技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種適用于實驗室大規(guī)模平行制備單鏈DNA的方法。具體來講,所述方法包括以下步驟:1)合成可重復(fù)生產(chǎn)單鏈DNA的模板,其中,合成時在所述模板的5’端和3’端分別為啟動子序列和一段通用接頭序列;2)模板的純化;3)對步驟2)純化的模板進行體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成RNA;4)以步驟3)中得到的RNA為模板進行逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成單鏈DNA,其中逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的通用反轉(zhuǎn)錄引物為步驟1)所述通用接頭序列的互補序列,并且所述通用反轉(zhuǎn)錄引物的dTTP核酸被dUTP核酸取代;以及5)使用UDG酶對步驟4)中逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)合成的單鏈DNA末端帶有的通用反轉(zhuǎn)錄引物序列進行消化,以對其純化。
技術(shù)研發(fā)人員:趙金銀;龐震國;白山;劉琦;李杰;許立志;于闖
受保護的技術(shù)使用者:大連晶泰生物技術(shù)有限公司
技術(shù)研發(fā)日:2017.08.31
技術(shù)公布日:2017.11.10