以6號峰為內參照峰,各峰號的相對保留時間分別為:1號峰0.15±0.0075、2號峰0.30±0.015、3號峰0.45±0.0225、4號峰0.55±0.0275、5號峰0.63±0.0315和6號峰1.0。
6.根據權利要求5所述的建立茜草藤藥材的指紋圖譜的方法,其特征在于,所述茜草藤藥材的指紋圖譜中,各峰號的相對保留時間分別為:1號峰0.15、2號峰0.30、3號峰0.45、4號峰0.55、5號峰0.63和6號峰1.0。
7.權利要求1~6任一項所述的方法在茜草藤藥材的質量檢測和質量控制中的應用。