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一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制作方法

文檔序號:11428718閱讀:1265來源:國知局

本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基。



背景技術(shù):

枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis),是芽孢桿菌屬的一種,為革蘭氏陽性菌,芽孢0.6~0.9×1.0~1.5微米,橢圓到柱狀,位于菌體中央或稍偏,芽孢形成后菌體不膨大??莶菅挎邨U菌為需氧菌,可利用蛋白質(zhì)、多種糖及淀粉,分解色氨酸形成吲哚。廣泛分布在土壤及腐敗的有機(jī)物中,易在枯草浸汁中繁殖,故名。

枯草芽孢桿菌耐熱抗逆性強(qiáng),在土壤和植物的表面普遍存在。是植物體內(nèi)常見的一種內(nèi)生菌,對人畜無毒無害,不污染環(huán)境。生長速度快、營養(yǎng)需求簡單,在植物的表面易于存活、定殖與繁殖,生產(chǎn)工藝簡單,制劑穩(wěn)定,施用方便,儲存期長??莶菅挎邨U菌是一種理想的生防微生物,其對植物病菌的作用機(jī)制和方式是多樣的,通過競爭作用、抗生作用、溶菌作用和促進(jìn)植物生長等方面發(fā)揮抗病抑菌的作用。

目前枯草芽孢桿菌大量應(yīng)用于生物肥料。當(dāng)作用于作物或土壤時能夠在作物根際或體內(nèi)定殖,并起到特定肥料效應(yīng)。目前,以枯草芽孢桿菌制備的微生物肥料在培肥地力,提高化肥利用率,抑制農(nóng)作物對硝態(tài)氮、重金屬、農(nóng)藥的吸收,凈化和修復(fù)土壤,降低農(nóng)作物病害發(fā)生,促進(jìn)農(nóng)作物秸稈和城市垃圾的腐熟利用、保護(hù)環(huán)境、以及提高農(nóng)作物產(chǎn)品品質(zhì)和食品安全等方面表現(xiàn)出了不可替代的作用。

但是在現(xiàn)有技術(shù)中枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)仍然存在產(chǎn)量低、成本高的問題,同時還存在易污染的問題。

因此,提供一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,能降低生產(chǎn)成本,增加產(chǎn)量、不易污染,成為了本領(lǐng)域技術(shù)人員亟待解決的問題。



技術(shù)實現(xiàn)要素:

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是:提供一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,解決現(xiàn)有技術(shù)中枯草芽孢桿菌的培養(yǎng)產(chǎn)量低、成本高、易污染的問題。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:

本發(fā)明所述的一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,以該發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖40-60g/l,甘油10-20g/l,玉米淀粉10-14g/l,蛋白胨12-24g/l,氨基酸2-5g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.6-1.0g/l,所述金離離子為鋁離子、鉀離子、鋅離子、鎂離子和亞鐵離子中的一種或多種。

優(yōu)選地,以所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖45-52g/l,甘油12-18g/l,玉米淀粉11-13g/l,蛋白胨15-20g/l,氨基酸3-4g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.7-0.9g/l。

優(yōu)選地,以所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖50g/l,甘油16g/l,玉米淀粉12g/l,蛋白胨18g/l,氨基酸3g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.8g/l。

優(yōu)選地,所述糖為葡萄糖、蔗糖或糖蜜。

優(yōu)選地,所述蛋白胨為胰蛋白胨、大豆蛋白胨和魚胨中的一種或多種。

優(yōu)選地,所述氨基酸為天冬氨酸、谷氨酸中的一種或兩種組合。

優(yōu)選地,所述鋁離子以硫酸鋁的形式添加,所述鉀離子以氯化鉀的形式添加,所述鋅離子以硫酸鋅的形式添加,所述鎂離子以七水硫酸鎂的形式添加,所述亞鐵離以七水硫酸亞鐵的形式添加。

優(yōu)選地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph值為5.0-6.5。

本發(fā)明還公開了一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:

步驟1:按重量份稱取原料;

步驟2:將上述組份依次溶解后,調(diào)節(jié)ph值;

步驟3:滅菌,備用,即得。

與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有的有益效果為:

本發(fā)明的發(fā)酵培養(yǎng)基各組分配方合理,比例恰當(dāng),能夠快速有效地培養(yǎng)枯草芽孢桿菌,提高枯草芽孢桿菌的產(chǎn)量。本發(fā)明的發(fā)酵培養(yǎng)基原原料來源易得,價格低廉,生產(chǎn)操作簡單,能有效降低枯草芽孢桿菌的生產(chǎn)成本,且在生產(chǎn)過程中不會產(chǎn)生二次污染。本發(fā)明值得推廣應(yīng)用。

具體實施方式

以下具體實施方式可以對本發(fā)明的內(nèi)容做出更為詳細(xì)的說明,但本發(fā)明的主題范圍不局限于以下具體實施例,凡是基于本發(fā)明內(nèi)容所實現(xiàn)的技術(shù)、工藝均屬于本發(fā)明的范圍。

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,以該發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖40-60g/l,甘油10-20g/l,玉米淀粉10-14g/l,蛋白胨12-24g/l,氨基酸2-5g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.6-1.0g/l,所述金離離子為鋁離子、鉀離子、鋅離子、鎂離子和亞鐵離子中的一種或多種。

優(yōu)選地,以所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖45-52g/l,甘油12-18g/l,玉米淀粉11-13g/l,蛋白胨15-20g/l,氨基酸3-4g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.7-0.9g/l。

優(yōu)選地,以所述發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:糖50g/l,甘油16g/l,玉米淀粉12g/l,蛋白胨18g/l,氨基酸3g/l,金屬離子化合物以金屬離子計0.8g/l。

優(yōu)選地,所述糖為葡萄糖、蔗糖或糖蜜。

優(yōu)選地,所述蛋白胨為胰蛋白胨、大豆蛋白胨和魚胨中的一種或多種。

優(yōu)選地,所述氨基酸為天冬氨酸、谷氨酸中的一種或兩種組合。

優(yōu)選地,所述鋁離子以硫酸鋁的形式添加,所述鉀離子以氯化鉀的形式添加,所述鋅離子以硫酸鋅的形式添加,所述鎂離子以七水硫酸鎂的形式添加,所述亞鐵離以七水硫酸亞鐵的形式添加。

優(yōu)選地,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的ph值為5.0-6.5。

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:

步驟1:按重量份稱取原料;

步驟2:將上述組份依次溶解后,調(diào)節(jié)ph值;

步驟3:滅菌,備用,即得。

其中,步驟2中于60-80℃加熱溶解,步驟3中滅菌為蒸汽滅菌。

實施例1

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,以該發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:葡萄糖50g/l,甘油16g/l,玉米淀粉12g/l,胰蛋白胨18g/l,谷氨酸3g/l,硫酸鋁以鋁離子計0.8g/l。

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:

步驟1:按重量份稱取上述原料;

步驟2:將上述組份依次加蒸餾水于80℃加熱溶解后,調(diào)節(jié)ph值為5.0;

步驟3:蒸汽滅菌,備用,即得。

實施例2

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,以該發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:蔗糖30g/l,糖蜜30g/l,甘油20g/l,玉米淀粉10g/l,大豆蛋白胨18g/l,魚胨12g/l,天冬氨酸3g/l,氯化鉀以鉀離子計0.5g/l,硫酸鋅以鋅離子計0.5g/l。

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:

步驟1:按重量份稱取上述原料;

步驟2:將上述組份依次加蒸餾水于60℃加熱溶解后,調(diào)節(jié)ph值為6.5;

步驟3:蒸汽滅菌,備用,即得。

實施例3

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基,以該發(fā)酵培養(yǎng)基的體積計,包括以下含量的組分:蔗糖40g/l,甘油10g/l,玉米淀粉10g/l,魚胨12g/l,天冬氨酸2g/l,谷氨酸3g/l,七水硫酸鎂、七水硫酸亞鐵以金屬離子計分別為0.3g/l。

一種枯草芽孢桿菌的發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法,包括以下步驟:

步驟1:按重量份稱取上述原料;

步驟2:將上述組份依次加蒸餾水于70℃加熱溶解后,調(diào)節(jié)ph值為5.5;

步驟3:蒸汽滅菌,備用,即得。

實施例4

采用實施例1制得的發(fā)酵培養(yǎng)基進(jìn)行枯草芽孢桿菌的培養(yǎng),其培養(yǎng)方法如下:

步驟1:種子培養(yǎng):取枯草芽孢桿菌的菌種接種于裝有種子培養(yǎng)基的三角瓶中,于30℃、120rpm條件下?lián)u床培養(yǎng)12-24小時,得種子液。

種子培養(yǎng)基的配方為:以種子培養(yǎng)基的體積計,包括蔗糖50g/l,甘油4g/l,,魚胨5g/l,七水硫酸鎂以鎂計分別為0.1g/l。

步驟2:將步驟1所得的種子液按20%的體積比加入發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng),發(fā)酵溫度30℃,發(fā)酵周期5d。

結(jié)果顯示,本實施例所得的枯草芽孢桿菌較現(xiàn)有技術(shù)中的發(fā)酵培養(yǎng)基生產(chǎn)現(xiàn)的枯草芽孢桿菌產(chǎn)量高出12%。

上述實施例僅為本發(fā)明的優(yōu)選實施方式之一,不應(yīng)當(dāng)用于限制本發(fā)明的保護(hù)范圍,但凡在本發(fā)明的主體設(shè)計思想和精神上作出的毫無實質(zhì)意義的改動或潤色,其所解決的技術(shù)問題仍然與本發(fā)明一致的,均應(yīng)當(dāng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

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