本發(fā)明涉及基因工程領(lǐng)域，具體涉及利用與前列腺癌相關(guān)的C22orf41在前列腺癌診斷標志物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：前列腺癌是常見的男性生殖系統(tǒng)惡性腫瘤之一。世界范圍內(nèi)，前列腺癌發(fā)病率在男性所有惡性腫瘤中位居第二，在美國前列腺癌的發(fā)病率已經(jīng)超過肺癌，成為第一位危害男性健康的腫瘤。亞洲前列腺癌的發(fā)病率遠遠低于歐美國家，但近年來呈現(xiàn)上升趨勢，且增長比歐美發(fā)達國家更加迅速。前列腺癌患者主要是老年男性，一般在50歲以后發(fā)病，95％發(fā)生于60歲以上的老年男性，發(fā)生率持續(xù)地隨著年齡增長而增加。前列腺癌早期多無任何癥狀，即使有所不適，也不足以引起病人的重視，當(dāng)腫瘤增大壓迫尿道時，又往往與前列腺增生相混淆。在我國約80％的病人首先發(fā)現(xiàn)遠處轉(zhuǎn)移病灶才發(fā)現(xiàn)前列腺癌。此時，病變已達晚期，預(yù)后不良。前列腺癌的臨床診斷方式目前主要有血清前列腺特異性抗原(PSA)檢測、直腸指檢、直腸超聲波檢測、活組織病理檢查等。PSA(ProstateSpecificAntigen)為前列腺組織特異性抗原，由前列腺的解剖結(jié)構(gòu)可知PSA通過前列腺導(dǎo)管進入血液和尿液中，一些病例或生理情況下PSA會進入血液中去，如前列腺炎癥、尿潴留、前列腺感染、前列腺增生和前列腺癌等，因此通過檢測血清PSA水平來預(yù)測前列腺癌具有一定的假陽性率。從1991年開始，檢測血清中PSA含量用于預(yù)測前列腺癌，含量高于4ng/mL認為是前列腺癌陽性，靈敏度79％，特異性20％-59％，平均靈敏度約33％，在濃度4-10ng/mL灰區(qū)部分，特異性是最低的，這時往往需要通過侵入性的穿刺活檢進行確定，給患者帶來極大痛苦及精神和經(jīng)濟負擔(dān)。所以PSA并不能較好的作為診斷前列腺癌的標志物。直腸指檢是最簡單、最經(jīng)濟實用的方法，主要通過醫(yī)生的食指觸摸前列腺，用以發(fā)現(xiàn)很多無癥狀的前列腺癌患者，有可能獲得早期診斷及根治的機會。但以上的方法都存在局限性。例如直腸指檢的局限性主要在4個方面：(1)患者前列腺腫塊不大時，易漏診；(2)部分患者前列腺癌腫大不明顯，但已屬于晚期，不易根治；(3)患者直腸有疾患時不能使用此檢測；(4)醫(yī)生經(jīng)驗不足時有漏診或者誤診的可能。C22orf41(SynaptonemalComplexCentralElementProtein3，聯(lián)會復(fù)合體中心元蛋白3)又名SYCE3是一種蛋白編碼基因，位于22號染色體上。與SYCE3基因的相關(guān)報道較少，僅有研究表明，SYCE3在犏牛睪丸組織中極顯著表達下調(diào)與同源染色體間、尤其是性染色體間的聯(lián)會復(fù)合體數(shù)量減少有關(guān)。近年來的研究表明，mRNA與前列腺癌密切相關(guān)，它們可能參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移，所以對腫瘤的發(fā)病機制、早期診斷、個體化治療、轉(zhuǎn)移的檢測和預(yù)后等可能有相應(yīng)的作用。技術(shù)實現(xiàn)要素：為了實現(xiàn)前列腺癌的早期診斷，個體化治療，本發(fā)明的目的在于提供一種新的前列腺癌mRNA，以及該mRNA的表達蛋白及其片段、類似物和衍生物。本發(fā)明的另一目的是前列腺癌相關(guān)mRNA在檢測前列腺癌中的用途。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明首先提供一種用于前列腺癌檢測的mRNA標志物，所述標志物為C22orf41或該mRNA的表達蛋白及其片段、類似物和衍生物；所述的C22orf41或該mRNA的表達蛋白及其片段、類似物和衍生物在前列腺癌生物學(xué)樣品中表達下調(diào)。優(yōu)選地，所述標志物包括如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列，該核苷酸序列為C22orf41mRNA的一部分序列。進一步地，本發(fā)明提供了一種檢測個體患有前列腺癌可能性的試劑盒，所述的試劑盒含有如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列。優(yōu)選地，所述試劑盒包括SEQIDNO:1所示的核苷酸序列的定量檢測試劑；所述核苷酸序列定量檢測試劑包括SEQIDNO.2和SEQIDNO.3所示的引物。優(yōu)選地，所述試劑盒包括10×Buffer、dNTP、MgCl2、Taq酶、逆轉(zhuǎn)錄酶和RNA酶抑制劑。優(yōu)選地，所述試劑盒還包括人正常的前列腺組織或細胞的總RNA或DNA。進一步地，本發(fā)明提供了一種檢測前列腺癌相關(guān)mRNA表達水平是否下調(diào)的方法。(1)檢測待測樣品中前列腺癌相關(guān)mRNA的表達水平，其中所述前列腺癌相關(guān)mRNA是C22orf41；(2)將待測細胞中前列腺癌相關(guān)mRNA的表達水平與對照相比較，從而確定前列腺癌表達水平是否下調(diào)。優(yōu)選地，所述待測樣品為細胞組織樣本。優(yōu)選地，所述的細胞組織樣品包括前列腺癌組織和癌旁組織。優(yōu)選地，所述的癌旁組織為正常組織。優(yōu)選地，所述檢測是通過基因芯片檢測法、熒光定量PCR、蛋白質(zhì)芯片檢測法、免疫方法或抗原-抗體檢測法進行。優(yōu)選地，所述免疫方法為ELISA檢測和/或膠體金檢測。優(yōu)選地，所述ELISA法為使用ELISA檢測試劑盒，該試劑盒包括：包被C22orf41單克隆抗體的固相載體，酶標抗體，酶的底物，蛋白標準品，陰性對照品，稀釋液，洗滌液，酶反應(yīng)終止液等。所述膠體金法為使用檢測試劑盒，所述的抗體可采用市售的C22orf41單克隆抗體或多克隆抗體。更優(yōu)選地，所述的膠體金檢測試劑盒是采用膠體金免疫層析技術(shù)或膠體金滲濾法。更優(yōu)選地，所述的膠體金檢測試劑盒硝酸纖維素膜上的檢測區(qū)(T)噴點有抗C22orf41抗體、質(zhì)控區(qū)(C)噴點有免疫球蛋白IgG。本發(fā)明的有益效果如下：本發(fā)明公開了一種與前列腺癌相關(guān)的C22orf41，并進一步證實該C22orf41或該mRNA的表達蛋白及其片段、類似物和衍生物在前列腺癌組織中表達下調(diào)。利用該mRNA檢測前列腺癌不僅能夠快速有效的做到早期診斷，而且為基因治療、藥物治療等臨床應(yīng)用提供了治療靶點和重要依據(jù)。附圖說明圖1前列腺癌組織及癌旁組織C22orf41cDNA表達情況；圖2測序結(jié)果與C22orf41整個mRNA序列的比對結(jié)果；圖3前列腺癌組織及癌旁組織C22orf41蛋白的表達情況。具體實施方式以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。若未特別指明，實施例中所用的技術(shù)手段為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的常規(guī)手段，所用的試劑可以商業(yè)購買得到。實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常為本領(lǐng)域常規(guī)方法，如按照常規(guī)條件如Sambrook等人，分子克隆，實驗手冊(第三版)(科學(xué)出版社，2002)中的所述條件，或按照試劑制造廠家所建議的條件。本發(fā)明的發(fā)明人對前列腺癌組織樣本及癌旁組織樣本的mRNA進行高通量轉(zhuǎn)錄組測序，通過生物信息學(xué)方法進行基因篩選，挑選出候選mRNAC22orf41，現(xiàn)有研究中并沒有C22orf41和前列腺癌相關(guān)的報道，進一步，發(fā)明人進行了分子生物學(xué)方法驗證，證實了C22orf41在前列腺癌細胞中表達下調(diào)。本發(fā)明的C22orf41是在本發(fā)明之前的已知mRNA，其基本信息如下：Genbank登錄號：NCBI參考序列:NM_001123225.2，來源于人類基因組。本發(fā)明還采用RT-PCR方法和基因芯片方法檢測上述mRNA在前列腺癌組織和癌旁正常組織的表達，并驗證了該mRNA在前列腺癌中表達下調(diào)。本文使用的術(shù)語“表達下調(diào)”指對應(yīng)于所表達基因的序列，其中序列量的測量證明，與從正常個體或從通過前列腺癌分期確定與前列腺癌不同的已鑒定疾病狀態(tài)的個體中分離的生物學(xué)樣品中的同一基因相比，所述基因在從患前列腺癌或通過前列腺癌分期確定的前列腺癌已鑒定疾病狀態(tài)的個體中分離的生物學(xué)樣品中的表達水平降低。根據(jù)本發(fā)明，“表達下調(diào)”是指通過本發(fā)明方法雜交強度測量的至少1％、2％、3％、4％、5％、6％、7％、8％、9％、10％或更多的表達降低，例如20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％或更低。實施例1高通量測序篩選差異表達基因1、取樣取2012年10月到2015年12月期間在北京協(xié)和醫(yī)院泌尿外科手術(shù)中獲得組織標本27例，所有標本均經(jīng)病理學(xué)檢查證實，其中癌旁組織樣本8例、前列腺癌標本19例，編號后置-80℃低溫冰箱保存。2、對組織樣本進行總RNA提取采用Reagent(invitrogen，貨號15596-018)進行樣本RNA提取，實驗操作按產(chǎn)品說明書進行，具體操作如下：收集樣本后凍存于液氮，取出后把組織放入已預(yù)冷的研缽中進行研磨，待組織樣本成粉末狀后：①加入Trizol，室溫保存5分鐘；②加氯仿0.2mL，用力振蕩離心管，充分混勻，室溫下放置5分鐘-10分鐘；③12000rpm高速離心15分鐘后吸取上層水相(吸70％)到另一新離心管管中，注意不要吸到兩層水相之間的蛋白物質(zhì)。移入新管，加入等體積的-20℃預(yù)冷異丙醇，充分顛倒混勻，置于冰上10分鐘；④12000rpm高速離15分鐘后小心棄掉上清液，按1mL/mLTrizol的比例加入75％DEPC乙醇洗漆沉淀(4℃保存)，洗漆沉淀物，振蕩混合，4℃下12000rpm高速離心5分鐘；⑤棄去乙醇液體，室溫下放置5分鐘以充分晾干沉淀，加入DEPC處理過的水溶解沉淀；⑥用Nanodrop2000紫外分光光度計測量RNA純度及濃度，凍存于-80℃。RNA質(zhì)量判定標準：RNA樣本的OD260/OD280值為1.7-2.2之間；總RNA電泳圖譜有清晰的28S、18S條帶；70℃水浴保溫1小時后的電泳圖譜與水浴保溫前的圖譜無明顯差異。3、RNA樣品的質(zhì)量分析RNA提取后瓊脂糖凝膠電泳，從電泳結(jié)果可以初步判定提取的RNA樣品質(zhì)量合格與否，是否可以用于進一步的轉(zhuǎn)錄組分析。進而通過NanoDrop1000分光光度計檢測RNA樣品的提取情況，RNA-seq測序的樣品要求：OD260/OD280為1.8-2.2。4、高通量測序測序平臺為Illumina公司的HiSeq2500高通量測序平臺，進行高通量轉(zhuǎn)錄組深度測序，測序后我們運用Fast-QC(http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/fastqc/)軟件對測序數(shù)據(jù)的質(zhì)量進行整體評估，包括堿基的質(zhì)量值分布，質(zhì)量值的位置分布，GC含量，PCRduplication含量，kmer的frequency等。在差異基因表達分析時，根據(jù)得到的FPKM值，采用國際公認算法EBSeq進行差異篩選。其中，篩選時，LOG2FC>1或<-1,FDR<0.05。為了更好的理解差異表達基因的功能，我們對差異表達基因進行了GeneOntology和信號通路分析，并對差異表達基因進行功能注釋和蛋白質(zhì)互相作用網(wǎng)絡(luò)分析，鑒于以上數(shù)據(jù)分析的結(jié)果，結(jié)合文獻我們篩選了差異表達C22orf41，該mRNA在前列腺癌組織樣本中表達下調(diào)。實施例2RT-PCR驗證前列腺癌組織及癌旁組織C22orf41表達情況1、材料20例前列腺癌組織樣本及8例癌旁組織樣取自北京協(xié)和醫(yī)院2012至2015年期間泌尿外科手術(shù)中前列腺癌樣本，對其進行分組及編號。所有樣本均經(jīng)過病理學(xué)檢查證實。2、方法2.1對組織樣本進行總RNA提取，同實施例1的提取方法。2.2逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA采用IIIReverseTranscriptase(invitrogen，貨號18080-044)進行cDNA反轉(zhuǎn)錄，實驗操作按產(chǎn)品說明書進行，具體操作如下：使用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒，用逆轉(zhuǎn)錄緩沖液對lμg總RNA進行逆反錄合成cDNA。采用25μL反應(yīng)體系，每個樣品取1μg總RNA作為模板RNA。將獲得的cDNA樣品稀釋10倍后保存在-20℃冰箱備用。2.3Real-TimePCR2.3.1儀器及分析方法用ABI7500型熒光定量PCR儀，采用2-ΔΔCt法進行數(shù)據(jù)相對定量分析。2.3.2引物設(shè)計采用在線引物設(shè)計軟件，基因序列參照NCBI:NM_001123225.2(C22orf41)，內(nèi)參選GAPDH，引物設(shè)計后由invitrogen公司合成。具體引物序列如下：表1引物序列2.3.3熒光定量PCR擴增25μL反應(yīng)體系中按表2依次加入以下成分：表2RealTime反應(yīng)體系組分加入量2×mix10μL上游引物(10uM)0.5μL下游引物(10uM)0.5μL模板2μL加入滅菌蒸餾水至25μL用PowerGreenPCRMasterMix(invitrogen，貨號4367659)分別對目的基因引物和內(nèi)參基因引物進行擴增。實驗操作按產(chǎn)品說明書進行。擴增程序為：95℃5min，(95℃15sec，61℃45sec)×35個循環(huán)。同時在60-95℃進行溶解曲線分析。反應(yīng)結(jié)束后，取5ul的PCR產(chǎn)物進行2％瓊脂糖電泳，用快速膠回收試劑盒(invitrogen公司)將大小為163bp的片段進行切膠回收并測序，結(jié)果用blast軟件進行同源性分析。實驗結(jié)果顯示，實時定量PCR擴增曲線拐點清楚，擴增曲線整體平行性好，表明各反應(yīng)管的擴增效率相近，極限平而無上揚現(xiàn)在，曲線指數(shù)期斜率較大，說明擴增效率較高；樣本擴增產(chǎn)物溶解曲線都是單峰，說明擴增產(chǎn)物只有一條，為特異性擴增；根據(jù)qRT-PCR的相對定量公式：2-ΔΔCt×100％，比較C22orf41在前列腺癌組織和癌旁組織中的表達水平。結(jié)果如圖1顯示：與癌旁組織相比，C22orf41在前列腺癌患組織中的表達水平僅為癌旁組織中的25％，證明該mRNA表達下調(diào)；RT-PCR產(chǎn)物經(jīng)回收后，在ABI3730全自動測序儀上測序，該163bp的片段的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。用blast軟件將該序列與C22orf41整個mRNA序列進行比對，比對結(jié)果如圖2顯示，如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列為C22orf41基因的一部分序列，符合率為99％,其中發(fā)現(xiàn)c.56A>C和c.97U>G均為無義突變。實施例3WB方法檢測前列腺癌組織中C22orf41的蛋白表達水平一、材料20例前列腺癌組織樣本及配對癌旁前列腺冰凍組織樣取自北京協(xié)和醫(yī)院2012至2015年期間泌尿外科手術(shù)中前列腺癌樣本，對其進行分組及編號。所有樣本均經(jīng)過病理學(xué)檢查證實。二、方法(一)蛋白質(zhì)樣品制備及定量1、RIPA裂解液(Beyotime)進行蛋白質(zhì)樣品制備，操作步驟如下:將組織樣本自冰箱取出，用濾紙擦拭組織上的PBS溶液，稱取重量，并將組織置于機械組織勻漿器中，1:10組織比裂解液的重量體積比例加入相應(yīng)體積的裂解液進行勻漿，10000-14000g離心3-5分鐘，取上清液，按1:1加入樣品緩沖液強力混勻后置于100度的水浴箱水浴加熱3-5分鐘，10000g離心10分鐘，取上清液，將其轉(zhuǎn)入另一潔凈的試管中。2、利用BCA蛋白濃度測定試劑盒進行總蛋白定量采用康為世紀微量BCA蛋白定量試劑盒(貨號：CW2011)，具體步驟見其說明書。二、SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)1、蛋白質(zhì)樣品變性:a)根據(jù)BCA蛋白質(zhì)濃度測定結(jié)果，每個凝膠加樣孔中加入相同質(zhì)量的總蛋白提取物。按照每1微升蛋白樣品加入0.25微升蛋白上樣緩沖液的比例，混合蛋白樣品和蛋白上樣緩沖液(5x)。b)100℃或沸水浴加熱3-5分鐘，以充分變性蛋白。c)冷卻到室溫后，直接上樣到SDS-PAGE膠加樣孔內(nèi)即可。2、膠板制備:采用Bio-Rad公司的微型垂直板電泳裝置制備0.75mm厚的凝膠，照說明書安裝好玻璃板后，先在小燒杯中配制5mL10％的分離膠，配方如下：表3分離膠配方組分用量30％丙烯酰胺溶液1.7mLTris-HCl(1.5M，pH8.8)1.3mL10％SDS0.05mL10％AP0.05mLTEMED0.002mL滅菌ddH2O補充至5mL混勻后立即灌膠，然后加lmL蒸餾水覆蓋，室溫下放置約30min待膠聚合后，用蒸餾水洗2-3次，再用濾紙吸干。然后制備2mL5％的濃縮膠，配方如下：表4濃縮膠配方組分用量30％丙烯酰胺溶液0.33mLTris-HCl(1.0M，pH6.8)0.25mL10％SDS0.02mL10％AP0.02mLTEMED0.002mL滅菌ddH2O補充至2mL混勻后立即灌膠，插入樣品梳，避免產(chǎn)生氣泡，待膠凝固后，取出樣品梳，后用蒸餾水和1x蛋白電泳緩沖液先后沖洗樣品孔。三、上樣及電泳將凝膠板裝在電泳裝置上，內(nèi)槽中加滿lx蛋白電泳緩沖液，外槽中l(wèi)x蛋白電泳緩沖液應(yīng)超過鉑絲，按順序上樣。在末端泳道中加入蛋白質(zhì)質(zhì)量標準蛋白梯度。電泳時藍色染料到達膠的底端處附近即可停止電泳。四、蛋白質(zhì)印跡1、按照上述方法先進行SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白。2、預(yù)先用轉(zhuǎn)印緩沖液浸泡NC膜、濾紙、海棉墊。SDS-PAGE結(jié)束后取出凝膠，去除濃縮膠，在Tris/甘氨酸緩沖液中漂洗數(shù)秒，然后置于轉(zhuǎn)印緩沖液中浸泡15-30min。打開電轉(zhuǎn)印夾，每側(cè)墊上一塊專用的用轉(zhuǎn)印緩沖液浸泡透的海棉墊，再各放一塊轉(zhuǎn)印液浸透的濾紙，濾紙與海棉墊大小相同或與NC膜，凝膠大小相同均可，將凝膠平放在陰極側(cè)濾紙上，最后將NC膜平放在凝膠上，去除氣泡，夾好電轉(zhuǎn)印夾。在電泳槽加滿電轉(zhuǎn)印液，插入電轉(zhuǎn)印夾，將電泳槽放入冰箱內(nèi)(電轉(zhuǎn)印液之前要放入冰箱內(nèi)預(yù)冷)，連接好電極，接通電流，轉(zhuǎn)印夾的NC膜應(yīng)對電泳槽的正極。3、封閉：用1xTBS漂洗一次。加入含5％的無脂奶粉TBS封閉緩沖液，置于振蕩培養(yǎng)箱中進行封閉；4、一抗雜交：棄封閉液，加入用一抗稀釋液稀釋的一抗(Anti-C22orf41antibody-N-terminal(sc-86595))雜交溶液，置于4℃雜交過夜，第二天在振蕩培養(yǎng)箱中進行雜交；5、回收一抗雜交液，用TBST洗膜3次；6、棄TBST，加入用封閉緩沖液稀釋的二抗(GoatAnti-RabbitIgG,HRPConjugated(CW0103))雜交溶液，置于振蕩培養(yǎng)箱中進行雜交；7、棄二抗溶液，用TBST洗膜3次；8、ECL化學(xué)發(fā)光及圖像采集和分析：按照高靈敏度化學(xué)發(fā)光檢測試劑盒(康為世紀貨號CW0049B)，具體步驟參照說明書。9、以β-Actin作為內(nèi)參進行數(shù)據(jù)標準化，以癌旁組織中C22orf41作為參照樣本，觀察實驗組中C22orf41蛋白的相對表達水平情況，采用ImageJ分析軟件對蛋白電泳條帶灰度值進行定量,最后得到的數(shù)據(jù)進行配對樣本t檢驗統(tǒng)計分析。五、實驗結(jié)果結(jié)果如圖3顯示，在癌旁前列腺組織與前列腺癌組織中C22orf41蛋白的表達趨勢與熒光定量PCR檢測mRNA水平的表達趨勢相符。即C22orf41蛋白表達量在前列腺癌組織中明顯低于癌旁組織(p<0.001)，表達差異有統(tǒng)計學(xué)意義。實施例4前列腺癌檢測試劑盒基于實施例2得到的引物組，組裝本發(fā)明所述的用于前列腺癌的試劑盒，所述試劑盒包括特異擴增如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列的引物對如SEQIDNO:2和SEQIDNO:3所示，和特異擴增內(nèi)參基因(GAPDH)的引物對如SEQIDNO:4和SEQIDNO:5所示；還包括SYBRGreen聚合酶鏈式反應(yīng)體系，如PCR緩沖液、SYBRGreen熒光染料、dNTPs。所述PCR緩沖液的成分為25mMKCL，2.5mMMgCL2，200mM(NH4)2SO4。通過對引物濃度和退火溫度的優(yōu)化，最終確定反應(yīng)體系如表3所示：表3PCR反應(yīng)體系最佳反應(yīng)條件為：95℃預(yù)變性5min，(95℃變性15sec，61℃退火45sec，72℃延伸35sec)×40個循環(huán)，72℃延伸15min。取30例待檢測前列腺癌病人的少量前列腺細胞，待檢前列腺癌病人為北京協(xié)和醫(yī)院泌尿科就診前列腺癌患者。本研究的所有臨床樣本，均對患者進行知情告知并經(jīng)本醫(yī)院倫理委員會通過。使用常規(guī)方法(或使用特定的試劑盒)從前列腺細胞中提取RNA，使用試劑盒中試劑，按照最佳反應(yīng)體系與條件進行PCR反應(yīng)，使用試劑盒中正常癌旁組織cDNA作為Real-TimePCR定量檢測中的對照cDNA，檢測組織樣本的C22orf41相對正常癌旁組織表達量變化，分析檢測結(jié)果，樣本和對照間比較采用t檢驗，P<0.05為差異顯著，判為檢測樣本陽性。檢測結(jié)果顯示，在30例待檢測病人中，有24例病人的C22orf41在前列腺細胞表達水平僅為癌旁組織中的20-40％。經(jīng)臨床進一步檢測，該24例病人確定患有前列腺癌，其他6例沒有患有前列腺癌，臨床檢測結(jié)果與本發(fā)明制備的試劑盒檢測結(jié)果一致。據(jù)此推斷，本前列腺癌的診斷試劑盒可以明確區(qū)分出前列腺癌患者，并以此為臨床提供診斷線索。雖然，上文中已經(jīng)用一般性說明及具體實施方案對本發(fā)明作了詳盡的描述，但在本發(fā)明基礎(chǔ)上，可以對之作一些修改或改進，這對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。因此，在不偏離本發(fā)明精神的基礎(chǔ)上所做的這些修改或改進，均屬于本發(fā)明要求保護的范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3