本發(fā)明涉及一種牛乳酶解蛋白多肽的制作方法。

背景技術(shù)：

牛乳通常是指母牛正常分娩后分泌擠得的乳汁，因其營養(yǎng)齊全、蛋白質(zhì)豐富而受到人們的青睞。然而牛乳蛋白理化特性又不同于人乳蛋白，服用后遇酸易凝固，不易被嬰幼兒消化吸收。此外，部分牛乳蛋白會使人體產(chǎn)生過敏等不良后果。人們一般通過將牛乳蛋白徹底酶解為多肽和氨基酸以解決這一問題。

近年來,科學(xué)發(fā)現(xiàn)牛乳中的乳球蛋白、乳白蛋白和乳酪蛋白的某些肽鏈片段有重要的生物學(xué)功能，這說明牛乳的某些生物學(xué)作用是通過活性多肽體現(xiàn)的。因此，將牛乳中的蛋白質(zhì)酶解為多肽，可使牛乳充分地被人體吸收，同時最大限度地保留牛乳的生物活性, 促進(jìn)人體的生長、發(fā)育、免疫調(diào)節(jié)和新陳代謝。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種牛乳酶解蛋白多肽的制作方法，將牛乳中的蛋白質(zhì)徹底酶解為多肽，同時最大限度地保留牛乳的生物活性。

為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，采用如下技術(shù)方案：

一種牛乳酶解蛋白多肽的制作方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）用乙醇或乙酸洗滌牛乳，脫去脂肪；

（2）配制牛乳液，調(diào)節(jié)溶液PH值至6-7；

（3）向牛乳液中加入木瓜蛋白酶進(jìn)行第一次酶解,得到一次牛乳酶解液；

（4）將所述一次牛乳酶解液的PH值調(diào)到8.9-9.1后加入堿性蛋白酶進(jìn)行第二次酶解，得到多肽生成液；

（5）將多肽生成液經(jīng)中空纖維超濾膜分離后進(jìn)行真空干燥，制成牛乳酶解蛋白多肽。

進(jìn)一步地，所述步驟（1）脫去牛乳中的脂肪是向新鮮牛乳中加入一定量95%的乙醇，以2000r/min離心10-15min后靜置，分離出的沉淀即為脫脂牛乳。

進(jìn)一步地，所述步驟（2）中牛乳液的制作方法為：將脫脂牛乳溶解在0.05mol/L的三羥甲基氨基甲烷（Tris）緩沖液中。

進(jìn)一步地，在所述牛乳液中加入少量的疊氮化鈉。

進(jìn)一步地，所述步驟（3）中木瓜蛋白酶的反應(yīng)條件為：PH值為6-7，溫度為55-65℃，反應(yīng)時間90-120min。

進(jìn)一步地，所述步驟（4）中堿性蛋白酶的反應(yīng)條件為：PH值為8.9-9.1，溫度為58-64℃，反應(yīng)時間90-120min。

進(jìn)一步地，所述步驟（5）中對多肽生成液做中空纖維超濾膜分離，超濾膜分子量≤4000。

本發(fā)明的有益效果為：采用木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶對牛乳蛋白進(jìn)行酶解，可加快蛋白質(zhì)的水解速度，并徹底將其酶解為N/P較小的多肽，利于人體吸收，而且木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶易得，成本較低。

具體實(shí)施方式

下面對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述：

一種牛乳酪蛋白酶解CPPs的制作方法，包括以下步驟：

（1）取新鮮牛乳，加入一定量95%的乙醇洗滌，以2000r/min離心10-15min后靜置，分離出沉淀脫脂牛乳。

（2）將脫脂牛乳溶解在0.05mol/L的三羥甲基氨基甲烷（Tris）緩沖液中，調(diào)節(jié)溶液PH值至6-7，為了防止牛乳蛋白變質(zhì)，可在溶液中加入少量的疊氮化鈉。

（3）向步驟（2）得到的牛乳液中加入木瓜蛋白酶，將其置于55-65℃水浴中反應(yīng)，反應(yīng)90-120min后，將反應(yīng)液置于110℃水浴中加熱15min，使酶解反應(yīng)終止。反應(yīng)液冷卻至室溫后，在10000r/min的條件下離心20min，取上清液即一次牛乳酶解液。

（4）向步驟（3）得到的一次牛乳酶解液中加堿性蛋白酶，調(diào)節(jié)PH值為8.9-9.1，將其置于58-64℃水浴中反應(yīng)，反應(yīng)90-120min后，將反應(yīng)液置于90℃水浴中加熱15min，使酶解反應(yīng)終止。反應(yīng)液冷卻至室溫后，在10000r/min的條件下離心20min，取上清液即多肽生成液。

（5）將多肽生成液經(jīng)中空纖維超濾膜分離后進(jìn)行真空干燥，制成牛乳酶解蛋白多肽，其中超濾膜分子量≤4000。