1.一種細胞和組織全蛋白提取方法，其特征在于分別采用變性裂解液以及非變性裂解液作為提取試劑，采用離心機、多只1.5ml離心試管和多只中部具有一道隔膜的50ml柱形聚乙烯離心試管作用提取工具，在采用變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白時，采用以下幾個步驟制得，第一步，把1ml具有0.5至2之間×107個數(shù)的細胞放于1.5ml離心試管中， 1.5ml離心試管內(nèi)加入1ml預(yù)先冷卻的PBS細胞洗滌溶液，然后把1.5ml離心試管用離心重力加速度1,000xg的離心機離心3分鐘，停止離心后，棄除1.5ml離心試管內(nèi)上層清液，離心、棄除上清流程共重復(fù)操作三次，第二步，將重復(fù)三次離心、棄除上清后細胞，根據(jù)細胞沉淀體積加入同體積的預(yù)先冷卻的PBS細胞洗滌溶液，進行細胞重懸操作，接著將重懸后細胞用離心機離心棄出上層清液，第三步，根據(jù)離心試管內(nèi)細胞量加入對應(yīng)量的變性裂解液，劇烈震蕩15s，第四步，將震蕩后裂解液轉(zhuǎn)移于50ml柱形聚乙烯離心試管內(nèi)，采用轉(zhuǎn)速14,000 rpm 離心機離心30s 后，收集50ml柱形聚乙烯離心試管管底的裂解液即為全細胞蛋白提取液，第五步，將全細胞蛋白提取液內(nèi)加入蛋白酶抑制劑防止蛋白降解，即完成采用變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白工序。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細胞和組織全蛋白提取方法，其特征在于采用非變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白時，采用以下幾個步驟制得，第一步，把1ml具有0.5至2之間×107個數(shù)的細胞放于1.5ml離心試管中，1.5ml離心試管內(nèi)加入1ml預(yù)先冷卻的PBS細胞洗滌溶液，然后把1.5ml離心試管用離心重力加速度1,000xg的離心機離心3分鐘，停止離心后，棄除1.5ml離心試管內(nèi)上層清液，離心、棄除上清流程共重復(fù)操作三次，第二步，將重復(fù)三次離心、棄除上清后細胞，根據(jù)細胞沉淀體積加入同體積的預(yù)先冷卻的PBS細胞洗滌溶液，進行細胞重懸操作，接著將重懸后細胞用離心機離心棄出上層清液，第三步，根據(jù)離心試管內(nèi)細胞量加入對應(yīng)量的非變性裂解液，并劇烈震蕩15s，將震蕩后裂解液轉(zhuǎn)移于冰上孵育5min，并每隔一分鐘震蕩一次，第四步，將震蕩后裂解液轉(zhuǎn)移于50ml柱形聚乙烯離心試管內(nèi)，采用轉(zhuǎn)速14,000 rpm 離心機離心30s 后，收集50ml柱形聚乙烯離心試管管底的裂解液即為全細胞蛋白提取液，第五步，將全細胞蛋白提取液內(nèi)加入蛋白酶抑制劑防止蛋白降解，即完成采用變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白工序。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種細胞和組織全蛋白提取方法，其特征在于采用變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白，進行根據(jù)離心試管內(nèi)細胞量加入對應(yīng)量的變性裂解液工序時，細胞量體積和加入的變性裂解液體積比例在1:7至1：12.5之間，比例隨細胞量體積增大比例逐漸增大。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種細胞和組織全蛋白提取方法，其特征在于采用非變性裂解液作為提取試劑提取細胞組織中全蛋白，進行根據(jù)離心試管內(nèi)細胞量加入對應(yīng)量的非變性裂解液工序時，細胞量體積和加入的非變性裂解液體積比例在1:7至1：12.5之間，比例隨細胞量體積增大比例逐漸增大。