技術(shù)特征：

1.一種通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜法在從受試者獲得的樣品中檢測(cè)一種或多種代謝物的存在和/或測(cè)量其水平的方法，所述代謝物至少包括谷氨酰胺，并且所述方法包括以下步驟：

(i)使用提取液從所述樣品中提取所述代謝物；

(ii)在步驟(i)之前或之后，提供包含已知量的一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品的溶液，所述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)于樣品中待檢測(cè)的所述代謝物；

(iii)使所述代謝物和所述一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品離子化以產(chǎn)生離子；

(iv)在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式下在質(zhì)譜圖中獲得所述一種或多種離子的質(zhì)荷比(m/z)；以及

(v)在MRM模式下確定谷氨酰胺和賴(lài)氨酸的總和，

(vi)使用對(duì)應(yīng)于賴(lài)氨酸的穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品，檢測(cè)和定量谷氨酰胺的量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，所述方法用于體外診斷選自尿素循環(huán)障礙和/或高氨血癥、高鳥(niǎo)氨酸血癥-高氨血癥-高瓜氨酸尿癥(HHH)和/或精氨琥珀酸尿癥的一種或多種代謝缺陷，所述方法還包括步驟(vii)，其中與谷氨酰胺的生理水平相比檢測(cè)到步驟(vi)中獲得的谷氨酰胺水平升高。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的方法，其中在所述樣品中進(jìn)一步檢測(cè)和定量選自氨基酸、有機(jī)酸、?；鈮A、多種肉堿和/或琥珀酰丙酮的一種或多種代謝物，其中所述方法還包括步驟(v)以通過(guò)分析步驟(iv)中獲得的MRM質(zhì)譜圖確定所述一種或多種代謝物的存在和/或量。

4.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中所述氨基酸包括天冬氨酸、絲氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、甲硫氨酸、纈氨酸、亮氨酸、瓜氨酸、高瓜氨酸、鳥(niǎo)氨酸、精氨酸、丙氨酸、N-乙酰谷氨酸、甘氨酸、精氨琥珀酸和/或氧代脯氨酸，并且/或者其中所述有機(jī)酸包括乳清酸，或所述?；鈮A或多種肉堿包括游離肉堿、乙酰肉堿、丙酰肉堿、丁酰肉堿、異戊酰肉堿、戊二酰肉堿、己酰肉堿、辛酰肉堿、癸酰肉堿、十二酰肉堿、十四酰肉堿、十六酰肉堿和/或硬脂酰肉堿。

5.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中所述一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品是干燥的和/或至少包括賴(lài)氨酸的穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品，并且還包括對(duì)應(yīng)于以下的一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品：丙氨酸、精氨酸、瓜氨酸、甘氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鳥(niǎo)氨酸、苯丙氨酸、谷氨酰胺、纈氨酸、賴(lài)氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、絲氨酸、氧代脯氨酸、脯氨酸、精氨琥珀酸、琥珀酰丙酮、乳清酸、游離肉堿、乙酰肉堿、丙酰肉堿、丁酰肉堿、異戊酰肉堿、戊二酰肉堿、己酰肉堿、辛酰肉堿、癸酰肉堿、十二酰肉堿、十四酰肉堿、十六酰肉堿和/或硬脂酰肉堿。

6.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中所述樣品是體液樣品，優(yōu)選血液樣品，更優(yōu)選干燥的血液樣品，和/或其中所述受試者是疑似患有代謝障礙的受試者，例如新生兒、嬰兒或兒童，優(yōu)選新生兒。

7.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，其中所述離子化步驟(iii)是通過(guò)將所述提取的代謝物和標(biāo)準(zhǔn)品通過(guò)液相色譜系統(tǒng)輸送至質(zhì)譜儀的離子源而進(jìn)行，和/或其中所述數(shù)據(jù)獲得步驟(iv)是使用三級(jí)四極質(zhì)譜儀或高分辨率質(zhì)譜儀進(jìn)行，和/或其中所述步驟(v)是通過(guò)選擇至少一種精確的質(zhì)荷比(m/z)離子而進(jìn)行，所述精確的質(zhì)荷比離子對(duì)應(yīng)于所述樣品中存在的所述一種或多種代謝物的至少一種計(jì)算的質(zhì)荷比(m/z)。

8.根據(jù)前述權(quán)利要求任一項(xiàng)的方法，還包括同時(shí)或依次進(jìn)行多肽分析，所述多肽包括選自以下的多肽：血紅蛋白、血紅蛋白變體、白蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素、細(xì)菌酶、抗原性的肽決定簇、糖蛋白和與多種先天性障礙相關(guān)的變體蛋白，其中所述方法還包括步驟(v)測(cè)定所述樣品中所述多肽的酶活性，和/或(vi)測(cè)定所述多肽的氨基酸組成。

9.一種新生兒篩查試劑盒，其用于根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的方法通過(guò)串聯(lián)質(zhì)譜法在新生兒的血液樣品中檢測(cè)谷氨酰胺的存在和/或測(cè)量谷氨酰胺的水平，所述試劑盒包括內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液，其包含至少一種對(duì)應(yīng)于賴(lài)氨酸的穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品。

10.權(quán)利要求12的新生兒篩查試劑盒，其用于體外診斷選自尿素循環(huán)障礙和/或高氨血癥、高鳥(niǎo)氨酸血癥-高氨血癥-高瓜氨酸尿癥(HHH)和/或精氨琥珀酸尿癥的一種或多種代謝缺陷。

11.權(quán)利要求12或13的新生兒篩查試劑盒，其中所述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液還包括對(duì)應(yīng)于一種或多種代謝物的一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品，所述一種或多種代謝物選自氨基酸、有機(jī)酸、?；鈮A、多種肉堿和/或琥珀酰丙酮，并且其中所述標(biāo)準(zhǔn)品任選地為干燥的。

12.根據(jù)權(quán)利要求12至14任一項(xiàng)的新生兒篩查試劑盒，其中所述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液還包括對(duì)應(yīng)于以下的一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品：丙氨酸、精氨酸、瓜氨酸、高瓜氨酸、甘氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鳥(niǎo)氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、絲氨酸、氧代脯氨酸、脯氨酸、谷氨酸、精氨琥珀酸、琥珀酰丙酮、乳清酸、游離肉堿、乙酰肉堿、丙酰肉堿、丁酰肉堿、異戊酰肉堿、戊二酰肉堿、己酰肉堿、辛酰肉堿、癸酰肉堿、十二酰肉堿、十四酰肉堿、十六酰肉堿和/或硬脂酰肉堿，其中所述試劑盒允許在所述新生兒中診斷選自尿素循環(huán)障礙和/或高氨血癥、高鳥(niǎo)氨酸血癥-高氨血癥-高瓜氨酸尿癥(HHH)和/或精氨琥珀酸尿癥的一種或多種代謝缺陷，以及選自氨基酸障礙、脂肪酸氧化(FAO)障礙和有機(jī)酸尿癥(OA)的其他新生兒代謝障礙。

13.根據(jù)權(quán)利要求12至15任一項(xiàng)的新生兒篩查試劑盒，其中所述內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液至少包括¹³C₆-¹⁵N₂-賴(lài)氨酸，還包括選自以下的一種或多種標(biāo)準(zhǔn)品：²H₄-丙氨酸、²H₂-瓜氨酸、¹⁵N-¹³C-甘氨酸、²H₃-亮氨酸、²H₃-甲硫氨酸、²H₆-鳥(niǎo)氨酸、¹³C₆-苯丙氨酸、²H₈-纈氨酸、²H₃-天冬氨酸、²H₃-谷氨酸、¹³C₃-絲氨酸、¹³C₆-酪氨酸、²H₅-脯氨酸、¹³C₅-琥珀酰丙酮、¹⁵N₄-¹³C_6–精氨琥珀酸、²H₉-肉堿、²H₃-乙酰肉堿、²H₃-丙酰肉堿、²H₃-丁酰肉堿、²H₉-異戊酰肉堿、²H₃-戊二酰肉堿、²H₃-己酰肉堿、²H₃-辛酰肉堿、²H₃-癸酰肉堿、²H₃-十二酰肉堿、²H₉-十四酰肉堿、²H₃-十六酰肉堿和/或²H₃-硬脂酰肉堿，其中所述標(biāo)準(zhǔn)品任選地為干燥的。

14.根據(jù)權(quán)利要求12至16任一項(xiàng)的新生兒篩查試劑盒，其中所述樣品是體液樣品，優(yōu)選地為血液樣品，更優(yōu)選地為干燥的血液樣品，和/或其中所述新生兒疑似患有代謝障礙。

15.一種內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液，其至少包括賴(lài)氨酸的穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品，還包括對(duì)應(yīng)于以下的一種或多種穩(wěn)定同位素標(biāo)記的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)品：丙氨酸、瓜氨酸、高瓜氨酸、甘氨酸、亮氨酸、甲硫氨酸、鳥(niǎo)氨酸、谷氨酰胺、苯丙氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、酪氨酸、絲氨酸、氧代脯氨酸、脯氨酸、精氨琥珀酸、琥珀酰丙酮、乳清酸、游離肉堿、乙酰肉堿、丙酰肉堿、丁酰肉堿、異戊酰肉堿、戊二酰肉堿、己酰肉堿、辛酰肉堿、癸酰肉堿、十二酰肉堿、十四酰肉堿、十六酰肉堿和/或硬脂酰肉堿，其中所述標(biāo)準(zhǔn)品任選地為干燥的。

16.權(quán)利要求26的內(nèi)部標(biāo)準(zhǔn)溶液，其至少包括¹³C₆-¹⁵N₂-賴(lài)氨酸，還包括選自以下的一種或多種標(biāo)準(zhǔn)品：²H₄-丙氨酸、²H₂-瓜氨酸、¹⁵N-¹³C-甘氨酸、²H₃-亮氨酸、²H₃-甲硫氨酸、²H₆-鳥(niǎo)氨酸、¹³C₆-苯丙氨酸、²H₈-纈氨酸、²H₃-天冬氨酸、²H₃-谷氨酸、¹³C₃-絲氨酸、¹³C₆-酪氨酸、²H₅-脯氨酸、¹³C₅-琥珀酰丙酮、¹⁵N₄-¹³C₆-精氨琥珀酸、²H₉-肉堿、²H₃-乙酰肉堿、²H₃-丙酰肉堿、²H₃-丁酰肉堿、²H₉-異戊酰肉堿、²H₃-戊二酰肉堿、²H₃-己酰肉堿、²H₃-辛酰肉堿、²H₃-癸酰肉堿、²H₃-十二酰肉堿、²H₉-十四酰肉堿、²H₃-十六酰肉堿和/或²H₃-硬脂酰肉堿，其中所述標(biāo)準(zhǔn)品任選地為干燥的。