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固定過氧化氫酶的明膠?二氧化硅雜化微球制備方法與流程

文檔序號:12108725閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種固定過氧化氫酶的明膠-二氧化硅雜化微球的方法,該方法采用包括微孔膜組件的裝置,以微孔膜滲透乳化過程為主加以實現(xiàn)的,其特征在于包括以下步驟:

1)在容器中,于溫度為40℃-70℃及攪拌下將固體明膠溶解于去離子水中,配制成濃度為0.05-0.5克/毫升的明膠溶液,再向其中加入溶解過氧化氫酶,使過氧化氫酶濃度保持為0.1-2毫克/升,制得水相明膠/過氧化氫酶溶液;

2)在容器中,于溫度為40℃-70℃及攪拌下將油溶性乳化劑司班-80加入到液體石蠟中,配制成含有司班-80質(zhì)量濃度為0.25-4.0% 的液體石蠟油,稱為油相;

3)按步驟1)制的水相明膠/過氧化氫酶溶液與步驟2)制的油相液體石蠟油的體積比為1:(2~15),在溫度40℃-70℃及200-1200rpm速度下攪拌下,將水相明膠/過氧化氫酶溶液加入油相中,得到粗乳液;

4)將步驟3)制的粗乳液加入裝配有膜孔徑為3.5-10.2微米的微孔膜的膜乳化裝置內(nèi),以20kPa-50kPa壓力使粗乳液通過微孔膜腔,進入收集器后,再回加入膜乳化器中,如此循環(huán)2-10次,得到多級乳化的W/O型乳液;

5)以正硅酸乙酯與去離子水按摩爾比為1:(0.05-0.4)混合,并向該混合中,按催化劑鹽酸與正硅酸乙酯摩爾比為(0.005-0.02):1加入鹽酸,然后在室溫下超聲振蕩直至得到澄清透明的溶液,再用去離子水稀釋溶液至濃度20-150mM,并且用NaOH將稀釋溶液的pH值調(diào)至6.0-8.0,得到正硅酸乙酯水解液;

6)在400rpm速度攪拌下,以步驟5)制得的正硅酸乙酯水解液與步驟4)制得的多級乳化W/O型乳液按體積比為1:(1.0-4.0),將多級乳化W/O型乳液加入正硅酸乙酯水解液中,加畢后在溫度0℃-8℃冰水浴中,交聯(lián)固化0.5-4小時后,再分別用異丙醇和丙酮進行洗滌至去除油相為止,然后在空氣中自然干燥得到用于固定化酶的明膠-二氧化硅雜化微球。

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