本發(fā)明涉及一種檢測方法，尤其涉及一種摻偽花生油的鑒別方法，屬于食品分析檢測領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

濃香花生油具有獨(dú)特的風(fēng)味，并且含有豐富的維生素E、甾醇等對人體有益的伴隨物質(zhì)，深受消費(fèi)者喜愛。濃香花生油已經(jīng)成為食用植物油中營養(yǎng)價值較高、價格較貴的產(chǎn)品。

我國是世界第一大食用植物油消費(fèi)國，市場極大的供需缺口以及濃香花生油獨(dú)特的風(fēng)味和較高價格定位，使得市場摻偽現(xiàn)象嚴(yán)重。國家標(biāo)準(zhǔn)《花生油》中規(guī)定“花生油中不得摻有其他食用油和非食用油，不得添加任何香精和香料”。然而，近年來一些不法商販為獲取暴利，屢屢在花生油中摻假，利用香精香料勾兌低價值油冒充濃香花生油，以次充好。濃香花生油的摻假與禁用物質(zhì)的非法添加對人民群眾的健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。長期食用不僅會對人體健康帶來危害，也擾亂了國內(nèi)食用油市場的秩序。為了保護(hù)生產(chǎn)者和消費(fèi)者的合法權(quán)益，加強(qiáng)濃香花生油的生產(chǎn)和銷售監(jiān)管，建立一套科學(xué)、簡便、快速、準(zhǔn)確、有效的摻偽花生油的鑒別方法尤為重要。

目前花生油摻假檢測方法主要有光譜法、核磁共振法、同位素法、氣相色譜法等。其中光譜法需大量樣品建模，檢測費(fèi)用高；氣相色譜法主要通過檢測脂肪酸種類和含量來鑒別是否摻偽，準(zhǔn)確度低；同位素法和核磁共振法設(shè)備昂貴且檢測方法尚不成熟，難以廣泛推廣應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明針對現(xiàn)有花生油摻假檢測方法存在的不足，提供一種摻偽花生油的鑒別方法。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下：

一種摻偽花生油的鑒別方法，包括如下步驟：

1)預(yù)處理：將花生油樣品進(jìn)行預(yù)處理；

2)頂空微萃?。夯罨腿☆^，以除去萃取頭表面的雜質(zhì)，利用頂空固相微萃取技術(shù)對步驟1)中預(yù)處理后的花生油樣品進(jìn)行芳香性物質(zhì)的萃??；

3)分析：利用氣質(zhì)聯(lián)用儀對萃取出來的芳香性物質(zhì)進(jìn)行分析；

4)通過采用Xcalibur軟件處理實(shí)驗(yàn)圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù)，利用乙基麥芽酚和三乙酸甘油酯作為特征性物質(zhì)對花生香精進(jìn)行定性分析。

進(jìn)一步，所述氣質(zhì)聯(lián)用儀中氣相色譜使用的毛細(xì)管柱為DB-5MS色譜柱，柱溫箱升溫程序?yàn)?0℃保持2min，以5℃/min的升溫速率升溫至220℃，保持10min，汽化室溫度：250℃，氦氣流速0.8mL/min，進(jìn)樣方式為不分流進(jìn)樣。

進(jìn)一步，所述氣質(zhì)聯(lián)用儀中質(zhì)譜條件為電子轟擊離子源能量70eV，離子源溫度200℃，燈絲發(fā)射電流200μA，接口溫度250℃，全譜掃描，掃描質(zhì)量范圍m/z 32-402。

進(jìn)一步，步驟2)中萃取的溫度為45-50℃，萃取時間為40-50min。

進(jìn)一步，步驟1)中所述預(yù)處理的方法為將花生油置于頂空瓶中于45-50℃恒溫水浴中加熱平衡20-30min。

進(jìn)一步，步驟2)中所述的萃取頭為固相微萃取手動進(jìn)樣(DVB/CAR/PDMS)萃取頭，50/30μm DVB/CAR on PDMS。

進(jìn)一步，步驟2)中所述活化萃取頭的方法為將氣質(zhì)聯(lián)用儀的進(jìn)樣口溫度設(shè)置為270℃，再將萃取頭插入氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)樣口進(jìn)行活化，活化時間為30-60min。

本發(fā)明通過采用Xcalibur軟件處理實(shí)驗(yàn)圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù)，經(jīng)計算機(jī)檢索與NIST譜庫(107000個化合物的數(shù)據(jù))和Wiley譜庫(320000個化合物的數(shù)據(jù))匹配確定未知化合物的名稱及相關(guān)信息，僅報道RSI(匹配度)大于800(最大值為1000)的相關(guān)鑒定結(jié)果。各組分的相對含量由峰面積歸一化法計算得到。

本發(fā)明的有益效果是：

1)本發(fā)明利用頂空固相微萃取結(jié)合氣質(zhì)聯(lián)用，分離鑒定花生油及花生香精的揮發(fā)性物質(zhì)，通過分析花生油中固有的內(nèi)源物和花生香精的特征芳香性物質(zhì)，進(jìn)行花生油摻偽鑒別，對保護(hù)花生油生產(chǎn)者和消費(fèi)者合法權(quán)益具有重要意義。

2)檢測限低，可達(dá)0.1％，準(zhǔn)確度高，檢測費(fèi)用低，操作方便。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)例對本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1：

特征性物質(zhì)的確定方法如下：

1)樣品收集：取不同品牌的濃香花生油2例，不同廠家花生香精2例；

2)取2g濃香花生油或香精置于15mL頂空瓶中，加入攪拌子后，將頂空瓶置于50℃恒溫水浴中加熱平衡20min，通過帶孔隔墊插入已經(jīng)活化好的SPME萃取頭，推出萃取頭后，在50℃恒溫水浴的條件下頂空吸附40min后，于250℃解析5min。

3)氣相色譜分析條件：毛細(xì)管柱：DB-5MS色譜柱(30mm×0.25mm×0.25μm)；氣相柱溫升溫程序：40℃保持2min，以5℃/min的升溫速率升溫至220℃,保持10min；汽化室溫度：250℃；氦氣流速0.8mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；

4)質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)；電子能量70eV；離子源溫度200℃；燈絲發(fā)射電流200μA；接口溫度為250℃；全譜掃描，掃描質(zhì)量范圍m/z32-402；

5)通過Xcalibur軟件處理實(shí)驗(yàn)圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù)，經(jīng)計算機(jī)檢索與NIST譜庫(107000個化合物的數(shù)據(jù))和Wiley譜庫(320000個化合物的數(shù)據(jù))匹配確定未知化合物的名稱及相關(guān)信息，僅報道RSI(匹配度)大于800(最大值為1000)的相關(guān)鑒定結(jié)果。各組分的相對含量由峰面積歸一化法計算得到。表1為花生油香精及濃香花生油主要芳香性物質(zhì)GC-MS分析結(jié)果。

表1花生香精及濃香花生油主要芳香性物質(zhì)GC-MS分析結(jié)果

表1中的數(shù)值表明，花生香精與濃香花生油中的芳香性物質(zhì)的種類存在著顯著的差異，濃香花生油中含有豐富的吡嗪類物質(zhì)，而香精中吡嗪種類較單一；花生油香精中含有大量的乙基麥芽酚和三乙酸甘油酯，而濃香花生油中未檢出，因此，我們使用乙基麥芽酚和三乙酸甘油酯作為花生香精的特征性物質(zhì)用于花生油中花生香精的定性檢測。

實(shí)施例2：

花生油中花生香精的檢測限確定方法如下：

1)樣品制備：依次向花生調(diào)和油中添加0.1％、0.2％、0.5％(質(zhì)量分?jǐn)?shù))的花生香精，配制摻偽花生油；

2)分別取2g步驟1中制備的摻偽花生油，置于頂空瓶中，加入攪拌子后，將頂空瓶置于50℃恒溫水浴中加熱平衡20min，通過帶孔隔墊插入已經(jīng)活化好的SPME萃取頭，推出萃取頭后，在50℃恒溫水浴的條件下頂空吸附40min后，于250℃解析5min；

3)氣相色譜條件：毛細(xì)管柱：DB-5MS色譜柱(30mm×0.25mm×0.25μm)；氣相柱溫升溫程序：40℃保持2min，以5℃/min的升溫速率升溫至220℃,保持10min；汽化室溫度：250℃；氦氣流速0.8mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；

4)質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)；電子能量70eV；離子源溫度200℃；燈絲發(fā)射電流200μA；接口溫度為250℃；全譜掃描，掃描質(zhì)量范圍m/z32-402；

5)通過Xcalibur軟件處理實(shí)驗(yàn)圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù)，經(jīng)計算機(jī)檢索與NIST譜庫(107000個化合物的數(shù)據(jù))和Wiley譜庫(320000個化合物的數(shù)據(jù))匹配確定未知化合物的名稱及相關(guān)信息，僅報道RSI(匹配度)大于800(最大值為1000)的相關(guān)鑒定結(jié)果。各組分的相對含量由峰面積歸一化法計算得到。表2為摻偽花生油中特征性鑒別物質(zhì)的GC-MS分析結(jié)果。添加0.1％花生香精的調(diào)和油完全可以鑒別真?zhèn)巍?/p>

表2添加花生香精的摻偽花生油特征物質(zhì)的分析結(jié)果

實(shí)施例3：

一種摻偽花生油的鑒別方法，包括如下步驟：

1)樣品預(yù)處理：將待檢測的花生油樣品置于15mL頂空瓶中，加入攪拌子后，將頂空瓶置于50℃恒溫水浴中加熱平衡20min；

2)活化萃取頭，采用固相微萃取手動進(jìn)樣(DVB/CAR/PDMS)萃取頭，50/30μm DVB/CAR on PDMS，將萃取頭插入氣質(zhì)聯(lián)用儀進(jìn)樣口進(jìn)行活化，進(jìn)樣口溫度設(shè)置為270℃，活化時間為30-60min；

3)通過帶孔隔墊向頂空瓶中插入已經(jīng)活化好的SPME萃取頭，推出萃取頭后，在50℃恒溫水浴的條件下頂空吸附40min后，于250℃解析5min；

4)后將萃取頭中吸取的芳香性物質(zhì)進(jìn)行氣相色譜質(zhì)譜分析，氣相色譜條件：毛細(xì)管柱：DB-5MS色譜柱(30mm×0.25mm×0.25μm)；氣相柱溫升溫程序：40℃保持2min，以5℃/min的升溫速率升溫至220℃,保持10min；汽化室溫度：250℃；氦氣流速0.8mL/min；進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；

質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源(EI)；電子能量70eV；離子源溫度200℃；燈絲發(fā)射電流200μA；接口溫度為250℃；全譜掃描，掃描質(zhì)量范圍m/z32-402；

5)通過Xcalibur軟件處理實(shí)驗(yàn)圖譜得到相關(guān)數(shù)據(jù)，經(jīng)計算機(jī)檢索與NIST譜庫(107000個化合物的數(shù)據(jù))和Wiley譜庫(320000個化合物的數(shù)據(jù))匹配確定未知化合物的名稱及相關(guān)信息，僅報道RSI(匹配度)大于800(最大值為1000)的相關(guān)鑒定結(jié)果。各組分的相對含量由峰面積歸一化法計算得到。

6)定性分析：若檢測結(jié)果中出現(xiàn)了乙基麥芽酚和三乙酸甘油酯的特征峰，則證明花生油中確實(shí)摻雜了花生香精，若檢測結(jié)果中未出現(xiàn)乙基麥芽酚和三乙酸甘油酯的特征峰，則證明花生油中未摻雜花生香精。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。