本發(fā)明屬于藥物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種吡啶-2-酮類(lèi)衍生物及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

雜環(huán)化合物在藥物中扮演著十分重要的角色，雜環(huán)化合物具有豐富多樣的生物活性，如抗癌、抗病毒、治療心腦血管疾病、鎮(zhèn)靜安眠等等。吡啶-2-酮結(jié)構(gòu)單元作為氮雜環(huán)化合物家族中較為重要的一員，已經(jīng)在很多臨床藥物中發(fā)揮著重要的作用。如商品化的藥物包括環(huán)丙沙星(Ciprofloxacin)、吡非尼酮(Pirfenidone)、吡侖帕萘(Fycompa)等含有吡啶-2-酮結(jié)構(gòu)。

具有2-吡啶酮結(jié)構(gòu)單元的天然產(chǎn)物來(lái)源廣泛，包括來(lái)自于藥用植物、海洋生物、真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物以及細(xì)菌發(fā)酵等。2-吡啶酮類(lèi)化合物生物活性多樣，包括抗病毒、抗真菌、抗腫瘤、抗凝血、抗炎、神經(jīng)毒性以及殺蟲(chóng)等多種生物活性。

目前國(guó)內(nèi)外均有吡啶酮類(lèi)抗癌藥物的文獻(xiàn)及專(zhuān)利報(bào)道，如：

CN200910043250.2(陶立堅(jiān)；胡高云)公開(kāi)了一種可用作抗菌劑的氟吡啶酮衍生物。

CN201480066559.2(J·克勞福德)公開(kāi)了提供具有親電子官能性的雜芳基吡啶酮和吡啶酮酰胺化合物，包括其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體和藥用鹽，其用于抑制Btk并用于治療癌癥和免疫病癥諸如由Btk介導(dǎo)的炎癥。還公開(kāi)使用化合物用于體外、原位和體內(nèi)診斷以及治療哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的所述病癥或相關(guān)的病理狀態(tài)的方法。

CN201480061771.X(萊昂尼德·貝格爾曼)公開(kāi)了一種使用吡啶酮化合物緩解和/或治療包括正粘病毒感染的疾病和/或疾病狀態(tài)的方法。正粘病毒病毒性感染的實(shí)例包括流感感染。

Merk公司早在上個(gè)世紀(jì)80年代就已經(jīng)開(kāi)始了2-吡啶酮類(lèi)衍生物在抗真菌以及抗病原細(xì)菌方面的研究。隨著研究的進(jìn)一步深入，Merk公司的Hoffman J.M.小組和Bisagni E.小組發(fā)現(xiàn)經(jīng)過(guò)進(jìn)一步結(jié)構(gòu)優(yōu)化的2-吡啶酮衍生物是HI V-1專(zhuān)屬的逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑。

雖然吡啶-2-酮化合物的母核結(jié)構(gòu)廣泛存在于藥物分子中，但要合成這些吡啶-2-酮類(lèi)藥物通常需要多步反應(yīng)且反應(yīng)常需要金屬催化劑、高溫等，從而導(dǎo)致合成這類(lèi)藥物成本較高。另外，吡啶-2-酮作為抗腫瘤的藥物還很少。因此建立一種合成路線(xiàn)短，工藝簡(jiǎn)單、高效，操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)條件溫和，不需要高溫及無(wú)水條件，不需要金屬催化，產(chǎn)率高，生產(chǎn)成本低的合成路線(xiàn)合成吡啶-2-酮類(lèi)抗腫瘤藥物具有十分重要的意義。本發(fā)明吡啶-2-酮類(lèi)衍生物具有良好的抗腫瘤活性，應(yīng)用前景顯著。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種吡啶-2-酮類(lèi)衍生物的制備方法和應(yīng)用，該類(lèi)化合物具有良好的抗腫瘤活性，極具應(yīng)用前景。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

吡啶-2-酮類(lèi)衍生物，該化合物的結(jié)構(gòu)如式(I)所示：

式(I)中，n＝1、2、3或4；Z為O或NH；

R為苯基、4-三氟甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-三氟甲基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2,4-二氟苯基、3,4-二氟苯基、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基呋喃基、噻吩基、丙基或丁基。

本發(fā)明還提供上述吡啶-2-酮類(lèi)衍生物的制備方法，包括如下步驟：

將式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與式(III)結(jié)構(gòu)的二硫縮烯酮類(lèi)化合物，在非質(zhì)子性溶劑中，在堿性加熱條件下，進(jìn)行邁克爾加成和環(huán)化反應(yīng)，TLC跟蹤，待反應(yīng)完全后，將反應(yīng)物純化，干燥，得到所述式(I)結(jié)構(gòu)的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物；

式(II)中，n＝1、2、3或4；R為苯基、4-三氟甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-三氟甲基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2,4-二氟苯基、3,4-二氟苯基、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基呋喃基、噻吩基、丙基或丁基；

式(III)中，EWG為氰基或酯基。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與式(III)結(jié)構(gòu)的二硫縮烯酮類(lèi)化合物的摩爾比為1:1～1:2；式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物的摩爾與非質(zhì)子性溶劑的體積比為1mmol：15～25mL。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，加熱溫度為60℃至非質(zhì)子性溶劑的回流溫度，反應(yīng)時(shí)間為1～4h。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的堿為Cs₂CO₃或K₂CO₃，式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與堿的摩爾比為1:1～1:2。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的非質(zhì)子性溶劑為乙腈；所述的干燥方法為烘干、自然風(fēng)干或紅外燈下干燥。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的純化方法為首先采用有機(jī)溶劑與飽和食鹽水萃取，有機(jī)相用無(wú)水Na₂SO₄或無(wú)水MgSO₄干燥，之后將濃縮物蒸干，經(jīng)柱層析分離或重結(jié)晶，得到如式(I)所示的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物純品。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或二氯甲烷；

所述的柱層析分離采用的洗脫劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑，體積比為10:1～20:1；

所述的重結(jié)晶用體積比為1:10～1:20乙酸乙酯與石油醚的混合溶劑，或體積比為1:10～1:20丙酮與石油醚的混合溶劑。

本發(fā)明同時(shí)提供上述吡啶-2-酮類(lèi)衍生物作為制備抗腫瘤藥物的應(yīng)用。

進(jìn)一步，優(yōu)選的是，所述的抗胃癌藥物、抗卵巢癌藥物、抗肺癌藥物或抗宮頸癌藥物，即可制備抗SK-OV-3(卵巢癌)、SGC-7901(胃腺癌細(xì)胞)、A549(人肺癌細(xì)胞)、Hela(宮頸癌細(xì)胞)腫瘤藥物的藥物。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，其有益效果為：

本發(fā)明利用簡(jiǎn)單易得的原料：1,1-烯二胺類(lèi)化合物(II)與二硫縮烯酮類(lèi)化合物(III)在非質(zhì)子性溶劑中加熱反應(yīng)合成具有抗腫瘤活性的目標(biāo)化合物即吡啶-2-酮類(lèi)衍生物(I)。該發(fā)明的合成路線(xiàn)短(僅一步反應(yīng))，操作簡(jiǎn)便，反應(yīng)條件溫和，不需要高溫(60℃至非質(zhì)子性溶劑的回流溫度)及無(wú)水條件，不需要金屬催化，產(chǎn)率高(85％～93％)，生產(chǎn)成本低等特點(diǎn)，十分有利工業(yè)生產(chǎn)。本發(fā)明吡啶-2-酮衍生物具有良好的抗腫瘤活性，應(yīng)用前景顯著。

本發(fā)明化合物5，6，8，9，11～13，15～17，19～20，23對(duì)SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)的IC₅₀＝1.505～9.811，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝11.001)；化合物5，8，14對(duì)SK-OV-3(人卵巢癌)的IC₅₀值小于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑的IC₅₀值；所發(fā)明的化合物5，6，8，9，11，23對(duì)A549(人肺癌)的IC₅₀＝2.990～8.324，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝15.320)；化合物5，12對(duì)Hela(人宮頸癌細(xì)胞)的IC₅₀值分別為3.264、4.137，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝9.941)?？傮w來(lái)看，化合物5對(duì)四種人源腫瘤細(xì)胞株SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)，SK-OV-3(人卵巢癌)，A549(人肺癌)，Hela(人宮頸癌細(xì)胞)的抗腫瘤活性均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑。

附圖說(shuō)明

圖1為化合物7的單晶結(jié)構(gòu)圖。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。

本領(lǐng)域技術(shù)人員將會(huì)理解，下列實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不應(yīng)視為限定本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中未注明具體技術(shù)或條件者，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻(xiàn)所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。所用試劑、儀器等未注明生產(chǎn)廠(chǎng)商者，均為可以通過(guò)購(gòu)買(mǎi)獲得的常規(guī)產(chǎn)品。

本發(fā)明原料可通過(guò)本領(lǐng)域的公知的方法來(lái)制備或通過(guò)市售產(chǎn)品獲得。

以下進(jìn)一步解釋本發(fā)明的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物合成的一般方法，但本發(fā)明吡啶-2-酮類(lèi)衍生物的制備方法不局限于此。

合成本發(fā)明的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物的方法如下：

將式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與式(III)結(jié)構(gòu)的二硫縮烯酮類(lèi)化合物，在非質(zhì)子性溶劑中，在堿性加熱條件下，進(jìn)行邁克爾加成和環(huán)化反應(yīng)，TLC跟蹤，待反應(yīng)完全后，將反應(yīng)物純化，干燥，得到所述式(I)結(jié)構(gòu)的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物；

式(II)中，n＝1、2、3或4；R為苯基、4-三氟甲基苯基、4-氟苯基、4-氯苯基、4-溴苯基、4-甲基苯基、4-甲氧基苯基、3-三氟甲基苯基、3-氟苯基、3-氯苯基、2-氟苯基、2-氯苯基、2,4-二氟苯基、3,4-二氟苯基、2,4-二氯苯基、3,4-二氯苯基呋喃基、噻吩基、丙基或丁基；

式(III)中，EWG為氰基或酯基。

式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與式(III)結(jié)構(gòu)的二硫縮烯酮類(lèi)化合物的摩爾比為1:1～1:2。

加熱溫度為60℃至非質(zhì)子性溶劑的回流溫度，反應(yīng)時(shí)間為1～4h。

所述的堿為Cs₂CO₃或K₂CO₃，式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物與堿的摩爾比為1:1～1:2。

所述的非質(zhì)子性溶劑不作具體規(guī)定，優(yōu)先選擇乙腈，用量為式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物的摩爾與非質(zhì)子性溶劑的體積比為1mmol：15～25mL。

所述的純化方法為首先采用有機(jī)溶劑和飽和食鹽水萃取，有機(jī)相用無(wú)水Na₂SO₄或無(wú)水MgSO₄干燥，之后將濃縮物蒸干，濃縮之后經(jīng)柱層析分離或重結(jié)晶，得到如式(I)所示的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物純品。

所述的萃取用有機(jī)溶劑為乙酸乙酯或二氯甲烷；所述的柱層析分離采用的洗脫劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑，體積比為10:1～20:1；所述的重結(jié)晶用乙酸乙酯與石油醚(1:10～1:20)、或丙酮與石油醚(1:10～1:20)的混合溶劑。

對(duì)于本發(fā)明產(chǎn)品的干燥方法本發(fā)明沒(méi)有具體要求，可采用烘干、自然干燥、紅外燈下干燥等干燥方法。

式(II)的化合物按照公知的方法(嚴(yán)勝驕、林軍、胡興梅、羅大云、資全興、崔時(shí)勝)，中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利，全取代3-硝基吲哚化合物及其中間體化合物、制備方法和應(yīng)用，申請(qǐng)?zhí)?ZL201710060227.9；Manley,P.W.；Quast,U.J.Med.Chem.1992,35,2327～2340；da Silva,Rodrigo C.；da Silva,Gustavo P.；Sangi,Diego P.；de M.Pontes,Joao G.；Ferreira,Antonio G.；Correa,Arlene G.；Paixao,Marcio W.Tetrahedron,2013,69,9007～9012)制備。其具體制備方法簡(jiǎn)述如下:

將1,1-雙(甲巰基)-2-硝基乙烯(1.65g，10mmol)溶于80毫升乙醇中，攪拌2分鐘，加入另一原料芳胺類(lèi)化合物(25mmol)，加熱回流12h，有白色固體析出，將固體進(jìn)行抽濾，洗滌，得式(II)結(jié)構(gòu)的1,1-烯二胺類(lèi)化合物。

式(III)化合物是公知的，是可商購(gòu)或可按照公知的方法制備。

下面結(jié)合部分具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳述。這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而不用于限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例中的制備方案僅為優(yōu)選方案，但本發(fā)明并不局限于優(yōu)選制備方案。

第一部分合成實(shí)施例

一、實(shí)施例1：合成3-氰基-1-(4-氟芐基)-6-((4-氟芐基)胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物1)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-氟芐胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,319mg)、Cs₂CO₃(1mmol,325mg)(1:1)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(1mmol,217mg)后，加入乙腈(15mL)和磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，反應(yīng)物加入飽和氯化鈉溶液，之后用有機(jī)溶劑乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析分離，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1，得黃色固體，烘干，得到產(chǎn)品3-氰基-1-(4-氟芐基)-6-((4-氟芐基)胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物1)，產(chǎn)率89％。熔點(diǎn)：177.8-178.0℃

波譜數(shù)據(jù)為：IR(KBr):3334,2219,1639,1554,1512,1494,1466,1419,1328,1235,1161,820,493cm^-1；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ:2.72(s,3H,CH₃),4.10(d,J＝3.9Hz,2H,CH₂),5.36(s,2H,CH₂),6.97–7.02(m,4H,ArH),7.14–7.21(m,4H,ArH),8.31(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)δ:19.4,44.9,49.0,89.0,115.3,115.5,115.8,115.9,116.9,122.6,128.9,129.0,129.0,130.6,130.7,132.3,149.8,156.0,159.2,162.0,162.1；HRMS(TOF,or ESI,m/z)calcd.for C₂₁H₁₆F₂N₄O₃S[M-H]^-441.0838；found 441.0836.

實(shí)施例2：合成3-氰基-1-(芐基)-6-(芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物2)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙芐胺基-2-硝基乙烯(1mmol,283mg)、Cs₂CO₃(2mmol,650mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(1.5mmol,325mg),加入乙腈溶劑(20mL)磁力攪拌下加熱至回流溫度下,TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，反應(yīng)1h。反應(yīng)物加入飽和碳酸氫鈉溶液，之后用有機(jī)溶劑二氯甲烷對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水MgSO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行重結(jié)晶(丙酮：石油醚＝1:10)，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，自然風(fēng)干后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(芐基)-6-(芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物2)產(chǎn)率92％。熔點(diǎn)：134～135℃；

波譜數(shù)據(jù)為：IR(KBr)(νmax,cm^-1):3442,2193,1603,1566,1479,1444,1345,1287,1187,763,736,697,561,456；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)δ:2.60(s,3H,CH₃),4.14(s,2H,CH₂),5.18(s,2H,CH₂),7.12–7.25(m,10H,ArH),7.27(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)δ:19.4,44.6,53.8,82.6,116.7,119.2,126.3,126.3,126.7,126.7,127.6,127.6,127.6,128.3,128.4,128.4,139.4,142.6,146.8,157.4,161.6；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd.for C₂₁H₁₈N₄O₃S[M-H]^-405.1027；found 405.1030.

實(shí)施例3：合成3-氰基-1-(芐基)-6-(芐胺基)-2-亞氨基-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物3)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙芐胺基-2-硝基乙烯(1mmol,283mg)、Cs₂CO₃(1mmol,325mg)和2-(二(甲硫基)亞甲基)丙二腈(2mmol,340mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)2h，原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行重結(jié)晶(丙酮：石油醚＝1:15)，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品1-苯基-6-(芐胺基)-2-亞氨基-4-(甲硫基)-5-硝基-1,2-二氫吡啶-3-甲腈(化合物3)產(chǎn)率85％。熔點(diǎn)：175.9–176.0℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3345,3033,2923,2215,1638,1590,1492,1466,1351,1054,1031,777,693,543,465；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.71(s,3H,CH₃),4.13(d,J＝2.6Hz,2H,CH₂),5.43(s,2H,CH₂),6.86-7.37(m,10H,ArH),8.41(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.5,29.5,45.5,49.7,89.0,116.9,122.4,126.7,126.7,127.9,128.2,128.3,128.7,128.7,129.0,129.1,134.6,136.1,149.9,155.9,159.2；HRMS(TOF,or ESI,m/z)calcd.for C₂₁H₁₆F₂N₄O₃S[M-H]^-,404.1187；found 405.1009.

實(shí)施例4：合成3-氰基-1-(4-芐基)-6-(4-氯芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物4)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙芐基-(4-氯芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,351mg)、Cs₂CO₃(2mmol,650mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至回流溫度下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(4-芐基)-6-(4-氯芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物4)，產(chǎn)率87％。熔點(diǎn)：187.8–188.8℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3346,2217,1639,1581,1550,1492,1439,1324,1098,825,570,475；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.72(s,3H,CH₃),4.09(d,J＝4.2Hz,2H,CH₂),5.36(s,2H,CH₂),6.94-7.39(m,8H,ArH),8.30(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,44.9,49.0,89.0,116.9,122.6,128.5,128.5,128.7,128.7,129.0,129.0,130.3,130.3,132.6,132.9,133.6,135.1,149.8,156.0,159.2；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₁H₁₆Cl₂N₄O₃S,[M-H]^-,473.0427；found,473.0427.

實(shí)施例5：合成3-氰基-1-苯乙基-6-(苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物5)

在25毫升圓底燒瓶中加入2-硝基-N,N'-雙苯乙基胺基乙烯(1mmol,311mg)、K₂CO₃(1mmol,138mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(20mL)磁力攪拌下加熱至回流溫度下,反應(yīng)2h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行重結(jié)晶(石油醚：乙酸乙酯＝10:1)，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-苯乙基-6-(苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物5)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：165.1–166.1℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3416,3260,2208,1626,1544,1492,1354,1236,753,605,488；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.70(s,3H,CH₃),2.70(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),2.96(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),3.33(t,J＝6.5Hz,2H,CH₂),4.24(t,J＝6.5Hz,2H,CH₂),7.22-7.34(m,10H,ArH),8.13(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.6,35.1,43.8,47.5,89.0,116.8,122.4,127.1,127.1,127.1,127.1,128.9,128.9,129.1,129.1,129.2,129.2,138.1,138.2,149.7,155.1,158.8；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₂N₄O₃S,[M-H]^-,433.1340；found,433.1339.

實(shí)施例6：合成3-氰基-1-(2-氟苯乙基)-6-(2-氟苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物6)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-氟苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,347mg)、Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)3h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(2-氟苯乙基)-6-(2-氟苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物6)，產(chǎn)率89％。熔點(diǎn)：118.2–119.0℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3417,3240,2207,1628,1546,1518,1234,757,478；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.83(s,3H,CH₃),2.83(t,J＝6.5Hz,2H,CH₂),3.00(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),3.33(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),4.33(t,J＝6.5Hz,2H,CH₂),7.12-7.29(m,8H,ArH),8.17(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,25.4,28.7,42.4,46.1,89.0,115.5,115.7,116.7,122.4,124.8,124.8,124.8,129.3,129.3,131.6,131.6,149.8,155.1,158.8,160.1,160.2,162.1；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀F₂N₄O₃S[M-H]^-,469.1151；found,469.1166.

實(shí)施例7：合成3-氰基-1-(4-甲氧芐基)-6-((4-甲氧芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物7)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-甲氧芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,343mg)和K₂CO₃(1.5mmol,207mg)，乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(20mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝10:1得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(4-甲氧芐基)-6-((4-甲氧芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物7)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：178.4–179.2℃；其單晶結(jié)構(gòu)圖如圖1所示。

波譜數(shù)據(jù)；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3358,2990,2837,2217,1640,1552,1396,1255,1181,1035,812,647,540,475；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.70(s,3H,CH₃),3.71(s,3H,CH₃),3.76(s,3H,CH₃),4.06(d,J＝4.2Hz,2H,CH₂),5.33(s,2H,CH₂),6.69-7.08(m,8H,ArH),8.21(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.5,44.8,49.2,55.5,55.6,88.9,114.0,114.0,114.6,114.6,116.9,122.3,126.3,127.9,128.3,128.3,129.9,129.9,149.6,155.8,159.2,159.3,159.3；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₂N₄O₅S[M-H]^-,465.1238；found,465.1240.

實(shí)施例8：合成3-氰基-1-(3-氟苯乙基)6-(3-氟苯乙胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物8)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(3-氟苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,347mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(25mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)3h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析,所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(3-氟苯乙基)6-(3-氟苯乙胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物8)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：107.6–108.8℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3287,2208,1627,1544,1490,1402,1275,1199,874,775,684,523；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.71(s,3H,CH₃),2.70(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),2.99(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),3.30(t,J＝6.5Hz,2H,CH₂),4.24(t,J＝7.0Hz,2H,CH₂),7.05-7.35(m,8H,ArH),8.13(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.6,34.7,43.5,47.1,89.1,113.9,114.0,115.8,116.0,116.7,122.4,125.3,125.3,130.7,130.9,140.8,141.2,149.7,155.2,158.8,161.7,163.6；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀F₂N₄O₃S,[M-H]^-,469.1151；found,469.1153.

實(shí)施例9：合成3-氰基-1-(4-溴苯乙基)-6-(4-溴苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物9)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-溴苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,438mg)，Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(25mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)2.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(4-溴苯乙基)-6-(4-溴苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物9)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：127.0–128.2℃。

波譜數(shù)據(jù)為；Yellow solid,yield:88％,mp.127.0–128.2℃；IR(KBr)(νmax,cm 1):3287,2208,1627,1544,1490,1402,1275,1199,874,775,684,523；1HNMR(500MHz,DMSO-d6)(δ,ppm):2.71(s,3H,CH3),2.70(t,J＝7.00Hz,2H,CH2),2.99(t,J＝7.00Hz,2H,CH2),3.30(t,J＝6.50Hz,2H,CH2),4.24(t,J＝7.00Hz,2H,CH2),7.05,7.35(m,8H,ArH),8.13(s,1H,NH)；13C NMR(125MHz,DMSO-d6)(δ,ppm):19.4,31.6,34.7,43.5,47.1,89.1,113.9,114.0,115.8,116.0,116.7,122.4,125.3,125.3,130.7,130.9,140.8,141.2,149.7,155.2,158.8,161.7,163.6；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀F₂N₄O₃S,[M-H]-,469.1151；found,469.1153HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₁₆H₁₅Br₂N₄O₃S,[M-H]^-,589.9623；found,458.9620.

實(shí)施例10：合成3-氰基-1-(2,4-二氯芐基)6-(2,4-二氯芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物10)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(2,4-氯芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,418mg)K₂CO₃(1.5mmol,207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)2h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝12:1,得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(2,4-二氯芐基)6-(2,4-二氯芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物10)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：127.0–128.2℃。

波譜數(shù)據(jù)為；Yellow solid,yield:88％,mp.127.0–128.2℃；IIR(KBr)(νmax,cm^-1):3414,2220,1678,1549,1506,1203,869,767,701；¹H NMR(600MHz,DMSO-d6)(δ,ppm):2.66(s,3H,CH₃),2.66(s,2H,CH₂),2.93(s,2H,CH₂),3.25(s,2H,CH₂),4.22(m,2H,CH₂),7.17-7.52(m,8H,ArH),8.12(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d6)(δ,ppm):19.4,31.4,34.5,43.5,47.1,89.0,116.7,120.2,120.3,122.4,131.4,131.4,131.5,131.5,131.7,131.7,131.9,131.9,137.5,137.7,149.6,155.1,158.8；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀F₂N₄O₃S,[M-H]^-,469.1151；found,469.1153.

實(shí)施例11：合成3-氰基-1-(2,4-二氯苯乙基)-6-(2,4-二氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物11)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(2,4-二氯苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,447mg)，K₂CO₃(1.5mmol,207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至回流下,反應(yīng)1.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(2,4-二氯苯乙基)-6-(2,4-二氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物11)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：167.3–168.5℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3425,3276,2217,1663,1550,1473,1383,1324,1101,1052,867,824,764,564；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.67(s,3H,CH₃),2.93(m,2H,CH₂),3.08(m,2H,CH₂),3.38(s,2H,CH₂),4.37(s,2H,CH₂),7.33-7.57(m,6H,ArH),8.16(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,29.3,32.4,42.0,45.5,89.0,116.6,122.4,127.8,128.2,129.1,129.4,132.7,132.7,132.8,132.9,134.5,134.7,134.9,134.9.149.8,155.2,158.8,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₁₈Cl₄N₄O₃S,[M-H]^-,570.9736；found,570.9734.

實(shí)施例12：合成3-氰基-1-(4-氯苯乙基)-6-(4-氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物12)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-氟苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,379mg)，K₂CO₃(1.5mmol,207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(4-氯苯乙基)-6-(4-氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物12)，產(chǎn)率88％，熔點(diǎn)：71.0–72.2℃；

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3415,2216,1660,1584,1492,1408,1316,1230,1091,1015,816,767,612,415；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.3,34.4,43.6,47.2,89.0,116.7,122.4,128.8,128.8,129.0,129.0,131.0,131.0,131.1,131.1,131.8,131.9,137.0,137.2,149.6,155.1,158.8；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀Cl₂N₄O₃S[M-H]^-,501.0560；found,501.0561.

實(shí)施例13：合成3-氰基1-(4-氟苯乙基)-6-(4-氟苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物13)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-氟苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,347mg)，K₂CO₃(1.5mmol,207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)3.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析,所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝10:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(4-氟苯乙基)-6-((4-氟苯乙基)胺)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物13)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：100.5–101.0℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3416,2216,1638,1551,1497,1420,1329,1165,1125,1069,1018,845,773,598,474；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.1,34.3,43.8,47.4,89.0,98.3,115.5,115.7,115.7,115.9,116.8,122.4,125.8,131.0,131.0,131.0,131.1,134.2,149.7,155.1,158.5,160.7,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀F₂N₄O₃S[M-H]^-,469.1151；found,469.1152.

實(shí)施例14：合成3-氰基-1-(4-(三氟甲基)-芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物14)

在25毫升圓底燒瓶中加入2-硝基-N,N'-雙(4-三氟甲基)芐基胺基)乙烯(1mmol,419mg)，K₂CO₃(1.5mmol，207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)1h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝10:1,得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(4-(三氟甲基)-芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物14)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：159.1–160.2℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3551,3476,3413,2316,1638,1618,1552,1493,1328,1165,1124,1069,1018,845,773,599,475；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.74(s,3H,CH₃),4.17(s,2H,CH₂),5.47(s,2H,CH₂),7.14-7.68(m,8H,ArH),8.37(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.1,45.3,49.2,89.2,116.8,122.0,122.7,123.6,123.7,125.5,125.5,125.8,125.8,127.3,127.3,128.8,128.8,139.5,140.9,149.9,156.2,159.2,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₁₆F₆N₄O₃S[M-H]^-,541.0775；found,541.0773.

實(shí)施例15：合成3-氰基-1-(3-三氟甲基)苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物15)

在25毫升圓底燒瓶中加入2-硝基-N,N'-雙-(3-(三氟甲基)苯乙基胺基)乙烯(1mmol,447mg)，K₂CO₃(1.5mmol,207mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(3-三氟甲基)苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物15)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：73.3–73.9℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3549,3414,2935,2217,1664,1550,1494,1330,1164,1073,833,764,703,616,478；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.2,31.6,34.7,89.0,116.6,121.3,121.4,122.4,123.6,123.6,125.8,125.8,125.8,127.8,129.2,129.6,129.7 129.9,130.1 133.4,139.4,139.8,149.7,155.1,158.7,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₅H₂₀F₆N₄O₃S[M-H]^-,569.1088；found,569.1089.

實(shí)施例16：合成3-氰基-1-(4-甲基苯乙基)-6-(4-甲基苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物16)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-甲基苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,339mg)Cs₂CO₃(2mmol,650mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)2h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行重結(jié)晶(乙酸乙酯：石油醚＝1:20)，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(4-甲基苯乙基)-6-(4-甲基苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物16)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：150.9–152.0℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3550,3475,3415,2210,1617,1540,1494,1123,619,478；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,21.1,21.1,31.6,34.8,43.9,47.6,88.9,116.8,122.4,128.9,129.0,129.1,129.2,129.4,129.5,129.6,129.8,134.9,135.1,136.1,136.2,149.7,155.0,158.8,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₅H₂₆N₄O₃S[M-H]^-,461.1653；found,461.1652.

實(shí)施例17：合成3-氰基-1-(3-苯丙基)-6-(3-苯丙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物17)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(3-苯丙基胺基)乙烯(1mmol,339mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(3-苯丙基)-6-(3-苯丙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物17)，產(chǎn)率91％。熔點(diǎn)：131.7–132.6℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3549,3415,2930,2214,1636,1544,1497,1331,747,700,618,481；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.3,28.1,30.8,32.6,32.7,42.4,46.1,88.5,117.0,122.1,126.4,126.4,128.6,128.6,128.6,128.6,128.8,128.8,128.8,128.8,141.3,141.4,149.8,154.8,158.9；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₅H₂₆N₄O₃S[M-H]^-,461.1653；found,461.1653.

實(shí)施例18：合成3-氰基-1-(3,4-二氟芐基)-6-(3,4-二氟芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物18)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(3,4-二氟芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,355mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至回流溫度下,反應(yīng)2.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(3,4-二氟芐基)-6-(3,4-二氟芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物18)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：186.9–187.8℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3417,3321,2215,1632,1546,1465,1397,1291,1214,1121,879,767,647,573,424；¹H NMR(600MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.74(s,3H,CH₃),4.05(s,2H,CH₂),5.33(s,2H,CH₂),6.92-7.37(m,6H,ArH),8.21(s,1H,NH)；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,44.5,48.9,89.1,116.4,116.9,117.4,117.8,118.0,122.8,123.6,125.8,132.2,133.7,148.4,148.7,148.9,150.1,150.6,156.2,159.2,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₁H₁₄F₄N₄O₃S[M-H]^-,477.0650；found,477.0652.

實(shí)施例19：合成3-氰基1-(2,4-二氟芐基)-6-(2,4-二氟芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物19)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(2,4-氟芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,355mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝10:1得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基1-(2,4-二氟芐基)-6-(2,4-二氟芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物19)，產(chǎn)率85％。熔點(diǎn)：153.1–154.3℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3374,2216,1641,1608,1550,1504,1455,1321,1140,965,850,770,651,484；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.73(s,3H,CH₃),4.17(s,2H,CH₂),5.29(s,2H,CH₂),6.96-7.31(m,6H,ArH),8.39(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.5,41.3,43.1,89.3,104.1,104.3,104.6,111.8,116.7,118.7,122.6,128.9,132.3,150.3,156.4,158.9,159.6,161.2,161.5,161.7,163.5；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd forC₂₁H₁₄F₄N₄O₃S[M-H]^-,477.0650；found,477.0651.

實(shí)施例20：合成3-氰基-1-(4-甲基芐基)-6-((4-甲基芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物20)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(4-氟芐基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,311mg)Cs₂CO₃(1mmol,325mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)3.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1,得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)3-氰基-1-(4-甲基芐基)-6-((4-甲基芐胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物20)，產(chǎn)率88％。熔點(diǎn)：182.7–183.6℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3400,2215,1647,1552,1501,1460,1327,803,625,480；¹H NMR(500MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):2.24(s,3H,CH₃),2.32(s,3H,CH₃),2.69(s,3H,CH₃),4.08(s,2H,CH₂),5.37(s,2H,CH₂),6.73-7.15(m,8H,ArH),8.28(s,1H,NH)；¹³C NMR(125MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.5,21.1,21.2,45.2,49.4,88.9,116.9,122.4,126.8,126.8,128.3,128.3,129.2,129.2,129.6,129.6,131.5,133.1,137.2,137.5,149.7,155.8,159.2；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₂N₄O₃S[M-H]^-,433.1340；found,433.1340.

實(shí)施例21：合成3-氰基-1-(4-苯丁基)-6-((4-苯丁胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物21)

在25毫升圓底燒瓶中加入2-硝基-N,N'-雙-(4-苯丁基胺基)乙烯(1mmol,367mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝15:1,得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-(4-苯丁基)-6-((4-苯丁胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物21)，產(chǎn)率85％。熔點(diǎn)：131.9–133.0℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3551,3476,3414,3337,2929,2215,1639,1617,1551,1495,1452,1326,770,617,484；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.3,26.4,28.2,28.4,28.6,35.0,35.2,42.3,46.0,88.4,117.0,122.2,126.2,126.2,126.2,126.2,128.7,128.7,128.7,128.7,128.7,128.7,142.1,142.2,149.5,154.6,159.0；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₇H₃₀N₄O₃S[M-H]^-,489.1966；found,489.1966.

實(shí)施例22：合成3-氰基-1-丁基-6-(丁胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物22)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(丁基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,215mg)Cs₂CO₃(1.5mmol,487mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至60℃下,反應(yīng)1.5h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品，3-氰基-1-丁基-6-(丁胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物22)，產(chǎn)率89％。熔點(diǎn)：104.7–105.8℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3416,3339,2962,2930,2219,1636,1552,1550,1329,1117,766,535；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):13.9,14.1,19.3,19.8,19.9,28.8,31.2,42.3,45.9,88.3,117.0,121.1,149.5,154.6,158.9；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₁₅H₂₂N₄O₃S[M-H]^-,337.1340；found,337.1341.

實(shí)施例23：合成3-氰基-1-(3-溴苯乙基)-6-(3-溴苯乙基胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物23)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(3-溴苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,447mg)，K₂CO₃(2mmol,276mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至70℃下,反應(yīng)3h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行重結(jié)晶(乙酸乙酯：石油醚＝1:15)，，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品得黃色固體，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(3-溴苯乙基)-6-(3-溴苯乙基胺基)-4-(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物23)，產(chǎn)率89％。熔點(diǎn)：104.7–105.8℃。波譜數(shù)據(jù)為；

Yellow solid,yield:89％,mp.162.2–163.1℃；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3417,1638,1618,1561,1220,617,479；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.0,34.1,43.3,46.8,89.0,116.7,122.5,129.6,129.7,129.8,129.9,129.9,131.1,131.2,131.3,131.4,131.6,139.2,139.5,149.7,155.2,158.7,；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₈H₁₃Cl₄N₄O₃S[M-H]^-,569.9854；found,569.9850.

實(shí)施例24：合成3-氰基-1-(3-氯苯乙基)-6-(3-氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物24)

在25毫升圓底燒瓶中加入N,N'-雙-(3-氯苯乙基胺基)-2-硝基乙烯(1mmol,380mg)K₂CO₃(1mmol,138mg)和乙基-2-氰基-3,3-二(甲硫基)丙烯酸酯(2mmol,434mg),加入乙腈溶劑(15mL)磁力攪拌下加熱至回流溫度下,反應(yīng)4h。TLC監(jiān)測(cè)反應(yīng)，待原料點(diǎn)完全消失后，用乙酸乙酯對(duì)反應(yīng)液進(jìn)行萃取，取有機(jī)層，然后用無(wú)水Na₂SO₄進(jìn)行干燥，將經(jīng)過(guò)干燥的液體濃縮蒸干，之后對(duì)濃縮蒸干物進(jìn)行柱層析，所述的柱色譜分離采用的溶劑為石油醚/乙酸乙酯的混合溶劑＝20:1，得黃色固體，紅外燈下干燥產(chǎn)品，紅外燈下干燥后得到產(chǎn)品3-氰基-1-(3-氯苯乙基)-6-(3-氯苯乙胺基)-4(甲硫基)-5-硝基吡啶-2-酮(化合物24)，產(chǎn)率93％。熔點(diǎn)：130.0–131.5℃。

波譜數(shù)據(jù)為；IR(KBr)(νmax,cm^-1):3550,3477,3414,1637,1617,1507,1201,767,621,475；¹³C NMR(150MHz,DMSO-d₆)(δ,ppm):19.4,31.5,34.7,43.5,47.0,89.1,116.77,122.4,127.1,127.1,127.9,128.0,129.1,130.7,130.8,130.8,133.5,133.7,140.5,140.8,149.7,155.1,158.7；HRMS(ESI-TOF,m/z):calcd for C₂₃H₂₀Cl₂N₄O₃S[M-H]^-,501.0560；found,501.0564.

以上所合成的吡啶-2-酮類(lèi)衍生物結(jié)構(gòu)如表1所示：

表1吡啶-2-酮類(lèi)衍生物結(jié)構(gòu)式

第二部分本發(fā)明化合物的抗腫瘤效果：

本發(fā)明的化合物對(duì)四種人源腫瘤細(xì)胞株SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)、SK-OV-3(人卵巢癌)、A549(人肺癌)、Hela(人宮頸癌細(xì)胞)進(jìn)行體外抗腫瘤活性研究(表2)。研究結(jié)果表明，所發(fā)明的化合物5，6，8，9，11～13，15～17，19～20，23對(duì)SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)的IC₅₀＝1.505～9.811，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝11.001)。證明這13個(gè)化合物體外抗SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)活性均優(yōu)于順鉑；所發(fā)明化合物5，8，14對(duì)SK-OV-3(人卵巢癌)的IC₅₀值小于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑的IC₅₀值；所發(fā)明的化合物5，6，8，9，11，23對(duì)A549(人肺癌)的IC₅₀＝2.990～8.324，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝15.320)，表明這6個(gè)化合物對(duì)A549(人肺癌)具有優(yōu)異的抗腫瘤活性；所發(fā)明的化合物5，12對(duì)Hela(人宮頸癌細(xì)胞)的IC₅₀值分別為3.264、4.137，均小于對(duì)照藥物順鉑(IC₅₀＝9.941)，表明這2個(gè)化合物對(duì)Hela(人宮頸癌細(xì)胞)具有優(yōu)異的抗腫瘤活性?？傮w來(lái)看，化合物5對(duì)四種人源腫瘤細(xì)胞株SGC-7901(人胃腺癌細(xì)胞)，SK-OV-3(人卵巢癌)，A549(人肺癌)，Hela(人宮頸癌細(xì)胞)的抗腫瘤活性均優(yōu)于陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑。同時(shí)我們隨機(jī)選擇了本發(fā)明的2個(gè)化合物即化合物1和3對(duì)篩選人源HCT116(直-結(jié)腸癌)的抗腫瘤活性(表3)，結(jié)果表明，這兩個(gè)化合物對(duì)HCT116(直-結(jié)腸癌)與陽(yáng)性對(duì)照藥物順鉑(DPP)具有幾乎相當(dāng)?shù)幕钚浴?/p>

表2化合物1～23對(duì)人源腫瘤細(xì)胞株的抗腫瘤活性篩選

表3化合物1與化合物3對(duì)HCT116(結(jié)腸癌細(xì)胞)抗腫瘤活性篩選

以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理、主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說(shuō)明書(shū)中描述的只是說(shuō)明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書(shū)及其等效物界定。