本發(fā)明涉及一種全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑，特別涉及一種具有全營養(yǎng)、抗病、促生、解毒、殺蟲等功能，用于抗重茬、克服連作障礙的微生物多肽菌肥。本發(fā)明還涉及所述復(fù)合微生物菌肥的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。
技術(shù)背景
設(shè)施農(nóng)業(yè)是現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的重要形式，是建設(shè)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、繁榮農(nóng)村經(jīng)濟、增加農(nóng)民收入的有效途徑，設(shè)施農(nóng)業(yè)作為一種現(xiàn)代農(nóng)業(yè)的生產(chǎn)方式，其集生物工程、環(huán)境技術(shù)于一體，具有高技術(shù)、高產(chǎn)出、高投入的特點，發(fā)展設(shè)施農(nóng)業(yè)是提高農(nóng)業(yè)生產(chǎn)效率，促進農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)?；?、集約化、高效化，實現(xiàn)農(nóng)業(yè)增效、農(nóng)民增收、農(nóng)村發(fā)展的重要途徑，是我國農(nóng)業(yè)現(xiàn)代化道路的必然選擇。近年來，我國設(shè)施農(nóng)業(yè)得到了快速發(fā)展，以蔬菜栽培為主體的設(shè)施園藝面積已突破3150萬畝，總面積居世界第一。
但是，隨著設(shè)施栽培的推廣，作物種類單一，種植地域化，農(nóng)業(yè)復(fù)種指數(shù)較高等問題，造成了農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展一大難題----連作障礙。連作障礙是指在正常栽培管理措施下，同一地塊連續(xù)種植相同作物，造成產(chǎn)量降低、品質(zhì)變劣、病蟲害發(fā)生頻繁等現(xiàn)象。連作障礙通常會引起土壤理化性狀變差、酚類化合物大量積累、土壤養(yǎng)分分布不均、土壤次生鹽漬化、土壤酶活性改變等問題，除此之外，連作障礙還會引起土壤微生物種群發(fā)生改變，病原物大量積累，加重作物的病蟲害，包括鐮刀菌、青枯病、黃萎病、根腐病和線蟲病等。近年來，隨著綠色農(nóng)業(yè)的不斷推廣，利用微生物菌劑進行土壤改良和生物防治成為研究和應(yīng)用的熱點。微生物菌劑種含有大量的有益活菌物質(zhì)及多種天然發(fā)酵活性物質(zhì)，施入土壤后，在根際繁殖形成優(yōu)勢種群，發(fā)揮其降解酚類等有害物質(zhì)、產(chǎn)活性物質(zhì)抑制土傳病原菌及殺蟲、活化土壤提高土壤肥力等作用，有些功能微生物本身還可以產(chǎn)生各類植物生長激素，刺激植物生長。因此，由于微生物菌劑具有有營養(yǎng)、促生、抗病、殺蟲、解毒、抗逆、活化土壤、提高品質(zhì)等功效，日益受到人們的關(guān)注。
肥料是農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的物質(zhì)保證，是糧食增產(chǎn)的物質(zhì)基礎(chǔ)。在我國，化肥占農(nóng)業(yè)成本的20％以上，致使我國成為世界上最大的化肥生產(chǎn)國和消費國，但是不斷增加化肥的投入并沒有持續(xù)的增加作物的產(chǎn)量，出現(xiàn)這一現(xiàn)象的原因就是肥料利用率低；此外，中國又是一個嚴重缺水的國家，水資源短缺是限制我國農(nóng)業(yè)發(fā)展的重要因素，外加伴隨著新型城鎮(zhèn)化建設(shè)步伐的加快，農(nóng)村勞動力轉(zhuǎn)移到城鎮(zhèn)，農(nóng)業(yè)生產(chǎn)面臨著勞動力匱乏的問題。水肥一體化技術(shù)是將灌溉與施肥融為一體的新技術(shù)，是將可溶性固體或液體肥料，通過可控的管道系統(tǒng)與灌溉水相融后，通過噴槍或噴頭噴灑到作物生長發(fā)育區(qū)域，該項技術(shù)由于具有省肥節(jié)水、省工省力等優(yōu)點成為高效灌溉、施肥發(fā)展的趨勢。發(fā)展水肥一體化技術(shù)要求所用肥料必須水溶肥。2012年農(nóng)業(yè)部發(fā)布的中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準(ny2266-2012)中明確定義：水溶性肥料是經(jīng)過水溶解或稀釋，用于灌溉施肥、葉面施肥、無土栽培、浸種蘸根等用途的液體或固體肥料，其具有生產(chǎn)耗能低、生產(chǎn)過程環(huán)保，施肥方式多樣、利用率高，易被植物吸收等優(yōu)點。目前，水溶性肥料技術(shù)相對成熟，常見的水溶性肥料有大量元素水溶肥料、微量元素水溶肥料、含氨基酸水溶肥料、含腐殖酸水溶肥料。截止至2015年3月2號，農(nóng)業(yè)部登記了6547個水溶性肥料產(chǎn)品，多數(shù)水溶性肥料配方過于單一，全營養(yǎng)水溶性肥料寥寥無幾，水溶性肥料產(chǎn)品的多樣性有待提高。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
(一)要解決的技術(shù)問題
本發(fā)明的目的在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，公開了一種全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑，特別涉及一種具有全營養(yǎng)、抗病、促生、解毒、殺蟲等功能，用于抗重茬、克服連作障礙的微生物多肽菌肥。本發(fā)明還涉及所述全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。本發(fā)明還公開了該菌劑的生產(chǎn)方法和用途。
(二)技術(shù)方案
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案予以實現(xiàn)：
一種全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌肥，其特征在于該菌劑包括茨木霉q2(trichodermaharzianum)1.2×109cfu/ml、釀酒酵母t6(saccharomycescerevisiae)0.3×109cfu/ml、側(cè)孢芽孢桿菌j5(bacilluslaterosporuslaubachefaciens)2.8×108cfu/ml；氨基酸、多肽含量≥5％，氮磷鉀含量≥5％，生化黃腐酸≥5％，螯合銅鋅鐵錳等微量元素含量≥5％；有機質(zhì)含量≥40％。
一種如權(quán)利要求1所述的復(fù)合微生物菌劑的生產(chǎn)方法，其特征是包含如下步驟：
1).斜面培養(yǎng)：哈茨木霉q2、釀酒酵母t6、側(cè)孢芽孢桿菌j5原始菌種無菌條件下分別接種于固體培養(yǎng)基上，哈茨木霉q2和釀酒酵母t6于30℃條件下培養(yǎng)60-84小時；側(cè)孢芽孢桿菌j5，37℃條件下培養(yǎng)48-60小時；
2).一級種子培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)的菌種無菌條件下分別接種于液體培養(yǎng)基，哈茨木霉q2、釀酒酵母t6于30℃條件下培養(yǎng)60-84小時、側(cè)孢芽孢桿菌j5于37℃條件下培養(yǎng)48-60小時，制得一級種子，結(jié)束培養(yǎng)各釀酒酵母、解淀粉芽孢桿菌懸液光密度od600值均分別達到3.0、2.5；
3).二級種子培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為10％的接種量，將一級種子分別接種到70l的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)液的總體積為100l，25℃-35℃條件下，攪拌速度為120r/-200min，通氣量為1：1.5-2.0，哈茨木霉q2、釀酒酵母t6培養(yǎng)60-84小時，側(cè)孢芽孢桿菌j5培養(yǎng)48-60小時制得二級種子；
4).混合發(fā)酵培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為10－15％的接種量，將二級種子接種到1噸的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基總體積為700l，進行發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑。
5.后處理：離心噴霧干燥。按照發(fā)酵液體積，添加氨基酸多肽2.0％、可溶性淀粉0.5％；進風(fēng)150℃、尾風(fēng)60℃、負壓15毫米水柱，噴霧干燥制得水溶微生物多肽菌劑。
其中，步驟1)、2)、3)中所用的培養(yǎng)基哈茨木霉q2、釀酒酵母t6為pda培養(yǎng)基，側(cè)孢芽孢桿菌j5為lb培養(yǎng)基強化氨基酸螯合微量元素培養(yǎng)基(1％)；
其中，步驟4)所用的培養(yǎng)基的配方按質(zhì)量百分比為：糖蜜10-15％、魚蛋白胨2-3％、豆餅粉8-10％，余量為水；糖蜜10-15％、魚蛋白胨2-3％、豆餅粉8-10％
發(fā)酵培養(yǎng)采用補料分批培養(yǎng)方式，其中補料碳源為：葡萄糖、蔗糖；氮源為：魚蛋白胨、豆餅粉。
發(fā)酵培養(yǎng)階段：起始0～24小時內(nèi)，間隔通氣，保持在有氧條件發(fā)酵，通氣量1：1.8，攪拌速度150r-200/min，攪拌間隔時間3-5小時，攪拌3-5分鐘，溫度25℃-35℃。
本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明采用獨特的配方和工藝研制中全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑，營養(yǎng)全面，富含氮、磷、鉀、氨基酸、腐植酸、多種微量元素及多種植物抗病增產(chǎn)因子；具有營養(yǎng)，壯根、促苗、促葉、?；?、保果；抗病、抗旱、抗災(zāi)、防凍、促早熟，抗早衰、抗重茬等多種功效。水溶性好，營養(yǎng)成分易被作物吸收，使用方便，省時省力，使用過程不受土壤條件和作物種類的影響。其包含多種功能菌劑，包括酚類物質(zhì)降解菌、解磷菌、固氮菌、病原微生物拮抗菌、殺線蟲菌，施入土壤后可有效發(fā)揮抗病、促生、解毒、殺蟲等功能，用于抗重茬、克服連作障礙有理想的效果。
具體實施方式
以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步描述，但要求保護的范圍并不局限于所述。
實施例一全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑制備
1).斜面培養(yǎng)：哈茨木霉q2、釀酒酵母t6、側(cè)孢芽孢桿菌j5原始菌種無菌條件下分別接種于固體培養(yǎng)基上，哈茨木霉q2和釀酒酵母t6于30℃條件下培養(yǎng)60-84小時；側(cè)孢芽孢桿菌j5，37℃條件下培養(yǎng)48-60小時；
2).一級種子培養(yǎng)：將步驟1)培養(yǎng)的菌種無菌條件下分別接種于液體培養(yǎng)基，哈茨木霉q2、釀酒酵母t6于30℃條件下培養(yǎng)60-84小時、側(cè)孢芽孢桿菌j5于37℃條件下培養(yǎng)48-60小時，制得一級種子，結(jié)束培養(yǎng)各釀酒酵母、解淀粉芽孢桿菌懸液光密度od600值均分別達到3.0、2.5；
3).二級種子培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為10％的接種量，將一級種子分別接種到70l的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)液的總體積為100l，25℃-35℃條件下，攪拌速度為120r/-200min，通氣量為1：1.5-2.0，哈茨木霉q2、釀酒酵母t6培養(yǎng)60-84小時，側(cè)孢芽孢桿菌j5培養(yǎng)48-60小時制得二級種子；
4).混合發(fā)酵培養(yǎng)：按液體培養(yǎng)基的體積比為10－15％的接種量，將二級種子接種到1噸的發(fā)酵罐中，發(fā)酵罐內(nèi)的培養(yǎng)基總體積為700l，進行發(fā)酵培養(yǎng)，獲得菌劑。
5).后處理：離心噴霧干燥。按照發(fā)酵液體積，添加氨基酸多肽2.0％、可溶性淀粉0.5％；進風(fēng)150℃、尾風(fēng)60℃、負壓15毫米水柱，噴霧干燥制得水溶微生物多肽菌劑。
其中，步驟1)、2)、3)中所用的培養(yǎng)基哈茨木霉q2、釀酒酵母t6為pda培養(yǎng)基，側(cè)孢芽孢桿菌j5為lb培養(yǎng)基強化氨基酸螯合微量元素培養(yǎng)基(1％)；
其中，步驟4)所用的培養(yǎng)基的配方按質(zhì)量百分比為糖蜜10-15％、魚蛋白胨2-3％、豆餅粉8-10％，余量為水；
發(fā)酵培養(yǎng)采用補料分批培養(yǎng)方式，其中補料碳源為：葡萄糖、蔗糖；氮源為：魚蛋白胨、豆餅粉。
發(fā)酵培養(yǎng)階段：起始0～24小時內(nèi)，間隔通氣，保持在有氧條件發(fā)酵，通氣量1：1.8，攪拌速度150r-200/min，攪拌間隔時間3-5小時，攪拌3-5分鐘，溫度25℃-35℃。
實施例二田間示范試驗
本水溶肥田間示范試驗，試驗地處于山東，氣候溫和，雨水充沛，所選蔬菜大棚面積為2畝，共設(shè)置兩個處理：常規(guī)施肥，全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑，每個處理個各1畝。全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑具體使用方法為：按1:500-800倍的水稀釋，隨水沖施。
結(jié)果顯示：采用常規(guī)施肥，黃瓜畝產(chǎn)量為15000公斤，而施用全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑黃瓜畝產(chǎn)量可達到19000公斤，增產(chǎn)4000公斤，增產(chǎn)率達26.67％。
實施例三田間防治根結(jié)線蟲病示范
本全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑線蟲防治實驗位于山東省壽光市，番茄連作多年，根結(jié)線蟲病嚴重。本實驗共設(shè)置3個處理，分別是阿維菌素陽性處理，ck陰性處理，以及全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑處理，每個處理3個重復(fù)，小區(qū)隨機分布。阿維菌素使用方式是2000倍稀釋液灌根，全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑具體使用方法為：按1:500-800倍的水稀釋，隨水沖施。
其結(jié)果表明：全營養(yǎng)水溶微生物多肽菌劑處理，其根結(jié)指數(shù)相比于空白對照下降了75％，西紅柿產(chǎn)量相比于對照增產(chǎn)24％。