本發(fā)明涉及屬發(fā)酵飼料
技術領域：
，尤其涉及一種復合固體發(fā)酵物的制備方法及其用途。
背景技術：
：啤酒酵母（saccharomycescerevisiae），啤酒酵母的營養(yǎng)豐富，含有較高的蛋白質、葡聚糖、甘露聚糖、谷胱甘肽及核酸等成分,其以存活狀態(tài)在動物消化道運行并發(fā)揮作用的，通過液固體發(fā)酵，酵母菌含量大幅提升，代謝產(chǎn)物大量積累，實現(xiàn)飼料營養(yǎng)的最大利用率，同時，預防動物疾病，保障動物健康。干酪乳桿菌（lactobacilluscasei），作為最早錄入飼料添加劑品種目錄的益生菌之一，進入動物體后可以在腸道內(nèi)大量存活，起到調(diào)節(jié)腸內(nèi)菌群平衡、促進動物體消化吸收等作用，同時，其對宿主營養(yǎng)、免疫、防病等具有顯著的益生功效，越來越成為人們研究、開發(fā)、生產(chǎn)的焦點。然而，卻鮮少有人將兩者聯(lián)合固體發(fā)酵，共同作用，本發(fā)明以提高豬類健康水平、降低飼料成本的原則，發(fā)明一種復合發(fā)酵方法，以期為畜牧業(yè)提供新方向。技術實現(xiàn)要素：發(fā)明的目的：為了提供一種效果更好的復合固體發(fā)酵的制備方法及其用途，具體目的見具體實施部分的多個實質技術效果。本發(fā)明的第一個目的是提供一種液固相聯(lián)合發(fā)酵工藝的優(yōu)化方法，通過發(fā)酵工藝的優(yōu)化，縮短發(fā)酵周期，降低生產(chǎn)成本，簡易控制工藝，進行大規(guī)模生產(chǎn)。本發(fā)明的另一目的是通過復合菌株，提高產(chǎn)品的綜合應用功能。同時，產(chǎn)品適口性好，不僅能提供豐富的營養(yǎng)物質，并且起到預防保健的作用。技術方案：1）將菌種分別進行復壯，接種至搖瓶培養(yǎng)，再進行發(fā)酵罐逐級擴大，好氧、厭氧發(fā)酵培養(yǎng)，制取液體發(fā)酵培養(yǎng)液；2）按比例將培養(yǎng)菌液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基混勻，備用；3）按比例將上述制好的混合固體培養(yǎng)基進行混勻，溫度控制20~45℃，有氧發(fā)酵24~36h，厭氧發(fā)酵72h，得到固體發(fā)酵產(chǎn)物；4）將得到的培養(yǎng)物進行超低溫環(huán)保連續(xù)干燥，粉碎，包裝。作為本發(fā)明的一個實施例，種子罐培養(yǎng)液以5~10%的接種量接種到7t發(fā)酵罐，接種后，發(fā)酵罐轉子緩慢轉動2小時，讓菌種在恒溫環(huán)境中進行充分孵育，發(fā)酵菌液ph控制在6.0~7.2，發(fā)酵20~24h時，培養(yǎng)液活菌數(shù)達到10~80億/ml.作為本發(fā)明的又一個實施例，上述步驟3)中，其有氧發(fā)酵條件為：空氣相對濕度60~70%，所述液體發(fā)酵培養(yǎng)液與固體發(fā)酵培養(yǎng)基混合的水分控制為70~80%，用翻料機2~4小時翻料一次，確保好氧發(fā)酵中溫度與氧氣的供給。作為本發(fā)明的又一個實施例，固體好氧發(fā)酵中活菌數(shù)可達50~80億cfu/g。作為本發(fā)明的又一個實施例，固體厭氧發(fā)酵72h，活菌進行充分的代謝產(chǎn)物積累，固料培養(yǎng)基進行了充分的生物分解，更有利于動物腸道吸收。作為本發(fā)明的又一個實施例，啤酒酵母搖瓶種子液體培養(yǎng)基組成：葡萄糖:5~15g/l，蛋白胨：10~15g/l，酵母膏：10~20g/l，kh2po4：0.5~1.5g/l，mgso4:0.2~0.8g/l，cacl2：0.1~0.5g/l.，調(diào)節(jié)至ph4.0~6.0，121℃高壓30min。作為本發(fā)明的又一個實施例，干酪乳桿菌搖瓶種子液體培養(yǎng)基組成：葡萄糖：2~5g/l，蛋白胨：10~15g/l，酵母膏：10~15g/l，k2hpo4：0.5~1g/l，nah2po4:3~5g/l，調(diào)節(jié)至ph6.5~7.5，121℃高壓30min。作為本發(fā)明的又一個實施例，所述固體發(fā)酵培養(yǎng)基組成：麩皮：50~70%，大豆粕：10~15%，玉米：10~20%，米糠：40~60%。從上面所述中看出，本發(fā)明提供的培養(yǎng)物的制備過程中，通過菌液體發(fā)酵工藝優(yōu)化，不僅有效縮短生產(chǎn)周期，增加飼料適口性，同時，經(jīng)過充分的厭氧發(fā)酵，菌積累大量代謝產(chǎn)物，成為一種功能與營養(yǎng)俱佳的發(fā)酵飼料。本發(fā)明的主要優(yōu)點是：1.生產(chǎn)工藝周期縮短，降低生產(chǎn)成本，并提供了豐富的蛋白質，水解酶類，維生素等營養(yǎng)與免疫物質；2.該產(chǎn)品獨特的復合菌株發(fā)酵，結合啤酒酵母和干酪乳桿菌兩種菌各自的獨特優(yōu)勢，添加于豬類的飼料中，提高其對環(huán)境應激的適應能力，增強其免疫力與抗病力，提高經(jīng)濟效益。具體實施方式進一步闡明本發(fā)明，應理解下述具體實施方式僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。實施例1：本發(fā)明的實施實例中，制備的培養(yǎng)物包括以下步驟：（1）用基礎yepd液體培養(yǎng)基對啤酒酵母生產(chǎn)菌株進行復壯：挑取一環(huán)斜面菌株，接種于種子液培養(yǎng)基中，150ml三角瓶培養(yǎng)基裝液量為50ml，25~35℃、180~200r/min搖瓶培養(yǎng)16~18h，此為一級種子液，將此種子液以1~3%的接種量接入二級種子液培養(yǎng)基中，1000ml三角瓶裝液量400ml，25~35℃、180~200r/min搖瓶培養(yǎng)16~18h；其中，基礎yepd液體培養(yǎng)基成分為:葡萄糖：20g/l，蛋白胨：20g/l，酵母膏：10g/l；搖瓶種子培養(yǎng)基成分為：葡萄糖：30~45g/l，蛋白胨：8~13g/l，(nh4)2so4：8~13g/l，酵母膏：18~24g/l，kh2po4：0.5~1.5g/l，mgso4:0.2~0.8g/l，cacl2：0.1~0.5g/l，初始ph5.0；上述兩種培養(yǎng)基均在115℃條件下高溫滅菌30min。接著，將此種子培養(yǎng)液以1~3％的接種量接入500l的種子發(fā)酵罐進行擴繁，控制溫度為25~35℃，有氧發(fā)酵16~20h，其中，剛接入時應緩慢轉動轉子，調(diào)節(jié)轉速為40r/min，2h后，轉速調(diào)至60r/min，制得酵母發(fā)酵種子液，其中，種子罐液體培養(yǎng)基為：葡萄糖：30~45g/l，蛋白胨：8~13g/l，酵母膏：18~24g/l，kh2po4：0.5~1.5g/l，mgso4:0.2~0.8g/l，初始ph5.5,115℃高壓30min。與此同時，干酪乳桿菌也進行復壯，活化，逐級培養(yǎng)，其中，一級種子培養(yǎng)基配方為：牛肉膏10g/l，蛋白胨10g/l，酵母膏5g/l，葡萄糖20g/l，檸檬酸鈉5g/l，無水乙酸鈉5g/l，k2hpo42g/l，mgso4·7h2o0.2g/l，mnso4·5h2o0.05g/l，吐溫801ml/l；接著，將此種子培養(yǎng)液以0.1~1％的接種量接入500l的種子發(fā)酵罐進行擴繁，控制溫度為35~45℃，有氧發(fā)酵18~24h，其中，剛接入時應緩慢轉動轉子，調(diào)節(jié)轉速為40r/min，2h后，轉速調(diào)至110r/min，制得乳桿菌發(fā)酵種子液，其中，種子罐液體培養(yǎng)基為：干酪乳桿菌培養(yǎng)基組成為：葡萄糖：2~5g/l，蛋白胨：10~15g/l，k2hpo4：0.5~1g/l，na2hpo4:3~5g/l，檸檬酸鈉3~10g/l，mnso4·5h2o0.01~0.1g/l，調(diào)節(jié)至ph7.0~7.2。下面，將兩種種子培養(yǎng)液分別以酵母菌20~40％的接種量，干酪乳桿菌10~30%的接種量同時接入7t的發(fā)酵罐，控制溫度為25~40℃，有氧發(fā)酵20~24h，其中7t發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基組成為：葡萄糖：20~30g/l，蛋白胨：10~15g/l，酵母膏：15~20g/l，kh2po4：0.5~1.5g/l，mgso4:0.2~0.8g/l，ph自然；（2）將部分需要粉碎固體培養(yǎng)基原料提前粉碎，用孔徑1.2mm篩子過濾，其中，固體培養(yǎng)基為麩皮：50~70%，大豆粕：10~15%，玉米：10~20%，米糠：40~60%；（3）把步驟1）得到的培養(yǎng)液（含菌量為100~120億cfu/ml）與步驟2）的固體培養(yǎng)基用混料機混勻，其水分控制在70~80%，在25~45℃有氧發(fā)酵24~36小時，得到固體發(fā)酵初產(chǎn)物，其中，此過程中，控制空氣相對濕度為60%~70%，ph控制在6.5~7.5，接著，進行全厭氧發(fā)酵72h；（4）將上述固體發(fā)酵產(chǎn)物進行低溫環(huán)保烘干，粉碎，包裝后即為培養(yǎng)物，該產(chǎn)品具有酵母的醇香味與干酪乳桿菌特殊的酸香味，適宜動物的嗅覺敏感度，增加飼料利用率。實施例2是在實施例1基礎上的進一步實施例，所述以啤酒酵母和干酪乳桿菌液體菌株添加比例為5:1。實施例3是在實施例1基礎上的進一步實施例，所述啤酒酵母和干酪乳桿菌液體菌株添加比例為10:1。實施例4是在實施例1基礎上的進一步實施例，所述以麩皮，大豆粕，米糠為固體基料發(fā)酵的配方比例調(diào)至：麩皮：20~30%，大豆粕：5~20%，玉米：20~30%米糠：30~50%。實施例1~4得到的培養(yǎng)物檢測指標對比如下表：粗蛋白粗灰分水分實施例117.23%4.89%9.35%實施例217.92%5.12%9.67%實施例318.14%5.15%9.21%實施例417.35%4.95%9.48%總的來說：在豬等單胃動物中添加這種發(fā)酵飼料后，通過調(diào)節(jié)動物腸道平衡，動物整體生產(chǎn)性能變好，如有效控制仔豬腹瀉，仔豬死亡率降低5%；對于母豬而言，有效解決便秘，改善奶品質，幫助其緩解產(chǎn)后各種應激反應；而在育肥豬中添加后，育肥豬日增重明顯增加，平均增加120g左右，提髙日糧中粗纖維表觀消化率8%。本發(fā)明公開了一種復合固體發(fā)酵物的制備方法及其用途，在結合傳統(tǒng)的酵母發(fā)酵生產(chǎn)飼料工藝的基礎上，通過添加干酪乳桿菌進行復合菌發(fā)酵，不僅有利于酵母菌的生長，干酪乳桿菌的活菌量也大幅提高，可達到50-80億/g，比優(yōu)化之前提高3-4倍，同時，可改善發(fā)酵飼料風味，提高飼料營養(yǎng)價值，在豬類等單胃動物養(yǎng)殖業(yè)應用前景較廣闊。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點。本領域的技術人員應該了解本發(fā)明不受上述實施例的限制，上述實施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進，這些變化和改進都落入要求保護的范圍內(nèi)。當前第1頁12