1.特異性靶向MC4R基因的sgRNA，其特征在于，其靶向MC4R基因CDS區(qū)的6133-6152bp序列或7127-7146bp序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的sgRNA，其特征在于，其核苷酸序列為5’-ttctggaaccgcagcaccta-3’。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的的sgRNA，其特征在于，其核苷酸序列為5’-gactttctccttacacagtc-3’。
4.含有權(quán)利要求2或權(quán)利要求3所述的sgRNA的CRISPR/Cas9打靶載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的CRISPR/Cas9打靶載體，其特征在于，其為連接有sgRNA的px-330質(zhì)粒。
6.一種制備MC4R基因敲除細(xì)胞的方法，其特征在于，將含有權(quán)利要求2所述sgRNA的CRISPR/Cas9打靶載體，與含有權(quán)利要求3所述sgRNA的CRISPR/Cas9打靶載體共轉(zhuǎn)染細(xì)胞，從而敲除細(xì)胞的MC4R基因。
7.一種制備MC4R基因敲除豬的方法，其特征在于，同時(shí)利用靶向MC4R基因CDS區(qū)6133-6152bp序列的CRISPR/Cas9打靶載體與靶向MC4R基因CDS區(qū)7127-7146bp序列的CRISPR/Cas9打靶載體，對(duì)MC4R基因?qū)崿F(xiàn)敲除。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)將含有權(quán)利要求2所述sgRNA的CRISPR/Cas9打靶載體、含有權(quán)利要求3所述sgRNA的CRISPR/Cas9打靶載體、與PL452-Neo分別進(jìn)行酶切，得到線性化片段；
(2)將步驟(1)得到的線性化片段共轉(zhuǎn)染豬的胎兒成纖維細(xì)胞，通過(guò)G418篩選具有抗性的單細(xì)胞克?。?/p>
(3)選取狀態(tài)良好的陽(yáng)性單細(xì)胞克隆作為核移植的供體細(xì)胞，卵母細(xì)胞作為核移植的受體細(xì)胞，利用體細(xì)胞核移植技術(shù)構(gòu)建克隆胚胎，將優(yōu)質(zhì)的克隆胚胎移植到代孕母豬的輸卵管內(nèi)，經(jīng)過(guò)全期發(fā)育獲得MC4R基因敲除豬。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述CRISPR/Cas9打靶載體為連接有sgRNA的px-330質(zhì)粒。
10.權(quán)利要求1～3任一項(xiàng)所述的sgRNA或權(quán)利要求4所述的CRISPR/Cas9打靶載體在CRISPR-Cas9特異性敲除豬MC4R基因中的應(yīng)用。