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一種高穩(wěn)定型MazF突變體及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12644621閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種蛋白質(zhì),為如下1)或2):

1)所示的蛋白為將野生型MazF蛋白氨基酸序列中第48位半胱氨酸進(jìn)行修飾,得到的蛋白;

2)所示的蛋白為將1)所示蛋白的氨基酸序列末端添加標(biāo)簽序列且由1)衍生的蛋白質(zhì)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白質(zhì),其特征在于:所述修飾為氨基酸置換。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蛋白質(zhì),其特征在于:所述氨基酸置換為將第48位的半胱氨酸置換為丙氨酸、苯丙氨酸、亮氨酸或異亮氨酸。

4.根據(jù)權(quán)利要求1-3中任一所述的蛋白質(zhì),其特征在于:所述野生型MazF蛋白來源于大腸桿菌;

或所述野生型MazF蛋白來源于大腸桿菌,其氨基酸序列為序列2。

5.編碼權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白的DNA分子。

6.含有權(quán)利要求5所述DNA分子的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系。

7.一種融合蛋白或蛋白組合物,包括抗毒素蛋白MazE和權(quán)利要求1-5中任一所述蛋白;

或一種融合蛋白或蛋白組合物,包括抗毒素蛋白MazE部分片段和權(quán)利要求1-5中任一所述蛋白。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的融合蛋白或蛋白組合物,其特征在于:

所述抗毒素蛋白MazE源于大腸桿菌;

或所述抗毒素蛋白MazE部分片段為大腸桿菌MazE蛋白C端部分中包括但不限于可中和MazF毒性的氨基酸序列。

9.權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系在剪切核酸中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白在作為核酸內(nèi)切酶中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系在制備核酸內(nèi)切酶中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系在抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或促進(jìn)細(xì)菌死亡中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系在制備抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或促進(jìn)細(xì)菌死亡產(chǎn)品中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或權(quán)利要求7或8所述的融合蛋白在篩選干擾毒素-抗毒素系統(tǒng)相互作用的小分子化合物中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或權(quán)利要求7或8所述的融合蛋白在制備篩選干擾毒素-抗毒素系統(tǒng)相互作用的小分子化合物產(chǎn)品中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或權(quán)利要求7或8所述的融合蛋白或蛋白組合物在構(gòu)建抗性篩選模塊、抗菌載體、抗HIV載體、抗HCV載體或抗腫瘤載體中的應(yīng)用;

或權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或權(quán)利要求7或8所述的融合蛋白或蛋白組合物在制備構(gòu)建抗性篩選模塊、抗菌載體、抗HIV載體、抗HCV載體或抗腫瘤載體產(chǎn)品中的應(yīng)用;

或一種產(chǎn)品,其活性成分為權(quán)利要求1-4中任一所述蛋白或權(quán)利要求5所述的蛋白或權(quán)利要求6所述的表達(dá)盒、重組載體、重組菌或轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或權(quán)利要求7或8所述的融合蛋白或蛋白組合物。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用或產(chǎn)品,其特征在于:所述核酸為RNA或mRNA或DNA或RNA和DNA的結(jié)合體;

或所述產(chǎn)品具有如下1)-4)中至少一種功能:

1)剪切核酸;

2)抑制細(xì)菌生長(zhǎng)或促進(jìn)細(xì)菌死亡;

3)篩選干擾毒素-抗毒素系統(tǒng)相互作用的小分子化合物;

4)構(gòu)建抗性篩選模塊、抗菌載體、抗HIV載體、抗HCV載體或抗腫瘤載體。

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