本發(fā)明涉及一種化合物的結(jié)晶型，尤其涉及一種硼替佐米結(jié)晶型，以及其制取該結(jié)晶型的方法和在制備26s蛋白酶體的類胰凝乳蛋白酶抑制劑藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

硼替佐米，曾名為ps-341(velcade，millenniumpharmaceuticals，inc，cambridge，ma)是一種二肽基硼酸化合物，為高度選擇性、強(qiáng)效、可逆的蛋白酶體抑制劑。于2003年5月19日獲得fda的批準(zhǔn)上市銷售，為注射用凍干粉針。用于先前至少已經(jīng)接受過(guò)兩種療法的治療并在最后一次治療后，疾病出現(xiàn)進(jìn)展的多發(fā)性骨髓瘤。該藥為一種蛋白酶體抑制劑，能夠特異性抑制哺乳動(dòng)物細(xì)胞內(nèi)26s蛋白酶體的類胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin-like)活性，對(duì)細(xì)胞內(nèi)一連串的信號(hào)發(fā)送產(chǎn)生影響，最終導(dǎo)致癌細(xì)胞死亡。已有研究發(fā)現(xiàn)蛋白酶體抑制劑具有以下效應(yīng)：1)對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞具有選擇性殺傷作用；2)與其它抗癌藥物聯(lián)合應(yīng)用具有協(xié)同作用；3)具有放療增敏作用；4)可誘導(dǎo)bcl-2過(guò)表達(dá)細(xì)胞凋亡。

wo2009/036281公開了一種硼替佐米兩種晶型的合成方法：晶型a是通過(guò)混合甲醇與水兩種溶劑重結(jié)晶，其水分含量大約為5％；晶型b是通過(guò)混合甲苯與二氯甲烷兩種溶劑來(lái)重結(jié)晶制備，其水分含量大約為3％。

2011/107912公開了兩種硼替佐米a1與a2晶型，晶型a1的xrpd2θ處的特征吸收峰為：7.1，8.5，10.1，12.2，13.2，14.6，15.9，16.7，18.4，18.9，19.5，21.3，25.3±0.2°；晶型a2的xrpd2θ處的特征吸收峰為：6.9，7.2，8.5，10.1，10.7，12.2，13.3，14.6，16.0，16.6，18.4，19.1，19.5，21.4，25.4，26.4±0.2°。

wo2012/131707公開了一種硼替佐米al晶型，其xrpd2θ處的特征吸收峰為：6.0，8.5，12.2，13.3，14.1，17.3，18.8，19.0，19.6，20.0，21.6，22.4，23.2，24.2，24.6，26.0，26.8，27.3±0.2°，且其含水量在7％至9％之間。

以上文獻(xiàn)公開的制取硼替佐米晶型均需要涉及到毒性較大的二類溶劑，從工業(yè)生產(chǎn)的角度出發(fā)，制備穩(wěn)定的硼替佐米晶型有一定的技術(shù)難度，所以獲得一個(gè)穩(wěn)定的硼替佐米晶型的工藝是非常迫切且必要的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種硼替佐米晶型。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種制備硼替佐米晶型的方法。

本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供一種硼替佐米晶型在制備26s蛋白酶體的類胰凝乳蛋白酶抑制劑藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明所稱的“預(yù)防”是指在未被臨床標(biāo)準(zhǔn)認(rèn)定的疾病前，各種用于防止疾病發(fā)生或發(fā)展的手段或措施，包括醫(yī)學(xué)、物理或化學(xué)的方法，以阻止和降低疾病各種癥狀的發(fā)生或發(fā)展。

本發(fā)明所稱的“治療”是指為了阻止和降低疾病的發(fā)生或發(fā)展，使疾病病程的發(fā)展或加重得以抑制、遏制、減輕、改善、減緩、停止、延遲或反轉(zhuǎn)，所描述的保持或用藥時(shí)的疾病的、紊亂的或病理學(xué)狀態(tài)的各種指標(biāo)包括減輕或減少癥狀或并發(fā)癥，或治愈或消除疾病、紊亂或狀況。

本發(fā)明所稱的“制劑”是指含有本發(fā)明提供的各種植物及其提取物和活性部位有利于給藥的劑型，如：但不僅限于，水溶液注射劑、粉針劑、丸劑、散劑、片劑、貼劑、栓劑、乳劑、霜?jiǎng)⒛z劑、顆粒劑、膠囊劑、氣霧劑、噴霧劑、粉霧劑、緩釋劑和控釋劑等。這些藥用輔料既可以是各種制劑中常規(guī)使用的，如：但不僅限于，等滲劑、緩沖液、矯味劑、賦形劑、填充劑、粘合劑、崩解劑和潤(rùn)滑劑等；也可以是為了與所述物質(zhì)相適應(yīng)而選擇使用的，如：乳化劑、增溶劑、抑菌劑、止痛劑和抗氧劑等，這類輔料能有效提高組合物所含化合物的穩(wěn)定性和溶解性或改變化合物的釋放速率和吸收速率等，從而改善本發(fā)明化合物在生物體內(nèi)的代謝，進(jìn)而增強(qiáng)給藥效果。此外，還可以為實(shí)現(xiàn)特定的給藥目的或方式，如：緩釋給藥、控釋給藥和脈沖給藥等，而使用的輔料，如：但不僅限于，明膠、白蛋白、殼聚糖、聚醚和聚酯類高分子材料，如：但不僅限于，聚乙二醇、聚氨酯、聚碳酸酯及其共聚物等。所稱的“有利于給藥”的主要表現(xiàn)有：但不僅限于提高治療效果、提高生物利用度、降低毒副作用和提高患者順應(yīng)性等。

本發(fā)明提供的一種硼替佐米晶型，其在x射線粉末衍射圖譜中具有以下2θ測(cè)定的特征峰：5.7°±0.2°、7.5°±0.2°、9.8°±0.2°、11.3°±0.2°、12.9°±0.2°、15.0°±0.2°、15.3°±0.2°、17.0°±0.2°、18.1°±0.2°、20.3°±0.2°、20.5°±0.2°、21.4°±0.2°和22.0°±0.2°。

本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型，其紅外光譜在450.07cm^-1、702.51cm^-1、747.27cm^-1、775.07cm^-1、870.02cm^-1、930.30cm^-1、1021.19cm^-1、1046.30cm^-1、1081.43cm^-1、1115.48cm^-1、1152.10cm^-1、1201.22cm^-1、1270.09cm^-1、1327.24cm^-1、1385.13cm^-1、1455.92cm^-1、1466.16cm^-1、1581.18cm^-1、1626.96cm^-1、1681.92cm^-1、2868.29cm^-1、2925.67cm^-1、2952.46cm^-1、3029.01cm^-1、3064.36cm^-1、3308.39cm^-1和3387.54cm^-1處附近有吸收峰。

本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型，其差示掃描量熱(dsc)分析在加熱至106.6℃±0.5℃和170.3℃±0.5℃出現(xiàn)吸熱峰。

本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型，其熱重分析(tga)在加熱到100℃～150℃時(shí)，具有4.60％±1.0％的重量損失梯度。

經(jīng)卡爾菲舍水份滴定儀檢測(cè)，本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型含水量為4％～6％。

本發(fā)明提供的一種制備各種硼替佐米晶型的方法，包括如下步驟：

將硼替佐米粗品溶于乙酸乙酯中，加入二乙醇胺，氮?dú)獗Ｗo(hù)下攪拌，抽濾，得到白色固體。所得固體轉(zhuǎn)至乙酸乙酯中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下滴加鹽酸，攪拌，分液，洗滌，干燥，抽濾，所得濾液濃縮干后得到無(wú)定形的硼替佐米產(chǎn)品，接著先后加入良性溶劑和非良性溶劑重結(jié)晶得到硼替佐米晶體。

本發(fā)明提供的另一種制備各種硼替佐米晶型的方法，包括如下步驟：

先將硼替佐米粗品溶于10～30倍的乙酸乙酯中，加入二乙醇胺(二乙醇胺與硼替佐米粗品摩爾比為1∶1～2∶1)，氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃～30℃下攪拌10小時(shí)以上，大量固體析出；

然后抽濾，所得固體轉(zhuǎn)至10～30倍的乙酸乙酯中，氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃～5℃下滴加鹽酸(鹽酸與硼替佐米粗品的摩爾比為1∶1～3∶1)，完畢，0℃～30℃攪拌4小時(shí)以上；

接著分出水相，將有機(jī)相分別用飽和碳酸氫鈉和食鹽水洗，所得溶液用無(wú)水硫酸鈉干燥3小時(shí)～5小時(shí)；

之后濃縮并干燥，得到無(wú)定形的硼替佐米產(chǎn)品；

最后，在0℃～35℃下向無(wú)定形的硼替佐米先后加入良性溶劑和非良性溶劑重結(jié)晶得到硼替佐米晶體。

本發(fā)明提供的制備方法，硼替佐米粗品，或固體與乙酸乙酯的倍數(shù)關(guān)系應(yīng)理解為僅限于數(shù)值倍數(shù)，硼替佐米粗品的計(jì)量單位為“克(g)”，乙酸乙酯的計(jì)量單位為“毫升(ml)”。如：硼替佐米粗品3g，10倍乙酸乙酯即為30ml，20倍乙酸乙酯即為60ml。

本發(fā)明提供的制備方法，良性溶劑與無(wú)定形硼替佐米的用量在3ml∶1g至10ml∶1g之間，優(yōu)選5ml∶1g。所稱的良性溶劑是化合物重結(jié)晶常用術(shù)語(yǔ)，具體如：該溶劑可以溶化或溶解硼替佐米，或使硼替佐米快速溶解于該溶劑中，或使用少量的溶劑即可使硼替佐米溶解，或達(dá)到較高的溶解度，如：但不限于c1～c6低級(jí)單元醇(如：乙醇、正丙醇和異丙醇等)、酮類(如：丙酮和甲基乙基酮等)、乙酸與c1～c6低級(jí)單元醇形成的酯類(如：乙酸乙酯和乙酸異丙酯等)。這些溶劑單獨(dú)和組合應(yīng)用于本發(fā)明，優(yōu)先選擇乙酯乙酯。

本發(fā)明提供的制備方法，非良性溶劑與無(wú)定形硼替佐米的用量在15ml∶1g至50ml∶1g之間，優(yōu)選20ml∶1g。所稱的非良性溶劑是化合物重結(jié)晶常用術(shù)語(yǔ)，具體如：該溶劑難以溶化或溶解硼替佐米，或使硼替佐米緩慢溶解于該溶劑中，或使用大量的溶劑才使小量或微量的硼替佐米溶解，或使用機(jī)械力才使小量或微量硼替佐米溶解，如：正庚烷、甲基叔丁基醚、異丙醚和甲苯。這些溶劑單獨(dú)和組合應(yīng)用于本發(fā)明，優(yōu)先選擇甲基叔丁基醚。

本發(fā)明提供的制備方法，重結(jié)晶溫度為25℃。

本發(fā)明提供的制備方法，重結(jié)晶還包括加入少量晶種。

本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型在制備26s蛋白酶體的類胰凝乳蛋白酶抑制劑藥物(如：治療多發(fā)性骨髓瘤的藥物)中的應(yīng)用，如：以本發(fā)明提供的各種硼替佐米晶型或其藥學(xué)上可接受的鹽為活性成分制成組合物。

本發(fā)明技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的有益效果：

本發(fā)明提供的各種硼替佐米，具有較好的穩(wěn)定性和較低的吸濕性。

本發(fā)明提供的各種硼替佐米制備方法，過(guò)程簡(jiǎn)單、成本低、收率高、產(chǎn)品純度高(hplc，99％以上)。

附圖說(shuō)明

圖1為本發(fā)明硼替佐米晶型的x射線粉末衍射圖；

圖2為本發(fā)明硼替佐米晶型的差示掃描量熱圖；

圖3為本發(fā)明硼替佐米晶型的熱重分析圖；

圖4為本發(fā)明硼替佐米晶型的紅外光譜圖；

圖5為本發(fā)明硼替佐米晶型的核磁共振氫譜圖；

圖6為本發(fā)明硼替佐米晶型的高效液相色譜圖。

具體實(shí)施方式

以下詳細(xì)描述本發(fā)明的技術(shù)方案。本發(fā)明實(shí)施例僅用以說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說(shuō)明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精神和范圍，其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍中。

實(shí)施例1硼替佐米晶體的制取

3g硼替佐米粗品加至60ml乙酸乙酯中，加入0.9g二乙醇胺，氮?dú)獗Ｗo(hù)，20℃～30℃下攪拌20小時(shí)。過(guò)濾，得白色固體。將白色固體加至40ml乙酸乙酯中。氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃～5℃下滴加20ml1m鹽酸。完畢，20℃～30℃下攪拌4小時(shí)。停止攪拌后，分出水相，有機(jī)相用20ml飽和碳酸氫鈉洗一次，20ml飽和鹽水洗一次，無(wú)水硫酸鈉干燥4小時(shí)。濾掉干燥劑后，濃縮得白色固體。將該固體溶于15ml乙酸乙酯中(如有少量不溶物則過(guò)濾棄之)。75ml甲基叔丁基醚緩慢滴加至該溶液中。室溫?cái)嚢?0小時(shí)，抽濾，使用30ml甲基叔丁基醚洗兩次，得到白色固體，即為硼替佐米晶型。hplc純度由粗品的96％提高至99％，固體在45℃下真空干燥24小時(shí)，使用卡爾菲舍水份滴定儀檢測(cè)硼替佐米晶型的水份含量為4.5％。所得硼替佐米晶型的xrpd、dsc、tga譜圖和紅外光譜與符合圖1、圖2、圖3和圖4所示的特征。

實(shí)施例2硼替佐米晶體的制取

3g硼替佐米粗品加至60ml乙酸乙酯中，加入0.9g二乙醇胺，氮?dú)獗Ｗo(hù)，20℃～30℃下攪拌20小時(shí)。過(guò)濾，得白色固體。將白色固體加至40ml乙酸乙酯中。氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃～5℃下滴加20ml1m鹽酸。完畢，20℃～30℃下攪拌4小時(shí)。停止攪拌后，分出水相，有機(jī)相用20ml飽和碳酸氫鈉洗一次，20ml飽和鹽水洗一次，無(wú)水硫酸鈉干燥4小時(shí)。濾掉干燥劑后，濃縮得白色固體。將固體加至20ml丙酮中，攪拌使充分溶解(如有少量不溶物則過(guò)濾棄之)。100ml甲基叔丁基醚緩慢滴加至該溶液中。室溫?cái)嚢?0小時(shí)，抽濾，使用20ml甲基叔丁基醚洗兩次，得到白色固體，即為硼替佐米晶型。固體在45℃下真空干燥24小時(shí)，使用卡爾菲舍水份滴定儀檢測(cè)硼替佐米晶型的水份含量為4.5％。所得硼替佐米晶型的xrpd、dsc、tga譜圖和紅外光譜與符合圖1、圖2、圖3和圖4所示的特征。

實(shí)施例3硼替佐米晶體的制取

300g硼替佐米粗品加至6l乙酸乙酯中，加入90g二乙醇胺，氮?dú)獗Ｗo(hù)，20℃～30℃下攪拌20小時(shí)。過(guò)濾，得白色固體。將白色固體加至4l乙酸乙酯中。氮?dú)獗Ｗo(hù)，0℃～5℃下滴加2l1m鹽酸。完畢，20℃～30℃下攪拌4小時(shí)。停止攪拌后，分出水相，有機(jī)相用2l飽和碳酸氫鈉洗一次，2l飽和鹽水洗一次，無(wú)水硫酸鈉干燥4小時(shí)。濾掉干燥劑后，濃縮得白色固體。將固體溶于1.5l乙酸乙酯中(如有少量不溶物則過(guò)濾棄之)。7.5l甲基叔丁基醚緩慢滴加至該溶液中。室溫?cái)嚢?0小時(shí)，抽濾，使用500ml甲基叔丁基醚洗兩次，得到白色固體，即為硼替佐米晶型。固體在45℃下真空干燥24小時(shí)，使用卡爾菲舍水份滴定儀檢測(cè)硼替佐米晶型的水份含量為4.5％。所得硼替佐米晶型的xrpd、dsc、tga譜圖和紅外光譜與符合圖1、圖2、圖3和圖4所示的特征。

實(shí)施例4硼替佐米晶型的x射線粉末衍射

本實(shí)施例所稱的x射線粉末衍射圖譜是在apd2000θ/θ粉末和液體自動(dòng)衍射計(jì)上采集，本實(shí)施例所稱的x射線粉末衍射的方法參數(shù)如下：

cuka靶，管電壓40kv，管電流40ma，掃描角度范圍為3°～40°，掃描角度速率為每秒0.02°。

硼替佐米晶型的x射線粉末衍射如圖1所示，其具體數(shù)據(jù)如表1所示：

表1

由表1可見，硼替佐米晶型在x射線粉末衍射圖譜中具有以下2θ測(cè)定的特征峰：5.7°±0.2°、7.5°±0.2°、9.8°±0.2°、11.3°±0.2°、12.9°±0.2°、15.0°±0.2°、15.3°±0.2°、17.0°±0.2°、18.1°±0.2°、20.3°±0.2°、20.5°±0.2°、21.4°±0.2°和22.0°±0.2°處具有特征峰。

實(shí)施例5硼替佐米晶型的差示掃描量熱分析

本實(shí)施例所稱的差示掃描量熱(dsc)分析圖使用t-zero瓶，加熱范圍為30℃～350℃，加熱速度為每分鐘10℃，氮?dú)饬魉俣葹槊糠昼?0毫升。

差示掃描量熱在加熱至至106.6℃附近和170.3℃附近出現(xiàn)吸熱峰，記為至106.6℃±0.5℃和170.3℃±0.5℃，參加圖2。

實(shí)施例6硼替佐米晶型的熱重分析

本實(shí)施例所稱的熱重分析(tga)pt瓶，加熱范圍為30℃～350℃，加熱速度為每分鐘5℃。

硼替佐米晶型加熱到到100℃～150℃時(shí)，具有4.60％±1.0％的重量損失梯度，參見圖3。

實(shí)施例7硼替佐米晶型的紅外光譜分析

硼替佐米晶型紅外光譜數(shù)據(jù)如下：

其在450.07cm^-1、702.51cm^-1、747.27cm^-1、775.07cm^-1、870.02cm^-1、930.30cm^-1、1021.19cm^-1、1046.30cm^-1、1081.43cm^-1、1115.48cm^-1、1152.10cm^-1、1201.22cm^-1、1270.09cm^-1、1327.24cm^-1、1385.13cm^-1、1455.92cm^-1、1466.16cm^-1、1581.18cm^-1、1626.96cm^-1、1681.92cm^-1、2868.29cm^-1、2925.67cm^-1、2952.46cm^-1、3029.01cm^-1、3064.36cm^-1、3308.39cm^-1、3387.54cm^-1處附近有吸收峰。

實(shí)施例8硼替佐米晶型的核磁共振氫譜分析

硼替佐米晶型的核磁共振氫譜數(shù)據(jù)如下：

¹hnmr(dmso-d6，ppm)：0.73～0.75(6h，m，2*-ch3)，1.15～1.29(2h，m，-ch2-i-pr)，1.48～1.53(1h，m，-chme2)，2.61(1h，d，-ch-b)，3.05～3.16(2h，-ch2ph)4.85～4.91(1h，-ch(bn)co-)7.09～7.21(5h，ph)，8.69(1h，d，pyrazine)，8.82(1h，d，pyrazine)，8.87～8.89(2h，m，nh)，9.06(1h，d，pyrazine)。