一種依托泊苷和替尼泊苷及其類似物的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ]本發(fā)明涉及一種依托泊苷和替尼泊苷及其類似物的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 木質(zhì)素類化合物廣泛存在于植物王國之中，作為二級代謝產(chǎn)物來源于苯丙素的氧 化二聚。[1]到目前為止已從十七個科的植物的根、莖、葉、種子及果實(shí)中分離得到木質(zhì)素類 化合物。盡管從化學(xué)結(jié)構(gòu)角度該類化合物的分子結(jié)構(gòu)中僅含有兩個C 6_C3苯丙素單元，但該 類化合物通過改變兩個苯丙素單元的連接方式而表現(xiàn)出結(jié)構(gòu)復(fù)雜和多樣性。
[0003] 生物活性測試顯示木脂素類化合物具有非常好的藥用活性，主要包括抗腫瘤、抗 感染、免疫抑制、心腦血管保護(hù)、抗氧化及抗病毒等。最為著名的木質(zhì)素類化合物當(dāng)屬鬼臼 毒素，鬼白毒素屬于芳基四氫萘類木質(zhì)素，已被證明具有很好的抗有絲分裂活性。早期臨床 試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)鬼白毒素確實(shí)對腫瘤的治療非常高效，但遺憾的是其毒副作用太大，從而限制了 其作為抗腫瘤藥物使用。鬼白毒素進(jìn)行糖苷化衍生后不僅提高了所需活性，而且毒副作用 也大大降低。因此，作為DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶II的抑制劑已被廣泛應(yīng)用于腫瘤的臨床治療，特別 是小細(xì)胞肺癌的治療。
[0004] Botta,B.；Delle Monache,G.；Misiti,D.；Vitali,A.；Zappia, 6.〇1^16(1.〇16111.2001，8，1363，因而具有良好的要用前景。而鬼臼毒素4-0!1的糖苷化是糖 化學(xué)領(lǐng)域的難點(diǎn)，主要是由于該羥基處于富電子苯環(huán)的芐位，易在酸性條件離去而生成芐 正離子。而幾乎所有的常規(guī)糖苷化條件均是當(dāng)量或催化量的Lewis酸促進(jìn)下進(jìn)行的，因而在 活化給體的同時，受體也受到活化從而導(dǎo)致反應(yīng)收率偏低。目前只有少數(shù)幾位化學(xué)家完成 了鬼臼毒素及其衍生物5-0-糖苷的合成（a)Helv.Chim.Acta 1968,51， 163.Helv.Chim.Acta 1968,51, 1631.(b)Tetrahedron Lett. 1991,32, 1653(c) Tetrahedron Lett. 1992,33,4831 . (d)J.Org.Chem.1993,58,4175. (e) Eur. J.Med. Chem. 2012，47，424.。但這幾種方法均具有產(chǎn)率低，構(gòu)型不易控制，毒性較大等 缺點(diǎn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供一種依托泊苷和替尼泊苷及其類似物的制備方法，該方法 條件溫和，綠色環(huán)保，產(chǎn)物的產(chǎn)率和純度均較高。該方法包括如下步驟(2)~（3)或者步驟 ⑴~⑶。
[0006] (1)4'去甲基表鬼臼毒素的4'位羥基的選擇性保護(hù)；（2)4'位羥基保護(hù)的表鬼臼毒 素類衍生物及鬼白毒素受體的4位羥基發(fā)生糖苷化;（3)保護(hù)基的脫除。
[0007] 具體來說，推薦各步驟如下：
[0008] (1)以4'去甲基表鬼臼毒素為原料，引入心選擇性的保護(hù)4'位羥基，得到到4'位羥 基保護(hù)的表鬼白毒素類衍生物3。
[0009
[0010] 其中，Ri為本領(lǐng)域常用的羥基保護(hù)基，所述的保護(hù)基較佳的為芐基，叔丁基二甲基 娃基，甲基；
[0011] (2)4'位羥基保護(hù)的表鬼白毒素類衍生物及鬼白毒素受體的4位羥基發(fā)生糖苷化， 得到全保護(hù)的4位連接糖基R 2的表鬼白毒素及鬼白毒素類糖苷2。
[0012]
[0013] 其中R2為全保護(hù)的β-D-葡萄糖基、全保護(hù)的α-D-葡萄糖基、全保護(hù)的β-D-半乳糖 基、全保護(hù)的a-D-半乳糖基、全保護(hù)的β-D-甘露糖基、全保護(hù)的a-D-甘露糖基、全保護(hù)的β-D_木糖基、全保護(hù)的a-D-木糖基、全保護(hù)的i3-D_2-氨基葡萄糖基、全保護(hù)的a-D-2-氨基葡萄 糖基、全保護(hù)的a-L-鼠李糖基、全保護(hù)的β-L-鼠李糖基、全保護(hù)的a-D-核糖基、全保護(hù)的β-D_核糖基、全保護(hù)的a-L-核糖基、全保護(hù)的β-L-核糖基、全保護(hù)的a-D-阿拉伯糖基、全保護(hù) 的β-D-阿拉伯糖基、全保護(hù)的a-L-阿拉伯糖基、全保護(hù)的β-L-阿拉伯糖基、全保護(hù)的a-L-巖 藻糖基、全保護(hù)的β-L-巖藻糖基、全保護(hù)的β-D-葡萄糖醛酸基、全保護(hù)的a-D-葡萄糖醛酸 基、全保護(hù)的β-D-半乳糖醛酸基、或者全保護(hù)的a-D-半乳糖醛酸基;其中糖上的保護(hù)基為乙 ?；⒈郊柞；?、芐基、乙醛叉，噻吩醛叉、AZMB結(jié)構(gòu)式〉
[0014] (3)4'位羥基保護(hù)的表鬼臼毒素及鬼臼毒素類衍生物糖苷2脫除保護(hù)基得到依托 泊苷和替尼泊苷及其類似物1。
[0015]
[0016] 所述的步驟（1) 4 '去甲基表鬼臼毒素4 '位羥基保護(hù)基Ri的引入中，4'去甲基表鬼 臼毒素與含保護(hù)基的反應(yīng)物RiX的摩爾比是1:1.0-1.5，反應(yīng)溫度是-10-25°C，反應(yīng)時間是 0.54-12小時，反應(yīng)的有機(jī)溶劑選自C1-C4的鹵代烷、三乙胺、吡啶、N，N-二甲基甲酰胺中的 至少一種，反應(yīng)在堿的作用下進(jìn)行，X選自鹵素;表鬼臼毒素與堿的摩爾比1:1.0-1.5;
[0017] 所述的步驟(2)4'位羥基保護(hù)的表鬼白毒素類衍生物及鬼白毒素受體的4位羥基 糖苷化反應(yīng)中，4位仲羥基受體與糖基炔酯給體4在有機(jī)溶劑中和惰性氣體保護(hù)下，在路易 斯酸作用下發(fā)生糖苷化反應(yīng)，
[0018] 所述的糖基炔酯給體 4)，R3選自C1-C6的烷基、C3-C10環(huán)烷基或 芳基；
[0019] 所述的4'位羥基保護(hù)的表鬼白毒素類衍生物受體(3)及鬼白毒素受體、糖基炔酯 給體(4)、路易斯酸的摩爾比是1:21.05-53.0:0.051-0.05,反應(yīng)溫度是室溫，反應(yīng)時間是 0.5-12小時，反應(yīng)的有機(jī)溶劑選自甲苯、二氯甲烷、乙醚及乙腈中至少一種；
[0020] 所述的步驟（1)堿選自吡啶、三乙胺、DMAP、乙胺、咪唑、氫化鈉、氫化鉀、二異丙基 氨基鋰或六甲基二硅基氨基鋰;所述步驟(3)的路易斯酸是金催化劑或分子篩，金催化劑為 AuCl、AuC13、PPh3AuOTf或PPh3AuNTf 2，OTf為三氟甲磺?；琋Tf 2為二三氟甲磺?；被环?子篩是3-5 I分子篩或者是酸洗的3-5 I：分子篩，底物和分子篩的質(zhì)量比為惰性 氣體是高純的氮?dú)?、氬氣或氦氣?br>[0021]
[0022]
[0023] 其中Bz為苯甲?；?，TBDPS為二苯基叔丁基硅基，AZMB: s 55所述的R3
〇·
[0024] 本發(fā)明的技術(shù)效果是:本發(fā)明的制備方法是一種高效、易于操作、綠色環(huán)保、適用 范圍廣的合成依托泊苷，替尼泊苷及其類似物的化學(xué)方法。并且該方法在引入依托泊苷及 替尼泊苷及類似物的4位糖基時，具有很好的區(qū)域選擇性，即將糖基選擇性引入到4位，無4 位手性異構(gòu)化副反應(yīng)發(fā)生。因此本發(fā)明的制備方法的發(fā)現(xiàn)將有利于該類化合物的開發(fā)利 用。
【具體實(shí)施方式】
[0025]下面詳細(xì)說明本發(fā)明所具有的有益效果，旨在幫助閱讀者更好地理解本發(fā)明的實(shí) 質(zhì)，但不能對本發(fā)明的實(shí)施和保護(hù)范圍構(gòu)成任何限定。
[0026]下述各實(shí)施例中涉及到的室溫為20~35°C。
[0027] 實(shí)施例1
[0028] 鬼臼毒素4-0-(2,3,4,6_四-0-苯甲酰基-β-D-葡萄糖)鬼臼毒素糖苷的制備
[0029]
[0030]步驟1:全苯甲?；Ｗo(hù)的葡萄糖給體的合成：
[0031]
[0032]氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將異頭位裸露的全Bz保護(hù)的葡萄糖5g，8.4mmol及鄰炔基苯甲酸 l·87g，10·lmmol溶于干燥的10mLDCM中，然后向體系中加入EDCI2g，10·lmmol，DMAPlg， lOmmol和DIPEA 3ml，16.7mmol，并于室溫下攪拌3h，TLC跟蹤至反應(yīng)結(jié)束。將反應(yīng)體系減壓 濃縮粗產(chǎn)品，然后柱層析得葡萄糖炔酯給體(6. lg，95%);
[0033] 步驟2:鬼臼毒素4-0-(2,3,4,6-四-0-苯甲?；?β-D-葡萄糖)鬼臼毒素糖苷的制 備
[0034]
[0035]氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將全苯甲?；Ｗo(hù)的葡萄糖給體115mg，0.15mmol和鬼臼毒素41mg， O.lmmol溶于干燥的3mLDCM中，反應(yīng)體系在室溫下攪拌30min后，加入Ph3PAuNTf222mg， 0.03mmol，室溫攪拌直至反應(yīng)完全。反應(yīng)體系減壓濃縮后得粗產(chǎn)品，柱層析純化得目標(biāo)產(chǎn)物 82.4mg,83%
[0036] [a]26D = -0.366(c = 0.76in ΟΚΙβ);1!! NMR(400MHz，CDCl3):S7.94(t，J = 7.2Hz， 4H) ,7.87(d,J = 7.2Hz,2H) ,7.82(d,J = 7.2Hz,2H) ,7.52(m,12H) ,7.12(s,lH) ,6.48(s, lH),6.33(s,2H),5.96(m,3H),5.70(m,2H),5.00(dd ,J = 3.2,7.6Hz,2H),4.70(dd ,J = 2.4, 12.4Hz, 1H) ,4.54(m,3H) ,4.20(m, 1H), 4.09(t ,J = 9.6Hz , 1H), 3.73(s, 6H), 3.67(s , 3H), 2.91(m，lH)，2.75(dd，J = 4.4,14.4Hz) ;13C 匪R(400MHz CDC13)S173.7,166.0,165.8， 165.1,164.9,162.6,148.1,147.6,133.6,129.8,129.7,129.1,128.6,128.5,128.3， 109.5,108.6,108.0,101.4,99.0,88.0,77.3,77.2,71.8,71.1,69.6,62.9,60.6,56.4， 45.5,43.9,38.5.HRMS(m/z):[M+Na] + calcd for C56 H48Na+0171015.2784, found 1015.2787。
[0037] 實(shí)施例2
[0038] 表鬼臼毒素4-0-(2,3,4,6_四-0-苯甲?；?β-D-葡萄糖)表鬼臼毒素糖苷的制備
[0039]
[0040]步驟1:如實(shí)施例1步驟1所示；
[0041] 步驟2:表鬼臼毒素的制備
[0042]
[0043] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將鬼臼毒素1.0g，2.41mmol和溴化鈉993.2mg，9.65mmol，溶于24mL乙 腈中，再加入甲磺酸〇.63mL，9.65mmol反應(yīng)體系在室溫下攪拌lh后，加入12mL水，再加入碳 酸鋇1.906g，9.65mmol，室溫攪拌直至反應(yīng)完全。反應(yīng)體系萃取干燥，減壓濃縮后得粗產(chǎn)品， 柱層析純化得目標(biāo)產(chǎn)物950mg，95 % ;
[0044] 步驟3:表鬼臼毒素4-0-(2,3,4,6-四-0-苯甲酰基-β-D-葡萄糖)表鬼臼毒素糖苷 的制備
[0045]
[0046] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，將全苯甲?；Ｗo(hù)的葡萄糖給體230mg，0.3mmol和表鬼臼毒素 41mg， 0 . lmmol溶于干燥的3mLDCM中，反應(yīng)體系在室溫下攪拌30min后，加入Ph3PAuNTf2l5mg, 0.02mmol，室溫攪拌直至反應(yīng)完全。反應(yīng)體系減壓濃縮后得粗產(chǎn)品，柱層析純化得目標(biāo)產(chǎn)物 74.411^,74.25^4(^21 = -0.209^ = 1.310111 CHC13);4 NMR(400MHz，CDC13) :δ8.10((1, J = 7.6Hz,2H),7.93(d,J = 7.6Hz,2H),7.84(d,J = 7.6Hz,2H),7.78(d,J = 7.56Hz,2H) ,7.59 (t ,J = 7.28Hz,lH) ,7.52(m,2H) ,7.46(t ,J = 7.