保存劑的培養(yǎng)基中洗滌細(xì)胞。在 加入洗滌培養(yǎng)基之后和使細(xì)胞沉降或在離心力下形成團(tuán)之前，對(duì)細(xì)胞來(lái)說(shuō)保持在室溫是優(yōu) 選的。在優(yōu)選實(shí)施方案中，在第二次離心前，細(xì)胞在室溫下保持約1〇、15、20、30分鐘。本領(lǐng) 域已知的任何培養(yǎng)基都可以用于洗滌細(xì)胞，例如可以使用上文列出的任何冬眠或稀釋培養(yǎng) 基。
[0083] 解凍和洗滌后，在37°C下培養(yǎng)細(xì)胞不同的時(shí)間，從而在移植之前使其復(fù)蘇?？梢栽?任何培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞，優(yōu)選在適合它們的分化階段的培養(yǎng)基中。在此時(shí)間內(nèi)，一些細(xì)胞可 能會(huì)死亡。
[0084] 為了用于移植，應(yīng)該將細(xì)胞懸浮在適于施用給受試者的最終培養(yǎng)基中。細(xì)胞移植 基本上類似于美國(guó)專利號(hào)7, 534, 608所述，其通過(guò)引用以其全文并入本文。
[0085] 此外，在用于移植之前，可以如上所述在0至37°C、優(yōu)選約4°C下將解凍的細(xì)胞維 持在冬眠培養(yǎng)基中長(zhǎng)達(dá)1小時(shí)和長(zhǎng)達(dá)約1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25或長(zhǎng)達(dá)30天，而不會(huì)有活力的明顯損失。在一些實(shí)施方案中，細(xì) 胞活力沒(méi)有發(fā)生統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的損失。
[0086] 測(cè)宙復(fù)蘇的細(xì)朐的活力
[0087] 儲(chǔ)存后，測(cè)定移植前細(xì)胞的活力和/或功能以確定它們用于，例如移植的適用性 是需要的。這可以使用本領(lǐng)域已知的多種方法實(shí)現(xiàn)。例如，可以使用活體染料使細(xì)胞染色， 該活體染料例如臺(tái)盼藍(lán)或溴化乙錠或吖啶橙。在有些實(shí)施方案中，適于移植的細(xì)胞群為至 少約50-100%是存活的。在優(yōu)選實(shí)施方案中，適于移植的細(xì)胞群為至少約50%、為至少約 55 %、為至少約60 %、為至少約65 %、為至少約70 %、為至少約75 %、為至少約80 %、為至少 約85%、為至少約90%、為至少約95%、為至少約96%、為至少約97%、為至少約98%、為 至少約99%是存活的。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，這樣的細(xì)胞群為至少約85%是存活的。
[0088] 在其它實(shí)施方案中，可以測(cè)定細(xì)胞的形態(tài)特征作為用于移植的細(xì)胞適合性的度 量。在優(yōu)選實(shí)施方案中，已使用現(xiàn)有方法儲(chǔ)存的且適于移植的細(xì)胞的形態(tài)和新鮮細(xì)胞沒(méi)有 區(qū)別（例如，統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的）。在優(yōu)選實(shí)施方案中，已使用現(xiàn)有方法儲(chǔ)存的且適于移植的 細(xì)胞的體內(nèi)形態(tài)和新鮮細(xì)胞沒(méi)有區(qū)別（例如，統(tǒng)計(jì)學(xué)上顯著的）。
[0089] 在細(xì)胞簇的情況下，可以在細(xì)胞冷凍/解凍和復(fù)蘇之前和之后對(duì)細(xì)胞量進(jìn)行定 量。在一個(gè)實(shí)施方案中，可以控制懸液中培養(yǎng)的細(xì)胞簇以壓緊。然后可以對(duì)該簇占據(jù)的區(qū) 域拍照并測(cè)量。通過(guò)比較冷凍/解凍和復(fù)蘇之前和之后細(xì)胞占據(jù)的區(qū)域，可以測(cè)定復(fù)蘇百 分比的值。
[0090] 也可測(cè)定已儲(chǔ)存的細(xì)胞的某些hES和/或胰腺祖細(xì)胞或激素分泌細(xì)胞標(biāo)志物的存 在，以確定它們是否適合用于移植。該方法詳細(xì)描述于上文2008年的Kroon等人的上述描 述，或者美國(guó)專利No. 7, 534, 608中，這些文獻(xiàn)通過(guò)引用以其全文并入本文。
[0091] 此外，或者可選擇地，可以測(cè)試細(xì)胞的功能，例如如上文2008年的Kroon等人或者 在美國(guó)專利No. 7, 534, 608中所討論的，這些文獻(xiàn)通過(guò)引用以其全文并入本文。
[0092] 包封裝詈
[0093] 本文所述的一個(gè)實(shí)施方案涉及包封裝置。該裝置可以植入到哺乳動(dòng)物中以治療多 種疾病和障礙。在優(yōu)選實(shí)施方案中，該裝置包含生物相容的免疫分離的裝置，其能夠完全將 治療生物活性劑和/或細(xì)胞包封在其中。例如，此類裝置可以在半滲透膜內(nèi)容納治療有效 量的細(xì)胞，該半滲透膜具有的孔徑使得對(duì)細(xì)胞存活和功能重要的氧和其它分子能夠通過(guò)該 半滲透膜移動(dòng)，而免疫系統(tǒng)的細(xì)胞無(wú)法滲透或穿過(guò)該孔。類似地，此類裝置可以含有治療有 效量的生物活性劑，例如血管生成因子、生長(zhǎng)因子、激素等。
[0094] 可以采用本文所述的裝置來(lái)治療需要向生物體連續(xù)供給生物活性物質(zhì)的病理。例 如，此類裝置還可以被稱為生物人工器官，其含有生物活性劑和/或細(xì)胞的同質(zhì)或異質(zhì)混 合物，或者產(chǎn)生一種或多種目標(biāo)生物活性物質(zhì)的細(xì)胞。理想地，生物活性劑和/或細(xì)胞被完 全包封或包裹在至少一個(gè)內(nèi)部空間內(nèi)，或者為包封腔室，其被至少一個(gè)或多個(gè)半滲透膜界 定。這樣的半滲透膜應(yīng)該容許包封的目標(biāo)生物活性物質(zhì)（例如胰島素、胰高血糖素、胰腺多 肽等）通過(guò)，使活性物質(zhì)可到達(dá)裝置外的靶細(xì)胞和患者體內(nèi)。在優(yōu)選實(shí)施方案中，半滲透膜 容許天然存在于受試者中的營(yíng)養(yǎng)物通過(guò)該膜，從而將必需的營(yíng)養(yǎng)物提供給包封的細(xì)胞。同 時(shí)，這樣的半滲透膜抑制或防止患者細(xì)胞，更具體地為免疫系統(tǒng)細(xì)胞通過(guò)和進(jìn)入該裝置并 傷害裝置中的包封的細(xì)胞。例如，在糖尿病的情況下，該方法能夠使葡萄糖和氧刺激胰島素 生成細(xì)胞來(lái)實(shí)時(shí)釋放身體所需的胰島素，同時(shí)防止免疫系統(tǒng)細(xì)胞識(shí)別和破壞植入的細(xì)胞。 在優(yōu)選實(shí)施方案中，半滲透膜抑制植入的細(xì)胞從包封中逸失。
[0095] 優(yōu)選的裝置可以具有某些需要的特征，但該特征不限于下述特征中的一種或組 合：i)包含在生理?xiàng)l件下起作用的生物相容性材料，該生理?xiàng)l件包括pH和溫度；實(shí)例包 括但不限于，各向異性材料、聚砜（PSF)、納米纖維墊、聚酰亞胺、四氟乙烯/聚四氟乙烯 (PTFE;也稱為Teflon? )、ePTFE(膨體聚四氟乙烯）、聚丙烯腈、聚醚砜、丙烯酸樹(shù)脂、醋酸 纖維素、硝酸纖維素、聚酰胺以及羥丙基甲基纖維素（HPMC)膜；ii)不釋放傷害包封在裝置 中的生物活性劑和/或細(xì)胞的毒性化合物；iii)促進(jìn)生物活性劑或大分子跨裝置的分泌或 釋放；iv)促進(jìn)大分子擴(kuò)散的快速動(dòng)力學(xué)；v)促進(jìn)包封的細(xì)胞的長(zhǎng)期穩(wěn)定性；vi)促進(jìn)血管 生成；vii)包含化學(xué)惰性的膜或外殼結(jié)構(gòu)；viii)提供穩(wěn)定的機(jī)械特性；ix)維持結(jié)構(gòu)/外 殼整體性（例如，防止毒性或有害試劑和/或細(xì)胞的不期望的泄露）；x)是可重裝填和/或 可灌注的；xi)是機(jī)械上可擴(kuò)展的；xii)不含開(kāi)口或含至少1個(gè)、2個(gè)、3個(gè)或更多個(gè)開(kāi)口； xiii)提供用于從宿主組織中免疫分離移植的細(xì)胞的機(jī)構(gòu)；xiv)易于制造和制備；以及xv) 可被滅菌。
[0096] 本文所述的包封裝置的實(shí)施方案不意在限于特定的裝置尺寸、形狀、設(shè)計(jì)、容量和 /或用于制備該包封裝置的材料，只要實(shí)現(xiàn)上述一個(gè)或多個(gè)因素即可。
[0097] 裝詈設(shè)計(jì)
[0098] 在一個(gè)實(shí)施方案中，通過(guò)在裝置中形成一個(gè)或多個(gè)隔室來(lái)改善該包封裝置，而不 是通過(guò)圍繞外周或邊緣來(lái)密封或焊接該裝置來(lái)防止細(xì)胞和/或生物活性劑的泄露而制成 的。圖1是裝置的一個(gè)實(shí)施方案的示意圖實(shí)例，但是該裝置不意在局限于此設(shè)計(jì)。而且，該 設(shè)計(jì)可以包括例如本領(lǐng)域中常規(guī)設(shè)計(jì)的變化。在一些實(shí)施方案中，裝置設(shè)計(jì)可以依據(jù)包封 的生物活性劑和/或細(xì)胞的類型而進(jìn)行修改以滿足需要和發(fā)揮研究功能。具有可行的任意 尺寸或形狀的裝置可以經(jīng)進(jìn)一步被分隔而具有至少1個(gè)、至少2個(gè)、至少3個(gè)、至少4個(gè)、至 少5個(gè)、至少6個(gè)、至少7個(gè)、至少8個(gè)、至少9個(gè)、至少10個(gè)、至少11個(gè)、至少12個(gè)、至少 13個(gè)、至少14個(gè)、至少15個(gè)、至少16個(gè)、至少17個(gè)、至少18個(gè)、至少19個(gè)、至少20個(gè)、至 少21個(gè)、至少22個(gè)、至少23個(gè)、至少24個(gè)或更多個(gè)腔室或隔室。形成多個(gè)隔室的一個(gè)目 的是其提高了包封的細(xì)胞和例如裝置周圍的空隙空間之間的營(yíng)養(yǎng)物和氧交換的表面積；例 如參見(jiàn)圖1-11。此外，這樣的設(shè)計(jì)抑制或并不促成大的細(xì)胞團(tuán)塊或簇或聚集體，它們使得被 塞進(jìn)大的細(xì)胞簇/聚集體中心中的細(xì)胞被摒棄，或接受很少的營(yíng)養(yǎng)物和氧，因此可能無(wú)法 存活。因此含有多個(gè)腔室或隔室的裝置更能夠?qū)⒓?xì)胞分散在整個(gè)腔室/隔室或多個(gè)腔室/ 隔室中。這樣，每個(gè)細(xì)胞更有機(jī)會(huì)接受營(yíng)養(yǎng)物和氧，從而促進(jìn)細(xì)胞存活而非細(xì)胞死亡。
[0099] -個(gè)實(shí)施方案涉及基本上橢圓形至矩形裝置；參見(jiàn)圖1和6。這些裝置進(jìn)一步被 分隔或重構(gòu)建，從而替代稍平的裝置，存在通過(guò)裝置中心走向的焊接部分或焊縫，將裝置的 每一半密封起來(lái)，從而形成兩個(gè)分開(kāi)的儲(chǔ)庫(kù)、腔、腔室、中空空間、容器或隔室；或者該焊接 部分或焊縫形成一個(gè)U形腔室，由于該焊接部分其從中間被隔開(kāi)或分開(kāi)，但在此情況下的 這樣的焊接部分沒(méi)有完全密封該室；參見(jiàn)圖1。圖1中，提供的兩個(gè)開(kāi)口用于容易地使細(xì)胞 裝填和沖進(jìn)該腔室和通過(guò)該腔室。
[0100] 另一個(gè)實(shí)施方案涉及類似的橢圓形或矩形裝置，其具有跨該裝置平面的2、3、4、5、 6、7、8、9、10或更多個(gè)焊接部分。在一些方面，焊接部分跨裝置的水平面或水平平面。在其 它方面，焊接部分跨裝置的垂直面或垂直平面。還在其它方面，相貫的焊接部分存在于跨該 平面的水平面和垂直面二者。在一些方面，焊接部分彼此平行且等距。在其它方面，焊接部 分是垂直的。還在其它方面，焊接部分平行但不等距。如上述實(shí)例中，如果焊接部分穿過(guò)裝 置延伸并連接裝置的兩個(gè)邊界的話，這樣的設(shè)計(jì)可有效形成完全分開(kāi)的多達(dá)2、3、4、5、6、7、 8、9、10或更多的室，或者其可以形成一個(gè)連續(xù)但互相交叉的腔室。此外，盡管某些示例性裝 置在圖1-11中與平行或平行并等距的焊接部分一起描述，但其它裝置還可以以任何方向 或取向上的焊接部分定制或制備，包括具有不被焊接部分中斷的區(qū)域的長(zhǎng)焊接部分。使用 的焊接部分的類型和數(shù)量可以取決于采用的細(xì)胞群或試劑，并且取決于治療或用途。在一 些實(shí)施方案中，可以排列焊接部分以修飾裝置的外觀。
[0101] 圖1顯示了體現(xiàn)本文所述特征的包封裝置，但是如上所述，這僅是一個(gè)示例，并且 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以預(yù)見(jiàn)到通過(guò)在任意此裝置中使用焊接部分或焊縫形成不同構(gòu)型， 可以定制適于用途的隔室的數(shù)量。圖2-5顯示同一裝置的上部、側(cè)面和端部橫截面。該裝 置可以圍繞整個(gè)邊緣1超聲焊接，以形成完全封閉的內(nèi)腔。可以使用形成袋狀裝置的密封 或隔絕膜的其它機(jī)構(gòu)。通過(guò)位于中心且沿裝置的長(zhǎng)軸延伸的內(nèi)部焊接部分2將腔進(jìn)一步分 隔。該焊接部分延伸到點(diǎn)3,該點(diǎn)3有效限制了每個(gè)隔室的厚度或深度，但尚未完全將內(nèi)腔 分開(kāi)。通過(guò)此方法，隔室的寬度和深度得到控制且可以根據(jù)需要變化，從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞產(chǎn)物存 活和性能。此外，該裝置的所有尺寸，包括但不限于總長(zhǎng)度、總寬度、外緣焊接部分厚度、外 緣焊接部分寬度、隔室長(zhǎng)度、隔室寬度、隔室深度、內(nèi)部焊接部分長(zhǎng)度、內(nèi)部焊接部分寬度和 開(kāi)口位置為可以變化的設(shè)計(jì)規(guī)格，變化的目的在于最優(yōu)化用于特定細(xì)胞產(chǎn)物和/或生物活 性劑的裝置。
[0102] 參照?qǐng)D1，通過(guò)兩個(gè)單獨(dú)的開(kāi)口 5、5'向隔室裝載細(xì)胞產(chǎn)物或生物活性劑，該開(kāi)口 5、5'在外緣超聲焊接時(shí)引入到裝置中。這些開(kāi)口延伸到腔或隔室中，并容許通向隔室，用于 在裝載期間均勻分布細(xì)胞和/或試劑的目的。此外，由于通過(guò)如圖1中的U形內(nèi)腔連接開(kāi) 口 5、5'，在裝載鄰近的開(kāi)口 5'時(shí)，使得氣體經(jīng)每個(gè)開(kāi)口 5通氣，因此防止在裝置內(nèi)積累壓 力。
[0103] 可選擇地，在另一個(gè)實(shí)施方案中，本文提供的裝置不含有入口或出口，即該裝置稱 為是少開(kāi)口的。這樣的實(shí)施方案顯示于圖6中。圖7-9顯示了基本上類似的裝置的頂部、 側(cè)面和端部橫截面。為了制成如圖6-11所示的少開(kāi)口裝置，兩個(gè)、三個(gè)、或更多個(gè)階段的焊 接加工是必須的。例如，在一個(gè)方面，首先通過(guò)超聲焊接形成橢圓形/矩形外緣6和分隔點(diǎn) 焊部分7。點(diǎn)焊接部分7的功能類似于圖1的內(nèi)部焊接部分2。該點(diǎn)焊部分7以跨裝置的 方式設(shè)置，以定期限制在任何給定點(diǎn)處的腔或隔室8的擴(kuò)展。并且，通過(guò)點(diǎn)焊產(chǎn)生腔或隔室 8,由此隔室8相互連接，并且不分離或完全分開(kāi)任一腔或隔室。此外，點(diǎn)焊部分7的總數(shù)、 直徑和分布為設(shè)計(jì)參數(shù)，其可以最優(yōu)化以適應(yīng)裝載動(dòng)力學(xué)和任何細(xì)胞產(chǎn)物或試劑的生長(zhǎng)速 率。
[0104] -旦細(xì)胞被載入裝置中時(shí)，通過(guò)跨裝置的邊緣9的第二個(gè)超聲焊接部分將該外部 邊緣完全和無(wú)菌地密封。多步密封方法的結(jié)果是完成的裝置完全封閉，且不具有從外緣延 伸的開(kāi)口。這種方式簡(jiǎn)化了裝載過(guò)程，且改善了裝置的總體完整性和安全性，因?yàn)殚_(kāi)口可以 是這樣的外緣區(qū)域，在該處由于未達(dá)到最佳的超聲焊接導(dǎo)致可能發(fā)生開(kāi)裂。
[0105] 此外，盡管上述方法以按順序的2個(gè)步驟描述，用于包封細(xì)胞和/或試劑的手段并 不限于所描述的2個(gè)步驟，而是以任何順序的任意數(shù)目的步驟，該步驟對(duì)包封細(xì)胞是必需 的且同時(shí)防止或降低裝置開(kāi)裂的水平。
[0106] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，圖10和11顯示了基本上類似于圖6所示裝置的包封裝置， 但是在焊接過(guò)程中改進(jìn)了點(diǎn)焊接部分10以去除中心。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員可以以各種方 式實(shí)現(xiàn)這一點(diǎn)，例如通過(guò)使用具有尖銳的內(nèi)部邊緣的超聲焊極（ultrasonicsonotrode)， 可以在焊接后立刻切割材料。這些切割出的焊接部分10具有的優(yōu)勢(shì)在于，它們更易于與宿 主組織整合，這是由于切割出的焊接部分10促進(jìn)裝置的血管化，因此改善了氧依賴性細(xì)胞 產(chǎn)物和/或試劑的存活和性能。通過(guò)裝置實(shí)現(xiàn)和促進(jìn)新的血管系統(tǒng)的結(jié)果是氧在X-Y方向 上的擴(kuò)散運(yùn)輸?shù)玫礁纳?，該擴(kuò)散運(yùn)輸通常局限于平面片層裝置的中心。
[0107] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該裝置設(shè)計(jì)可以為不同形狀，例如細(xì)胞包封裝置可以是管 狀或平管狀，或者是滿足本發(fā)明裝置的上述要求之一的任何其它形狀。
[0108] 裝詈材料
[0109] 所包括的本領(lǐng)域已描述的細(xì)胞可滲透膜和不可滲透膜包括上文Baxter之前 描述的那些專利或之前被稱為TheraCyte細(xì)胞包封裝置，包括美國(guó)專利No. 6, 773, 458 ; 6, 520, 997 ；6, 156, 305 ；6, 060, 640 ；5, 964, 804 ；5, 964, 261 ；5, 882, 354 ；5, 807, 406 ； 5, 800, 529 ；5, 782, 912 ；5, 741, 330 ；5, 733, 336 ；5, 713, 888 ；5, 653, 756 ；5, 593, 440 ； 5, 569, 462 ；5, 549, 675 ；5, 545, 223 ；5, 453, 278 ；5, 421, 923 ；5, 344, 454 ；5, 314, 471 ； 5,324,518 ;5, 219, 361 ;5, 100,392 ;和5, 011，494,上述所有專利通過(guò)引用以其全文并入本 文。
[0110] 在一個(gè)實(shí)施方案中，由生物相容性材料組成包封裝置，該生物相容性材料包 括但不限于各向異性材料、聚砜（PSF)、納米纖維墊、聚酰亞胺、四氟乙烯/聚四氟乙烯 (PTFE;也稱為Teflon? )、ePTFE(膨體聚四氟乙烯）、聚丙烯腈、聚醚砜、丙烯酸樹(shù)脂、醋 酸纖維素、硝酸纖維素、聚酰胺以及羥丙基甲基纖維素（HPMC)膜。至少由例如Gore儀、 PhillipsScientific?、Zeus⑧、Pall?和Dewal?等制備這些和基本上類似的膜類型 和組分。
[0111] 固宙化的裝詈
[0112] 還提供了可植入的裝置，其固定在植入位點(diǎn)處，以將包封的細(xì)胞和/或生物活性 劑維持在植入位點(diǎn)并使得例如表達(dá)和分泌的治療多肽從該植入位點(diǎn)擴(kuò)散。一方面，該植入 位點(diǎn)在治療所針對(duì)的組織或器官處或者鄰近該組織或器官。在其它方面，在從裝置分泌的 試劑的遞送并非位點(diǎn)依賴性的且該試劑的生物分布取決于血管系統(tǒng)的情況下，該裝置可以 植入遠(yuǎn)離的位置。例如，在優(yōu)選實(shí)施方案中，該生物相容的裝置皮下植入在前臂、或側(cè)腹、 或背部、或臀部、或腿部等的皮膚下面，在該處其基本上保持直到需要將其移出的這樣的時(shí) 間。
[0113] 可擴(kuò)展的裝詈
[0114] 本文所述的裝置具有內(nèi)表面和外表面，其中該裝置含有至少一個(gè)空隙（或儲(chǔ)庫(kù)、 或腔、或容器或隔室），并且其中至少一個(gè)空隙對(duì)裝置的內(nèi)表面是開(kāi)放的。常規(guī)可植入的裝 置通常由剛性的、非擴(kuò)展的生物相容性材料制成。本文所述的裝置的一個(gè)實(shí)施方案由可擴(kuò) 展的材料制成。其它實(shí)施方案涉及不可擴(kuò)展的材料。裝置是否能夠擴(kuò)展可以是制作該裝置 而采用的材料的固有部分，例如可擴(kuò)展的聚合物外鞘，或者可以設(shè)計(jì)使得其可擴(kuò)展或具有 可擴(kuò)展的能力。例如，提供了擴(kuò)展尺寸以容納額外的細(xì)胞或以重新裝填現(xiàn)有裝置的裝置。
[0115] 在另一個(gè)實(shí)施方案中，該可植入的裝置包含在外殼或支架中，該外殼或支架是稍 微更為剛性的，且為不可擴(kuò)展的，但是能夠以足夠的手段通過(guò)增加植入裝置的數(shù)量來(lái)提高 細(xì)胞或試劑容量。例如，用于插入各自具有預(yù)先裝載的細(xì)胞或試劑的額外的儲(chǔ)庫(kù)、腔、容器、 隔室或盒子的機(jī)構(gòu)?？蛇x擇地，該外殼含有多個(gè)裝置，該多個(gè)裝置中僅部分裝載了細(xì)胞或其 中包封了細(xì)胞，而其它裝置是空的，可以在之后的時(shí)間段及時(shí)或在最初植入后的任意時(shí)間 裝載和裝填細(xì)胞或試劑。這樣的可擴(kuò)展外殼由適于體內(nèi)移植的惰性材料組成，該惰性材料 例如金屬、鈦、鈦合金或不銹鋼合金、塑料和適合在哺乳動(dòng)物中、更具體地在人體內(nèi)植入的 陶瓷。
[0116] 還在另一個(gè)實(shí)施方案中，這樣的外殼或植入裝置支架包括外部套管，該外部套管 具有縱軸、沿著該縱軸的至少一個(gè)通道和遠(yuǎn)端以及適合共同接合裝置的裝置接合區(qū)域。類 似地，該裝置支架起的作用類似于能夠在任何時(shí)間或長(zhǎng)時(shí)間容納超過(guò)一個(gè)磁盤或盒式錄音 帶的磁盤或盒式錄音帶支架。還在一些實(shí)施方案中，該裝置支架含有適合提高支架高度的 延展器。
[0117]可重裝填細(xì)朐的包封裝詈
[0118] 另一個(gè)實(shí)施方案涉及具有可重裝填的儲(chǔ)庫(kù)、腔、容器或隔室的包封裝置，其可以用 適合的治療或生物活性試劑和/或細(xì)胞定期裝填或灌注?？梢酝ㄟ^(guò)將治療有效量的適合的 治療或生物活性劑和/或細(xì)胞注射進(jìn)植入的儲(chǔ)庫(kù)、腔、容器或隔室來(lái)實(shí)現(xiàn)這樣的裝填，例如 使用注射器或本領(lǐng)域用于體內(nèi)裝填像儲(chǔ)庫(kù)、腔、容器或隔室的其它標(biāo)準(zhǔn)手段真皮下或皮下 進(jìn)行。
[0119]包封的細(xì)朐
[0120] 在一些實(shí)施方案中，該系統(tǒng)包含的細(xì)胞密度為約1X105、1X106細(xì)胞/mL至約 IX101°細(xì)胞/mL或更大。在一些實(shí)施方案中，細(xì)胞在培養(yǎng)條件下或在系統(tǒng)中體內(nèi)存活至 少1個(gè)月、2個(gè)月、3個(gè)月、4個(gè)月、5個(gè)月、6個(gè)月、7個(gè)月、8個(gè)月、9個(gè)月、10個(gè)月、11個(gè)月、 12個(gè)月或1年或更長(zhǎng)，且具有的功能相當(dāng)于細(xì)胞被引入系統(tǒng)時(shí)或細(xì)胞在系統(tǒng)中完全發(fā)育和 /或成熟時(shí)，例如植入需要在體內(nèi)進(jìn)一步發(fā)育或成熟為功能細(xì)胞的祖細(xì)胞表現(xiàn)的功能的至 少 50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、 89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99% 或更多。在一些實(shí)施方案 中，系統(tǒng)中的細(xì)胞在所述系統(tǒng)中擴(kuò)增，以提高系統(tǒng)體內(nèi)植入后的細(xì)胞密度和/或細(xì)胞功能。
[0121]提高細(xì)朐存活的方法
[0122] 細(xì)胞和組織包封/免疫分離領(lǐng)域的一個(gè)障礙是跨過(guò)用于包封細(xì)胞和組織的聚合 物膜的氧和營(yíng)養(yǎng)運(yùn)輸?shù)牟蛔?。這種氣體和營(yíng)養(yǎng)交換不足的結(jié)果是降低的代謝活性和細(xì)胞死 亡。本文所述的實(shí)施方案涉及解決現(xiàn)有技術(shù)的這一缺陷的可植入的細(xì)胞包封裝置。
[0123] 已經(jīng)測(cè)量了在胰島的天然環(huán)境中分離后和移植后，在不同聚合物裝置中以及裸露 或游離的，例如在腎包囊下胰島內(nèi)的氧分壓。胰腺胰島中的氧分壓是體內(nèi)任何器官中最高 的（37-46mmHg)。然而，經(jīng)過(guò)分離，這些值急劇下降（14-19mmHg)。胰腺胰島經(jīng)移植到血 糖量正常的動(dòng)物中后，和它們分離的值相比，該值輕微下降（9-15mmHg)。參見(jiàn)Dionne等 人，Trans.Am.Soc.Artf.Intern.Organs. 1989 ;35:739-741 ;和Carlsson等人，Diabetes July1998 47(7) :1027-32,所述文獻(xiàn)的公開(kāi)內(nèi)容通過(guò)引用明確并入本文。這些研究證實(shí) 了當(dāng)組織被免疫分離且移植時(shí)，即使在血管化的區(qū)域，例如腎包囊中，與其自然狀態(tài)相比 (37-46mmHg)，該氧分壓也下降。因此，這些近乎缺氧的條件可以導(dǎo)致細(xì)胞死亡，特別是更為 接近細(xì)胞簇的中心或包封裝置的中心的細(xì)胞。
[0124] 為了達(dá)到更好的氧利用性和向包封的細(xì)胞或組織和/或生物活性劑的更好的遞 送，本文所述的實(shí)施方案涉及在裝置設(shè)計(jì)和/或制劑中，例如在用于裝配該裝置的膜或材 料中使用例如全氟化物質(zhì)。特別是全氟有機(jī)化合物，例如全氟化碳（PFC)，由于其對(duì)氧的溶 解性比水高數(shù)倍，是良好的溶劑。例如，在正常條件下，液體PFC溶解以體積計(jì)的40至55% 的氧和以體積計(jì)的100至150%的C02。PFC被大量用作血液替代物和組織保存。此外，PFC 衍生物是無(wú)法代謝的密集的、化學(xué)惰性的水可溶性化合物。
[0125] 在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面，02遞送的增強(qiáng)通過(guò)PFC-乳液或PFC和一些基質(zhì)的混 合物進(jìn)行。例如，裝置部件或細(xì)胞可以