Ahu-377半鈣鹽晶型及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種NEP抑制劑AHU-377半鈣鹽晶型及其制 備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 中性內(nèi)肽酶（EC3. 4. 24. 11 ;腦啡肽酶；必肽酶；NEP)是一種可以在芳族氨基酸的 氨基末端上裂解各種肽底物的包含鋅的金屬蛋白酶。這種酶的底物非限制性地包括心鈉素 (ANF，也被稱為ANP)、腦鈉肽（BNP)、met和leu腦啡肽、緩激肽、神經(jīng)激肽A和P物質(zhì)。
[0003]ANF是一族血管舒張、利尿和抗高血壓的肽類，一種形式--ANF99-126是在心臟 擴(kuò)張情況中由心臟釋放的循環(huán)肽激素。ANF的功能是維持鹽和水的體內(nèi)平衡以及調(diào)節(jié)血壓。 ANF在循環(huán)中被至少兩個(gè)過(guò)程迅速滅活：受體-介導(dǎo)的清除和在NEP進(jìn)行的酶滅活。NEP抑 制劑增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行藥理學(xué)ANF注射后的低血壓、利尿、促尿鈉排泄和血漿ANF響應(yīng)。 通過(guò)兩種特定的NEP抑制劑進(jìn)行的ANF的增強(qiáng)，1988年，美國(guó)專利US4749688中一般性地公 開了可以用NEP來(lái)增強(qiáng)ANF。同年，美國(guó)專利US4740499中公開了噻奧芬（thiorphan)和凱 拉托芬也可以用于增強(qiáng)心房肽的應(yīng)用。此外，NEP抑制劑可降低血壓和發(fā)揮ANF-樣作用如 在一些形式的實(shí)驗(yàn)性高血壓中的利尿和增加環(huán)鳥苷3'，5'_單磷酸（cGMP)排泄的作用。因 為ANF的抗體將抵消血壓的降低，所以NEP抑制劑的抗高血壓作用是通過(guò)ANF介導(dǎo)的。長(zhǎng) 期和不進(jìn)行控制的高血壓血管疾病最終將導(dǎo)致靶器官如心和腎的各種病理學(xué)改變。持續(xù)的 高血壓也能導(dǎo)致中風(fēng)的發(fā)生率增加。因此，強(qiáng)烈需要對(duì)抗高血壓治療的功效進(jìn)行評(píng)估，即對(duì) 除了血壓降低以外的其它心血管終點(diǎn)事件進(jìn)行檢查以進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)聯(lián)合治療的益處。
[0004] 1993年，GaryKsander等在美國(guó)專利US5217996中公開了一類聯(lián)芳基取代的4-氨 基丁酸衍生物，該類化合物被發(fā)現(xiàn)具有明顯的NEP抑制活性，其中最具代表性的一個(gè)化合 物為N-(3-羧基-1-氧代丙基）-(4S)-對(duì)-苯基苯基甲基）-4-氨基-2R-甲基丁酸乙酯 (又稱AHU-377)。
[0006] 在實(shí)際生產(chǎn)制備過(guò)程中AHU-377通常以油狀物出現(xiàn)，不利于保存及后續(xù)藥物開 發(fā)。AHU-377粗品經(jīng)叔丁醇酯化、氫氧化鈉堿水解后得到的AHU-377鈉鹽經(jīng)二氯甲烷/正 己烷重結(jié)晶后聚集狀態(tài)不明，而且經(jīng)發(fā)明人深入研究發(fā)現(xiàn)AHU-377鈉鹽吸濕性相當(dāng)大，物 質(zhì)不穩(wěn)定且不利于儲(chǔ)存，因此，AHU-377作為藥物活性成分，其產(chǎn)品質(zhì)量、物質(zhì)穩(wěn)定性、儲(chǔ)存 或稱量等均存在很大問(wèn)題，其鈉鹽也沒有解決上述問(wèn)題，雖然美國(guó)專利US5217996也公開 了AHU-377還可以制備成各種鹽型化合物，例如堿金屬鹽、堿土金屬鹽、胺鹽、烷基胺鹽、羥 烷基胺鹽等，但是，主要還是從AHU-377含有一個(gè)羧基的化學(xué)結(jié)構(gòu)上推斷得出，并未實(shí)際得 至IJ各種除鈉鹽之外的其它鹽型化合物，不能解決AHU-377產(chǎn)品質(zhì)量差、物質(zhì)不穩(wěn)定、難以儲(chǔ) 存及稱量等問(wèn)題。
[0007] 此外，該藥的應(yīng)用對(duì)象為有高血壓和心衰類心血管疾病的病人，鈉的攝入也會(huì)增 加心血管負(fù)擔(dān)，因此十分有必要將鈉鹽更換成其他鹽型，或其他類對(duì)心血管無(wú)害或有益的 鹽類如鈣鹽等。鈣離子對(duì)心血管的有益作用被廣泛認(rèn)同，鈣離子降血壓的作用可能由以下 機(jī)制所致：1、鈣的膜穩(wěn)定作用，鈣結(jié)合在細(xì)胞膜上，可降低細(xì)胞膜通透性，提高興奮閾，能使 血管平滑肌松弛；2、鈣自身可阻斷鈣通道，使細(xì)胞外的鈣離子不能進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)；3、血鈣高 可對(duì)抗高鈉所致的排鉀增加，而鉀離子對(duì)穩(wěn)定細(xì)胞膜起重要作用。人維持足夠的高鈣攝入， 可對(duì)抗高鈉的有害作用；4、有學(xué)者認(rèn)為，40%的血壓升高與甲狀旁腺有關(guān)。甲狀旁腺可產(chǎn)生 一種耐高熱的多肽物質(zhì)，這是引起高血壓的罪魁禍?zhǔn)祝环Q為"致高血壓因子"。"致高血壓 因子"的產(chǎn)生受低鈣飲食刺激，而高鈣飲食可抑制其產(chǎn)生"致高血壓因子"?，F(xiàn)代研究證明， 中老年人多吃含鈣豐富的食物可以預(yù)防動(dòng)脈硬化，高血壓病人在服用降壓藥的同時(shí)配合補(bǔ) 鈣，還能更好地使過(guò)高的血壓降到正常。所以，對(duì)于缺鈣的人，長(zhǎng)期大量地補(bǔ)充鈣質(zhì)，使血鈣 保持正常水平，維持平滑肌細(xì)胞內(nèi)外鈣代謝的平衡，避免血管平滑肌的痙攣，從而達(dá)到有效 預(yù)防動(dòng)脈血管硬化、降低血壓的目的。因此，將AHU377的鈉鹽換成鈣鹽，不僅可以減少鈉鹽 帶來(lái)的副作用，還可以帶來(lái)額外的對(duì)心血管疾病的有益作用。
[0008] 雖然W02008031567也公開了AHU-377游離酸制備成鈣鹽的合成路線，如下所示：
[0010] 但是，本領(lǐng)域人員可以了解，上述常見的成鹽反映技術(shù)路線是基于含有羧基的化 合物與鈣鹽成鹽的一般技術(shù)路線，但是該技術(shù)路線并不能適合所有羧基化合物，也無(wú)從知 曉是否可以通過(guò)這個(gè)反映來(lái)制備出AHU377的鈣鹽。該技術(shù)路線無(wú)實(shí)施例支持，所以更加 不可知該技術(shù)路線是否可以產(chǎn)生晶型的鈣鹽。另外，該技術(shù)路線只有在特殊條件下成立， 尤其是合成路線中第二步，是AHU-377鈉鹽與CaC12發(fā)生的離子交換反應(yīng)，如果不能創(chuàng)造 AHU-377鈣鹽或者氯化鈉從體系析出的特殊條件，則上述合成路線則不成立。其次，從該通 用的技術(shù)路線，無(wú)法推測(cè)是否可以制備固體形式的AHU-377鈣鹽，所得鈣鹽是否為晶型，是 何種晶型。因此，該通用的技術(shù)路線無(wú)法得到AHU-377鈣鹽或結(jié)晶形式的AHU-337鈣鹽晶 體。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0011] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的問(wèn)題，改善AHU-377或其鈉鹽的理化性質(zhì)，發(fā)明人在深 入研究的基礎(chǔ)上制備得到了AHU-377半鈣鹽晶型。通過(guò)將AHU-377制備成鈣鹽來(lái)改變 AHU-377或其鈉鹽的理化性質(zhì)，例如結(jié)晶性、溶解性、吸濕性等。
[0012] 本發(fā)明第一方面提供一種AHU-377半鈣鹽晶型，其X射線粉末衍射圖包括位于 12·70±0·2°，7·32±0·2°，15·90±0·2°和18·56±0·2°的衍射角（2Θ)處的峰，或其 X射線粉末衍射圖包括位于4. 02±0. 2°，3. 62±0. 2°和17. 82±0. 2°的衍射角（2 Θ)處 的峰。
[0013]本發(fā)明第二方面提供一種AHU-377半鈣鹽三水合物晶型（指定為晶型I)，其X射 線粉末衍射圖包括位于 12. 70±0. 2°，7. 32±0. 2°，15. 90±0. 2° 和 18. 56±0. 2° 的衍 射角（2Θ)處的峰。
[0014]作為進(jìn)一步優(yōu)選的方案，優(yōu)選其X射線粉末衍射圖還包括位于14. 74±0. 2°，15. 42±0·2°，7·82±0·2°，19·42±0·2°，16·64±0·2° 和 17·54±0·2° 的衍射角（2Θ)處 的峰。
[0015] 作為更進(jìn)一步優(yōu)選的方案，最優(yōu)選其X射線粉末衍射圖與圖1中顯示的衍射角 (2 Θ)處的峰基本上相同，其X射線粉末衍射數(shù)據(jù)如表1所示：
[0016]表1
[0018]本發(fā)明第三方面提供一種AHU-377半鈣鹽無(wú)水晶型（指定為晶型II)，其X射線粉 末衍射圖包括位于4. 02±0. 2°，3. 62±0. 2°和17. 82±0. 2°的衍射角（2Θ)處的峰。
[0019] 作為進(jìn)一步優(yōu)選的方案，優(yōu)選其X射線粉末衍射圖還包括位于 20. 48±0· 2°，14. 50±0· 2° 和 19. 66±0· 2° 的衍射角（2Θ)處的峰。
[0020] 作為更進(jìn)一步優(yōu)選的方案，最優(yōu)選其X射線粉末衍射圖與圖3中顯示的衍射角 (2Θ)處的峰基本上相同，其X射線粉末衍射數(shù)據(jù)如表2所示：
[0021]表 2
[0023] 本文所使用的關(guān)于X射線衍射峰位置的術(shù)語(yǔ)"基本上相同的"意指考慮典型的峰 位置和強(qiáng)度可變性。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解，峰位置（2Θ)將由于XRTO儀器不同， 而造成測(cè)量值有所變化，有時(shí)這種變化達(dá)有時(shí)多達(dá)0.2°。此外，本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解， XRH)樣品制樣方法，XRH)儀器，樣品結(jié)晶度，樣品用量以及晶體擇優(yōu)取向等因素將導(dǎo)致樣 品XRro衍射圖中相對(duì)峰強(qiáng)度的改變。
[0024] 本發(fā)明第四方面提供一種AHU-377半鈣鹽三水合物晶型的制備方法，包括，
[0025] 1)將AHU-377游離酸溶解或混懸在合適的溶劑中，與等量或過(guò)量可溶于該體系的 苛性堿或弱堿性鈉鹽或鉀鹽相混合制備生成AHU-377相應(yīng)的鹽，優(yōu)選將弱堿性鈉鹽或鉀鹽 相混合；
[0026] 2)將上述AHU-377鹽體系與水溶性鈣鹽在水或含有機(jī)溶劑的水體系中相混合，產(chǎn) 生AHU-377鈣鹽沉淀；
[0027] 3)收集上述成鹽反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)物得到AHU-377半鈣鹽三水合物晶型。
[0028] 作為進(jìn)一步優(yōu)選的方案，步驟1)所述合適的溶劑為結(jié)晶溶劑，包括水、水溶性溶 劑或其混合物。
[0029] 作為更進(jìn)一步優(yōu)選的方案，所述水溶性溶劑選自醇類、酮類、環(huán)醚類、酰胺類、亞砜 類有機(jī)溶劑或其混合物，優(yōu)選自甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、正丁醇、乙腈、丙酮、甲乙酮、四 氫呋喃、二