本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及前列腺癌相關(guān)基因的表達(dá)水平來診斷癌癥并監(jiān)控治療效果的產(chǎn)品應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：前列腺癌是常見的男性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一。世界范圍內(nèi)，前列腺癌發(fā)病率在男性所有惡性腫瘤中位居第二，在美國前列腺癌的發(fā)病率已經(jīng)超過肺癌，成為第一位危害男性健康的腫瘤。亞洲前列腺癌的發(fā)病率遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于歐美國家，但近年來呈現(xiàn)上升趨勢(shì)，且增長(zhǎng)比歐美發(fā)達(dá)國家更加迅速。前列腺癌患者主要是老年男性，一般在50歲以后發(fā)病，95％發(fā)生于60歲以上的老年男性，發(fā)生率持續(xù)地隨著年齡增長(zhǎng)而增加。前列腺癌早期多無任何癥狀，即使有所不適，也不足以引起病人的重視，當(dāng)腫瘤增大壓迫尿道時(shí)，又往往與前列腺增生相混淆。在我國約80％的病人首先發(fā)現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移病灶才發(fā)現(xiàn)前列腺癌。此時(shí)，病變已達(dá)晚期，預(yù)后不良。前列腺癌的臨床診斷方式目前主要有血清前列腺特異性抗原(PSA)檢測(cè)、直腸指檢、直腸超聲波檢測(cè)、活組織病理檢查等。PSA(ProstateSpecificAntigen)為前列腺組織特異性抗原，由前列腺的解剖結(jié)構(gòu)可知PSA通過前列腺導(dǎo)管進(jìn)入血液和尿液中，一些病例或生理情況下PSA會(huì)進(jìn)入血液中去，如前列腺炎癥、尿潴留、前列腺感染、前列腺增生和前列腺癌等，因此通過檢測(cè)血清PSA水平來預(yù)測(cè)前列腺癌具有一定的假陽性率。從1991年開始，檢測(cè)血清中PSA含量用于預(yù)測(cè)前列腺癌，含量高于4ng/mL認(rèn)為是前列腺癌陽性，靈敏度79％，特異性20％-59％，平均靈敏度約33％，在濃度4-10ng/mL灰區(qū)部分，特異性是最低的，這時(shí)往往需要通過侵入性的穿刺活檢進(jìn)行確定，給患者帶來極大痛苦及精神和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。所以PSA并不能較好的作為診斷前列腺癌的標(biāo)志物。直腸指檢是最簡(jiǎn)單、最經(jīng)濟(jì)實(shí)用的方法，主要通過醫(yī)生的食指觸摸前列腺，用以發(fā)現(xiàn)很多無癥狀的前列腺癌患者，有可能獲得早期診斷及根治的機(jī)會(huì)。但以上的方法都存在局限性。例如直腸指檢的局限性主要在4個(gè)方面：(1)患者前列腺腫塊不大時(shí)，易漏診；(2)部分患者前列腺癌腫大不明顯，但已屬于晚期，不易根治；(3)患者直腸有疾患時(shí)不能使用此檢測(cè)；(4)醫(yī)生經(jīng)驗(yàn)不足時(shí)可能有漏診或者誤診的可能。假基因與正?；蛴邢嗨频男蛄?，但是與正常的基因存在結(jié)構(gòu)上的差異。這些差異包括在不同部位上程度不等的核苷酸缺失或插入，在基因內(nèi)含子和外顯子連接區(qū)發(fā)生序列變化，在編碼序列當(dāng)中含有終止密碼子，或在轉(zhuǎn)錄啟動(dòng)區(qū)出現(xiàn)缺陷等。這些變化使此類基因不能轉(zhuǎn)錄翻譯，或者產(chǎn)生有缺陷的蛋白質(zhì)從而失去原有的生物學(xué)功能。長(zhǎng)期以來，人們認(rèn)為假基因是貌似正常、卻沒有功能的“死亡基因”，是基因組進(jìn)化的“化石記錄”。但是近年來，關(guān)于假基因的討論日益增多，越來越多的試驗(yàn)證實(shí)假基因能夠轉(zhuǎn)錄并且表達(dá)。假基因在基因表達(dá)調(diào)控、基因組進(jìn)化等方面發(fā)揮著重要作用。目前，對(duì)于中晚期前列腺癌患者，手術(shù)治療的效果差，大多數(shù)采用藥物治療。根據(jù)不同的病情可以采用化學(xué)藥物治療、外放射治療、放射性核素內(nèi)放射治療以及各種療法的綜合應(yīng)用等。然而，放化療藥物不僅作用于腫瘤，還可以作用于腫瘤周圍健康的組織，因而在殺傷腫瘤的同時(shí)，也給機(jī)體帶來了很大的副作用，最終影響對(duì)腫瘤的治療效果。因此，本領(lǐng)域迫切需要開發(fā)早期判斷前列腺癌的特異性標(biāo)志物，并開發(fā)前列腺癌的靶向藥物。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了實(shí)現(xiàn)前列腺癌的早期診斷，預(yù)后評(píng)估，個(gè)體化治療，本發(fā)明的目的之一在于提供用于檢測(cè)前列腺癌的標(biāo)記物。本發(fā)明的目的之二在于提供所述的標(biāo)記物在制備前列腺癌診斷和預(yù)后產(chǎn)品中的應(yīng)用。本發(fā)明的目的之三是在于提供一種前列腺癌診斷或預(yù)后評(píng)估試劑盒。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明首先提供用于檢測(cè)前列腺癌標(biāo)記物，所述的標(biāo)記物選自以下PPIEL(NR_003929.2，pseudogene)、RAET1K(NR_024045.1，pseudogene)和/或MBL1P(NR_002724.2，pseudogene)中的一個(gè)或多個(gè)基因。優(yōu)選地，所述基因在前列腺癌組織中均表達(dá)下調(diào)。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供了所述的標(biāo)記物在制備前列腺癌診斷和預(yù)后產(chǎn)品中的應(yīng)用。優(yōu)選地，所述診斷和預(yù)后為診斷、療效評(píng)估或轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)監(jiān)控。優(yōu)選地，所述產(chǎn)品包括檢測(cè)試劑或試劑盒。優(yōu)選地，所述檢測(cè)試劑包括用熒光定量PCR方法、基因芯片或RNA測(cè)序檢測(cè)待測(cè)樣品中上述基因的相對(duì)含量來診斷前列腺癌。優(yōu)選地，所述基因芯片包括固相載體以及固定在所述固相載體上的寡核苷酸探針，所述寡核苷酸探針包括特異性地對(duì)應(yīng)于上面所述的基因核苷酸的部分或全部序列。優(yōu)選地，所述的基因的相對(duì)含量為待測(cè)樣品中基因表達(dá)水平相比于對(duì)照的表達(dá)水平。優(yōu)選地，所述待測(cè)樣品包括受試者的細(xì)胞組織樣品和血液樣品；所述細(xì)胞組織樣品為前列腺癌組織樣品；所述前列腺癌組織樣本包括治療前的或治療后的組織樣本；所述對(duì)照為癌旁組織樣品；所述癌旁組織為正常組織。優(yōu)選地，所述治療包括施用手術(shù)干涉，化療，放療，藥物治療或其組合。優(yōu)選地，所述的檢測(cè)基因的表達(dá)水平包括檢測(cè)轉(zhuǎn)錄物水平。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種前列腺癌診斷或預(yù)后評(píng)估試劑盒，所述試劑盒包括特異性擴(kuò)增PPIEL、RAET1K和/或MBL1P中的一組或多組的引物序列。優(yōu)選地，所述引物序列包括：PPIEL：SEQIDNO.1和2；RAET1K：SEQIDNO.3和4；和/或MBL1P：SEQIDNO.5和6。優(yōu)選地，所述試劑盒還包括10×Buffer、dNTP、MgCl2、Taq酶和SYBRGreen熒光染料。所述試劑盒含有人正常的前列腺組織或細(xì)胞的總RNA或DNA。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種檢測(cè)受試者中存在前列腺癌的體外方法。所述方法包括確定來自受試者第一樣品中一個(gè)或多個(gè)基因的表達(dá)水平以獲得測(cè)定值，所述基因選自：PPIEL、RAET1K和/或MBL1P。以及將所述的測(cè)定值與參考值相比較，測(cè)定值明顯低于參考值表明所述受試者患有前列腺癌。所述的參照水平是正常細(xì)胞中上述基因的水平。進(jìn)一步地，本發(fā)明提供一種評(píng)估對(duì)受試者的前列腺癌治療效果的體外方法。所述方法包括確定來自受試者的一個(gè)或多個(gè)基因的相對(duì)含量以獲得第一值，所述基因選自：PPIEL、RAET1K和/或MBL1P。對(duì)受試者實(shí)施癌癥治療，確定在其后由受試者獲得的后續(xù)樣品中，所述的一個(gè)或多個(gè)相同的基因的相對(duì)含量以獲得治療值；和將所述的第一值與所述治療值相比較。評(píng)估療效定為治療值高于所述第一值的10％，表明所述治療是有效的，低于或等于10％，說明所述治療是無效的。優(yōu)選地，所述第一和后續(xù)樣品是已知的或被懷疑包含前列腺癌組織或細(xì)胞，例如已知的或被懷疑包含循環(huán)前列腺癌細(xì)胞(CTC)的血液樣品，或已知的或被懷疑含有前列腺癌細(xì)胞的活檢樣品。本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明公開了一組與前列腺癌相關(guān)的基因，并進(jìn)一步證實(shí)這些基因的表達(dá)水平在前列腺癌組織中表達(dá)下調(diào)。利用一個(gè)或多個(gè)基因聯(lián)合檢測(cè)前列腺癌不僅能夠快速有效的做到早期檢測(cè)、預(yù)后評(píng)估，其精確度大大提高，而且為基因治療、藥物治療等臨床應(yīng)用提供了治療靶點(diǎn)和重要依據(jù)。附圖說明圖1分別為PPIEL、RAET1K和/或MBL1P在前列腺癌組織和癌旁組織的表達(dá)情況。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實(shí)施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段，所用的試劑可以商業(yè)購買得到。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常為本領(lǐng)域常規(guī)方法，如按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆，實(shí)驗(yàn)手冊(cè)(第三版)(科學(xué)出版社，2002)中的所述條件，或按照試劑制造廠家所建議的條件。本發(fā)明的發(fā)明人對(duì)前列腺癌組織樣本及癌旁組織樣本進(jìn)行高通量測(cè)序，通過生物信息學(xué)方法進(jìn)行基因篩選，挑選3個(gè)候選基因：PPIEL、RAET1K和MBL1P，現(xiàn)有研究中并沒有關(guān)于上述基因和前列腺癌相關(guān)的報(bào)道，進(jìn)一步，發(fā)明人進(jìn)行了分子生物學(xué)方法驗(yàn)證，證實(shí)了上述基因在前列腺癌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)。PPIEL(peptidylprolylisomeraseElikepseudogene,肽基脯氨酰異構(gòu)酶E類假基因)位于1號(hào)染色體上，是與PPIE基因轉(zhuǎn)錄相關(guān)的假基因。PPIEL在非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)中表達(dá)下調(diào)。RAET1K(retinoicacidearlytranscript1Kpseudogene，維甲酸早期轉(zhuǎn)錄1k假基因)位于6號(hào)染色體上。MBL1P(mannosebindinglectin1,pseudogene，甘露糖結(jié)合凝集素1，假基因)，位于第10號(hào)染色體上。人類MBL(mannosebindinglectin，甘露糖結(jié)合凝集素)有兩個(gè)基因，其中MBL1是偽基因，只有MBL2能夠編碼蛋白質(zhì)。本發(fā)明的所述的基因是在本發(fā)明之前的已知，基本信息可以在Genbank中查到，來源于人類基因組。本發(fā)明還采用RT-PCR方法檢測(cè)上述基因在前列腺癌組織和癌旁正常組織的表達(dá)，并驗(yàn)證了上述基因在前列腺癌中表達(dá)下調(diào)。本發(fā)明使用的術(shù)語“表達(dá)下調(diào)”指對(duì)應(yīng)于所表達(dá)基因的序列，其中序列量的測(cè)量證明，與從正常個(gè)體或從通過前列腺癌分期確定與前列腺癌不同的已鑒定疾病狀態(tài)的個(gè)體中分離的生物學(xué)樣品中的同一基因相比，所述基因在從患前列腺癌或通過前列腺癌分期確定的前列腺癌已鑒定疾病狀態(tài)的個(gè)體中分離的生物學(xué)樣品中的表達(dá)水平降低。根據(jù)本發(fā)明，“表達(dá)下調(diào)”是指通過本發(fā)明方法雜交強(qiáng)度測(cè)量的至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％或更多的表達(dá)降低，例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更低。在本發(fā)明中，“預(yù)后”是指癌癥患者在通過手術(shù)、化療、藥物治療或其組合處理等抑制或緩解腫瘤生長(zhǎng)后的過程或結(jié)果。預(yù)后可以是通過手術(shù)、化療、藥物治療或其組合處理抑制或緩解腫瘤生長(zhǎng)后1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20年或更久時(shí)的生機(jī)狀態(tài)。預(yù)后可以通過檢查標(biāo)志物來評(píng)估，所述的標(biāo)記物選自以下PPIEL、RAET1K和/或MBL1P中的一個(gè)或多個(gè)基因。預(yù)后評(píng)估可以這樣進(jìn)行：根據(jù)標(biāo)志物的有或無，或者升高或降低，確定患者的預(yù)后是良好還是不良，或者確定良好預(yù)后或不良預(yù)后的概率。實(shí)施例1高通量測(cè)序篩選差異表達(dá)基因1、取樣取2011年10月到2015年12月期間在北京協(xié)和醫(yī)院泌尿外科手術(shù)中獲得組織標(biāo)本27例，所有標(biāo)本均經(jīng)病理學(xué)檢查證實(shí)，其中癌旁組織樣本8例、前列腺癌標(biāo)本19例，編號(hào)后置-80℃低溫冰箱保存。2、對(duì)組織樣本進(jìn)行總RNA提取采用Reagent(invitrogen，貨號(hào)15596-018)進(jìn)行樣本RNA提取，實(shí)驗(yàn)操作按產(chǎn)品說明書進(jìn)行，具體操作如下：收集樣本后凍存于液氮，取出后把組織放入已預(yù)冷的研缽中進(jìn)行研磨，待組織樣本成粉末狀后：①加入Trizol，室溫保存5分鐘；②加氯仿0.2mL，用力振蕩離心管，充分混勻，室溫下放置5分鐘-10分鐘；③12000rpm高速離心15分鐘后吸取上層水相(吸70％)到另一新離心管管中，注意不要吸到兩層水相之間的蛋白物質(zhì)。移入新管，加入等體積的-20℃預(yù)冷異丙醇，充分顛倒混勻，置于冰上10分鐘；④12000rpm高速離15分鐘后小心棄掉上清液，按1mL/mLTrizol的比例加入75％DEPC乙醇洗漆沉淀(4℃保存)，洗漆沉淀物，振蕩混合，4℃下12000rpm高速離心5分鐘；⑤棄去乙醇液體，室溫下放置5分鐘以充分晾干沉淀，加入DEPC處理過的水溶解沉淀；⑥用Nanodrop2000紫外分光光度計(jì)測(cè)量RNA純度及濃度，凍存于-80℃。RNA質(zhì)量判定標(biāo)準(zhǔn)：RNA樣本的OD260/OD280值為1.7-2.2之間；總RNA電泳圖譜有清晰的28S、18S條帶；70℃水浴保溫1小時(shí)后的電泳圖譜與水浴保溫前的圖譜無明顯差異。3、RNA樣品的質(zhì)量分析RNA提取后瓊脂糖凝膠電泳，從電泳結(jié)果可以初步判定提取的RNA樣品質(zhì)量合格與否，是否可以用于進(jìn)一步的轉(zhuǎn)錄組分析。進(jìn)而通過NanoDrop1000分光光度計(jì)檢測(cè)RNA樣品的提取情況，RNA-seq測(cè)序的樣品要求：OD260/OD280為1.8-2.2。4、高通量測(cè)序測(cè)序平臺(tái)為Illumina公司的HiSeq2500高通量測(cè)序平臺(tái)，進(jìn)行高通量轉(zhuǎn)錄組深度測(cè)序，測(cè)序后我們運(yùn)用Fast-QC(http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/)軟件對(duì)測(cè)序數(shù)據(jù)的質(zhì)量進(jìn)行整體評(píng)估，包括堿基的質(zhì)量值分布，質(zhì)量值的位置分布，GC含量，PCRduplication含量，kmer的frequency等。在差異基因表達(dá)分析時(shí)，根據(jù)得到的FPKM值，采用國際公認(rèn)算法EBSeq進(jìn)行差異篩選。其中，篩選時(shí)，LOG2FC>1或<-1，F(xiàn)DR<0.05。為了更好的理解差異表達(dá)基因的功能，我們對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行了GeneOntology和信號(hào)通路分析，并對(duì)差異表達(dá)基因進(jìn)行功能注釋，鑒于以上數(shù)據(jù)分析的結(jié)果，結(jié)合文獻(xiàn)我們篩選了差異表達(dá)PPIEL、RAET1K和/或MBL1P基因，上述基因在前列腺癌組織樣本中表達(dá)下調(diào)。實(shí)施例2RT-PCR驗(yàn)證前列腺癌組織及癌旁組織中基因表達(dá)情況1、材料前列腺癌組織樣本34例及癌旁組織樣本8例取自北京協(xié)和醫(yī)院2011至2015年期間泌尿外科手術(shù)中前列腺癌樣本，對(duì)其進(jìn)行分組及編號(hào)。所有樣本均經(jīng)過病理學(xué)檢查證實(shí)。2、方法2.1對(duì)組織樣本進(jìn)行總RNA提取，同實(shí)施例1的提取方法。2.2逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA采用IIIReverseTranscriptase(invitrogen，貨號(hào)18080-044)進(jìn)行cDNA反轉(zhuǎn)錄，實(shí)驗(yàn)操作按產(chǎn)品說明書進(jìn)行，具體操作如下：使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，用逆轉(zhuǎn)錄緩沖液對(duì)lμg總RNA進(jìn)行逆反錄合成cDNA。采用25μL反應(yīng)體系，每個(gè)樣品取1μg總RNA作為模板RNA。獲得的cDNA保存放-20℃冰箱備用。2.3Real-TimePCR2.3.1儀器及分析方法用ABI7500型熒光定量PCR儀，采用2-ΔΔCt法進(jìn)行數(shù)據(jù)相對(duì)定量分析。2.3.2引物設(shè)計(jì)采用在線引物設(shè)計(jì)軟件，基因序列參照NCBI：PPIEL(NR_003929.2，pseudogene)、RAET1K(NR_024045.1，pseudogene)和/或MBL1P(NR_002724.2，pseudogene)，內(nèi)參選GAPDH，引物設(shè)計(jì)后由invitrogen公司合成。具體引物序列如下：表1引物序列操作過程如下：表2RealTime反應(yīng)體系組分加入量2×mix10μL上游引物(10uM)0.5μL下游引物(10uM)0.5μL模板2μL加入滅菌蒸餾水至25μL(一)反應(yīng)體系：用PowerGreenPCRMasterMix(invitrogen，貨號(hào)4367659)進(jìn)行擴(kuò)增，實(shí)驗(yàn)操作按產(chǎn)品說明書進(jìn)行。擴(kuò)增程序?yàn)椋?5℃5min，(95℃15sec，60℃45sec，72℃35sec)×40個(gè)循環(huán)。(二)引物篩選將各樣本cDNA混合后，以此為模板進(jìn)行5倍梯度稀釋，稀釋后樣品各取2μL作模板，分別用目的基因引物和內(nèi)參基因引物進(jìn)行擴(kuò)增，同時(shí)在60-95℃進(jìn)行融解曲線分析，根據(jù)擴(kuò)增效率高和溶解曲線單峰原則進(jìn)行引物篩選。(三)樣品RealTime-PCR檢測(cè)將各樣品cDNA10倍稀釋后取2μL作模板，分別用目的基因引物和內(nèi)參基因引物進(jìn)行擴(kuò)增。同時(shí)在60-95℃進(jìn)行溶解曲線分析。3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)時(shí)定量PCR擴(kuò)增曲線拐點(diǎn)清楚，擴(kuò)增曲線整體平行性好，表明各反應(yīng)管的擴(kuò)增效率相近，極限平而無上揚(yáng)現(xiàn)在，曲線指數(shù)期斜率較大，說明擴(kuò)增效率較高；樣本擴(kuò)增產(chǎn)物溶解曲線都是單峰，說明擴(kuò)增產(chǎn)物只有一條，為特異性擴(kuò)增；根據(jù)qRT-PCR的相對(duì)定量公式：2-ΔΔCt×100％，比較基因在前列腺癌組織和癌旁組織中的表達(dá)水平。結(jié)果顯示：qRT-PCR擴(kuò)增結(jié)果穩(wěn)定，基因在前列腺癌患組織中的表達(dá)水平低于癌旁組織中，以上結(jié)果驗(yàn)證了高通量轉(zhuǎn)錄組表達(dá)數(shù)據(jù)的整合分析基因在前列腺癌患者中表達(dá)下調(diào)的結(jié)果。具體情況見圖1。實(shí)施例3前列腺癌預(yù)后評(píng)估試劑盒制備基于實(shí)施例2得到的引物組，組裝本發(fā)明所述的用于檢測(cè)前列腺癌的試劑盒，所述試劑盒包括特異擴(kuò)增PPIEL、RAET1K和/或MBL1P中一個(gè)或多個(gè)基因的引物組如表1所示，具體為：1、試劑盒包括特異性擴(kuò)增PPIEL和RAET1K；2、試劑盒包括特異性擴(kuò)增PPIEL、RAET1K和MBL1P。和特異擴(kuò)增管家基因(GAPDH)的引物對(duì)如SEQIDNO:7和SEQIDNO:8所示；還包括SYBRGreen聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系，如PCR緩沖液、SYBRGreen熒光染料、dNTPs。所述PCR緩沖液的成分為25mMKCl，2.5mMMgCl2，200mM(NH4)2SO4；還包括前列腺正常組織cDNA：作為陰性對(duì)照與檢測(cè)樣本cDNA共同定量PCR檢測(cè)，每個(gè)反應(yīng)體系使用與檢測(cè)樣本cDNA相同量。通過對(duì)引物濃度和退火溫度的優(yōu)化，最終確定反應(yīng)體系如表3所示：表3PCR反應(yīng)體系組分加入量SYBRGreen聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)體系12.5μL上游引物(10μM)0.5μL下游引物(10μM)0.5μL模板cDNA2.0μL加入滅菌蒸餾水至25μL最佳反應(yīng)條件為：95℃5min，(95℃15sec，60℃45sec，72℃35sec)×40個(gè)循環(huán)，72℃10min。實(shí)施例4前列腺癌預(yù)后評(píng)估試劑盒的臨床驗(yàn)證對(duì)北京協(xié)和醫(yī)院自2011年10月至2015年12月間收治的10例泌尿外科手術(shù)中前列腺癌患者組織樣本進(jìn)行了研究，獲取的手術(shù)組織為前列腺癌組織。利用實(shí)施例3所述的兩種試劑盒檢測(cè)10例前列腺癌患者組織中的相應(yīng)基因表達(dá)的相對(duì)含量。治療結(jié)束后再檢測(cè)患者前列癌組織中上述基因表達(dá)相對(duì)含量。判斷標(biāo)準(zhǔn)定為：治療后基因表達(dá)相對(duì)含量與治療前相比相升高小于10％，判斷為治療無效；治療后基因表達(dá)相對(duì)含量與治療前相比升高大于或等于10％，判斷為治療有效，相比越高治療效果越好，其評(píng)估結(jié)果如表4所示。同時(shí)，醫(yī)生根據(jù)臨床癥狀判斷前列腺癌的治療效果，結(jié)果如表4所示。表4實(shí)施例3所述的試劑盒評(píng)估前列腺癌療效結(jié)果由表4可知，在10例臨床患者中，試劑盒1檢測(cè)結(jié)果顯示其中5例有療效，其余5例無治療效果，其中編號(hào)為8的患者判斷結(jié)果與臨床結(jié)果有誤；試劑盒2檢測(cè)結(jié)果為4例有治療效，其余6例無治療效果，該試劑盒檢測(cè)結(jié)果與臨床判斷結(jié)果一致。據(jù)此推斷，試劑盒2比試劑盒1檢測(cè)更加精確，本前列腺癌的預(yù)后評(píng)估試劑盒可以對(duì)前列腺癌患者治愈效果進(jìn)行評(píng)估，并以此為臨床提供有用的參考價(jià)值。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對(duì)之作一些修改或改進(jìn)，這對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進(jìn)，均屬于本發(fā)明要求保護(hù)的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3