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焦磷酸測序法檢測TRIB3基因多態(tài)性的試劑盒及方法與流程

文檔序號:12609718閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種焦磷酸測序法檢測TRIB3基因多態(tài)性的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括如下引物:

(1)擴增引物:

上游引物:5′-GATCGTGCAACTGCTGTGG-3′;

下游引物:5′-TCCCAGGCCTCCTGTGGT-3′;所述下游引物的5'-進行生物素標記;

(2)測序引物:5′-GGGCGGGCGGGCCTA-3′。

2.一種應用權利要求1所述的試劑盒檢測TRIB3基因多態(tài)性的方法,包括如下步驟:

(1)DNA提取;

(2)聚合酶鏈反應:

配制50μl PCR擴增體系,包含:2×Premix 25μl,ddH2O 23μl,模板2μl,其中,所述2×Premix中含有權利要求1所述的上游引物和下游引物;然后依次在95℃ 30S,55℃ 30S,72℃ 30S進行35個循環(huán),再在72℃保持5min,最終保持在18℃,得擴增產(chǎn)物;

(3)對擴增產(chǎn)物進行純化;

(4)對經(jīng)步驟(3)處理后的擴增產(chǎn)物焦磷酸測序及結果分析。

3.權利要求1所述試劑盒在制備2型糖尿病心血管并發(fā)癥的預后判斷試劑中的應用。

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