本發(fā)明涉及免疫檢測領(lǐng)域，特別是指一種乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒及其制備方法。

背景技術(shù)：

乙型腦炎是由乙腦病毒引起、由蚊蟲傳播的一種急性傳染病。乙腦病毒屬披蓋病毒科中黃病毒屬，為B組蟲媒病毒，呈球形，直徑40nm，含單股正鏈RNA，長約11kb。其RNA基因組編碼單個多肽，內(nèi)有衣殼蛋白(C)與核酸構(gòu)成的核心，外披以含脂質(zhì)的囊膜，表面有囊膜糖蛋白(E)刺突，即病毒血凝素，囊膜內(nèi)尚有內(nèi)膜蛋白(M)，參與病毒的裝配，以及非結(jié)構(gòu)蛋白NS1—NS5。

乙腦主要通過蚊蟲叮咬而傳播，其中三帶喙庫蚊是主要傳播媒介。人群對乙腦病毒普遍易感，感染后多數(shù)呈隱性感染，并獲得持久免疫力。發(fā)病病例主要集中在10歲以下的兒童，以2-6歲組發(fā)病率最高。發(fā)病與否，取決于病毒的數(shù)量，毒力和機(jī)體的免疫功能。感染乙腦病毒的蚊蟲叮咬人體后，病毒先在局部組織細(xì)胞和淋巴結(jié)、以及血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)增殖，不斷侵入血流，形成病毒血癥。發(fā)病后，可引起腦實(shí)質(zhì)廣泛病變，以大腦皮質(zhì)、腦干及基底核的病變最為明顯。

其基本病變?yōu)椋?/p>

①血管內(nèi)皮細(xì)胞損害，可見腦膜與腦實(shí)質(zhì)小血管擴(kuò)張、充血、出血及血栓形成，血管周圍套式細(xì)胞浸潤；

②神經(jīng)細(xì)胞變性壞死，液化溶解后形成大小不等的篩狀軟化灶；

③局部膠質(zhì)細(xì)胞增生，形成膠質(zhì)小結(jié)。部分患者腦水腫嚴(yán)重，顱內(nèi)壓升高或進(jìn)一步導(dǎo)致腦疝。

該病的流行區(qū)域呈現(xiàn)不斷擴(kuò)大的趨勢，有效防控仍然面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)?？焖?、準(zhǔn)確的診斷方法的建立，有利于篩查病毒感染者，可控有效制其傳染。

目前對乙型腦炎病毒的檢測主要有病毒分離培養(yǎng)、分子生物學(xué)檢測和血清學(xué)診斷等手段。

病毒分離培養(yǎng)法主要是通過采集患者血液和(或)腦脊液標(biāo)本，從腦炎患者標(biāo)本中分離到乙腦病毒的診斷方法，主要分為組織細(xì)胞培養(yǎng)法和新生乳鼠接種法。此類方法耗時長，實(shí)驗(yàn)儀器與操作要求高，不適于廣泛使用與快速篩查。

分子生物學(xué)檢測主要是通過設(shè)計(jì)乙腦病毒特異性引物，通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)或?qū)崟r熒光定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測標(biāo)本中是否存在乙腦病毒特異性核酸，進(jìn)而診斷是否感染。該方法比病毒分離培養(yǎng)法更加敏感、快速，可直接作出診斷，但也需特定的實(shí)驗(yàn)儀器與專業(yè)的實(shí)驗(yàn)人員操作。

血清學(xué)檢測主要有補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)、中和試驗(yàn)、血凝抑制試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等，這些方法都需要在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)由專業(yè)技術(shù)人員操作，并需要熒光顯微鏡、酶標(biāo)儀和多種配套試劑，操作步驟較為復(fù)雜。

因此，亟需建立操作更加簡便，成本低廉，特異性好，靈敏度高，適于普及并可單份檢測，更適合于流行病學(xué)調(diào)查及現(xiàn)場應(yīng)用的乙型腦炎病毒快速診斷試劑盒。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒，操作簡便，適用廣泛，特異性好，靈敏度高。

基于上述目的本發(fā)明提供的乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒包括檢測條，所述檢測條包括金結(jié)合物墊和反應(yīng)膜，所述金結(jié)合物墊包被有膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體，所述反應(yīng)膜包括檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線包被有重組乙型腦炎病毒抗原，所述質(zhì)控線包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體。

較佳的，所述重組乙型腦炎病毒抗原是應(yīng)用基因工程方法重組表達(dá)獲得，濃度為2.0-10.0mg/mL。

較佳的，制備所述重組乙型腦炎病毒抗原所用的PCR引物為：

5'-CGCTCGAGTTAAGCATGCATTGGTCGCTAA-3'；

5'-CGGAATTCTTTAATCGTTGTCTGGGAATGGGCAATCGTGACA-3'。

較佳的，所述羊抗鼠IgG多克隆抗體濃度為4.0-10.0mg/mL，所述鼠抗人IgG單克隆抗體濃度為2.0-10.0mg/mL。

較佳的，所述乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒還包括樣本稀釋液，該樣本稀釋液為磷酸鹽緩沖液。

可選的，所述檢測條放置于長方形塑料盒中，構(gòu)成檢測卡，該檢測卡上設(shè)有樣品孔和檢測孔，所述樣品孔與所述檢測條的所述樣品墊位置對應(yīng)，所述檢測孔對應(yīng)所述檢測條的所述檢測線和所述質(zhì)控線。

基于相同的發(fā)明構(gòu)思，本發(fā)明還提供一種制備上述乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒的方法，包括以下步驟：

(1)反應(yīng)膜的制備：

稀釋所述重組乙型腦炎病毒抗原和所述羊抗鼠IgG多克隆抗體，并噴涂至所述反應(yīng)膜上，分別形成所述檢測線與質(zhì)控線，干燥備用；

(2)金結(jié)合物墊的制備：

將所述鼠抗人IgG單克隆抗體與膠體金進(jìn)行偶聯(lián)制得膠體金標(biāo)的記鼠抗人IgG單克隆抗體溶液，調(diào)整濃度，并浸泡所述金結(jié)合物墊，鋪金，干燥備用；

(3)切割裝配：將所述反應(yīng)膜、金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙、樣品墊裝配至所述反應(yīng)板，切割后形成所述檢測條。

較佳的，所述膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體的制備方法包括以下步驟：

(1)使用碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)膠體金pH值至8.5-9.0；

(2)加入鼠抗人IgG單克隆抗體，攪拌；

(3)加入10％牛血清白蛋白溶液，攪拌；

(4)離心，棄去上清液；

(5)加入膠體金結(jié)合物稀釋液，即得。

較佳的，所述膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體的制備方法步驟1)中，碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)膠體金pH值至8.5。

本試劑盒的原理為：

采用膠體金免疫層析技術(shù)原理，在硝酸纖維素膜上的檢測線包被基因重組乙型腦炎病毒抗原，在質(zhì)控線包被羊抗鼠IgG多克隆抗體，在金標(biāo)墊上包被膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體。用于定性檢測全血或血清(漿)樣本中的乙型腦炎病毒IgG抗體。

檢測陽性樣本時，樣本中的乙型腦炎病毒IgG抗體可與膠體金標(biāo)記的鼠 抗人IgG單克隆結(jié)合，形成免疫復(fù)合物，由于層析作用復(fù)合物及樣本在硝酸纖維素膜內(nèi)部向前流動。當(dāng)復(fù)合物經(jīng)過檢測線時與包被的重組乙型腦炎病毒抗原結(jié)合，形成“膠體金-鼠抗人IgG單克隆抗體-乙型腦炎病毒IgG-重組乙型腦炎病毒抗原”而凝集顯色。剩余的膠體金標(biāo)記鼠抗人IgG單克隆抗體與指控線包被的羊抗鼠IgG多克隆抗體結(jié)合而凝集顯色，檢測陰性樣本時，樣本中不含乙型腦炎病毒IgG抗體，致使不能形成免疫復(fù)合物，則只能在質(zhì)控線處顯色。

從上面所述可以看出，本發(fā)明提供的乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有快速、簡便、不需特殊設(shè)備，特異性高，靈敏度好。整個操作時間僅需15-20分鐘，適用于疾病的快速診斷，以及現(xiàn)場檢測，流行病學(xué)調(diào)研等。

附圖說明

圖1為本發(fā)明實(shí)施例乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒中檢測條的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖2為本發(fā)明實(shí)施例乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒中檢測卡的結(jié)構(gòu)示意圖。

具體實(shí)施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白，以下結(jié)合具體實(shí)施例，并參照附圖，對本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明。

實(shí)施例1：

在本實(shí)施例中，所述乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒，包括檢測條或檢測卡、樣本稀釋液。圖1為本發(fā)明實(shí)施例乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒中檢測條的結(jié)構(gòu)示意圖，如圖1所示，所述檢測條包括反應(yīng)板1，以及依次疊壓粘附于所述反應(yīng)板上1的樣品墊2、金結(jié)合物墊3、反應(yīng)膜4、粗纖維濾紙5。

在本實(shí)施例中，所述金結(jié)合物墊3包被有膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體。作為一個較佳的實(shí)施例，所述鼠抗人IgG單克隆抗體標(biāo)記膠體金前為無色透明液體，濃度為2.0-10.0mg/mL。較佳地，所述鼠抗人IgG單克隆抗體濃度為2mg/mL。用聚丙烯酰氨凝膠電泳(SDS-PAGE)測定，上樣量為10μL時，該鼠抗人IgG單克隆抗體顯示為重鏈和輕鏈各一條帶。

在本實(shí)施例中，所述反應(yīng)膜4為硝酸纖維素膜，包括檢測線6和質(zhì)控線 7。

所述檢測線6包被有重組乙型腦炎病毒抗原，該重組乙型腦炎病毒抗原包被前其外觀為無色透明液體，濃度為2.0-10.0mg/mL。較佳地，所述重組乙型腦炎病毒抗原濃度2.0mg/mL。

重組乙型腦炎病毒抗原制備方法：

(1)用Trizol提取乙型腦炎病毒RNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄PCR后得到的產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增。PCR引物如下：

5'-CGCTCGAGTTAAGCATGCATTGGTCGCTAA-3'；

5'-CGGAATTCTTTAATCGTTGTCTGGGAATGGGCAATCGTGACA-3'。

經(jīng)PCR擴(kuò)增后，將PCR產(chǎn)物用1.5％瓊脂糖凝膠電泳分離。在凝膠成像儀觀測下，切下1400bp左右處目的條帶。采按照說明書，采用瓊脂糖凝膠回收試劑盒(天根生化科技有限公司)對目的片段進(jìn)行純化。

(2)回收后的PCR片段克隆入pMD18T載體中，轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞，酶切鑒定，并將測序，測序正確后，再次酶切并融入表達(dá)載體pET28a，轉(zhuǎn)達(dá)表達(dá)宿主菌BL21表達(dá)。

(3)重組蛋白進(jìn)行IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，收集培養(yǎng)的大腸桿菌，經(jīng)超聲波破碎后，采用Ni柱親和層析方法得到目的蛋白，用SDS-PAGE或其他方法測定，上樣量為10μL時，僅55KD顯示一條帶。

在本實(shí)施例中，所述質(zhì)控線7包被有羊抗鼠IgG多克隆抗體。作為一個較佳的實(shí)施例，所述羊抗鼠IgG多克隆抗體包被前為無色透明液體，濃度為4.0-10.0mg/mL。較佳地，所述羊抗鼠IgG多克隆抗體濃度為4mg/mL。

在本實(shí)施例中，所述羊抗鼠IgG多克隆抗體、鼠抗人IgG單克隆抗體均購自北京萬域美瀾科技有限公司。

在本實(shí)施例中，所述樣本稀釋液為20mM PH值為7.4的磷酸鹽緩沖液。

圖2為本發(fā)明實(shí)施例乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒中檢測卡的結(jié)構(gòu)示意圖，如圖2所示，作為一個可選的實(shí)施例，所述檢測條放置于特定的長方形塑料盒中，構(gòu)成所述檢測卡，該檢測卡上設(shè)有一樣品孔8和檢測孔9。所述樣品孔8用于滴加實(shí)驗(yàn)樣品，與所述檢測條的樣品墊2位置對應(yīng)；檢測孔9對應(yīng)檢測條的檢測線6和質(zhì)控線7，通過檢測孔9可以觀察到所述反應(yīng)膜4上檢測線6和質(zhì)控線7的變化。

實(shí)施例2：乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒的制備方法：

利用重組乙型腦炎病毒抗原包被反應(yīng)膜4作為檢測線；利用羊抗鼠IgG多克隆抗體包被反應(yīng)膜4作為質(zhì)控線；標(biāo)記膠體金的鼠抗人IgG單克隆抗體包被金結(jié)合物墊，即得檢測條。

(1)反應(yīng)膜的制備：

用包被稀釋液將乙型腦炎病毒抗原稀釋至最佳包被濃度1mg/mL；用包被稀釋液將羊抗鼠IgG多克隆抗體稀釋至最佳包被濃度2mg/mL；用點(diǎn)膜機(jī)將兩種包被液分別噴到反應(yīng)膜4上，噴點(diǎn)量為0.1μl/mm，分別形成所述檢測線6與質(zhì)控線7；將已包被的反應(yīng)膜4于37℃干燥3小時，并于室溫保存。所述包被稀釋液為0.05M的磷酸鹽緩沖液。

(2)金結(jié)合物墊的制備：

將鼠抗人IgG單克隆抗體與膠體金進(jìn)行偶聯(lián)制得膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體溶液。將膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體溶液調(diào)整至最佳濃度10μg/mL，以1.5mL/條，浸泡所述金結(jié)合物墊，鋪金，37℃干燥3小時，并于室溫保存。

其中，膠體金標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體的制備步驟如下：

1)用0.1M碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)膠體金PH值至8.5-9.0；

2)加入10μg/mL鼠抗人IgG單克隆抗體，攪拌40分鐘；

3)再加入10％的牛血清白蛋白至終濃度為1％，攪拌15分鐘；

4)12000rpm/min，4℃離心15分鐘，小心棄去上清液；

5)加入原體積(原體積以膠體金體積計(jì)算)的1/2體積的膠體金結(jié)合物稀釋液。

其中，所述膠體金結(jié)合物稀釋液是將磷酸氫二鈉5.372g、磷酸二氫鈉0.78g、牛血清白蛋白5g、氯化鈉8.5g、酪蛋白0.5g溶于1L去離子水中，混勻制備而成。

較佳地，用0.1M碳酸鉀溶液調(diào)節(jié)膠體金PH值至8.5。

(3)切割裝配：在內(nèi)包間內(nèi)將反應(yīng)膜、金結(jié)合物墊、粗纖維濾紙、樣品墊等裝配成反應(yīng)板，再用切割機(jī)切成4mm的檢測條組裝成成品。

實(shí)施例3：乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒的檢測方法

1.檢測前準(zhǔn)備：檢驗(yàn)前將試劑盒和樣本恢復(fù)至室溫。實(shí)驗(yàn)濕度應(yīng)小于60％，實(shí)驗(yàn)溫度為18-30℃。

2.樣本準(zhǔn)備：全血為指尖采血或者采用靜脈采血。全血樣本采集后不做 保存，即采即用。血清樣本按常規(guī)方法由靜脈采集。血漿樣本可采用肝素、檸檬酸鈉、EDTA進(jìn)行處理。血清或血漿樣本5天內(nèi)測定的樣本可放置4℃保存。樣本放置在-20℃至少可保存3個月。樣本避免溶血或反復(fù)凍融。混濁或有沉淀的樣本應(yīng)離心或過濾澄清后再檢測。

3.檢測條檢測方法

(1)從原包裝鋁箔袋中取出檢測條，平置于臺面上；

(2)取20μL血清或血漿樣本，加到檢測條指示箭頭下端的加樣處，再加樣本稀釋液100μL(約2-3滴)；

(3)15-20分鐘內(nèi)判讀結(jié)果，20分鐘后檢驗(yàn)結(jié)果無效。

(4)檢測結(jié)果判定：

陰性：只在質(zhì)控線位置出現(xiàn)一條紅色條帶。

陽性：質(zhì)控線和檢測線位置出現(xiàn)兩條紅色條帶。

無效：質(zhì)控線位置沒有出現(xiàn)紅色條帶

4.檢測卡檢測方法

(1)從鋁箔袋中取出檢測卡，放在水平工作臺面上平置，并做好樣本標(biāo)記；

(2)取20μL血清、血漿或40ul全血樣本，直接加入到加樣孔中，再加樣本稀釋液100μL(約2-3滴)；

(3)15-20分鐘內(nèi)判讀結(jié)果，20分鐘后檢驗(yàn)結(jié)果無效。

(4)檢測結(jié)果判定：

陰性：只在質(zhì)控線位置出現(xiàn)一條紅色條帶。

陽性：質(zhì)控線和檢測線位置出現(xiàn)兩條紅色條帶。

無效：質(zhì)控線位置沒有出現(xiàn)紅色條帶。

實(shí)施例4：質(zhì)控血清制備

質(zhì)控血清制備方法：

1.質(zhì)控血清的采集

(1)收集血清大于35mL(無明顯溶血、黃疸、脂肪血或污染血清)，

(2)60℃加熱1小時滅活；

(3)離心、過濾，除去沉淀物；

(4)稀釋：需要稀釋時，用正常人血清稀釋；

(5)更換質(zhì)控血清時，與欲被替換的原質(zhì)控血清至少連續(xù)對照標(biāo)定3 次；

(6)分裝、標(biāo)識、保存：用1.5mL離心管分裝，1mL/管，共35管，封口，貼簽，-20℃凍存。

2.質(zhì)控血清的鑒定

(1)乙型腦炎病毒IgG抗體陰性血清10份：陰性血清采集于健康獻(xiàn)血員的血清，經(jīng)市售乙型腦炎病毒IgG抗體ELISA試劑盒鑒定為陰性血清，選取10份作為抗體陰性質(zhì)控血清。

(2)乙型腦炎病毒IgG抗體陽性血清10份：市售乙型腦炎病毒IgG抗體ELISA試劑盒(美國Inbios公司的Japanese Encephalitis IgG ELISA)鑒定為乙型腦炎病毒IgG抗體陽性血清，分析檢測結(jié)果，選擇3份弱陽性血清、4份中陽性血清、3份強(qiáng)陽性血清，共10份，作為抗體陽性質(zhì)控血清。

(3)最低檢出限指控血清：對其中一份弱陽性血清,其s/c值(樣本值/C CUT-OFF值)為3.1左右進(jìn)行系列稀釋，當(dāng)稀釋至1：8時仍可檢出，該系列血清為最低檢出限血清。為保持今后最低檢出限血清的一致性，在最低檢出限血清原液選擇時選擇s/c值為3.1左右的弱陽性進(jìn)行系列稀釋，以保持批間一致性。

(4)精密性血清：選擇一份乙型腦炎病毒IgG抗體弱陽性血清(s/c值為3.4左右)，作為精密性血清。

實(shí)施例5：乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒有效性驗(yàn)證

采用上述方法制備的質(zhì)控血清檢測本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒的有效性：

1.陰陽性符合率檢測：

(1)檢測10份乙型腦炎病毒IgG抗體陽性指控血清，檢測結(jié)果均為陽性。說明本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有較好的陽性符合率。

(2)檢測10份乙型腦炎病毒IgG抗體陰性指控血清，檢測結(jié)果均為陰性。說明本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有較好的陰性符合率。

此外，與同類上市試劑盒對1000例臨床標(biāo)本進(jìn)行臨床對比研究，本試劑盒與同類試劑盒的臨床試驗(yàn)總符合率為98％，陽性符合率97.9％，陰性符合率98.1％，本試劑盒與同類試劑盒檢測結(jié)果無顯著性差異。

2.靈敏度檢測：

最低檢出限指控血清檢測，最低檢出限血清原液，按1：8稀釋后檢測， 檢測結(jié)果為陽性。說明本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒靈敏度較好。

3.精密性檢測：

采用10個檢測條平行測定精密性血清，各檢測條顯色速度及強(qiáng)度一致，均一性無差別。說明本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒精密性較好。

4.特異性檢測：

采用本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒(膠體金法)檢測含內(nèi)源性干擾物質(zhì)和潛在交叉反應(yīng)物質(zhì)的樣本，結(jié)果如下：

戊型肝炎病毒IgG抗體、甲型肝炎病毒IgG抗體、乙型肝炎病毒表面抗原抗體、丙型肝炎病毒抗體、梅毒螺旋體抗體、艾滋病毒抗體、肺炎支原體IgG抗體、肺炎衣原體IgG抗體、腺病毒IgG抗體、呼吸道合胞病毒IgG抗體、甲型流感病毒IgG抗體、乙型流感病毒IgG抗體、EV71病毒IgG抗體、麻疹病毒IgG抗體、麻疹病毒IgM抗體、風(fēng)疹病毒IgG抗體、腮腺炎病毒IgG抗體、A群流腦病毒IgG抗體、百日咳病毒IgG抗體、脊髓灰質(zhì)炎病毒IgG抗體、抗核抗體、抗線粒體抗體、高濃度非特異性IgM抗體(血清總IgM)陽性樣本均不會對本品造成干擾。

5.穩(wěn)定性檢測：

4～30℃保存12個月或37℃條件下保存14天，各項(xiàng)指標(biāo)仍符以上的要求。說明本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有較好的穩(wěn)定性。

6.其他：

(1)高濃度非特異性IgG抗體(血清總IgG)會與特異性IgG抗體競爭抗體的結(jié)合位點(diǎn)使檢測靈敏度下降。

(2)樣本中血脂含量高于6mmol/L、膽紅素含量高于40μmol/L、血紅蛋白大于5.0g/L時均會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。

本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有以下優(yōu)點(diǎn)：

(1)較高的靈敏性與特異性：本發(fā)明乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒的檢測線包被基因工程方法重組表達(dá)獲得乙型腦炎病毒抗原，配合高純度的鼠抗人IgG單克隆抗體包被膠體金，作為金結(jié)合物，可以有效的結(jié)合樣本中人血清總IgG，排除其他類型抗體對檢測的干擾，起到對樣本中總IgG抗體的初篩作用。將乙型腦炎病毒IgG抗體弱陽性血清(s/c值為3.1左右)稀釋至1：8時仍可檢出，說明具有較高的靈敏性；并且僅對乙型腦炎病毒IgG抗 體陽性血清標(biāo)本呈陽性，而對其他病原體感染的血清標(biāo)本呈陰性結(jié)果，具有良好的特異性。

(2)檢測快速簡便：本試劑盒檢測整體操作僅需15-20分鐘，僅需滴加樣本至樣本墊，等待結(jié)果即可。并且無需特定的實(shí)驗(yàn)儀器輔助，不需要專業(yè)培訓(xùn)，適于臨床、居家使用，可快速篩檢病人，適于現(xiàn)場普遍篩查、流行病學(xué)調(diào)查等。

(3)較高的精密性：多個檢測條平行檢測同一樣本，各檢測條顯色速度及強(qiáng)度一致，均一性無差別，說明具有良好的精密性。

(4)良好的穩(wěn)定性：4～30℃保存12個月或37℃條件下保存14天，仍符合檢測標(biāo)準(zhǔn)。

可見，本發(fā)明提供的乙型腦炎病毒IgG抗體檢測試劑盒具有快速、簡便、不需特殊設(shè)備，準(zhǔn)確和靈敏度高等特點(diǎn)。整個操作時間僅需15-20分鐘。對臨床檢測具有重要應(yīng)用價值，并且適合流行病學(xué)調(diào)查及現(xiàn)場應(yīng)用。

所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解：以上所述僅為本發(fā)明的具體實(shí)施例而已，并不用于限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所做的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。