技術(shù)特征：

1.一種T細(xì)胞受體(TCR)，其特征在于，其具有結(jié)合ILSLELMKL-HLA A0201復(fù)合物的活性。

2.如權(quán)利要求1所述的TCR，其特征在于，其包含TCRα鏈可變域和TCRβ鏈可變域，所述TCRα鏈可變域包含3個(gè)CDR區(qū)，所述TCRα鏈可變域的3個(gè)CDR區(qū)的基準(zhǔn)序列如下，

CDR1α：DRVSQS

CDR2α：IYSNGD

CDR3α：AATNSGYALN，并且含有至少一個(gè)下列突變：

突變前的殘基突變后的殘基CDR1α的第2位RI、K或MCDR1α的第3位VY或LCDR1α的第4位SNCDR1α的第6位SACDR2α的第1位ILCDR2α的第3位SRCDR2α的第4位NGCDR2α的第6位DS或TCDR3α的第5位SDCDR3α的第7位YICDR3α的第8位AH、I、V或LCDR3α的第9位LF、M或I

和/或所述TCRβ鏈可變域包含3個(gè)CDR區(qū)，所述TCRβ鏈可變域的3個(gè)CDR區(qū)的基準(zhǔn)序列如下，

CDR1β：GTSNPN

CDR2β：SVGIG

CDR3β：AWSVDGAEQY，并且含有至少一個(gè)下列突變：

突變前的殘基突變后的殘基CDR1β的第1位GL或PCDR1β的第2位TS、H、R或DCDR1β的第3位SN、Y或DCDR1β的第4位NP、T、I或LCDR1β的第5位PRCDR1β的第6位NL、A或ICDR2β的第4位IVCDR2β的第5位GRCDR3β的第1位ASCDR3β的第2位WYCDR3β的第4位VL。

3.一種T細(xì)胞受體(TCR)，其具有結(jié)合ILSLELMKL-HLA A0201復(fù)合物的活性，并包含TCRα鏈可變域和TCRβ鏈可變域，其特征在于，所述TCR在SEQ ID NO：36所示的α鏈可變域中發(fā)生突變，所述突變的氨基酸殘基位點(diǎn)包括28R、29V、30S、32S、50I、52S、53N、55D、94S、96Y、97A或98L中的一個(gè)或多個(gè)，其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:36所示的編號(hào)；和/或所述TCR在SEQ ID NO：37所示的β鏈可變域中發(fā)生突變，所述突變的氨基酸殘基位點(diǎn)包括27G、28T、29S、30N、31P、32N、53I、54G、92A、93W或95V中的一個(gè)或多個(gè)，其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:37所示的編號(hào)。

4.如權(quán)利要求3所述的TCR，其特征在于，突變后的所述TCRα鏈可變域包括選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基：28I、28K、或28M；29Y或29L；30N；32A；50L；52R；53G；55S或55T；94D；96I；97H、97I、97V或97L；98M、98I或98F；和/或突變后的所述TCRβ鏈可變域包括選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基：27P或27L；28H、28S、28R或28D；29N、29Y或29D；30P、30T、30I或30L；31R；32L、32A或32I；53V；54R；92S；93Y；95L。

5.一種T細(xì)胞受體(TCR)，其特征在于，所述TCR包含TCRα鏈可變域和TCRβ鏈可變域，所述TCRβ鏈可變域包含CDR1β、CDR2β和CDR3β，其中所述CDR3β包含序列：DGAEQY，并且其長(zhǎng)度為10個(gè)氨基酸殘基。

6.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR是αβ異質(zhì)二聚TCR，所述TCR的α鏈可變域包含與SEQ ID NO:36所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性的氨基酸序列；和/或所述TCR的β鏈可變域包含與SEQ ID NO:37所示的氨基酸序列有至少90％的序列同源性的氨基酸序列。

7.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR包含(ⅰ)除其跨膜結(jié)構(gòu)域以外的全部或部分TCRα鏈，和(ⅱ)除其跨膜結(jié)構(gòu)域以外的全部或部分TCRβ鏈，其中(ⅰ)和(ⅱ)均包含TCR鏈的可變域和至少一部分恒定域。

8.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈可變域氨基酸序列包含SEQ ID NO:40-56中任一氨基酸序列；和/或

所述TCR的β鏈可變域氨基酸序列包含SEQ ID NO:57-69中任一氨基酸序列。

9.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR具有選自下組的CDR：

10.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈可變區(qū)與β鏈恒定區(qū)之間含有人工鏈間二硫鍵。

11.如權(quán)利要求10所述的TCR，其特征在于，在所述TCR中形成人工鏈間二硫鍵的半胱氨酸殘基取代了選自下列的一組或多組位點(diǎn)：

TRAV的第46位氨基酸和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的第60位氨基酸；

TRAV的第47位氨基酸和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的61位氨基酸；

TRAV的第46位氨基酸和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的第61位氨基酸；或

TRAV的第47位氨基酸和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的第60位氨基酸。

12.如權(quán)利要求10或11所述的TCR，其特征在于，所述TCR包含α鏈可變域和β鏈可變域以及除跨膜結(jié)構(gòu)域以外的全部或部分β鏈恒定域，但其不包含α鏈恒定域，所述TCR的α鏈可變域與β鏈形成異質(zhì)二聚體。

13.如權(quán)利要求1-9中任一所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈恒定區(qū)與β鏈恒定區(qū)之間含有人工鏈間二硫鍵。

14.如權(quán)利要求13所述的TCR，其特征在于，在所述TCR中，形成人工鏈間二硫鍵的半胱氨酸殘基取代了選自下列的一組或多組位點(diǎn)：

TRAC*01外顯子1的Thr48和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Ser57；

TRAC*01外顯子1的Thr45和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Ser77；

TRAC*01外顯子1的Tyr10和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Ser17；

TRAC*01外顯子1的Thr45和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Asp59；

TRAC*01外顯子1的Ser15和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Glu15；

TRAC*01外顯子1的Arg53和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Ser54；TRAC*01外顯子1的Pro89和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Ala19；和

TRAC*01外顯子1的Tyr10和TRBC1*01或TRBC2*01外顯子1的Glu20。

15.如權(quán)利要求1-5、7-14中任一所述的TCR，其特征在于，所述TCR是單鏈。

16.如權(quán)利要求15所述的TCR，其特征在于，所述TCR是由α鏈可變域和β鏈可變域組成的單鏈TCR，所述α鏈可變域和β鏈可變域由一柔性短肽序列(linker)連接，并且所述TCR的疏水芯發(fā)生突變。

17.如權(quán)利要求15或16所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈可變域包含與SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列有至少90％同源性的氨基酸序列；和/或所述TCR的β鏈可變域包含與SEQ ID NO：4所示的氨基酸序列有至少90％同源性的氨基酸序列。

18.如權(quán)利要求15-19中任一所述TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈可變域氨基酸序列包含SEQ ID NO:6-22中任一氨基酸序列；和/或

所述TCR的β鏈可變域氨基酸序列包含SEQ ID NO:23-35中任一氨基酸序列。

19.如權(quán)利要求15-20中任一所述TCR，其特征在于，所述TCR選自下組：

20.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR的疏水芯突變發(fā)生在SEQ ID NO:36所示α鏈可變域選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基位點(diǎn)：19A、21L和79S；其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:36所示的編號(hào)；和/或

所述疏水芯突變發(fā)生在SEQ ID NO:37所示β鏈可變域選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基位點(diǎn)：13Q、19L、64L、78S和81L，其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:37所示的編號(hào)。

21.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，疏水芯突變后的所述TCR的α鏈可變域包括選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基：19V、21I和79I；其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:36所示的編號(hào)；和/或疏水芯突變后的所述TCR的β鏈可變域包括選自下組的一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基：13V、19V、64Y、78I和81V；其中，氨基酸殘基編號(hào)采用SEQ ID NO:37所示的編號(hào)。

22.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR是可溶的。

23.如以上任一權(quán)利要求所述的TCR，其特征在于，所述TCR的α鏈和/或β鏈的C-或N-末端結(jié)合有偶聯(lián)物。

24.如權(quán)利要求23所述的TCR，其特征在于，與所述TCR結(jié)合的偶聯(lián)物為可檢測(cè)標(biāo)記物、治療劑、PK修飾部分或任何這些物質(zhì)的組合。

25.如權(quán)利要求24所述的TCR，其特征在于，與所述TCR結(jié)合的治療劑為連接于所述TCR的α或β鏈的C-或N-末端的抗-CD3抗體。

26.如權(quán)利要求25所述的TCR，其特征在于，所述與抗-CD3抗體結(jié)合的TCR的α鏈可變域氨基酸序列選自：SEQ ID NO:6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55和56；和/或所述與抗-CD3抗體結(jié)合的TCR的β鏈可變域氨基酸序列選自：SEQ ID NO:23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、57、58、59、60、61、62、63、64、65、66、67、68、和69。

27.一種多價(jià)TCR復(fù)合物，其特征在于，包含至少兩個(gè)TCR分子，并且其中的至少一個(gè)TCR分子為上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的TCR。

28.一種核酸分子，其特征在于，所述核酸分子包含編碼權(quán)利要求1-26任一所述的TCR的核酸序列或其互補(bǔ)序列；

29.一種載體，其特征在于，所述的載體含有權(quán)利要求28中所述的核酸分子。

30.一種宿主細(xì)胞，其特征在于，所述的宿主細(xì)胞中含有權(quán)利要求29中所述的載體或染色體中整合有外源的權(quán)利要求28中所述的核酸分子。

31.一種分離的細(xì)胞，其特征在于，所述細(xì)胞表達(dá)權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的TCR。

32.一種藥物組合物，其特征在于，所述組合物含有藥學(xué)上可接受的載體以及權(quán)利要求1-26中任一項(xiàng)所述的TCR、或權(quán)利要求27中所述的TCR復(fù)合物、或權(quán)利要求31中所述的細(xì)胞。

33.一種治療疾病的方法，其特征在于，包括給需要治療的對(duì)象施用權(quán)利要求1-26中任一所述的TCR、或權(quán)利要求27中所述的TCR復(fù)合物、或權(quán)利要求31中所述的細(xì)胞、或權(quán)利要求32中所述的藥物組合物。

34.權(quán)利要求1-26任一項(xiàng)所述的T細(xì)胞受體、權(quán)利要求27中所述的TCR復(fù)合物或權(quán)利要求31中所述細(xì)胞的用途，其特征在于，用于制備治療腫瘤的藥物。

35.一種制備權(quán)利要求1-26中任一所述的T細(xì)胞受體的方法，其特征在于，包括步驟：

(i)培養(yǎng)權(quán)利要求30所述的宿主細(xì)胞，從而表達(dá)權(quán)利要求1-26中任一所述的T細(xì)胞受體；

(ii)分離或純化出所述的T細(xì)胞受體。