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一種增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法與流程

文檔序號:12248677閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,所述方法為將分離的脂肪干細胞傳代培養(yǎng),其特征是:取代2-5代的脂肪干細胞用含有干細胞生長因子的培養(yǎng)基培養(yǎng)至細胞80%匯合,傳代后24h向培養(yǎng)基中添加轉(zhuǎn)化生長因子TGF-β1,培養(yǎng)24h后獲得增殖與移植后存活能力增強的脂肪干細胞。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,其特征是:所述培養(yǎng)MSC細胞所用的生長因子及濃度為EGF 2ng/mL、FGF 2ng/mL、VEGF 2ng/mL、PDGF 2ng/mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,其特征是:所述誘導激活脂肪干細胞所用的細胞因子終濃度為0.1-10ng/ml的TGF-β1。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,所述TGF-β1的培養(yǎng)濃度為0.1ng/ml。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,其特征是:所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基為α-MEM培養(yǎng)基(90%體積)、胎牛血清(或患者自體血清,10%體積)、青鏈霉素雙抗(終濃度100U/mL)。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,其特征是:取傳代2-5代的脂肪干細胞,傳代后以含有細胞因子FGF、EGF、VEGF、PDGF-BB,各2ng/mL,10%胎牛血清,青鏈霉素雙抗(終濃度100U/mL)的α-MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)24h,此時向培養(yǎng)基中添加TGF-β1使其終濃度為0.1ng/ml,培養(yǎng)24小時后,棄培養(yǎng)基,收獲增殖與存活能力加強的脂肪干細胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述增強脂肪干細胞增殖與移植后存活能力的方法,其特征是:所述脂肪干細胞來自人類外科手術(shù)所得固體脂肪與吸脂術(shù)所得液體脂肪。

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