技術(shù)特征:
技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種BRCA1/2基因檢測文庫的構(gòu)建方法和試劑盒,該方法包括:在DNA片段化及末端修復(fù)反應(yīng)體系中,在打斷酶、末端修復(fù)酶的作用下,將均一化的DNA樣本片段化并末端修復(fù);在DNA連接酶的作用下,將上一步所得的產(chǎn)物與接頭序列連接;以上一步所得的接頭連接產(chǎn)物為模板,在DNA聚合酶的作用下,使用接頭序列的引物進行PCR擴增;使用包含BRCA1/2基因的探針序列與上一步的產(chǎn)物進行雜交以捕獲含有BRCA1/2基因的DNA片段,并洗脫以獲取雜交捕獲產(chǎn)物;在連接酶的作用下,使雜交捕獲產(chǎn)物的單鏈實現(xiàn)環(huán)化,得到BRCA1/2基因檢測文庫。本發(fā)明的建庫步驟簡便快速,有效降低成本,減少工作量,變異類型全面、準(zhǔn)確、通量高。
技術(shù)研發(fā)人員:李紅梅;葉明芝;李世勇;蘇孟媛
受保護的技術(shù)使用者:深圳華大基因股份有限公司;天津華大醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;廣州華大基因醫(yī)學(xué)檢驗所有限公司;華大生物科技(武漢)有限公司
技術(shù)研發(fā)日:2017.04.06
技術(shù)公布日:2017.07.28