本發(fā)明涉及一種用于治療艾滋病的藥物及其制備方法。
背景技術：
：艾滋病是一種危害性極大的傳染病，已上市的治療藥物主要有逆轉錄酶抑制劑（reversetranscriptaseinhibitors）、蛋白酶抑制劑（proteaseinhibitors）、融合抑制劑（fusioninhibitors）、hiv整合酶抑制劑（integraseinhibitors）等。hiv整合酶抑制劑是一種全新作用機制的抗hiv/aids藥物，可與其他抗逆轉錄病毒藥物聯(lián)合用藥有效治療hiv感染，且臨床不易產生耐藥性。hiv-1整合酶是逆轉錄病毒復制的必需酶，而且在人類細胞中沒有類似物，因此成為治療艾滋病的富有吸引力和合理的靶標。整合酶抑制劑是指抑制整合酶的藥物，即抑制逆轉錄病毒復制過程，阻斷催化病毒dna與宿主染色體dna的整合。本發(fā)明所涉及化合物式（?。┮婚_始是用于癌癥方面的研發(fā)，然而其對癌細胞的抑制活性并不理想，經進一步的活性測試驚喜的發(fā)現(xiàn)具有hiv整合酶抑制活性。為艾滋病治療提供了新的結構類型，提供了更多的整合酶抑制劑的選擇，可以作為艾滋病藥物進一步深入研發(fā)，以期應用于臨床實踐。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種用于治療艾滋病的藥物，其化學結構為式（?。?，其中，r為、、、或中的一種。其中，*相鄰c原子為與n原子成鍵的c原子。進一步地，式（?。┍硎镜幕衔铩⑵潲}或其溶劑化合物。本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于治療艾滋病的藥物，其化學結構為式（?。┑暮铣陕肪€為：其中，r為、、、或中的一種。本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于治療艾滋病的藥物組合物，所述藥物組合物包含有效量的式（?。┖退帉W上可接受的載體。進一步地，所述藥學上可接受的載體為填料或增容劑、粘合劑、保濕劑、崩解劑、緩溶劑、吸收加速劑、潤濕劑、吸附劑、潤滑劑中的一種或幾種。進一步地，所述藥物組合物為注射劑或口服制劑。進一步地，所述口服制劑選自膠囊劑、片劑、丸劑、散劑或顆粒劑。本發(fā)明的另一目的在于提供一種用于治療艾滋病的藥物，其化學結構為式（ⅰ），其中，r為、、、或中的一種。具體實施方式實施例1：中間體n-（噻唑-2-亞甲基）-8-氯喹唑啉-2-胺的合成將8-氯喹唑啉-2-胺（10mmol）和2-噻唑甲醛（11mmol）溶于30ml甲醇/四氫呋喃（2:1）混合溶劑中，回流1小時，然后降至室溫，向體系中加入水（50ml），用50ml二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉干燥有機相，減壓蒸除溶劑，用丙酮和乙醇（1:4）重結晶，過濾，50℃真空干燥。得到2.6g深黃色n-（噻唑-2-亞甲基）-8-氯喹唑啉-2-胺固體，產率95%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:7.41-7.48(m,2h),7.80-7.84(m,2h),8.12(d,1h),8.66(s,1h),9.74(s,1h).實施例2：中間體n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺的合成將n-（噻唑-2-亞甲基）-8-氯喹唑啉-2-胺（10mmol）溶于40ml甲醇中，再加入5毫升冰乙酸，降溫至0-5℃，然后加入1.2克硼氫化鈉，低溫下攪拌2小時，升至室溫繼續(xù)攪拌半小時，然后向體系中加入100ml水，攪拌1小時，過濾，50℃真空干燥，得到2.54g棕黃色n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺固體粉末，產率92%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.29(s,1h),4.65(s,2h),7.20(d,1h),7.48(t,1h),7.65(d,1h),7.79(m,1h),8.12(m,1h),9.43(s,1h).實施例3：n-（噻唑-2-甲基）-8-苯基喹唑啉-2-仲胺的合成將n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺（10mmol）溶于30毫升氮氮二甲基甲酰胺中，體系鼓氬氣二十分鐘，排空體系中的空氣，然后加入四三苯基膦鈀(1mmol)，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌半小時，向其中加入苯硼酸(12mmol)，再加入10毫升碳酸鈉(1克)水溶液，升溫至90℃，攪拌5小時，整個過程保持通入氬氣，然后降溫，減壓蒸除溶劑，固體快速通過色譜柱，得到2.9g類白色固體，即為n-（噻唑-2-甲基）-8-苯基喹唑啉-2-仲胺，產率91%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.18(s,1h),4.65(s,2h),7.18-7.21(m,5h),7.41(m,1h),7.65-7.73(m,2h),7.99-8.04(m,2h),9.43(s,1h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:38.26,117.16,120.14,125.67,126.42,128.09,128.58,129.47,134.64,135.93,138.45,139.57,157.2,159.86,160.6,164.92.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:319[m+1].實施例4：n-（噻唑-2-甲基）-8-苯基喹唑啉-2-仲胺富馬酸鹽的合成將n-（噻唑-2-甲基）-8-苯基喹唑啉-2-仲胺(10mmol)溶于100毫升乙腈中形成澄清溶液，常溫下向此溶液中加入富馬酸（10mmol），有大量白色不溶物，然后加熱至回流，直到所有的固體都溶解，開始自然降溫，直到降至10℃左右，有大量白色粉末析出，過濾，用乙腈洗滌，40℃真空干燥5小時，可得3.8gn-（噻唑-2-甲基）-8-苯基喹唑啉-2-仲胺富馬酸鹽，產率87%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.51(s,1h),4.62(s,2h),6.29(s,2h),7.18(m,5h),7.39(m,1h),7.63-7.72(m,2h),7.97-7.99(m,4h),9.41(s,1h),14.92(s,2h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:38.26,117.16,120.14,125.67,126.42,128.09,128.58,129.47,133.23,134.64,135.93,138.45,139.57,157.2,159.86,160.6,164.92,169.68.實施例5：n-（噻唑-2-甲基）-8-(2-萘基)喹唑啉-2-胺的合成合成路線：合成步驟：將n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺（10mmol）溶于30毫升氮氮二甲基甲酰胺中，體系鼓氬氣二十分鐘，排空體系中的空氣，然后加入四三苯基膦鈀(1mmol)，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌半小時，向其中加入2-萘硼酸(12mmol)，再加入10毫升碳酸鈉(1克)水溶液，升溫至90℃，攪拌5小時，整個過程保持通入氬氣，然后降溫，減壓蒸除溶劑，固體快速通過色譜柱，得到3.4g類白色固體，即為n-（噻唑-2-甲基）-8-(2-萘基)喹唑啉-2-胺，產率92%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.16(s,1h),4.65(s,2h),7.20(d,1h),7.38(dd,1h),7.55-7.73(m,5h),7.99-8.09(m,5h),9.43(s,1h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:38.26,117.16,120.14,125.67,126.42,128.09,128.58,129.47,134.64,135.93,138.45,139.57,157.2,159.86,160.6,164.92.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:369[m+1].實施例6：n-（噻唑-2-甲基）-8-對氰基苯基喹唑啉-2-胺的合成合成路線：合成步驟：將n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺（10mmol）溶于30毫升氮氮二甲基甲酰胺中，體系鼓氬氣二十分鐘，排空體系中的空氣，然后加入四三苯基膦鈀(1mmol)，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌半小時，向其中加入對氰基苯硼酸(12mmol)，再加入10毫升碳酸鈉(1克)水溶液，升溫至90℃，攪拌5小時，整個過程保持通入氬氣，然后降溫，減壓蒸除溶劑，固體快速通過色譜柱，得到3.1g類白色固體，即為n-（噻唑-2-甲基）-8-對氰基苯基喹唑啉-2-胺，產率90%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.26(s,1h),4.65(s,2h),7.20(d,1h),7.65-8.03(m,8h),9.43(s,1h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:38.26,114.26,117.16,118.94,120.14,125.67,126.42,130.22,130.8,134.64,135.93,139.57,142.47,157.2,159.86,160.6,164.92.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:344[m+1].實施例7：n-（噻唑-2-甲基）-8-對異丙基苯基喹唑啉-2-胺的合成合成路線：合成步驟：將n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺（10mmol）溶于30毫升氮氮二甲基甲酰胺中，體系鼓氬氣二十分鐘，排空體系中的空氣，然后加入四三苯基膦鈀(1mmol)，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌半小時，向其中加入對異丙基苯硼酸(12mmol)，再加入10毫升碳酸鈉(1克)水溶液，升溫至90℃，攪拌5小時，整個過程保持通入氬氣，然后降溫，減壓蒸除溶劑，固體快速通過色譜柱，得到3.15g類白色固體，即為n-（噻唑-2-甲基）-8-對異丙基苯基喹唑啉-2-胺，產率87%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:1.20(d,6h),2.87(m,1h),3.21(s,1h),4.65(s,2h),7.20(d,1h),7.54-7.73(m,6h),7.98-8.02(m,2h),9.44(s,1h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:23.38,33.96,38.26,117.16,120.14,125.54,125.67,126.42,130.05,134.54,134.64,135.93,139.57,151.4,157.2,159.86,160.6,164.92.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:361[m+1].實施例8：n-（噻唑-2-甲基）-8-（3,5二氟苯基）喹唑啉-2-胺的合成合成路線：合成步驟：將n-（噻唑-2-甲基）-8-氯喹唑啉-2-仲胺（10mmol）溶于30毫升氮氮二甲基甲酰胺中，體系鼓氬氣二十分鐘，排空體系中的空氣，然后加入四三苯基膦鈀(1mmol)，升溫至60℃，繼續(xù)攪拌半小時，向其中加入3,5二氟苯基苯硼酸(12mmol)，再加入10毫升碳酸鈉(1克)水溶液，升溫至90℃，攪拌5小時，整個過程保持通入氬氣，然后降溫，減壓蒸除溶劑，固體快速通過色譜柱，得到3.4g類白色固體，即為n-（噻唑-2-甲基）-8-（3,5二氟苯基）喹唑啉-2-胺，產率96%。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ:3.25(s,1h),4.65(s,2h),6.97(m,1h),7.20-7.29(m,3h),7.65-7.73(m,2h),7.99-8.04(m,2h),9.51(s,1h).13c-nmr(75mhz,cdcl3)δ:38.26,103.59,109.73,117.16,120.14,126.08,127.8,135.54,135.81,139.57,140.97,157.2,159.86,160.6,163.94,164.92.lc-ms(esi,pos,ion)m/z:355[m+1].試驗例：整合酶活性測試一、實驗原理整合酶活性試驗采用xpressbio公司的非放射性試劑盒xpressbiohiv-1integraseassaykit，其測試原理為：鏈霉親和素覆蓋的96孔板上附上末端經生物素標記的雙鏈hiv-1ltru5供體（ds）dna。全長重組hiv-1整合酶蛋白結合到dsdna上。測試化合物加入到酶反應中，然后一個3’-末端修飾過的雙鏈靶標（ts）dna也被加入到反應混合物中。整合酶經化合物抑制后，不能發(fā)揮正常作用，經washbuffer洗滌除去未結合的tsdna后，kit反應終止；在正常的kit流程中，hiv-1整合酶從hiv-1ltrdsdna暴露的3’-末端裂解末端的兩個堿基然后催化鏈轉移重組反應，將dsdna整合入tsdna。接下來加入的hrp-標記的tsdna3’-末端修飾物的抗體就會結合到反應鏈上，加入hrp底物后即可通過酶標儀比色讀數(shù)，經進一步計算得出抑制率。二、試驗方法（1）預熱試劑實驗前將reactionbuffer和blockingsolution置于37℃水浴10min，除hiv-1整合酶以外，將kit里所有其他成分放至室溫條件預熱。（2）dsdna覆蓋將需要量的dsdna用reactionbuffer稀釋100倍。每孔加入100μl1×dsdna溶液，37℃孵育30min，將reactionbuffer再放入37℃水浴。（3）封板將液體從96孔板中吸出，用300μl1×washingbuffer洗5次。每孔加入200μlblockingbuffer并于37℃孵育30min。（4）加入整合酶用前將整合酶在濕冰上解凍（或2-8℃）5min并用離心機簡單離心。用reactionbuffer將酶稀釋300倍。吸出96孔板中的液體，用200μlreactionbuffer洗3次，每孔加入100μlreactionbuffer（空白對照）或整合酶溶液（陰性對照和實驗組），37℃孵育30min?？瞻讓φ兆鰪涂住eactionbuffer再放入37℃水浴。（5）加入抑制劑將要測試的化合物用reactionbuffer稀釋至終濃度的兩倍。本實驗設置終濃度為5μg/ml，疊氮溶液稀釋至0.3%（2×濃度）大概抑制50%整合酶的活性。設50μlreactionbuffer的空白和陰性對照復孔?；衔镒疃嗫珊?%dmso體積比的終濃度。將液體從孔里吸出，用200μlreactionbuffer洗三次。每孔加入50μl含化合物的reactionbuffer溶液（空白和陰性對照只有reactionbuffer無測試化合物），室溫孵育5min。（6）加入tsdna將需要量的100×tsdna用reactionbuffer稀釋100倍，每孔加入50μl1×tsdna，在桌上水平輕搖平板3-5次將反應液混勻，37℃孵育30min。（7）加入hrp抗體吸出孔里的液體，用300μlwashbuffer洗五遍。每孔加入100μl辣根抗體溶液，37℃孵育30min。（8）加入tmb過氧化物酶底物吸出孔里的液體，用300μlwashbuffer洗五遍。每孔加入100μltmb過氧化物酶底物溶液，室溫孵育10min。（9）加入tmb終止液向含有tmb底物的孔里加入100μltmb終止液。用酶標儀在450nm下讀取吸光值。讀數(shù)應該在加入tmb終止液10min內完成。（10）數(shù)據(jù)處理陰性對照與實驗組每孔讀數(shù)均減去空白對照組平均吸光度得到校正后吸光度。計算吸光度平均值以及sd值和cv值（sd/mean×100%）。整合酶活性=測試化合物的平均吸光度/陰性對照的平均吸光度×100%。sd校正=整合酶活性×cv陰性對照抑制率=1-整合酶活性±sd校正三、實驗結果以埃替拉韋作為陽性對照，抗hiv-1整合酶的活性數(shù)據(jù)見下表：表15μg/ml化合物抗hiv-1整合酶的活性化合物r抑制率（%）ⅰa45.1±1.2ⅰb94.8±0.8ⅰc63.1±0.8ⅰd72.8±1.1ⅰe60.9±0.7埃替拉韋93.9±1.0在5μg/ml的濃度時，式（ⅰ）所示的化合物hiv-1整合酶的抑制率在45%-95%之間，ⅰb的抑制率最高達到94.8%，超過了已上市藥物埃替拉韋的抑制率。ⅰa的抑制率偏低，不足50%。綜上所述，式（?。┧镜幕衔锟梢宰鳛閔iv-1整合酶抑制劑，用于治療艾滋病。顯然，根據(jù)本發(fā)明的上述內容，按照本領域的普通技術知識和手段，在不脫離本發(fā)明上述基本技術思想前提下，還可以做出其他多種形式的修改、替換或變更。當前第1頁12