一種生物素活潑酯及其合成方法、用圖_2

文檔序號：8936625閱讀：來源：國知局

導(dǎo)航： X技術(shù)> 最新專利>有機(jī)化合物處理,合成應(yīng)用技術(shù)>一種生物素活潑酯及其合成方法、用圖

亞胺酯的核磁數(shù)據(jù)如下： HNMR(400MHz,DMS0) ： 8 6. 43 - 6. 33 (2H,m), 6.I(2H,br), 4. 37 - 4. 27 (1H,m), 4.18- 4.12 (1H,m),3. 5 (2H,br), 3. 12 - 3. 07 (1H,m),2. 88-2. 81 (1H,m), 2. 68 -2. 52 (3H,m)，I. 69 -I. 23 (9H,m)，I. 69 -I. 23 (9H,m)。
[0027] 實(shí)施例4 向100mL三口瓶中，加入24. 4g生物素和50ml氯化亞砜，室溫反應(yīng)24小時，旋干過量氯化亞砜，再加甲苯帶酸兩遍，得到的中間體備用。
[0028] 向250ml三口瓶中加入18. 8gH0NB，再加入150ml二氯甲烷，冰水浴冷卻下滴加上述中間體，滴加完畢，撤去冰浴，室溫反應(yīng)20小時，抽濾，濾餅用少量乙酸乙酯洗滌，再用異丙醇重結(jié)晶，得到30.Ig生物素活潑酯，即生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯，摩爾收率為74%，HPLC純度98. 1%。
[0029] 該實(shí)施例4所制備的生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯的核磁數(shù)據(jù)如下： HNMR(400MHz,DMS0) ： 8 6. 43 - 6. 33 (2H,m), 6.I(2H,br), 4. 37 - 4. 27 (1H,m), 4.18- 4.12 (1H,m),3. 5 (2H,br), 3. 12 - 3. 07 (1H,m),2. 88-2. 81 (1H,m), 2. 68 -2. 52 (3H,m)，I. 69 -I. 23 (9H,m)，I. 69 -I. 23 (9H,m)。
[0030] 實(shí)施例5 向100mL三口瓶中，加入24. 4g生物素和60ml草酰氯，室溫反應(yīng)24小時，旋干過量草酰氯，再加甲苯帶酸兩遍，得到的中間體備用。
[0031] 向250ml三口瓶中加入18. 8gH0NB，再加入100mL乙腈，冰水浴冷卻下滴加上述中間體，滴加完畢，撤去冰浴，室溫反應(yīng)20小時，抽濾，濾餅用少量乙酸乙酯洗滌，再用異丙醇重結(jié)晶，得到29.Ig生物素活潑酯，即生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯，摩爾收率為71. 5%，HPLC純度99. 4%。
[0032] 該實(shí)施例5所制備的生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯的核磁數(shù)據(jù)如下： HNMR(400MHz,DMS0) ： 8 6. 43 - 6. 33 (2H,m), 6.I(2H,br), 4. 37 - 4. 27 (1H,m), 4.18- 4.12 (1H,m),3. 5 (2H,br), 3. 12 - 3. 07 (1H,m),2. 88-2. 81 (1H,m), 2. 68 - 2. 52 (3H，m)，I. 69 -I. 23 (9H，m)，I. 69 -I. 23 (9H，m)。
[0033] 上述各實(shí)施例具體描述了本發(fā)明的生物素活潑酯生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯的合成過程，以及其結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)，進(jìn)一步確認(rèn)了其結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯可作為一種更穩(wěn)定，可替代目前已廣泛使用的穩(wěn)定性較差的Biotin-OSU作為蛋白質(zhì)標(biāo)記試劑用于生物檢測、分離等領(lǐng)域中。經(jīng)穩(wěn)定性試驗表明，本發(fā)明的生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺酯可以在室溫條件下穩(wěn)定保存半年以上，可以解決現(xiàn)有的生物素活潑酯Biotin-OUS不穩(wěn)定，無法長期保存的問題。
[0034] 以上對本發(fā)明的特定實(shí)施例進(jìn)行了說明，但本發(fā)明的保護(hù)內(nèi)容不僅僅限定于以上實(shí)施例，在本發(fā)明的所屬技術(shù)領(lǐng)域中，只要掌握通常知識，就可以在其技術(shù)要旨范圍內(nèi)進(jìn)行多種多樣的變更。
【主權(quán)項】
1. 一種生物素活潑酯，其特征在于，具有以下化學(xué)式： (I)O2. -種如權(quán)利要求1所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于，包括以下步驟：生物素與N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺在溶劑中反應(yīng)，生成式（I)化合物生物素活潑酯。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：生物素與N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺在有機(jī)溶劑中，在縮合劑的作用下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成式（I)化合物生物素活潑酯。4. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：所述縮合劑為N， Ν' -二環(huán)己基碳二亞胺、Ν，Ν' -二異丙基碳二亞胺或EDC鹽酸鹽。5. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：所述有機(jī)溶劑選自 N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氯甲烷、乙腈、二氧六環(huán)中的一種或幾種。6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：生物素與氯化亞砜或草酰氯反應(yīng)得到中間體，然后所述中間體與N-羥基-5-降冰片烯-2，3-二甲酰亞胺在有機(jī)溶劑中反應(yīng)，得到式（I)化合物生物素活潑酯。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：所述有機(jī)溶劑選自 N，N-二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、二氯甲烷、乙腈、二氧六環(huán)中的一種或幾種。8. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：所述反應(yīng)的溫度為 20-50。。。9. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的生物素活潑酯的合成方法，其特征在于：該方法還包括對反應(yīng)后生成的粗產(chǎn)品重結(jié)晶的步驟，重結(jié)晶使用的溶劑為異丙醇。10. -種如權(quán)利要求1所述的生物素活潑酯作為蛋白質(zhì)標(biāo)記試劑的用途。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種生物素活潑酯及其合成方法、用途。該生物素活潑酯具有以下式（I）的化學(xué)式，化學(xué)名稱為：生物素-N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺酯（Biotin-ONB），其合成方法包括生物素與N-羥基-5-降冰片烯-2,3-二甲酰亞胺在溶劑中反應(yīng)，生成式（I）化合物生物素活潑酯的步驟。本發(fā)明的生物素活潑酯具有良好的穩(wěn)定性，可以作為Biotin-OSU的替代試劑，廣泛地應(yīng)用于生物檢測、分離等領(lǐng)域中，且合成方法簡便，產(chǎn)率和純度都較高；？？（I）。
【IPC分類】C07K1/13, C07D495/04
【公開號】CN105153191
【申請?zhí)枴緾N201510545346
【發(fā)明人】孫豪義, 呂敏杰, 蔣兆琴, 李宏林
【申請人】蘇州昊帆生物科技有限公司
【公開日】2015年12月16日
【申請日】2015年8月31日

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