No. 10751的OD66tl 為0. 82。說明乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751蛋白水解能力較強(qiáng)，而在干酪成熟過程 中，發(fā)酵劑菌株能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)分解為多肽、氨基酸或其它無機(jī)、有機(jī)小分子物質(zhì)，對干酪風(fēng) 味的形成起著重要作用。
[0064] e)、噬菌體抗性
[0065] 將發(fā)酵異常（干酪用菌不產(chǎn)酸或產(chǎn)酸極為緩慢且凝乳異常即為發(fā)酵異常。）的干 酪用原料乳（從光明乳業(yè)研宄院中試車間處獲得）作為樣品，將乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751按2% (v/v)的接種量接種于裝有樣品的三角瓶中，置于30°C恒溫培養(yǎng)箱發(fā)酵培 養(yǎng)12小時(shí)。測定發(fā)酵培養(yǎng)的發(fā)酵液的pH值，發(fā)現(xiàn)Λ pH多0. 5,說明乳酸乳球菌乳酸亞種 CGMCC No. 10751具有噬菌體抗性。
[0066] 由實(shí)施例2~3的數(shù)據(jù)說明，所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751具有以下 的微生物學(xué)特性：
[0067] 1、形態(tài)學(xué)的特性
[0068] 在Ml7agar培養(yǎng)基培養(yǎng)24小時(shí)后，菌落呈乳白色，菌落較小，圓形凸起，有光澤，菌 體卵圓形。之后迅速生長，2天后菌落大而緊密，呈乳白色略帶黃色。
[0069] 2、培養(yǎng)學(xué)的特性
[0070] 在酸性（PH5.0)、高鹽濃度（4% NaCl，所述百分比為質(zhì)量百分比）環(huán)境下生長良 好；在15~30°C下生長良好；在40°C，2小時(shí)的干酪切割升溫工藝條件下存活性良好。
[0071] 3、生理特性
[0072] 產(chǎn)酸能力強(qiáng)，產(chǎn)酸速度較慢；凝乳速度相對較快，凝乳黏度較高；發(fā)酵特征方面， 能析出乳清，凝乳組織狀態(tài)好、香氣濃郁；蛋白水解能力較強(qiáng)，能夠?qū)⒌鞍踪|(zhì)分解為多肽、氨 基酸或其它無機(jī)、有機(jī)小分子物質(zhì)；并具有噬菌體抗性。
[0073] 實(shí)施例4乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的16S rDNA序列分析
[0074] 16S rDNA序列分析：利用27F，1492R引物擴(kuò)增乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的16S rDNA片段，純化，回收，然后使用測序儀ABI3730-XL進(jìn)行DNA測序（上海 派森諾生物科技有限公司）。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751與乳酸乳球 菌乳酸亞種標(biāo)準(zhǔn)株Lactococcus lactis subsp. Iactis I11403strain IL1403 的 16S rDNA 序列的同源性為100%。由于當(dāng)16S rDNA序列同源性高于97%時(shí)，可以認(rèn)為是屬內(nèi)同種， 因此酸乳球菌CGMCC No. 10751屬于乳酸乳球菌乳酸亞種（Lactococcus lactis subsp. lactis)ο
[0075] 其中，如上所述的引物對序列為：27F :agagtttgat cctggctcag ;1492R : ctacggctaccttgttacga(核苷酸序列分別如序列表SEQIDN0·2和SEQIDN0·3所示）。 乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的16S rRNA基因測序的結(jié)果如SEQ ID NO. 1所示。
[0076] 實(shí)施例5乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0077] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至10 °C。
[0078] 種子培養(yǎng)基：10%脫脂乳培養(yǎng)基（脫脂乳粉購自新西蘭Westland合作乳業(yè)有限公 司，將脫脂乳粉溶解于水中混合即得脫脂乳培養(yǎng)基，所述百分比為所述脫脂乳粉占所述脫 脂乳粉和所述水總質(zhì)量的質(zhì)量百分比），所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng)過 115°C、15min 滅菌。
[0079] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度28°C，培養(yǎng)周期32h，接種量為1%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化2代。
[0080] 發(fā)酵培養(yǎng)基：蛋白胨8g/L、牛肉膏9g/L、葡萄糖15g/L、酵母膏4g/L、梓檬酸按 I. 8g/L、磷酸氫二鉀I. 8g/L、乙酸鈉4. 8g/L、硫酸鎂0. 5g/L、硫酸錳0. 5g/L和吐溫80g/L。
[0081] 培養(yǎng)溫度為25°C，培養(yǎng)周期72h，培養(yǎng)pH為4。
[0082] 實(shí)施例6乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0083] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至20 °C。
[0084] 種子培養(yǎng)基：12%脫脂乳培養(yǎng)基，所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng) 過 115°C、20min 滅菌。
[0085] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度32°C，培養(yǎng)周期16h，接種量為2%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化4代。
[0086] 發(fā)酵培養(yǎng)基：蛋白胨12g/L、牛肉膏12g/L、葡萄糖20g/L、酵母膏6g/L、檸檬酸銨 2g/L、磷酸氫二鉀2. 0g/L、乙酸鈉5. 2g/L、硫酸鎂0. 6g/L、硫酸錳0. 55g/L和吐溫85g/L。
[0087] 培養(yǎng)溫度為35°C，培養(yǎng)周期24h，培養(yǎng)pH為6。
[0088] 實(shí)施例7乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0089] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至28 °C。
[0090] 種子培養(yǎng)基：12%脫脂乳培養(yǎng)基，所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng) 過 115°C、20min 滅菌。
[0091] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度32°C，培養(yǎng)周期16h，接種量為2%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化3代。
[0092] 發(fā)酵培養(yǎng)基：蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、葡萄糖20g/L、酵母膏5g/L、檸檬酸銨 2g/L、磷酸氫二鉀2g/L、乙酸鈉5g/L、硫酸鎂0. 5g/L、硫酸錳0. 5g/L和吐溫80g/L。
[0093] 培養(yǎng)溫度為28°C，培養(yǎng)周期48h，培養(yǎng)pH為5。
[0094] 實(shí)施例8乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0095] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至34°C。
[0096] 種子培養(yǎng)基：10%脫脂乳培養(yǎng)基，所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng) 過 115°C、15min 滅菌。
[0097] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度28°C，培養(yǎng)周期32h，接種量為1%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化2代。
[0098] 發(fā)酵培養(yǎng)基：蛋白胨10g/L、牛肉膏10g/L、葡萄糖20g/L、酵母膏5g/L、檸檬酸銨 2g/L、磷酸氫二鉀2g/L、乙酸鈉5g/L、硫酸鎂0. 5g/L、硫酸錳0. 5g/L和吐溫80g/L。
[0099] 培養(yǎng)溫度為30°C，培養(yǎng)周期48h，培養(yǎng)pH為5。
[0100] 實(shí)施例9乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0101] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至20 °C。
[0102] 種子培養(yǎng)基：10%脫脂乳培養(yǎng)基，所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng) 過 115°C、15min 滅菌。
[0103] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度28°C，培養(yǎng)周期32h，接種量為1%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化4代。
[0104] 發(fā)酵培養(yǎng)基：植物蛋白胨4. 5g/L、酵母提取物4g/L、聚蛋白胨4g/L、β -甘油磷酸 二鈉18g/L、抗壞血酸0. 4g/L、牛肉浸膏2. 2g/L和七水合硫酸鎂lg/L以及瓊脂粉2. 5g/L。
[0105] 培養(yǎng)溫度為35°C，培養(yǎng)周期24h，培養(yǎng)pH為4。
[0106] 實(shí)施例10乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751的發(fā)酵
[0107] 將凍存的所述乳酸乳球菌乳酸亞種CGMCC No. 10751緩慢升溫至28 °C。
[0108] 種子培養(yǎng)基：12%脫脂乳培養(yǎng)基，所述的百分比為質(zhì)量百分比。該脫脂乳培養(yǎng)菌經(jīng) 過 115°C、15min 滅菌。
[0109] 種子瓶中種子培養(yǎng)基的培養(yǎng)溫度28°C，培養(yǎng)周期32h，接種量為1%，所述的百分 比為占發(fā)酵培養(yǎng)基的體積百分比。在種子培養(yǎng)基中活化2代。
[0110] 發(fā)酵培養(yǎng)基：植物蛋白胨5. 5g/L、酵母提取物5g/L、聚蛋白胨5g/L、β -甘油磷酸 二鈉20g/L、抗壞血酸0. 5g/L、牛肉浸膏2. 8g/L和七水