一種高純度黃芩苷的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及天然產(chǎn)物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種高純度黃芩苷的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 黃芩苷是常用中藥黃芩的主要藥用成分，具有抗炎、抗病毒、抗腫瘤、抗變態(tài)、降血 脂及降壓等活性，還具有抗氧化、清除氧自由基的功效，能抑制黑色素的生成。高純度黃芩 苷在臨床上用于肺炎、肝炎、感染等疾病的治療，也常常用作保健品、美容化妝品的原料。
[0003] 黃芩苷為一連有葡萄糖醛酸結(jié)構(gòu)的黃酮衍生物，水解后產(chǎn)生黃芩素和葡萄糖醛 酸。黃芩苷的分子結(jié)構(gòu)如下：
[0004]
冊 ^
[0005] 黃芩苷pKa值為5.047，為弱酸性藥物。黃芩苷在趨堿性溶液中極不穩(wěn)定，在強酸性 水溶液中也容易水解，而在有機溶劑中的穩(wěn)定性較好。
[0006] 黃芩苷的提取工藝通常為水溶液中的酸堿工藝，該工藝由于酸化時快速形成很細 的黃芩苷無定形結(jié)晶，夾帶了大量的雜質(zhì)，難以達到很高的純度。高純度的黃芩苷通常需要 在有機溶劑中制取，目前黃芩苷的純化以酸堿處理工藝和樹脂吸脫為主，如：
[0007] 2008年北京中醫(yī)藥大學(xué)王慶國等(CN 101475618A)公開了一種注射用黃芩苷的精 制方法，通過加熱堿溶、過濾、酸化、過濾、洗滌等工藝，得到純度在92%以上的黃芩苷。2009 年賈繼明等(CN 200910075217.8)公開了一種黃芩苷粗品的精制方法，采用乙醇、鹽酸、氫 氧化鈉及去離子水分步除去不同極性的雜質(zhì)，得到純度98%以上的黃芩苷。
[0008] 2011年沈陽藥科大學(xué)邱峰等(CN102584918)公開了一種制備高純度黃芩苷的方法 以大孔吸附樹脂吸附，0-30%的乙醇水洗脫除掉雜質(zhì)，繼續(xù)用40-60%的乙醇水洗脫，洗脫 液減壓濃縮后冷凍干燥，得到黃芩苷含量大于80%的粗品，該粗品用乙醇/水/乙酸溶劑系 統(tǒng)在進行重結(jié)晶，得到的產(chǎn)品為淡黃色，經(jīng)高效液相檢測，純度在98%以上。
[0009] 2013年南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司楊存(CN 103450298)發(fā)明了一種從黃芩中提 取黃芩苷的新方法提取液經(jīng)大孔吸附樹脂柱吸附，水洗樹脂柱至無糖色，再加入乙醇洗脫 有效成分，收集洗脫液，減壓濃縮，濃縮液放置結(jié)晶，濾除粗結(jié)晶，乙醇重結(jié)晶2次，得到純度 在96%以上的黃芩苷。
[0010] 2014年山西大學(xué)張立偉等（CN104356185)發(fā)明了一種快速高效提取黃芩苷的方 法，采用離子液提取，具有溶劑沸點高，并抑制水解酶活性的特點。
[0011] 2015年山東中醫(yī)藥研究院的于蓓蓓等(CN 104610401)發(fā)明了一種從黃芩中同時 提取黃芩苷、黃芩素和漢黃芩素的方法，將提取濃縮液經(jīng)大孔樹脂吸附，以乙醇溶液分步洗 脫得到不同組分，經(jīng)后處理得到的黃芩苷含量大于95 %。
[0012] 上述黃芩苷的制備工藝普遍存在以下缺點：（1)強酸強堿以及加熱條件的聯(lián)合應(yīng) 用，容易在生產(chǎn)過程中造成黃芩苷的進一步水解，產(chǎn)率及純度都受到影響。并且強腐蝕性的 酸堿對原料儲運、生產(chǎn)操作等設(shè)備和工藝都有更嚴(yán)苛的要求。（2)水中及醇中形成的黃芩苷 沉淀為非常細的無定形結(jié)晶，容易和溶劑形成糊狀物，過濾操作非常繁瑣。（3)樹脂吸附效 率不高，通常也要配合溶劑結(jié)晶處理，不易實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。（4)處理規(guī)模小，不適合工業(yè)生 產(chǎn)的要求。
[0013] 申請人之前的中國專利申請CN104650165A公開了一種通過加入酰胺溶劑將黃芩 苷溶解，并通過醇類稀釋，通過兩次晶型轉(zhuǎn)化獲得高純度黃芩苷的方法，雖然無需采用樹脂 吸附，能夠?qū)崿F(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)，但仍然需要進行兩次結(jié)晶轉(zhuǎn)化，仍然要進行多次過濾操作才能 獲得高純度黃芩苷，且醫(yī)藥工業(yè)中酰胺溶劑通常為高沸點二類溶劑，溶劑殘留去除工序較 復(fù)雜。因此，操作方法和溶劑選擇仍需優(yōu)化。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0014] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種操作條件溫和，避免黃芩苷二次水解，無需 采用樹脂吸附，能夠?qū)崿F(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)且方便殘留溶劑的后續(xù)處理的高效節(jié)能、工藝簡單的 高純度黃芩苷的制備方法。
[0015] 為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供技術(shù)方案如下：
[0016] -方面，提供一種高純度黃芩苷的制備方法，包括如下步驟：
[0017] 1)取黃芩苷粗品，加入二甲基亞砜和低碳醇的混合溶劑中，攪拌加熱至30~70°C 溶解，得黃芩苷溶液，其中，黃芩苷粗品、二甲基亞砜和低碳醇的加入量的質(zhì)量比為1:(0.8- 3):(0~2);
[0018] 2)過濾，除去不溶性雜質(zhì)，收集濾液；
[0019] 3)向所述步驟2)的濾液中再加入低碳醇，低碳醇的加入量與黃芩苷粗品的質(zhì)量比 為(3-10): 1，不斷攪拌下，攪拌加熱至50-90°C，生成黃色沉淀，保溫0.5-3小時；
[0020] 4)冷卻，過濾，低碳醇洗滌、干燥，得到黃色粉末，即得所述高純度黃芩苷。
[0021] 本發(fā)明的黃芩苷粗品是指質(zhì)量百分含量在85%以下的黃芩苷，高純度的黃芩苷產(chǎn) 品是指經(jīng)高效液相色譜法測定純度在97%以上。
[0022] 本發(fā)明采用二甲基亞砜溶解黃芩苷粗品，利用低碳醇降低了溶液的粘度，便于過 濾，以除去不溶性性雜質(zhì)以及活性炭吸附分離，通過醇類的稀釋，于高溫下，形成粉狀的黃 色結(jié)晶，冷卻，過濾，洗滌、干燥得到粉狀的黃色結(jié)晶，不需要進行兩次結(jié)晶轉(zhuǎn)化即得高純度 的黃芩苷，而且本發(fā)明使用的二甲基亞砜為三類溶劑，未使用高沸點的二類溶劑（如酰胺 類），方便殘留溶劑的后續(xù)處理，更有利于臨床應(yīng)用;本發(fā)明操作條件溫和，不用強酸，避免 了黃芩苷的二次水解，降低對設(shè)備的腐蝕;本發(fā)明制備的黃芩苷結(jié)晶顆粒大，容易過濾，無 需采用樹脂吸附，可以處理大量樣品，適合規(guī)模化生產(chǎn);本發(fā)明制備的黃芩苷不僅收率高、 純度高，而且工藝簡單，生產(chǎn)成本低，適于廣泛推廣。
[0023]進一步地，所述步驟1)中，所述黃芩苷粗品、二甲基亞砜和低碳醇的質(zhì)量比為1: (1-2.5) :(0~1.5)。三者合適的比例才能在保證黃芩苷充分溶解的基礎(chǔ)上除去其它雜質(zhì)。
[0024] 優(yōu)選地，所述步驟1)中，所述黃芩苷粗品、二甲基亞砜和低碳醇的質(zhì)量比為1:(1_ 1.5) :(0.5~0.8)。三者合適的比例才能在保證黃芩苷充分溶解的基礎(chǔ)上除去其它雜質(zhì)。
[0025] 進一步地，所述步驟3)中，攪拌加熱溫度為70_80°C，保溫時間為1-1.5小時。
[0026] 進一步地，所述步驟1)中的低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種。
[0027] 進一步地，所述步驟3)中，所述低碳醇的加入量與黃芩苷粗品的質(zhì)量比為(4-8): 1〇
[0028] 進一步地，所述步驟3)中的低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種。
[0029] 優(yōu)選地，所述步驟4)中的低碳醇為甲醇、乙醇、丙醇、異丙醇中的一種或多種。
[0030] 綜上所述，本發(fā)明的有益效果表現(xiàn)為：
[0031] 1)本發(fā)明采用二甲基亞砜溶解黃芩苷粗品，利用低碳醇降低了溶液的粘度，便于 過濾，以除去不溶性性雜質(zhì)以及活性炭吸附分離，通過低碳醇的稀釋，于高溫下，形成粉狀 的黃色結(jié)晶，經(jīng)過冷卻，過濾，洗滌、干燥得到粉狀的黃色結(jié)晶，不需要進行兩次結(jié)晶轉(zhuǎn)化即 得高純度的黃芩苷;而且本發(fā)明使用的二甲基亞砜為三類溶劑，未使用高沸點的二類溶劑 (如酰胺類），方便殘留溶劑的后續(xù)處理，更有利于臨床應(yīng)用；
[0032] 2)本發(fā)明操作條件溫和，不用強酸，避免了黃芩苷的二次水解，降低對設(shè)備的腐 蝕；
[0033] 3)本發(fā)明制備的黃芩苷結(jié)晶顆粒大，容易過濾，無需采用樹脂吸附，可以處理大 量樣品，適合規(guī)?；a(chǎn)；
[0034] 4)本發(fā)明制備的黃芩苷不僅收率高、純度高，而且工藝簡單，生產(chǎn)成本低，適于廣 泛推廣。
【附圖說明】
[0035] 圖1為本發(fā)明實施例一制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0036]圖2為本發(fā)明實施例二制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0037] 圖3為本發(fā)明實施例三制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0038] 圖4為本發(fā)明實施例四制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0039]圖5為本發(fā)明實施例八制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0040] 圖6為對比例一制備的黃芩苷的液相圖譜；
[0041] 圖7為對比例二制備的黃芩苷的液相圖譜。
【具體實施方式】
[0042] 為使本發(fā)明的實施例要解決的技術(shù)問題、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結(jié)合 附圖及具體實施例進行詳細描述。但本發(fā)明絕非限于這些例子。以下所述僅為本發(fā)明較好 的實施例，僅僅用以解釋本發(fā)明，并不能因此而理解為本發(fā)明專利范圍的限制。應(yīng)當(dāng)指出的 是，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所做的任何修改、等同替換和改進等，均應(yīng)包含在本發(fā)明 的保護范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明專利的保護范圍應(yīng)以所附權(quán)利要求為準(zhǔn)。
[0043]實施例一:高純度黃芩苷的制備
[0044] 1)取黃芩苷粗品lOO.Og(含量83%)，加入到二甲基亞砜(DMSO)llOg和甲醇200g的 混合溶劑中，攪拌加熱至60°C溶解，得黃芩苷溶液；
[0045] 2)過濾除去不溶性雜質(zhì)；
[0046] 3)濾液中再加入甲醇1000g。
[0047] 4)攪拌加熱至回流，生成黃色沉淀，保溫1小時；
[0048] 5)冷卻，過濾，甲醇洗滌、干燥，得到產(chǎn)品75.2g。
[0049] 黃芩苷的HPLC測定方法為：等度洗脫，檢測波長280nm，柱溫25°C，流動相：甲醇- 0.2%磷酸水溶液(47:53)，十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑。HPLC測定方法按照黃芩苷標(biāo) 準(zhǔn)(標(biāo)準(zhǔn)號WS-10001-(HD-0989)-2002)檢測，出處《化學(xué)藥品地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)（第十 冊）》D10-239。
[0050] 制備的黃芩苷的液相圖譜見圖1，其HPLC測定含量為:99.1%。
[0051] 實施例二:高純度黃芩苷的制備
[0052] 1)取黃芩苷粗品lOO.Og(含量83%)，加入到二甲基亞砜(DMSO)lOOg和乙醇50g的 混合溶劑中，攪拌加熱至70°C溶解，得黃芩苷溶液；
[0053] 2)過濾除去不溶性雜質(zhì)；
[0054] 3)濾液中再加入乙醇400g。
[0055] 4)攪拌加熱至回流，生成黃色沉淀，保溫1.5小時；
[0056] 5)冷卻，過濾，甲醇洗滌、干