1.一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于包括如下步驟:
1)將待測(cè)食用油樣品用溶劑稀釋,加入內(nèi)標(biāo)后,進(jìn)行衍生化反應(yīng),反應(yīng)后食用油中的游離脂肪酸轉(zhuǎn)化為帶正電荷的游離脂肪酸衍生物,得到待測(cè)樣品的進(jìn)樣溶液;
2)將步驟1)所得待測(cè)樣品的進(jìn)樣溶液進(jìn)行質(zhì)譜分析,采集游離脂肪酸衍生物的譜圖和譜峰數(shù)據(jù);
3)定性分析:根據(jù)步驟2)所得譜圖中的質(zhì)荷比,確定對(duì)應(yīng)游離脂肪酸衍生物的準(zhǔn)分子離子峰,從而對(duì)待測(cè)樣品中的游離脂肪酸進(jìn)行定性分析;
4)定量分析:將脂肪酸標(biāo)準(zhǔn)品用溶劑稀釋成一系列濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液,分別加入內(nèi)標(biāo)后,在與步驟1)相同的條件下進(jìn)行衍生化反應(yīng),反應(yīng)后游離脂肪酸轉(zhuǎn)化為帶正電荷的游離脂肪酸衍生物,得到標(biāo)準(zhǔn)樣品的進(jìn)樣溶液;
5)a、將步驟4)所得標(biāo)準(zhǔn)樣品的進(jìn)樣溶液進(jìn)行質(zhì)譜分析,采集游離脂肪酸衍生物的譜圖和譜峰數(shù)據(jù),以標(biāo)準(zhǔn)溶液中游離脂肪酸與內(nèi)標(biāo)的濃度比值為橫坐標(biāo),游離脂肪酸衍生物與內(nèi)標(biāo)衍生物的準(zhǔn)分子離子峰強(qiáng)度比值為縱坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線;b、將步驟2)所得譜圖中游離脂肪酸衍生物與內(nèi)標(biāo)衍生物的準(zhǔn)分子離子峰強(qiáng)度比值結(jié)合標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)待測(cè)食用油樣品中的游離脂肪酸進(jìn)行定量分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述衍生試劑為一端含有一個(gè)氨基(-NH2),另一端含有一個(gè)叔胺基的化合物,通式表示為:NH2-(CH2)n-NR2,其中,n取值范圍是2~4,R基團(tuán)為碳數(shù)少于2的烷基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述衍生試劑選擇N,N-二乙基乙二胺。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述衍生化反應(yīng)的條件為:將食用油樣品用溶劑稀釋后加入內(nèi)標(biāo)、催化劑混勻,然后加入衍生試劑,反應(yīng)溫度為38~42℃,反應(yīng)時(shí)間為2~10min。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述衍生化反應(yīng)中,以氘代十六烷酸為內(nèi)標(biāo),以2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物和三乙胺為催化劑,以N,N-二乙基乙二胺為衍生試劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于在衍生化反應(yīng)體系中,脂肪酸的濃度為0.5~200nmol/L,內(nèi)標(biāo)的濃度為5~15nmol/L,催化劑三乙胺的濃度為0.5~0.7μmol/mL,催化劑2-氯-1-甲基吡啶鎓碘化物的濃度為0.1~0.5μmol/mL,衍生試劑N,N-二乙基乙二胺的濃度為0.6~1.2μmol/mL。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于步驟1)和步驟4)所得進(jìn)樣溶液經(jīng)過干燥、復(fù)溶、純化后再進(jìn)行質(zhì)譜分析。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述質(zhì)譜分析的條件為:注射針泵進(jìn)樣,進(jìn)樣流速為10~30μL/min;電噴霧電離源:正離子模式;質(zhì)譜掃描模式:73Da中性丟失掃描;離子源氣體1:12kPa;碰撞能:30~35eV;去簇電壓:70~80eV;入口電壓:5~10V;碰撞室輸出電壓:5~10V;質(zhì)量范圍:200~550m/z。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述步驟4)中標(biāo)準(zhǔn)溶液為一種或幾種脂肪酸的混合溶液,且所述標(biāo)準(zhǔn)溶液中脂肪酸的濃度范圍均在0.5~200nmol/L。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種基于衍生化技術(shù)的食用油中游離脂肪酸的質(zhì)譜分析方法,其特征在于所述待測(cè)食用油樣品主要包括菜籽油、芝麻油、玉米油、亞麻籽油、橄欖油、紫蘇油、豬油、魚油。