新的聯(lián)苯環(huán)辛烯型木脂素類化合物及其制備方法和用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從干燥的雞血藤中分離得到的一種具有內(nèi)皮 細(xì)胞保護(hù)作用的聯(lián)苯環(huán)辛烯型木脂素類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 雞血藤是一味傳統(tǒng)活血化瘀中藥，以其藤汁紅如雞血而得名，藥用歷史悠久，始 見于《本草備要》，歷代本草均有記載，《中國藥典》規(guī)定其原植物為密花豆Spatholobus suberectus Dunn，生于山野、深谷、疏林、密林中的陰濕處，它主要分布于廣西、廣東。雞血 藤又名大血藤、血藤、血風(fēng)藤、三葉雞血藤，性溫，味苦、甘，歸肝、腎經(jīng)。雞血藤為中醫(yī)治療血 癥和風(fēng)濕的重要藥物，廣西龍州民間長期以來取其藥湯治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，療效優(yōu)異。
[0003] 雞血藤化學(xué)成分復(fù)雜，主要含有黃酮類、萜類、留醇類、木質(zhì)素類及蒽醌類等 化學(xué)成分。目前分離得到的代表性化合物包括：表無羈砲醇（Friedelan-3 β _〇1)、 胡蘿卜戒（Daucosterol)、β -谷留醇（0-sitosterol)、7-酮基-β-谷留醇 (7-0X0-β -sitosterol)、刺芒柄花素（Formononetin)、芒柄花戒（Ononin)、櫻黃素 (Prunetin)、阿佛洛莫生（Afrormosin)、大豆素（Daidzein)、3, 7-二羥基-6-甲氧基二氫 黃酮醇、表兒茶精（Epicatechin)、異甘草戒元（Isoliquiritigenin)、3, 4, 2'，4' -四羥基 查耳酮、甘草查耳酮（Licochalcone)A、苜豬酸（Medicagol)、原兒茶酸（Protocatechuic acid)、9_甲氧基香豆雌酸（9-methoxycoumestrol)和木豆異黃酮（Cajanin)等。
[0004] 現(xiàn)代藥理研究表明雞血藤具有降血壓、抗癌、抑菌、抗放射線的功效。近年來臨床 上常用雞血藤治療貧血，各種原因（如放療、化療）引起的白細(xì)胞、血小板、紅細(xì)胞等全血象 減少和再生障礙性貧血等疾病，且療效較好?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，雞血藤還具有抗病毒、 免疫調(diào)節(jié)、對酪氨酸酶雙向調(diào)節(jié)、抗炎、抗氧化、鎮(zhèn)靜催眠等作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從干燥的雞血藤中分離得到的一種具有內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù) 作用的聯(lián)苯環(huán)辛烯型木脂素類化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I )，
[0008]
[0009] 所述的化合物（I )的制備方法，包含以下操作步驟：(a)將干燥的雞血藤粉碎， 用75~85%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽 和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟（a) 中乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用75%乙醇洗脫10 個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b)中75% 乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、45:1、25:1、10:1和1:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進(jìn)一步分離，依次用體 積比為15:1、10:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟⑷中組分2 用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收 集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I )。
[0010] 進(jìn)一步地，所述大孔樹脂為DlOl大孔吸附樹脂。
[0011] 進(jìn)一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為80 %。
[0012] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I )和藥學(xué)上可接受的 載體。
[0013] 所述的化合物（I )在制備內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
[0014] 所述的藥物組合物在制備內(nèi)皮細(xì)胞保護(hù)藥物中的應(yīng)用。
[0015] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0016] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I )，其余為藥物學(xué)上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0017] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
【附圖說明】
[0018] 圖1為化合物（I )結(jié)構(gòu)式；
[0019] 圖2為化合物（I )理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0020] 下面結(jié)合實施例進(jìn)一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護(hù)范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0021] 實施例1 :化合物（I )分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0022] 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化 學(xué)試劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0023] 制備方法：（a)將干燥的雞血藤（IOkg)粉碎，用80%乙醇熱回流提取（25LX3 次），合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次）、乙酸乙酯（3LX3次）和 水飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（431g)和正丁 醇萃取物；(b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用DlOl大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱 體積，再用75 %乙醇洗脫10個柱體積，收集75 %乙醇洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫物 浸膏（172g) ;(c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1(8 個柱體積）、45:1 (8個柱體積）、25:1 (8個柱體積）、10:1 (10個柱體積）和1:1 (5個柱體 積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4 (65g)用正相硅膠進(jìn) 一步分離，依次用體積比為15:1 (8個柱體積）、10:1 (10個柱體積）和5:1 (8個柱體積）的 二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (37g)用十八烷基硅烷鍵合 的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-12個柱體積洗脫 液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I ) (45mg)。
[0024] 結(jié)構(gòu)確證：白色無定形粉末；HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z 519. 2018,結(jié)合核磁 特征可得分子式為C28H32O8，不飽和度為13。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δ H(ppm，DMS0-d6,400MHz): Η-4(6· 66, s)，Η-6(6· 67, s)，Η-8(2· 62, m)，Η-9(2· 41，m)，Η-9(2· 67, m)，H-1U6. 41，s)， Η-17(1· 08，d，J = 7· 0)，Η-18(4· 86，s)，Η-18(5· 02，s)，Η-3'（6· 01，m)，Η-4'（I. 84，dq，J = 7· 1，L 0)，Η-5'（1· 35, s)，l-0Me(3. 51，s)，2-0Me(3. 83, s)，3-0Me(3. 85, s)，14-0Me(3. 65， s)，12, 13-0CH20(5. 86, s)，12, 13-0CH20(5. 84, s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù) δ c(ppm，DMS0-d6， 100MHz) :151. 2(Ca-C)，141. I (C，2-C)，151. 6(C，3-C)，109. 3(CH，4-C)，131. I (C，5-C)， 80. 4 (CH，6-C)，155. 8 (C，7-C)，33. 6 (CH，8-C)，36. 7 (CH2,9-C)，140. 0 (C，10-C)，102. 2 (CH， n-C)，148. 3 (C，12-C)，134. I (C，13-C)，140. 3 (C，14-C)，120. 7 (C，15-C)，121. 3 (C，16-C)， 18. 5 (CH3,17-C)，106. 8 (CH2,18-C)，165. 7 (C，Γ -C)，126. 8 (C，2' -C)，140. 2 (CH，3' -C)， 15. 5 (CH3,4' -C)，19. 4 (CH3, 5' -C)，60.1 (CH3,1-OMe)，60. 5 (CH3, 2-0Me)，55. 4 (CH3, 3-0Me)， 58. 6 (CH3,14-OMe)，100.1 (CH2,12, 13-0CH20);碳原子標(biāo)記參見圖1。表明該化合物含有羰基 (1713cm 4和苯環(huán)（1621和1463cm 4。核磁數(shù)據(jù)表明該化合物含有兩個芳環(huán)，四個甲氧基， 一個甲基，一個