本發(fā)明屬于微生物降解農(nóng)業(yè)廢棄物
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑及其制作方法。
背景技術(shù)：
：我國是農(nóng)業(yè)生產(chǎn)大國，每年產(chǎn)生大量的農(nóng)業(yè)廢棄物，尤其是農(nóng)作物秸稈，包括玉米秸稈、小麥秸稈、高粱秸稈、水稻秸稈、動(dòng)物糞便等，這些秸稈中含有大量的碳水化合物、蛋白質(zhì)和脂肪，以作物秸稈為主的農(nóng)業(yè)廢棄物如果不加以利用，將其丟棄，就會(huì)造成大量資源浪費(fèi)?，F(xiàn)有技術(shù)中，農(nóng)作物秸稈等廢棄物主要用作牲畜飼料的主要原料，其在還田腐解方面研究較少，其腐解技術(shù)更是研究的甚少。在生物領(lǐng)域，微生物的協(xié)同作用一直都是學(xué)者們研究的熱點(diǎn)，當(dāng)不同的微生物在相同的環(huán)境下生長(zhǎng)一段時(shí)間后，它們之間的拮抗和協(xié)同作用，使得其復(fù)合微生物產(chǎn)生的效果大于單個(gè)微生物產(chǎn)生的效果。在農(nóng)業(yè)菌劑方面具有良好的應(yīng)用前景。目前最農(nóng)業(yè)廢棄物腐解菌劑是em菌，對(duì)糞便的腐熟效果較好，但是秸稈類腐解過程中通常需要添加動(dòng)物糞便，單獨(dú)的em菌降解秸稈的速率較慢，秸稈中纖維素降解效率不佳。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供的一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑及其制作方法，解決了現(xiàn)有em復(fù)合菌劑降解秸稈的速率較慢，秸稈中纖維素降解效率不佳的問題。本發(fā)明的目的是提供一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，包括以下步驟：由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物40-60份、酵母菌培養(yǎng)物10-20份、黑曲霉培養(yǎng)物10-20份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物10-20份和乳酸菌培養(yǎng)物1-2份；所述米曲霉培養(yǎng)物是將米曲霉接種于熟黃豆和小麥秸稈粉的混合物中，發(fā)酵2-3d而得；所述酵母菌培養(yǎng)物是將酵母菌接種于液體麥芽汁培養(yǎng)基中，培養(yǎng)2-3d而得；所述黑曲霉培養(yǎng)物是將黑曲霉接種于小麥秸稈粉和豆粕的混合物中，發(fā)酵2-3d而得；所述枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物是將枯草芽孢桿菌接種于小麥秸稈粉和碳粉的混合物中，發(fā)酵18-24h而得；所述乳酸菌培養(yǎng)物是將乳酸菌接種于小麥秸稈粉、碳粉和氯化鈉的混合物中，培養(yǎng)1-2d而得。優(yōu)選的，上述促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物50份、酵母菌培養(yǎng)物15份、黑曲霉培養(yǎng)物15份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物15份和乳酸菌培養(yǎng)物1份。優(yōu)選的，上述促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物40份、酵母菌培養(yǎng)物20份、黑曲霉培養(yǎng)物20份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物10份和乳酸菌培養(yǎng)物2份。優(yōu)選的，上述促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑中，所述米曲霉為米曲霉滬釀3.042或者米曲霉滬釀1.08；所述酵母菌為釀酒酵母；所述黑曲霉為黑曲霉as3.316；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌acccno.03189；所述乳酸菌為耐鹽乳酸菌scgmcc3792或者雙歧桿菌。優(yōu)選的，上述促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑中，所述復(fù)合菌劑中的有效活菌數(shù)為108個(gè)/克。本發(fā)明還提供了一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑的制作方法，包括以下步驟：步驟1，制備米曲霉培養(yǎng)物步驟1.1，活化米曲霉菌種，并用無菌水洗脫米曲霉孢子，得到米曲霉孢子懸浮液；步驟1.2，將黃豆于水中浸泡4-6h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至30-40℃，得到熟黃豆；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟黃豆和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟1.3，向米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種米曲霉孢子懸浮液，其中每千克米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種米曲霉孢子懸浮液5-10ml，混合均勻，然后于28-32℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到米曲霉培養(yǎng)物；步驟2，制備酵母菌培養(yǎng)物將酵母菌接種于液體麥芽汁培養(yǎng)基中，18-25℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到酵母菌培養(yǎng)物；步驟3，制備黑曲霉培養(yǎng)物步驟3.1，活化黑曲霉菌種，并用無菌水洗脫黑曲霉孢子，得到黑曲霉孢子懸浮液；步驟3.2，將豆粕于水中浸泡2-3h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至30-40℃，得到熟豆粕；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟豆粕和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟3.3，向黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種黑曲霉孢子懸浮液，其中每千克黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種黑曲霉孢子懸浮液5-10ml，混合均勻，然后于28-32℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到黑曲霉培養(yǎng)物；步驟4，制備枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物步驟4.1，活化枯草芽孢桿菌菌種，并將活化的枯草芽孢桿菌接種于lb液體培養(yǎng)基中，36-38℃條件下培養(yǎng)20h，得到枯草芽孢桿菌種子液；步驟4.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉和80目的碳粉按照10:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟4.3，向枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種枯草芽孢桿菌種子液，其中每千克枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)接種枯草芽孢桿菌種子液5-10ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于35-38℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟5，制備乳酸菌培養(yǎng)物步驟5.1，活化乳酸菌菌種，并將活化的乳酸菌接種于mrs液體培養(yǎng)基中，28-30℃條件下培養(yǎng)2-3d，得到乳酸菌種子液；步驟5.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉、氯化鈉和80目的碳粉按照10:0.4:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟5.3，向乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種乳酸菌種子液，其中每千克乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)接種乳酸菌種子液5-10ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于28-30℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟6，按以下重量份稱取各組分：米曲霉培養(yǎng)物40-60份、酵母菌培養(yǎng)物10-20份、黑曲霉培養(yǎng)物10-20份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物10-20份和乳酸菌培養(yǎng)物1-2份，充分混合均勻，于28-30℃培養(yǎng)24h，得到濕菌劑，最后于35-40℃條件下干燥至濕菌劑的水分含量低于10％，得到促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，0-4℃保存?zhèn)溆?。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑具有以下有益效果：(1)選用的米曲霉、酵母菌、黑曲霉、枯草芽孢桿菌、乳酸菌安全性高，不產(chǎn)生有毒副產(chǎn)物，即使使用過量，也不會(huì)造成環(huán)境微生物污染，在這幾種微生物的協(xié)同作用下，可以加速農(nóng)作物秸稈等農(nóng)業(yè)廢棄物的降解，降解速率高，且秸稈中纖維素降解效率高。(2)制備方法中，每一個(gè)菌種都選用了各自專用的培養(yǎng)基，在擴(kuò)培微生物的同時(shí)，加速纖維素酶等代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生，從而為秸稈中纖維素的快速降解提供了物質(zhì)基礎(chǔ)；微生物的協(xié)同作用是生物領(lǐng)域的一個(gè)重要研究方向，我們將各個(gè)微生物的培養(yǎng)物混合均勻后再培養(yǎng)24h，使微生物之間達(dá)到生長(zhǎng)平衡，這樣才能在降解秸稈時(shí)達(dá)到最高的效率，以最少的支出獲得高回報(bào)。(3)我們發(fā)明的復(fù)合菌劑中，纖維素酶活力、蛋白酶活力是em菌產(chǎn)生的酶活的60.2倍和28.5倍以上。具體實(shí)施方式下面對(duì)發(fā)明的具體實(shí)施方式進(jìn)行詳細(xì)描述，但應(yīng)當(dāng)理解本發(fā)明的保護(hù)范圍并不受具體實(shí)施方式的限制。下列實(shí)施例中未注明具體條件的試驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或者按照各制造商所建議的條件。當(dāng)實(shí)施例給出數(shù)值范圍時(shí)，應(yīng)理解，除非本發(fā)明另有說明，每個(gè)數(shù)值范圍的兩個(gè)端點(diǎn)以及兩個(gè)端點(diǎn)之間任何一個(gè)數(shù)值均可選用。除非另外定義，本發(fā)明中使用的所有技術(shù)和科學(xué)術(shù)語與本
技術(shù)領(lǐng)域：
技術(shù)人員通常理解的意義相同。除實(shí)施例中使用的具體方法、設(shè)備、材料外，根據(jù)本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的掌握及本發(fā)明的記載，還可以使用與本發(fā)明實(shí)施例中所述的方法、設(shè)備、材料相似或等同的現(xiàn)有技術(shù)的任何方法、設(shè)備和材料來實(shí)現(xiàn)本發(fā)明。下述實(shí)施例中使用的米曲霉(aspergillusoryzae)滬釀3.042、米曲霉(aspergillusoryzae)滬釀1.08、釀酒酵母、耐鹽乳酸菌(tetragenococcushalophilu)cgmcc3792、雙歧桿菌等微生物菌購自微生物保藏中心，其中釀酒酵母采用食品領(lǐng)域釀造啤酒用的啤酒酵母均可以，培養(yǎng)酵母菌培養(yǎng)時(shí)采用的麥芽汁培養(yǎng)基為常規(guī)方法制備而成的；黑曲霉(aspergillusniger)as3.316、枯草芽孢桿菌(bacillussubtilis)acccno.03189，購自中國農(nóng)業(yè)微生物菌種保藏管理中心。實(shí)施例1一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物50份、酵母菌培養(yǎng)物15份、黑曲霉培養(yǎng)物15份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物15份和乳酸菌培養(yǎng)物1份。具體按照以下步驟制備：步驟1，制備米曲霉培養(yǎng)物步驟1.1，活化米曲霉菌種，并用無菌水洗脫米曲霉孢子，得到米曲霉孢子懸浮液；步驟1.2，將黃豆于水中浸泡4h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至30℃，得到熟黃豆；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟黃豆和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟1.3，向米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種米曲霉孢子懸浮液，其中每千克米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種米曲霉孢子懸浮液5ml，混合均勻，然后于30℃發(fā)酵培養(yǎng)3d，得到米曲霉培養(yǎng)物；步驟2，制備酵母菌培養(yǎng)物將酵母菌接種于液體麥芽汁培養(yǎng)基中，18℃發(fā)酵培養(yǎng)3d，得到酵母菌培養(yǎng)物；步驟3，制備黑曲霉培養(yǎng)物步驟3.1，活化黑曲霉菌種，并用無菌水洗脫黑曲霉孢子，得到黑曲霉孢子懸浮液；步驟3.2，將豆粕于水中浸泡2h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至30℃，得到熟豆粕；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟豆粕和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟3.3，向黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種黑曲霉孢子懸浮液，其中每千克黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種黑曲霉孢子懸浮液5ml，混合均勻，然后于30℃發(fā)酵培養(yǎng)2d，得到黑曲霉培養(yǎng)物；步驟4，制備枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物步驟4.1，活化枯草芽孢桿菌菌種，并將活化的枯草芽孢桿菌接種于lb液體培養(yǎng)基中，36-38℃條件下培養(yǎng)20h，得到枯草芽孢桿菌種子液；步驟4.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉和80目的碳粉按照10:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟4.3，向枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種枯草芽孢桿菌種子液，其中每千克枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)接種枯草芽孢桿菌種子液5ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于35-38℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟5，制備乳酸菌培養(yǎng)物步驟5.1，活化乳酸菌菌種，并將活化的乳酸菌接種于mrs液體培養(yǎng)基中，28-30℃條件下培養(yǎng)2-3d，得到乳酸菌種子液；步驟5.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉、氯化鈉和80目的碳粉按照10:0.4:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟5.3，向乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種乳酸菌種子液，其中每千克乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)接種乳酸菌種子液10ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于28-30℃發(fā)酵培養(yǎng)2-3d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟6，按以下重量份稱取各組分：米曲霉培養(yǎng)物50份、酵母菌培養(yǎng)物15份、黑曲霉培養(yǎng)物15份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物15份和乳酸菌培養(yǎng)物1份，充分混合均勻，于28-30℃培養(yǎng)24h，得到濕菌劑，最后于35-40℃條件下干燥至濕菌劑的水分含量低于10％，得到促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，0-4℃保存?zhèn)溆茫瑥?fù)合菌劑中的有效活菌數(shù)為108個(gè)/克。實(shí)施例2一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物40份、酵母菌培養(yǎng)物20份、黑曲霉培養(yǎng)物20份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物10份和乳酸菌培養(yǎng)物2份。所述米曲霉為米曲霉滬釀3.042；所述酵母菌為釀酒酵母；所述黑曲霉為黑曲霉as3.316；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌acccno.03189；所述乳酸菌為耐鹽乳酸菌scgmcc3792。具體按照以下步驟制備：步驟1，制備米曲霉培養(yǎng)物步驟1.1，活化米曲霉菌種，并用無菌水洗脫米曲霉孢子，得到米曲霉孢子懸浮液；步驟1.2，將黃豆于水中浸泡6h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至40℃，得到熟黃豆；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟黃豆和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟1.3，向米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種米曲霉孢子懸浮液，其中每千克米曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種米曲霉孢子懸浮液10ml，混合均勻，然后于30℃培養(yǎng)3d，得到米曲霉培養(yǎng)物；步驟2，制備酵母菌培養(yǎng)物將酵母菌接種于液體麥芽汁培養(yǎng)基中，18℃培養(yǎng)2d，得到酵母菌培養(yǎng)物；步驟3，制備黑曲霉培養(yǎng)物步驟3.1，活化黑曲霉菌種，并用無菌水洗脫黑曲霉孢子，得到黑曲霉孢子懸浮液；步驟3.2，將豆粕于水中浸泡3h，瀝干水分，然后蒸熟，冷卻至40℃，得到熟豆粕；將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將熟豆粕和小麥秸稈粉按照1:2的質(zhì)量比例混合均勻，得到黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)；步驟3.3，向黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)中接種黑曲霉孢子懸浮液，其中每千克黑曲霉培養(yǎng)基質(zhì)接種黑曲霉孢子懸浮液10ml，混合均勻，然后于32℃培養(yǎng)2.5d，得到黑曲霉培養(yǎng)物；步驟4，制備枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物步驟4.1，活化枯草芽孢桿菌菌種，并將活化的枯草芽孢桿菌接種于lb液體培養(yǎng)基中，37℃條件下培養(yǎng)20h，得到枯草芽孢桿菌種子液；步驟4.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉和80目的碳粉按照10:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟4.3，向枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種枯草芽孢桿菌種子液，其中每千克枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)接種枯草芽孢桿菌種子液10ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于37℃培養(yǎng)2d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟5，制備乳酸菌培養(yǎng)物步驟5.1，活化乳酸菌菌種，并將活化的乳酸菌接種于mrs液體培養(yǎng)基中，28-30℃條件下培養(yǎng)2-3d，得到乳酸菌種子液；步驟5.2，將小麥秸稈磨成粉，過60目篩，得到小麥秸稈粉；然后將小麥秸稈粉、氯化鈉和80目的碳粉按照10:0.4:1的質(zhì)量比例混合均勻，得到乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)；步驟5.3，向乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)中接種乳酸菌種子液，其中每千克乳酸菌培養(yǎng)基質(zhì)接種乳酸菌種子液5ml，接著加入相當(dāng)于枯草芽孢桿菌培養(yǎng)基質(zhì)30％質(zhì)量的無菌水，混合均勻，然后于28-30℃培養(yǎng)2-3d，得到枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物；步驟6，按以下重量份稱取各組分：米曲霉培養(yǎng)物40份、酵母菌培養(yǎng)物20份、黑曲霉培養(yǎng)物20份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物10份和乳酸菌培養(yǎng)物2份，得到濕菌劑，最后于35-40℃條件下干燥至濕菌劑的水分含量低于10％，得到促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，0-4℃保存?zhèn)溆茫瑥?fù)合菌劑中的有效活菌數(shù)為108個(gè)/克。實(shí)施例3一種促進(jìn)農(nóng)業(yè)廢棄物快速腐解的復(fù)合菌劑，由以下重量份的原料制備而成：米曲霉培養(yǎng)物60份、酵母菌培養(yǎng)物10份、黑曲霉培養(yǎng)物10份、枯草芽孢桿菌培養(yǎng)物20份和乳酸菌培養(yǎng)物1.5份。所述米曲霉為米曲霉滬釀1.08；所述酵母菌為釀酒酵母；所述黑曲霉為黑曲霉as3.316；所述枯草芽孢桿菌為枯草芽孢桿菌acccno.03189；所述乳酸菌為雙歧桿菌，具體制備步驟同實(shí)施例1。我們分別測(cè)定了em菌和實(shí)施例1-3的復(fù)合菌劑中，纖維素酶活力、蛋白酶活力(主要測(cè)定的是中性蛋白酶活力)，測(cè)定方法參照常規(guī)方法進(jìn)行，為了方便比較，我們對(duì)纖維素酶活進(jìn)行了歸一化處理，以em菌的纖維素酶活力和蛋白酶活力為標(biāo)準(zhǔn)，其酶活值規(guī)定為1，計(jì)算實(shí)施例1-3樣品的相對(duì)纖維素酶活，相對(duì)纖維素酶活的計(jì)算公式為：相對(duì)纖維素酶活＝樣品纖維素酶活力/em菌纖維素酶活力相對(duì)蛋白酶活力＝樣品蛋白酶活力/em菌蛋白酶活力。結(jié)果如表1所示，比較表1中的數(shù)據(jù)可知，實(shí)施例1-3的樣品中纖維素酶活分別為對(duì)照組的51.40倍、49.15倍和50.36倍，極大的提高了纖維素酶活，為快速降解玉米秸稈纖維素奠定了基礎(chǔ)。表1不同樣品的相對(duì)纖維素酶活實(shí)施例1實(shí)施例2實(shí)施例3em菌相對(duì)纖維素酶活力60.261.165.31相對(duì)蛋白酶活力30.028.530.61我們將實(shí)施例1的復(fù)合菌劑和em菌的秸稈腐熟、糞便腐熟效果比較。實(shí)驗(yàn)一組：按照1:200的質(zhì)量比例將復(fù)合菌劑與玉米秸稈混合，常溫發(fā)酵；實(shí)驗(yàn)二組：按照1:200的質(zhì)量比例將復(fù)合菌劑與小麥秸稈混合，常溫發(fā)酵；實(shí)驗(yàn)三組：按照1:10:200的質(zhì)量比例將復(fù)合菌劑、雞糞、小麥秸稈混合，常溫發(fā)酵；對(duì)照一組：按照1:200的質(zhì)量比例將em菌與玉米秸稈混合，常溫發(fā)酵；對(duì)照二組：按照1:200的質(zhì)量比例將em菌與小麥秸稈混合，常溫發(fā)酵；對(duì)照三組：按照1:10:200的質(zhì)量比例將em菌、雞糞、小麥秸稈混合，常溫發(fā)酵。各組分別取發(fā)酵第3天、10天、15天的樣品，測(cè)定不同樣品中木質(zhì)素含量和纖維素(以粗纖維素計(jì))含量，計(jì)算不同樣品中木質(zhì)素和纖維素的降解率，結(jié)果如表2所示，并觀察不同組的腐熟效果，結(jié)果如表3所示。通過實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、對(duì)照一組、對(duì)照二組不同發(fā)酵時(shí)間木質(zhì)素的降解率，我們發(fā)現(xiàn)，在加入復(fù)合菌劑后，木質(zhì)素的降解率有明顯提高，發(fā)酵10天即可達(dá)到58％以上，而對(duì)照組玉米秸稈發(fā)酵10天后，其木質(zhì)素的降解率仍不到20％，實(shí)施例1的復(fù)合菌劑使木質(zhì)素的降解率提高了約3倍以上。通過實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、對(duì)照一組、對(duì)照二組不同發(fā)酵時(shí)間纖維素的降解率，我們發(fā)現(xiàn)，在加入復(fù)合菌劑后，纖維素的降解率有明顯提高，發(fā)酵10天即可達(dá)到71％以上，而對(duì)照組玉米秸稈發(fā)酵10天后，其纖維素的降解率僅為34.9％，實(shí)施例1的復(fù)合菌劑使纖維素的降解率提高了約2倍以上。表2不同樣品中木質(zhì)素和纖維素的降解率通過實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、實(shí)驗(yàn)三組、對(duì)照一組、對(duì)照二組、對(duì)照三組不同發(fā)酵時(shí)間腐熟程度，以百分比計(jì)，腐熟程度根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的經(jīng)驗(yàn)，從外觀和氣味常規(guī)判斷，由于表3的數(shù)據(jù)是定性判斷，所以不做相關(guān)指標(biāo)的測(cè)定，實(shí)驗(yàn)一組、實(shí)驗(yàn)二組、實(shí)驗(yàn)三組在第10天已經(jīng)全部腐熟，而對(duì)照一組、對(duì)照二組、對(duì)照三組在發(fā)酵第15天時(shí)，腐熟程度仍不足70％。表3不同樣品的腐熟程度注：“-”表示未檢測(cè)該數(shù)據(jù)。上述實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明，本發(fā)明的方法可以有效加速玉米秸稈腐解，耗時(shí)短，不會(huì)影響后茬作物的生長(zhǎng)，為農(nóng)作物秸稈的還田利用提供了有效途徑，該方法就有良好的應(yīng)用前景。盡管已描述了本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例，但本領(lǐng)域內(nèi)的技術(shù)人員一旦得知了基本創(chuàng)造性概念，則可對(duì)這些實(shí)施例作出另外的變更和修改。所以，所附權(quán)利要求意欲解釋為包括優(yōu)選實(shí)施例以及落入本發(fā)明范圍的所有變更和修改。顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改動(dòng)和變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。這樣，倘若本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，則本發(fā)明也意圖包含這些改動(dòng)和變型在內(nèi)。當(dāng)前第1頁12