本發(fā)明涉及一種高分子化學(xué)合成領(lǐng)域，具體是指帶有縮醛鍵和鄰硝基苯甲基為連接橋的聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

藥物靶向性主要有主動靶向與被動靶向兩種方式：被動靶向是根據(jù)納米藥物具有較大尺寸特點，在腫瘤組織內(nèi)會產(chǎn)生增強滲透與滯留效應(yīng)(epreffect)，即正常組織中的微血管內(nèi)皮間隙致密、結(jié)構(gòu)完整，大分子和脂質(zhì)顆粒不易透過血管壁，而實體瘤組織中血管豐富、血管壁間隙較寬、結(jié)構(gòu)完整性差，淋巴回流缺失，造成大分子類物質(zhì)和脂質(zhì)顆粒具有選擇性高通透性和滯留性，促進大分子類物質(zhì)在腫瘤組織的選擇性分布，可以增加藥效并減少系統(tǒng)副作用。而主動靶向則是通過化學(xué)修飾的方法，偶聯(lián)一些具有主動靶向腫瘤組織的物質(zhì)，如葉酸、rgd、抗體等，根據(jù)生物體內(nèi)某些部位或某些病變區(qū)的特殊生物化學(xué)環(huán)境，或生物的抗原抗體反應(yīng)機制而實現(xiàn)藥物的主動靶向功能。

藥物的可控釋放是藥物運輸系統(tǒng)的另一個核心，目前報道的控制釋放條件有很多，例如溫度敏感，紫外光敏感，酸堿敏感等，均能在一定適當(dāng)?shù)臈l件下進行控制釋放。腫瘤本身具有弱酸性ph，而人體正常細胞則高于該值，這便啟發(fā)人們通過引進一些弱酸條件下可分解的官能團來構(gòu)建聚合物載體，實現(xiàn)藥物的快速輸送、釋放到細胞內(nèi)甚至特定的細胞器,從而大量地增加藥物作用部位如細胞質(zhì)和細胞核中的濃度，從而減少腫瘤化學(xué)治療中對正常細胞的毒副作用。此外，光(紫外)控制釋放由于其操作方便、易于控制、干凈等特點，近些年也被廣泛地用于藥物輸送系統(tǒng)的設(shè)計中。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明實施例所要解決的技術(shù)問題在于，提供一種聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物。

本發(fā)明的第二個目的是提供一種聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物的合成方法。

本發(fā)明的第三個目的是提供一種聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物的應(yīng)用方法。

為實現(xiàn)本發(fā)明的第一個目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是該共聚物帶有縮醛鍵和鄰硝基苯甲基為連接橋，其化學(xué)式為

式中n為(15-400)，m為(15-400)。

實現(xiàn)本發(fā)明的第二個發(fā)明目的，其技術(shù)方案是包括有以下步驟：

(1)、ph敏感嵌段的合成

1).取分子量為5000的聚乙二醇單甲醚，對甲苯磺酸，加入反應(yīng)容器中，加入甲苯，共沸除水；

2).甲苯共沸結(jié)束后，在氮氣保護移至室溫水中，反應(yīng)容器中加入ch2cl2作為溶劑，在冰水浴中進行攪拌；

3).用分壓漏斗緩慢滴加氯乙基乙烯基醚，滴加完畢后繼續(xù)攪拌反應(yīng)30min,用少量飽和碳酸氫鈉溶液進行淬滅；

4).用水進行萃取，將對甲苯磺酸鹽除去，得到有機相，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只含少量ch2cl2，將產(chǎn)物滴加至冰乙醚中進行沉淀，抽濾，得到濾餅；

5).加入經(jīng)上述反應(yīng)所得的甲氧基聚乙二醇氯和nan3于反應(yīng)容器中，加入二甲基甲酰胺作為反應(yīng)試劑，氮氣保護，在60℃條件下反應(yīng)24小時；

6).油泵旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去二甲基甲酰胺,固體重新溶于ch2cl2中，加入少量水，將過量的鹽溶解,ch2cl2萃取三次，得到有機層,將產(chǎn)物滴加至冰乙醚中進行沉淀，抽濾，得到濾餅，放入真空箱中干燥，得到

(2)、uv敏感嵌段的合成

1).取1-亞硝基-4-羥基苯甲醛溶于甲醇溶液中,在冰水中進行攪拌；

2).緩慢分批量地加入nabh4進行反應(yīng)；

3).加入hcl溶液，將ph調(diào)至酸性，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將甲醇和水蒸干，直接進行下一步反應(yīng)；

4).往容器中加入二甲基甲酰胺使反應(yīng)物溶解，加入3-溴丙炔，k2co3作為催化劑，攪拌，加熱條件下進行反應(yīng)；

5).反應(yīng)結(jié)束后，油泵旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去二甲基甲酰胺,固體重新溶于ch2cl2中，加入少量水，將過量的鹽溶解，ch2cl2萃取，得到有機層，過柱分離，得到褐色固體粉末，該褐色固體粉末分子式為

6).分別將經(jīng)充分干燥后的上述褐色固體粉末,ε-己內(nèi)酯,辛酸亞錫和精制過的甲苯置于容器中，在氮氣的保護下磁力攪拌，回流24h；

7).反應(yīng)完畢后產(chǎn)物在乙醚中沉淀，過濾，得到淺褐色濾餅，干燥，得到

(3)、點擊反應(yīng)偶聯(lián)二嵌段

1).將步驟(1)合成的步驟(2)合成的以及五甲基二乙烯基三胺,溶于四氫呋喃和二甲基甲酰胺的混合溶液中，經(jīng)過三次冷凍解凍泵循環(huán)；

2).氮氣保護氛圍內(nèi)，加入cubr,在室溫下反應(yīng)24小時；

3).用na2co3水溶液淬滅，混合液用ch2cl2稀釋，用無水mgso4干燥，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)；

4).產(chǎn)物用乙醚沉淀，過濾，得到淺褐色濾餅，干燥，得到聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物，該共聚物帶有縮醛鍵和鄰硝基苯甲基為連接橋，其化學(xué)式為

式中n為(數(shù)15-400)，m為(15-400)。

實現(xiàn)本發(fā)明的第三個發(fā)明目的，其技術(shù)方案是將聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物在水中進行自組裝，得到粒徑為90-200nm的實心球狀的囊泡結(jié)構(gòu)的納米膠束藥物載體。

本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

合成以縮醛及鄰硝基苯甲基為連接橋的兩親性嵌段共聚mpeg-b-pcl，制備納米膠束藥物載體系統(tǒng)，其具有ph/uv雙重控制釋放協(xié)同效果。可用于藥物的可控制釋放，實現(xiàn)藥物的快速輸送、釋放到細胞內(nèi)甚至特定的細胞器,從而大量地增加藥物作用部位如細胞質(zhì)和細胞核中的濃度，減少腫瘤化學(xué)治療中對正常細胞的毒副作用。

附圖說明

圖1本發(fā)明實施例的uv/ph降解gpc實例圖；

圖2本發(fā)明的實施例自組裝所得的囊泡結(jié)構(gòu)的納米膠束示意圖；

圖3本發(fā)明的實施例組裝的納米膠束動態(tài)光散射(dls)圖；

圖4本發(fā)明的實施例組裝的納米膠束sem圖。

具體實施方式

為使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案和優(yōu)點更加清楚，下面將結(jié)合對本發(fā)明作進一步地詳細描述。

實施例

(1)ph敏感嵌段的合成

其合成路線如下：

制備方法：稱取分子量為5000的mpeg0.5g,對甲苯磺酸7.5mg(mpeg質(zhì)量的1.5％左右)，加入三頸燒瓶中，加入甲苯，共沸除水4h；甲苯共沸結(jié)束后，移至室溫水中，注意此過程中需要進行氮氣保護，以防冷卻過程中有水汽的凝結(jié)。三頸燒瓶中加入精制的ch2cl2作為溶劑，在冰水浴中進行攪拌。用分壓漏斗，緩慢滴加氯乙基乙烯基醚，滴加完畢后繼續(xù)攪拌反應(yīng)30min,用3ml飽和碳酸氫鈉溶液進行淬滅。用水進行萃取，將對甲苯磺酸鹽除去，得到有機相。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至只含少量ch2cl2，將產(chǎn)物滴加至冰乙醚中進行沉淀，抽濾，得到濾餅。放入真空箱中干燥，溫度在30-40℃，得到白色固體粉末。加入經(jīng)上述反應(yīng)所得的mpeg-cl和nan3，于三頸燒瓶中，加入dmf作為反應(yīng)試劑，氮氣保護，在60℃條件下反應(yīng)24小時。油泵旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去dmf,固體重新溶于ch2cl2中，加入少量水，將過量的鹽溶解。ch2cl2萃取三次，得到有機層。將產(chǎn)物滴加至冰乙醚中進行沉淀，抽濾，得到濾餅。放入真空箱中干燥。

(2)uv敏感嵌段的合成

合成路線如下：

制備方法：取1-亞硝基-4-羥基苯甲醛溶于甲醇(meoh)溶液中,在冰水中進行攪拌.緩慢，分批量地加入nabh4，反應(yīng)較為劇烈，應(yīng)控制每份加入的量，可看到大量氣泡產(chǎn)生，淡綠變?yōu)榈S色。加入hcl溶液，將ph調(diào)至酸性。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將甲醇和水蒸干，無機鹽可暫不進行處理，直接進行下一步反應(yīng)。往燒瓶中加入dmf使反應(yīng)物溶解，加入3-溴丙炔，k2co3作為催化劑，攪拌，60℃條件下進行反應(yīng)。反應(yīng)結(jié)束后，油泵旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去dmf,固體重新溶于ch2cl2中，加入少量水，將過量的鹽溶解。ch2cl2萃取三次，得到有機層。過柱分離，得到褐色固體粉末。分別將0.25g經(jīng)充分干燥后的產(chǎn)物(1.2mmol),4gε-己內(nèi)酯(35mmol),54mg辛酸亞錫和25ml精制過的甲苯置于100ml圓底燒瓶中，在氮氣的保護下磁力攪拌，于120℃下回流24h。反應(yīng)完畢后產(chǎn)物在100ml乙醚中沉淀，過濾，得到淺褐色濾餅，干燥。

(3)“點擊反應(yīng)”偶聯(lián)二嵌段

合成路線如下

制備方法：將peg-n3(0.5g,0.1mmol),pcl-，pmdea(五甲基二乙烯基三胺)57.2mg,溶于25ml1:1的thf和dmf的混合溶液中，經(jīng)過三次冷凍解凍泵循環(huán)。氮氣保護氛圍內(nèi)，加入cubr(15.7mg),在室溫下反應(yīng)24小時。用質(zhì)量分數(shù)為10％na2co3水溶液淬滅，混合液用ch2cl2稀釋，用無水mgso4干燥，過濾，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。產(chǎn)物在100ml乙醚中沉淀，過濾，得到淺褐色濾餅，干燥。

(4)uv/ph降解實驗

uv降解：取10mg步驟(3)所得產(chǎn)物溶于1.5mlthf與0.1ml，0.2mol/l，ph＝7.0的pbs溶液，在365nm的紫外光下照射360s，800r/min攪拌速度。

ph降解：取10mg步驟(3)所得產(chǎn)物溶于1mlthf與1ml,0.2mol/l,ph＝5.6的pbs溶液，800r/min的攪拌速率攪拌1h。

參見圖1所示，本實施例所得產(chǎn)物聚乙二醇-聚己內(nèi)酯二嵌段共聚物數(shù)均分子量mn＝19781，分別經(jīng)實施例步驟(4)uv、ph降解后，數(shù)均分子量分別變?yōu)?52、924，說明得到了很好地降解結(jié)果；

(5)自組裝實驗

取5mg步驟(3)所得產(chǎn)物溶于1mlthf中，用移液槍取50ul,在2000r/min的轉(zhuǎn)速下滴入20ml純水中，滴完后攪拌10min，靜止10min。

參見圖2-4所示，實施例步驟(5)自組裝后得到的膠粒動態(tài)光散射和sem的結(jié)果，平均粒徑為115nm。圖4是膠束在透射電子顯微鏡圖片，測量組裝為實心球狀的囊泡結(jié)構(gòu)，大小不一，粒徑為95nm，與dls呈現(xiàn)的結(jié)果基本一致。

以上所揭露的僅為本發(fā)明較佳實施例而已，當(dāng)然不能以此來限定本發(fā)明之權(quán)利范圍，因此依本發(fā)明權(quán)利要求所作的等同變化，仍屬本發(fā)明所涵蓋的范圍。