技術(shù)特征：

1.一種高活性的肝素酶I(HepI)及其高效可溶性基因工程表達(dá)生產(chǎn)方法，其特征在于：依照肝素酶I的空間結(jié)構(gòu)分析，改造獲得一種比酶活較野生型提高48％的高活性肝素酶Hep¹⁶⁹，然后利用分子生物學(xué)技術(shù)建立了Hep¹⁶⁹的高效可溶性基因工程表達(dá)體系。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述高活性肝素酶I，其氨基酸序列如附錄序列表所示。

3.一種如權(quán)利要求1所述的Hep¹⁶⁹高效可溶性基因工程表達(dá)體系，其特征在于：

(1)針對宿主密碼子偏愛性，對Hep¹⁶⁹的編碼基因進行優(yōu)化，以大腸桿菌為例，其優(yōu)化后的序列如附錄序列表所示；

(2)為實現(xiàn)高效可溶性基因工程表達(dá)，將Hep¹⁶⁹與可促進二硫鍵形成、空間折疊的融合標(biāo)簽進行融合表達(dá)，這些融合標(biāo)簽包括SUMO、泛素、GST、Trx、DsbC、MBP等

(3)為了確保融合標(biāo)簽不影響Hep¹⁶⁹的空間結(jié)構(gòu)及活性，在肝素酶I基因的N端引入柔性linker，可用的柔性linker包括(G₄S)n(n＝1-4)、GSGGSG、GSGGSGG、GSGGSGGG等。

(4)為了在后續(xù)純化中切去融合標(biāo)簽，在融合標(biāo)簽與HepI¹⁶⁹間引入了蛋白酶切割位點，可用的蛋白酶包括腸激酶、SUMO蛋白酶、凝血酶、TEV酶、Xa因子、3C蛋白酶等；

(5)將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至基因工程宿主菌，所述宿主菌包括大腸桿菌、酵母菌、乳酸菌、枯草芽孢桿菌等。

4.一種如權(quán)利要求1所述的高活性肝素酶I在低分子量肝素制備等領(lǐng)域中的應(yīng)用。