技術特征：

1.一種同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的試劑盒，其特征在于，包括一對通用引物、一條熒光探針和根據(jù)金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素特異性基因設計的雜交連接探針；其中，

所述通用引物的序列為SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示；

所述熒光探針為ROX熒光探針，序列為SEQ ID NO：3所示；

所述根據(jù)金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素特異性基因設計的雜交連接探針如下：

金黃色葡萄球菌的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：16和SEQ ID NO：17所示；

A型腸毒素的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：18和SEQ ID NO：19所示；

B型腸毒素的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：20和SEQ ID NO：21所示；

C型腸毒素的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：22和SEQ ID NO：23所示；

D型腸毒素的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：24、SEQ ID NO：25所示；

E型腸毒素的雜交連接探針序列為SEQ ID NO：26和SEQ ID NO：27所示。

2.如權利要求1所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的試劑盒，其特征在于，所述熒光探針ROX同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素基因，其Tm值分別為，E型腸毒素：Tm值54.0±1℃，D型腸毒素：Tm值57.5±1℃，金黃色葡萄球菌耐熱核酸酶編碼基因：Tm值62.5±1℃，C型腸毒素：Tm值66.0±1℃，B型腸毒素：Tm值70.0±1℃，A型腸毒素：Tm值74.5±1℃。

3.如權利要求1或2所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括雜交連接酶和雜交連接酶緩沖液。

4.如權利要求1或2所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括PCR緩沖液、MgCl₂、dNTP、rTaq酶和ddH₂O。

5.一種同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

設計通用引物、熒光探針和根據(jù)金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素特異性基因設計的雜交連接探針，比檢測其雜交熔點溫度，制備權利要求1-4任一所述的試劑盒；

提取待測樣本所含可疑菌的DNA；

以所述DNA作為模板，使用所述雜交連接探針識別并與待測的目的基因進行雜交連接反應，雜交連接酶催化與所述模板互補的待檢位點的上下游雜交探針之間形成3’-5’磷酸二酯鍵，獲得一條完整的單鏈雜交連接產(chǎn)物，將待測目的基因序列中的信息轉移到所述雜交連接產(chǎn)物中；

通過一對通用引物和一條熒光探針進行熒光PCR擴增所述雜交連接產(chǎn)物，同時進行熔解曲線分析，由低到高的變化過程中出不同的Tm值，完成熔解曲線分析，通過產(chǎn)物溶解峰的溫度和形狀差異，判斷是否含有金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素，其中，所述熒光探針與金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素中的多種匹配程度不同的靶序列雜交，形成穩(wěn)定性不同的雙鏈雜交體。

6.根據(jù)權利要求5所述的同時檢測10種金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的檢測方法，其特征在于，所述雜交連接反應的試劑體系包括：

7.根據(jù)權利要求5或6所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的檢測方法，其特征在于，所述雜交連接反應條件：95℃預變性5min，60℃連接80min，98℃高溫變性5min。

8.根據(jù)權利要求5所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的方法，其特征在于，

所述熒光PCR擴增處理的試劑體系包括：

9.根據(jù)權利要求5或8所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的檢測方法，其特征在于，所述熒光PCR擴增處理的條件為：95℃預變性3min；然后經(jīng)95℃變性5s，退火58℃，15s同時采集熒光信號，延伸74℃，15s，40個循環(huán)。

10.根據(jù)權利要求5、6或8所述的同時檢測金黃色葡萄球菌及其5種腸毒素的檢測方法，其特征在于，所述溶解曲線分析處理的條件為：95℃變性30s，40℃雜交1min，從40℃-82℃逐步升溫每上升0.5℃采集一次熒光信號。