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分析物的提取、衍生化和定量的制作方法

文檔序號:12505740閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種用于確定測試樣品中一種或多種分析物的存在的方法,所述方法包括:

a)從所述測試樣品固相提取一種或多種分析物,

b)用具有堿性pH、或酸性pH、或中性pH的洗脫溶液從所述固相提取洗脫所述一種或多種分析物,

c)用衍生化試劑原位衍生所述一種或多種分析物,和

d)采用液相色譜和/或質(zhì)譜檢測所述一種或多種衍生化的分析物。

2.一種用于確定樣品中一種或多種分析物的量的方法,所述方法包括:在允許所述一種或多種分析物中至少一種衍生化的條件下,使用包含衍生化試劑的洗脫緩沖液將所述一種或多種分析物中至少一種從固相提取洗脫。

3.如權(quán)利要求1或權(quán)利要求2所述的方法,其中,所述一種或多種分析物是具有伯胺、仲胺或酚羥基的化合物。

4.如權(quán)利要求3所述的方法,其中,所述一種或多種分析物是單胺神經(jīng)遞質(zhì),包括兒茶酚胺或其衍生物或代謝物之一,性激素或其衍生物或代謝物之一,大麻素或其衍生物或代謝物之一,甲狀腺激素或其衍生物或代謝物之一,阿片試劑、阿片樣物質(zhì)或其衍生物或代謝物之一,或芳基環(huán)己胺或其衍生物或代謝物之一,安非他明或其衍生物或代謝物之一。

5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的方法,其中,所述樣品是生物樣品、土壤樣品、或食物樣品。

6.如權(quán)利要求1-5中任一項所述的方法,其中,所述衍生化試劑是酰鹵。

7.如權(quán)利要求6所述的方法,其中,所述酰鹵是酰氯。

8.如權(quán)利要求7所述的方法,其中,所述酰氯是式II的Fmoc氯化物:

其中,R1,R2,R3和R4各自獨(dú)立地是H,氟,氯,溴,碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈或支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

9.如權(quán)利要求8所述的方法,所述酰氯是以下化合物之一:

其中,稠合環(huán)體系是全碳環(huán)或雜環(huán)芳香體系,任選地萘、喹諾酮、異喹啉、喹唑啉(quinzoline)、苯并呋喃、吲哚、苯并咪唑,具有5-7元取代或未取代的稠合環(huán),或者非芳香性的碳環(huán)或雜環(huán)稠合環(huán)體系,例如3,4-二氫-1H-茚,或3,4-二氫-2H-色烯,具有4-8元稠合環(huán),其中,所述稠合環(huán)適當(dāng)時可以被一種或多種以下的取代基取代:鹵素原子,任選地氟、氯、溴、或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

10.如權(quán)利要求7所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物之一:

其中,R1和R2各自獨(dú)立地是H,氟,氯,溴,碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈或支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

11.如權(quán)利要求10所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物之一:

12.如權(quán)利要求7所述的方法,其中,所述酰氯是式II的化合物:

其中,R1,R2,R3,R4和R5各自獨(dú)立地是H,鹵素原子如氟,氯,溴或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈或支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

13.如權(quán)利要求12所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物之一:

其中,稠合環(huán)體系是全碳環(huán)或雜環(huán)芳香體系,具有5-7元取代或未取代的稠合環(huán),或者非芳香性的碳環(huán)或雜環(huán)稠合環(huán)體系,例如3,4-二氫-1H-茚,或3,4-二氫-2H-色烯,具有4-8元稠合環(huán),其中,所述稠合環(huán)適當(dāng)時可以被一種或多種以下的取代基取代:鹵素原子,任選地氟、氯、溴、或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

14.如權(quán)利要求12所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物:

15.如權(quán)利要求7所述的方法,其中,所述酰氯是式VIII的化合物:

其中,R1,R2,R3,R4和R5各自獨(dú)立地是H,鹵素原子,任選地氟,氯,溴或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈或支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

16.如權(quán)利要求15所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物之一:

其中,稠合環(huán)體系是全碳環(huán)或雜環(huán)芳香體系,具有5-7元稠合環(huán),或者非芳香性的碳環(huán)或雜環(huán)稠合環(huán)體系,例如3,4-二氫-1H-茚,或3,4-二氫-2H-色烯,具有4-8元稠合環(huán),其中,所述稠合環(huán)適當(dāng)時可以被一種或多種以下的取代基取代:鹵素原子,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

17.如權(quán)利要求15所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物:

18.如權(quán)利要求7所述的方法,其中,所述酰氯是式IX的化合物:

其中,R1,R2,R3,R4和R5各自獨(dú)立地是H,鹵素原子,任選地氟,氯,溴或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈或支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

19.如權(quán)利要求18所述的方法,其中,所述酰氯是以下化合物之一:

其中,稠合環(huán)體系是全碳環(huán)或雜環(huán)芳香體系,任選地萘、喹諾酮、異喹啉、喹唑啉(quinzoline)、苯并呋喃、吲哚、苯并咪唑,具有5-7元取代或未取代的稠合環(huán),或者非芳香性的碳環(huán)或雜環(huán)稠合環(huán)體系,例如3,4-二氫-1H-茚,或3,4-二氫-2H-色烯,具有4-8元稠合環(huán),其中,所述稠合環(huán)適當(dāng)時可以被一種或多種以下的取代基取代:鹵素原子,任選地氟、氯、溴、或碘,氰基,乙炔基,丙烯基,乙烯基,直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷基,取代的乙烯基,或直鏈、支鏈或環(huán)狀C1-8烷氧基。

20.如權(quán)利要求1-19中任一項所述的方法,其中,所述質(zhì)譜包括串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)或LC-MS/MS技術(shù)。

21.如權(quán)利要求1-20中任一項所述的方法,其中,所述一種或多種分析物是檢測是定性或定量的。

22.一種用于確定一種或多種分析物的量的固相提取試劑盒,所述試劑盒包括:

a)固相提取柱,和

b)在相同或單獨(dú)容器中的含有權(quán)利要求6-19中任一項所述的衍生化試劑的具有高pH的洗脫溶液。

23.如權(quán)利要求22所述的試劑盒,其中,所述SPE柱是弱陽離子交換柱、強(qiáng)陽離子交換柱、陰離子交換柱和/或反相柱。

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