專利名稱：一種鬼臼毒素的衍生物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水溶性的鬼臼毒素衍生物制備方法，它是聚乙二醇修飾的鬼臼毒素 衍生物。
背景技術(shù)：
鬼臼毒素是一種具有抗腫瘤活性的天然化合物，它有很強(qiáng)的細(xì)胞毒作用，但由于其 毒性反應(yīng)比較嚴(yán)重，不能用于臨床，需對(duì)其結(jié)構(gòu)進(jìn)行改造，藥學(xué)工作者合成了大量的鬼 臼毒素衍生物，并進(jìn)行了構(gòu)效關(guān)系研究。如依托泊苷、替尼泊苷以及其他的鬼臼毒素 衍生物己被開發(fā)成抗腫瘤藥物應(yīng)用于臨床。用高分子化合物對(duì)鬼臼毒素進(jìn)行修飾，是減 小鬼臼毒素毒副作用的另一種重要方法，木質(zhì)素、聚乙二醇及其衍生物都被用作鬼臼毒 素的修飾劑。在中國(guó)專利文獻(xiàn)庫(kù)中對(duì)鬼臼毒素衍生物有所報(bào)道，但是對(duì)經(jīng)聚乙二醇修飾的鬼臼毒 素衍生物和其制備方法沒有進(jìn)行報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的首要技術(shù)問題是提供一種經(jīng)聚乙二醇修飾的鬼臼毒素的衍生物， 它具有良好的水溶性，并可通過(guò)人體內(nèi)酶的調(diào)控作用，達(dá)到良好的緩釋目的，藥效期長(zhǎng)，療效高。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題是提供一種經(jīng)聚乙二醇修飾的鬼臼毒素的衍生 物的制備方法，它采用微波催化合成手段，高效、快速、簡(jiǎn)便地實(shí)現(xiàn)了鬼臼毒素與羧基 聚乙二醇的酯化反應(yīng)。本發(fā)明解決上述首要技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為 一種鬼臼毒素的衍生物，其特 征在于其為以下結(jié)構(gòu)式的鬼臼毒素的羧基單甲氧基聚乙二醇衍生物。<formula>formula see original document page 5</formula>鬼臼毒素-聚乙二醇衍生物 本發(fā)明解決上述另一個(gè)技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案為 一種鬼臼毒素的衍生物制備 方法，其特征在于在裝有鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇的反應(yīng)容器中，加入二環(huán)己 基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶，通過(guò)微波催化作用而形成下列結(jié)構(gòu)式的鬼臼毒素的前 藥。<formula>formula see original document page 5</formula>鬼臼毒素-聚乙二醇衍生物所述的鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇、二環(huán)己基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶的 四種反應(yīng)物的配比為0.9-1.1:1.4-1.6:1.9-2.1:1.9-2.1摩爾比，使反應(yīng)物混合均勻，在微 波催化下制得白色粉末狀的鬼臼毒素前藥，其制備過(guò)程如下(l)按配比將反應(yīng)物混合 均勻；(2)在微波爐中催化加熱反應(yīng)25-35min，使酯化反應(yīng)完全；(3)將反應(yīng)后的混合 物干燥、.冷卻后，加入無(wú)水二氯甲垸，過(guò)濾，濾液濃縮后加入無(wú)水乙醚進(jìn)行沉淀，抽濾， 洗滌，干燥，得白色固體；(4)加二氯甲垸溶解，先后用9-ll。/。HOAc/THF和0.09-0.11N 鹽酸溶液洗滌，加入無(wú)水硫酸鈉干燥，除去干燥劑，濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾 得白色固體，真空干燥，得最終產(chǎn)品聚乙二醇一鬼臼毒素衍生物。最佳實(shí)施方式，所述的鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇、二環(huán)己基碳二亞胺和二 甲基氨基吡啶的四種反應(yīng)物的配比為1:1.5:2:2摩爾比，使反應(yīng)物混合均勻，在微波催 化下制得白色粉末狀的鬼臼毒素前藥，其制備過(guò)程如下(l)按配比將反應(yīng)物混合均勻; (2)在微波爐中催化加熱反應(yīng)30min，使酯化反應(yīng)完全；(3)將反應(yīng)后的混合物干燥、 冷卻后，加入無(wú)水二氯甲垸，過(guò)濾，濾液濃縮后加入無(wú)水乙醚進(jìn)行沉淀，抽濾，洗滌，<formula>formula see original document page 5</formula>干燥，得白色固體；(4)加二氯甲烷溶解，先后用10。/。HOAc/THF和O.IN鹽酸溶液洗漆，加入無(wú)水硫酸鈉千燥，除去干燥劑，濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾得白色固體，真空干燥，得最終產(chǎn)品聚乙二醇一鬼臼毒素衍生物。最后，所述的羧基單甲氧基聚乙二醇的分子量?jī)?yōu)選為2000-20000。 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于前述鬼臼毒素衍生物，其mPEG-COOH分子量為2000-20000，通過(guò)微波催化作用， 將鬼臼毒素與mPEG-COOH以酯鍵的方式連接起來(lái)，制得可溶性的鬼臼毒素衍生物。 其中用聚乙二醇及其衍生物作修飾劑尤其重要，藥理實(shí)驗(yàn)表明，用此法修飾后的鬼臼毒 素衍生物藥效至少不低于同濃度下的鬼臼毒素的藥效。本發(fā)明利用微波催化作用，實(shí)現(xiàn)了鬼臼毒素的羥基與羧基單甲氧基聚乙二醇之間的 酯化反應(yīng)。常規(guī)的酯化反應(yīng)不僅需使用有毒的有機(jī)溶劑、操作繁雜，而且反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)， 效率低，特別是對(duì)于溶解性較差的鬼臼毒素，它與聚乙二醇的酯化反應(yīng)使用常規(guī)方法難 度很大。微波催化是一種新型的有機(jī)合成手段， 一些傳統(tǒng)的藥物合成方法有的反應(yīng)復(fù)雜、 難度大、費(fèi)時(shí)費(fèi)力，有的反應(yīng)進(jìn)行得很慢甚至難以發(fā)生，選用微波催化方法則可大大優(yōu) 化反應(yīng)條件，加快反應(yīng)速度，提高反應(yīng)選擇性和反應(yīng)收率，使過(guò)去難以發(fā)生或速度很慢 的反應(yīng)得以高速完成，同時(shí)還能大大簡(jiǎn)化后處理過(guò)程。目前，微波催化在水解、酯化、 氧化、親核取代、加成、縮合等許多有機(jī)合成反應(yīng)中已有大量的應(yīng)用。但是文獻(xiàn)中有關(guān) 高分子量的羧基聚乙二醇與小分子醇分子之間的酯化反應(yīng)尚沒有報(bào)道。本發(fā)明采用了微 波催化方法，高效、快速、簡(jiǎn)便地實(shí)現(xiàn)了羧基單甲氧基聚乙二醇^t鬼臼毒素的酯化反應(yīng)， 制得了可溶性的鬼臼毒素的前藥。并取得了以下效果1. 將鬼臼毒素與羧基單氧基聚乙二醇反應(yīng)制成鬼臼毒素的前藥，提供了一種制備 鬼臼毒素衍生物的方法；2. 采用微波催化合成手段，高效、快速、簡(jiǎn)便地實(shí)現(xiàn)了鬼臼毒素與羧基聚乙二醇 的酯化反應(yīng)；3. 提高了鬼臼毒素的溶解性能，其水溶性有脂溶性均有較大程度的提高，更有利 于藥物在生物體的吸收與代謝。
具體實(shí)施方式
以下結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。本發(fā)明的制備路線為將鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇置于反應(yīng)容器中，加入二環(huán)己基碳二亞胺和二 甲基氨基吡啶，使反應(yīng)物混合均勻，在微波催化下反應(yīng)30分鐘，即可制得鬼臼毒素前 藥。實(shí)施例1
在25毫升三角瓶中，加入1.00 g(0.5 mmol)mPEG-COOH 2000、 0.31 g(0.75 mmol) 鬼臼毒素、0.21 g (1.0 mmol) 二環(huán)己基碳二亞胺和0.12 g (1.0 mmol)對(duì)-N，N-二甲基氨 基吡啶，充分搖動(dòng)使反應(yīng)物混合均勻，然后置于惠而浦微波爐中，在510W的功率下加 熱30min，使不再有水珠生成時(shí)為止。將反應(yīng)后的混合物置于真空干燥箱中干燥、冷卻 后，加入40ml無(wú)水二氯甲垸，充分搖動(dòng)，過(guò)濾，濾液蒸去部分二氯甲烷后，加入80ml 無(wú)水乙醚，析出白色沉淀。將上述樣品置于4 1(TC的冰箱中冷卻，抽濾，干燥，得白色 固體，重L22g。
在上述粗品中，加入40ml二氯甲垸使之溶解，再加入20ml 10。/。AcOH/THF分解 過(guò)量的二環(huán)己基碳二亞胺，10min后用20 ml 0.1N鹽酸溶液洗滌，加入無(wú)水硫酸鈉干燥， 除去干燥劑，濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾得白色固體，真空干燥，得最終產(chǎn)品聚 乙二醇一鬼臼毒素衍生物0.94 g，熔化溫度50~53°C ，產(chǎn)率78.3%。
實(shí)施例2
在25毫升三角瓶中，加入2.50 g(0.5 mmol)mPEG-COOH 5000、 0.31 g(0.75 mmol) 鬼臼毒素、0.21 g (l.O腿ol) 二環(huán)己基碳二亞胺和0.12g (LO腿ol)對(duì)-N,N-二甲基氨 基吡啶，充分搖動(dòng)使反應(yīng)物混合均勻，然后置于惠而浦微波爐中，在510W的功率下加 熱30min，使不再有水珠生成時(shí)為止。將反應(yīng)后的混合物置于真空干燥箱中干燥、冷卻 后，加入40ml無(wú)水二氯甲烷，充分搖動(dòng)，過(guò)濾，濾液蒸去部分二氯甲垸后，加入80ml 無(wú)水乙醚，析出白色沉淀。將上述樣品置于4 1(TC的冰箱中冷卻，抽濾，干燥，得白色 固體，重2.66g。
在上述粗品中，加入40 ml 二氯甲烷溶解后，加入20 ml 10% AcOH/THF分解過(guò)量 的二環(huán)己基碳二亞胺，10min后用20ml0.1N鹽酸溶液洗滌，加入無(wú)水硫酸鈉干燥，除 去干燥劑，濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾得白色固體，真空干燥，得最終產(chǎn)品聚乙 二醇一鬼臼毒素衍生物2.02g，熔化溫度59 62。C，產(chǎn)率74.8%。
本文中HOAc和AcOH是指冰醋酸，THF是指四氫呋喃，PEG是指聚乙二醇，一 cooH為有機(jī)酸根。
權(quán)利要求
1、一種鬼臼毒素的衍生物，其特征在于其為以下結(jié)構(gòu)式的鬼臼毒素的羧基單甲氧基聚乙二醇衍生物。鬼臼毒素-聚乙二醇衍生物。
2、 一種鬼臼毒素的衍生物制備方法，其特征在于在裝有鬼臼毒素、羧基單甲氧 基聚乙二醇的反應(yīng)容器中，加入二環(huán)己基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶，通過(guò)微波催化作 用而形成下列結(jié)構(gòu)式的鬼臼毒素的前藥。^-CO-PEG鬼臼毒素-聚乙二醇衍生物。
3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的鬼臼毒素的衍生物制備方法，其特征在于鬼臼毒素、羧 基單甲氧基聚乙二醇、二環(huán)己基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶的四種反應(yīng)物的配比為 0.9-1.1:1.4-1.6:1.9-2. 1:1.9-2. l摩爾比，使反應(yīng)物混合均勻，在微波催化下制得白 色粉末狀的鬼臼毒素前藥，其制備過(guò)程如下(1)按配比將反應(yīng)物混合均勻；(2)在微 波爐中催化加熱反應(yīng)25-35min，使酯化反應(yīng)完全；(3)將反應(yīng)后的混合物干燥、冷卻后， 加入無(wú)水二氯甲垸，過(guò)濾，濾液濃縮后加入無(wú)水乙醚進(jìn)行沉淀，抽濾，洗滌，干燥，得 白色固體；(4)加二氯甲烷溶解，先后用9-llMH0Ac/THF和0. 09-0. 11N鹽酸溶液洗漆，加入無(wú)水硫酸鈉干燥，除去干燥劑，濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾得白色固體，真 空干燥，得最終產(chǎn)品聚乙二醇一鬼臼毒素衍生物。
4、 根據(jù)權(quán)利要求3所述的鬼臼毒素的衍生物制備方法，其特征在于鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇、二環(huán)己基碳二亞胺和二甲基氨基吡啶的四種反應(yīng)物的配比為 1:1.5:2:2摩爾比，使反應(yīng)物混合均勻，在微波催化下制得白色粉末狀的鬼臼毒素前藥， 其制備過(guò)程如下(1)按配比將反應(yīng)物混合均勻；(2)在微波爐中催化加熱反應(yīng)30min， 使酯化反應(yīng)完全；(3)將反應(yīng)后的混合物干燥、冷卻后，加入無(wú)水二氯甲烷，過(guò)濾，濾 液濃縮后加入無(wú)水乙醚進(jìn)行沉淀，抽濾，洗滌，干燥，得白色固體；(4)加二氯甲烷溶 解，先后用10% HOAc/THF和0. 1N鹽酸溶液洗滌，加入無(wú)水硫酸鈉干燥，除去干燥劑， 濾液濃縮后用異丙醇重結(jié)晶，過(guò)濾得白色固體，真空干燥，得最終產(chǎn)品聚乙二醇一鬼臼 毒素衍生物。
5、 根據(jù)權(quán)利要求2或3或4所述的鬼臼毒素的衍生物制備方法，其特征在于羧基單 甲氧基聚乙二醇的分子量為2000-20000。
全文摘要
一種鬼臼毒素的衍生物，其特征在于其為以下結(jié)構(gòu)式的鬼臼毒素的羧基單甲氧基聚乙二醇衍生物。制備方法，以鬼臼毒素、羧基單甲氧基聚乙二醇、二環(huán)己基亞胺和N二甲基對(duì)氨基吡啶為原料，通過(guò)微波催化作用，制備了一種鬼臼毒素的聚乙二醇衍生物。本發(fā)明的鬼臼毒素前藥，溶解性好，穩(wěn)定性高。本發(fā)明的制備方法具有高效、快速、簡(jiǎn)便和反應(yīng)產(chǎn)率高的特點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07D493/00GK101314043SQ20071006899
公開日2008年12月3日 申請(qǐng)日期2007年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2007年5月29日
發(fā)明者侯琳熙, 張劍鋒 申請(qǐng)人:寧波大學(xué)