本發(fā)明涉及水產(chǎn)品檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體為一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法及檢測(cè)卡。

背景技術(shù)：

孔雀石綠是有毒的三苯甲烷類化學(xué)物，既是染料，也是殺菌和殺寄生蟲(chóng)的化學(xué)制劑，可致癌。本品針對(duì)魚(yú)體水霉病和魚(yú)卵的水霉病有特效，現(xiàn)市面上還暫無(wú)針對(duì)水霉病能夠短時(shí)間解決水霉病的特效藥物，這也是為什么這個(gè)產(chǎn)品在水產(chǎn)業(yè)禁止這么多年還禁而不止，水產(chǎn)業(yè)養(yǎng)殖戶鋌而走險(xiǎn)繼續(xù)違規(guī)使用孔雀石綠的根本原因，其他方面，也可以很好的用于鰓霉病、小瓜蟲(chóng)病、車輪蟲(chóng)病、指環(huán)蟲(chóng)病、斜管蟲(chóng)病、三代蟲(chóng)病，和其他一些細(xì)菌性疾病都有很好的效果。農(nóng)業(yè)部以將孔雀石綠列為水產(chǎn)上的禁藥，非食用魚(yú)的觀賞魚(yú)還可以使用。

結(jié)晶紫是堿性染料，能溶于水（溶解度9%）和酒精（溶解度8.75%）。結(jié)晶紫在細(xì)胞學(xué)、組織學(xué)和細(xì)菌學(xué)等方面應(yīng)用極廣，是一種優(yōu)良的染色劑。他是細(xì)胞核染色常用的，用來(lái)顯示染色體的中心體，并可染淀粉、纖維蛋白、神經(jīng)膠質(zhì)等。凡是用番紅和蘇木精或其他染料染細(xì)胞核不能成功時(shí)，用它能得到良好的結(jié)果。用番紅和結(jié)晶紫作染色體的二重染色，染色體染成紅色，紡錘絲染成紫色，所以也是一種顯示細(xì)胞分裂的優(yōu)良染色劑。用結(jié)晶紫染纖毛，效果也很好。用結(jié)晶紫染色的切片，缺點(diǎn)是不易長(zhǎng)久保存。

雖然水產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)中明令禁止孔雀石綠和結(jié)晶紫的使用，但由于沒(méi)有低廉有效的替代品，孔雀石綠和結(jié)晶紫在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的使用屢禁不止，故工商部門需要經(jīng)常對(duì)市場(chǎng)上的水產(chǎn)品進(jìn)行抽檢，目前對(duì)孔雀石綠和結(jié)晶紫的檢測(cè)方式一般采用檢測(cè)卡進(jìn)行檢測(cè)，這種檢測(cè)方式上采用膠體金免疫層析方法，在NC膜上預(yù)包被偶聯(lián)抗原和羊抗鼠IgG抗體，樣本中殘留的孔雀石綠藥物、結(jié)晶紫藥物與NC膜上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競(jìng)爭(zhēng)孔雀石綠抗體，抑制抗原與孔雀石綠抗體、結(jié)晶紫的結(jié)合。從而通過(guò)對(duì)檢測(cè)線和質(zhì)控線的觀察就可以判斷樣品中孔雀石綠藥物和結(jié)晶紫藥物是否超過(guò)檢測(cè)限，目前對(duì)孔雀石綠和結(jié)晶紫的檢測(cè)方法還不夠完善，容易存在樣品中雜質(zhì)過(guò)多而影響檢測(cè)結(jié)果的問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

基于背景技術(shù)存在的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提出了一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法及檢測(cè)卡，解決了目前對(duì)孔雀石綠和結(jié)晶紫的檢測(cè)方法還不夠完善，容易存在樣品中雜質(zhì)過(guò)多而影響檢測(cè)結(jié)果的問(wèn)題。

為實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)卡，包括檢測(cè)卡殼體，所述檢測(cè)卡殼體的內(nèi)部設(shè)置有檢測(cè)條，所述檢測(cè)卡殼體的上表面開(kāi)設(shè)有與其內(nèi)腔連通的加樣孔和顯色窗口，并且所述加樣孔位于檢測(cè)卡殼體上表面的前部，所述顯色窗口上由前至后設(shè)置有C區(qū)和T區(qū)。

優(yōu)選的，所述檢測(cè)卡殼體1的上表面還刻印有兩個(gè)指示箭頭，兩個(gè)指示箭頭分別位于加樣孔的兩側(cè)。

優(yōu)選的，所述顯色窗口的長(zhǎng)度為檢測(cè)卡殼體長(zhǎng)度的二分之一，顯色窗口的寬度為檢測(cè)卡殼體寬度的三分之一。

本發(fā)明還提出了一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法，包括如下步驟：

S1：樣品前處理，所述樣品前處理包括：

a、提取，將待檢測(cè)的水產(chǎn)品去皮，然后用刀和鑷子取水產(chǎn)品50-100g；

b、搗碎，用均質(zhì)器將a中提取的樣本均質(zhì)2-5min，取均質(zhì)后的樣品5.00g，精確到0.01g；

c、溶解，選取100ml離心管一支，向離心管內(nèi)加入有機(jī)溶劑，然后將b中均質(zhì)后的樣品5.00g加入到離心管中，將離心管置于離心機(jī)內(nèi)以3000-4000r/min離心5-8min，得到離心溶液；

d、PH調(diào)試，向離心管中加入PH為4的檸檬酸溶液，并用PH試紙對(duì)離心管內(nèi)的容液進(jìn)行測(cè)定，使離心管內(nèi)溶液的PH位于5-6之間；

e、鹽析，向離心管中加入無(wú)機(jī)鹽類5-10g，然后震蕩、攪拌后沉淀5-8min；

S2：檢測(cè)處理，取檢測(cè)卡水平放置于檢測(cè)臺(tái)上，然后用采樣滴管取S1步驟e中離心管內(nèi)的溶液2-4滴（約100微升）緩慢的逐滴滴入到檢測(cè)卡的加樣孔內(nèi)，等待10-15min；

S3：檢測(cè)結(jié)果判斷：

檢測(cè)卡上T區(qū)和C區(qū)均顯色，表示樣品中待檢藥物濃度低于檢測(cè)限或不含待檢藥物；

檢測(cè)卡上C區(qū)顯色，T區(qū)不顯色，表示樣品中待檢藥物濃度高于檢測(cè)限；

檢測(cè)卡上C區(qū)不顯色，表明操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效，需要更換新的檢測(cè)卡從新檢測(cè)

優(yōu)選的，S1步驟c中的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯溶液或乙腈溶液。

優(yōu)選的，S1步驟e中的無(wú)機(jī)鹽類為氯化鈉、氯化銨、硫酸鈉和硫酸銨的其中一種.

本發(fā)明提供了一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法及檢測(cè)卡，通過(guò)對(duì)樣品前處理，對(duì)樣品溶液中的雜質(zhì)分離較為徹底，從而減少了雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，提高了檢測(cè)精度，其中，PH調(diào)試能夠使樣品中的溶液的PH調(diào)試到5-6之間，從而接近蛋白質(zhì)弱酸性的等電點(diǎn)，提高了鹽析的效果，鹽析能夠使樣品中的蛋白質(zhì)沉積，從而方便上清液的取用，減少了上清液中雜質(zhì)的含量，提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明需要重新檢測(cè)時(shí)孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)卡的示意圖；

圖2為本發(fā)明檢測(cè)合格時(shí)孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)卡的示意圖；

圖3為本發(fā)明檢測(cè)不合格時(shí)孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)卡的示意圖；

圖4為本發(fā)明流程圖。

圖中：1檢測(cè)卡殼體、2 C區(qū)、3 T區(qū)、4加樣孔、5指示箭頭、6顯色窗口、7檢測(cè)條。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例中的附圖，對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

請(qǐng)參閱圖1-3，本發(fā)明提供一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)卡，包括檢測(cè)卡殼體1，檢測(cè)卡殼體1的內(nèi)部設(shè)置有檢測(cè)條7，檢測(cè)卡殼體1的上表面開(kāi)設(shè)有與其內(nèi)腔連通的加樣孔4和顯色窗口6，并且加樣孔4位于檢測(cè)卡殼體1上表面的前部，檢測(cè)卡殼體1的上表面還刻印有兩個(gè)指示箭頭5，兩個(gè)指示箭頭5分別位于加樣孔4的兩側(cè)，方便了對(duì)加樣孔4的辨別，顯色窗口6上由前至后設(shè)置有C區(qū)2和T區(qū)3，顯色窗口6的長(zhǎng)度為檢測(cè)卡殼體1長(zhǎng)度的二分之一，顯色窗口6的寬度為檢測(cè)卡殼體1寬度的三分之一。

請(qǐng)參閱圖1-4，本發(fā)明提供一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法；

實(shí)施例一：

一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法，包括以下步驟：

S1：樣品前處理，樣品前處理包括：

a、提取，將待檢測(cè)的水產(chǎn)品去皮，然后用刀和鑷子取水產(chǎn)品50g；

b、搗碎，用均質(zhì)器將a中提取的樣本均質(zhì)2min，取均質(zhì)后的樣品5.00g，精確到0.01g；

c、溶解，選取100ml離心管一支，向離心管內(nèi)加入乙酸乙酯，然后將b中均質(zhì)后的樣品5.00g加入到離心管中，將離心管置于離心機(jī)內(nèi)以3000r/min離心8min，得到離心溶液；

d、PH調(diào)試，向離心管中加入PH為4的檸檬酸溶液，并用PH試紙對(duì)離心管內(nèi)的容液進(jìn)行測(cè)定，使離心管內(nèi)溶液的PH位于5-6之間；

e、鹽析，向離心管中加入氯化鈉5g，然后震蕩、攪拌后沉淀5min；

S2：檢測(cè)處理，取檢測(cè)卡水平放置于檢測(cè)臺(tái)上，然后用采樣滴管取S1步驟e中離心管內(nèi)的溶液2-4滴（約100微升）緩慢的逐滴滴入到檢測(cè)卡的加樣孔4內(nèi)，等待10-15min；

S3：檢測(cè)結(jié)果判斷：

檢測(cè)卡上T區(qū)3和C區(qū)2均顯色，表示樣品中待檢藥物濃度低于檢測(cè)限或不含待檢藥物；

檢測(cè)卡上C區(qū)2顯色，T區(qū)3不顯色，表示樣品中待檢藥物濃度高于檢測(cè)限；

檢測(cè)卡上C區(qū)2不顯色，表明操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效，需要更換新的檢測(cè)卡從新檢測(cè)。

實(shí)施例二：

一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法，包括以下步驟：

S1：樣品前處理，樣品前處理包括：

a、提取，將待檢測(cè)的水產(chǎn)品去皮，然后用刀和鑷子取水產(chǎn)品80g；

b、搗碎，用均質(zhì)器將a中提取的樣本均質(zhì)4min，取均質(zhì)后的樣品5.00g，精確到0.01g；

c、溶解，選取100ml離心管一支，向離心管內(nèi)加入乙酸乙酯，然后將b中均質(zhì)后的樣品5.00g加入到離心管中，將離心管置于離心機(jī)內(nèi)以3500r/min離心6min，得到離心溶液；

d、PH調(diào)試，向離心管中加入PH為4的檸檬酸溶液，并用PH試紙對(duì)離心管內(nèi)的容液進(jìn)行測(cè)定，使離心管內(nèi)溶液的PH位于5-6之間；

e、鹽析，向離心管中加入硫酸鈉7g，然后震蕩、攪拌后沉淀6min；

S2：檢測(cè)處理，取檢測(cè)卡水平放置于檢測(cè)臺(tái)上，然后用采樣滴管取S1步驟e中離心管內(nèi)的溶液2-4滴（約100微升）緩慢的逐滴滴入到檢測(cè)卡的加樣孔4內(nèi)，等待10-15min；

S3：檢測(cè)結(jié)果判斷：

檢測(cè)卡上T區(qū)3和C區(qū)2均顯色，表示樣品中待檢藥物濃度低于檢測(cè)限或不含待檢藥物；

檢測(cè)卡上C區(qū)2顯色，T區(qū)3不顯色，表示樣品中待檢藥物濃度高于檢測(cè)限；

檢測(cè)卡上C區(qū)2不顯色，表明操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效，需要更換新的檢測(cè)卡從新檢測(cè)。

實(shí)施例三：

一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法，包括以下步驟：

S1：樣品前處理，樣品前處理包括：

a、提取，將待檢測(cè)的水產(chǎn)品去皮，然后用刀和鑷子取水產(chǎn)品100g；

b、搗碎，用均質(zhì)器將a中提取的樣本均質(zhì)5min，取均質(zhì)后的樣品5.00g，精確到0.01g；

c、溶解，選取100ml離心管一支，向離心管內(nèi)加入乙腈溶液，然后將b中均質(zhì)后的樣品5.00g加入到離心管中，將離心管置于離心機(jī)內(nèi)以4000r/min離心5min，得到離心溶液；

d、PH調(diào)試，向離心管中加入PH為4的檸檬酸溶液，并用PH試紙對(duì)離心管內(nèi)的容液進(jìn)行測(cè)定，使離心管內(nèi)溶液的PH位于5-6之間；

e、鹽析，向離心管中加入硫酸銨10g，然后震蕩、攪拌后沉淀8min；

S2：檢測(cè)處理，取檢測(cè)卡水平放置于檢測(cè)臺(tái)上，然后用采樣滴管取S1步驟e中離心管內(nèi)的溶液2-4滴（約100微升）緩慢的逐滴滴入到檢測(cè)卡的加樣孔4內(nèi)，等待10-15min；

S3：檢測(cè)結(jié)果判斷：

檢測(cè)卡上T區(qū)3和C區(qū)2均顯色，表示樣品中待檢藥物濃度低于檢測(cè)限或不含待檢藥物；

檢測(cè)卡上C區(qū)2顯色，T區(qū)3不顯色，表示樣品中待檢藥物濃度高于檢測(cè)限；

檢測(cè)卡上C區(qū)2不顯色，表明操作不當(dāng)或檢測(cè)卡已失效，需要更換新的檢測(cè)卡從新檢測(cè)。

本發(fā)明提供了一種孔雀石綠結(jié)晶紫檢測(cè)方法及檢測(cè)卡，通過(guò)對(duì)樣品前處理，對(duì)樣品溶液中的雜質(zhì)分離較為徹底，從而減少了雜質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，提高了檢測(cè)精度，其中，PH調(diào)試能夠使樣品中的溶液的PH調(diào)試到5-6之間，從而接近蛋白質(zhì)弱酸性的等電點(diǎn)，提高了鹽析的效果，鹽析能夠使樣品中的蛋白質(zhì)沉積，從而方便上清液的取用，減少了上清液中雜質(zhì)的含量，提高了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

需要說(shuō)明的是，在本文中，術(shù)語(yǔ)“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備不僅包括那些要素，而且還包括沒(méi)有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備所固有的要素。在沒(méi)有更多限制的情況下。由語(yǔ)句“包括一個(gè)......限定的要素，并不排除在包括所述要素的過(guò)程、方法、物品或者設(shè)備中還存在另外的相同要素”。

盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言，可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對(duì)這些實(shí)施例進(jìn)行多種變化、修改、替換和變型，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。