本發(fā)明涉及天然活性成分提取
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種桃膠多糖提取方法。
背景技術(shù)：
：桃膠為薔薇科植物桃或山桃等樹皮中分泌出來的樹脂。植物形態(tài)詳"桃仁"條。夏季采收，用刀切割樹皮，待樹脂溢出后收集。水浸，洗去雜質(zhì)，曬干。樹膠的主要組成為半乳糖、鼠李糖、α-葡萄糖醛酸等。煉制后服，具有保中不饑，忍風寒，下尿道結(jié)石，破血，治中惡疰忤，和血益氣，治下痢，止痛的功效，桃膠中的多糖具有降血糖的功效，目前桃膠多糖在提取過程中一般采用sevage法，即將氯仿和丁醇溶液按v:v=5:1的比例加入多糖中，混合物劇烈鎮(zhèn)搖5分鐘后靜置萃取，多次分去水層和溶液層中的蛋白質(zhì)，至無明顯沉淀為止，此種去除多糖中蛋白質(zhì)方式復(fù)雜，需反復(fù)處理且很難完全去除，另外，采用氯仿和丁醇去除多糖中蛋白質(zhì)同時對多糖也具有一定污染性。技術(shù)實現(xiàn)要素：為解決現(xiàn)有采用sevage法去除多糖中蛋白質(zhì)存在的缺點，本發(fā)明的目的在于提供一種桃膠多糖提取方法。本發(fā)明采用的技術(shù)方案為，一種桃膠多糖提取方法，步驟如下：（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在60-65℃下處理25-30分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，60-80分鐘攪拌提??；（3）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于40-45℃下，向濃縮液中按10:1-2的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2-3℃下存放30-35分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.25-1.3mpa下靜置40-50分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。優(yōu)選的，將桃膠粉末在60-65℃下處理25分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，80分鐘攪拌提取。優(yōu)選的，將濃縮液置于40℃下，向濃縮液中按10:2的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2℃下存放35分鐘后，去沉淀，再進行下次充入。優(yōu)選的，向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.25mpa下靜置50分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀。本發(fā)明有益效果在于，較于現(xiàn)有sevage法去除桃膠中的蛋白質(zhì)，本發(fā)明采用向濃縮液中按10:1-2的體積比充入液氮方式去除桃膠多糖中的蛋白質(zhì)，去除率達到99.5%，且去除過程對桃膠多糖無污染性，最終得到高品質(zhì)桃膠多糖，另外，在具體獲得桃膠多糖過程中，將桃膠粉末在60-65℃下處理25-30分鐘后再與蒸餾水混合浸提，能顯著提高桃膠多糖得率，醇沉獲得桃膠多糖時，在1.25-1.3mpa下靜置相較于常壓靜置，能顯著縮短醇沉?xí)r間。具體實施方式實施例1、一種桃膠多糖提取方法，具體的，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在60℃下處理25分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，60分鐘攪拌提??；（3）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于40℃下，向濃縮液中按10:1的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2℃下存放30分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.25mpa下靜置40分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。實施例2、一種桃膠多糖提取方法，具體的，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在65℃下處理30分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，80分鐘攪拌提?。唬?）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于45℃下，向濃縮液中按10:2的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于3℃下存放35分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.3mpa下靜置50分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。實施例3、一種桃膠多糖提取方法，具體的，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在62℃下處理28分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分鐘攪拌提?。唬?）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于42℃下，向濃縮液中按10:1.5的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2.8℃下存放32分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.28mpa下靜置45分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。以下結(jié)合具體對比例對本發(fā)明進一步說明：對比試驗分為3組，各組所用桃膠采購于同一產(chǎn)地，隨機等分得到；其中，實驗組按照以下方式獲得桃膠多糖，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在62℃下處理28分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分鐘攪拌提??；（3）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于42℃下，向濃縮液中按10:1.5的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2.8℃下存放32分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.28mpa下靜置45分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。其中，對照組1按照以下方式獲得桃膠多糖，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分鐘攪拌提?。唬?）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將濃縮液置于42℃下，向濃縮液中按10:1.5的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2.8℃下存放32分鐘后，去沉淀，再進行下次充入；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.28mpa下靜置45分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。其中，對照組2按照以下方式獲得桃膠多糖，（1）將桃膠干去雜，粉碎過80目篩，得到桃膠粉末；（2）將桃膠粉末在62℃下處理28分鐘后，與蒸餾水按1g:100ml的比例混合，90℃，70分鐘攪拌提?。唬?）浸提液用高速離心機離心20分鐘，速度為4000r/min，獲得上清液，上清液于60℃真空濃縮至原體積的1/5；（4）將氯仿和丁醇溶液按v;v=5;1的比例加入到多糖中，混合物劇烈鎮(zhèn)搖5分鐘后靜置萃取，分去水層和溶液層交界處的變性蛋白質(zhì)，得到脫蛋白糖液，反復(fù)多次至水與溶液層交界處無明顯蛋白沉淀為止；（5）向去除沉淀的濃縮液中按10倍體積比加入無水乙醇，1.28mpa下靜置45分鐘，4000r/min離心20分鐘，獲取沉淀；（6）沉淀經(jīng)真空干燥，研磨，得到桃膠多糖。統(tǒng)計各組多糖得率，多糖中蛋白質(zhì)去除率，結(jié)果見下表1：組別實驗組對照組1對照組2多糖得率（%）72.555.472.6蛋白質(zhì)去除率（%）99.5899.5283.66由表1可知，將桃膠粉末在62℃下處理28分鐘后，再與蒸餾水混合提取，對于提高多糖得率作用顯著，采用將濃縮液置于42℃下，向濃縮液中按10:1.5的體積比充入液氮，充入時，液氮排出口在濃縮液的最底部，連續(xù)充入3次，每次充入結(jié)束后，將濃縮液置于2.8℃下存放32分鐘后，去沉淀，再進行下次充入，對去除桃膠中蛋白質(zhì)作用顯著。當前第1頁12