本發(fā)明涉及一種茶黃素產(chǎn)品，特別涉及一種富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。
背景技術(shù)：
：茶樹鮮葉(camelliasinensis(l.)o.ktze)含有茶兒茶素類多酚類物質(zhì)及其對應(yīng)的多酚氧化酶，在適度的溫度和氧氣作用下，接觸反應(yīng)能夠生成茶黃素類(theaflavins)多酚類化合物。即表兒茶素(epi-catechin,ec)聯(lián)合表沒食子兒茶素(epigallo-catechin,egc)、ec聯(lián)合表沒食子兒茶素沒食子酸酯(epigallo-catechingallate,egcg)、表兒茶素沒食子酸酯(epi-catechingallate,ecg)聯(lián)合egc、ecg聯(lián)合egcg組合物經(jīng)多酚氧化酶(teapolyphenoloxidase,tppo)酶促氧化縮聚而成茶黃素類化合物。茶黃素類多酚類化合物通常包括簡單茶黃素(tf)和酯型茶黃素，其中酯型茶黃素主要涉及的成分為茶黃素-3-單沒食子酸酯(tf-3-g)、茶黃素-3′-單沒食子酸酯(tf-3′-g)和茶黃素-3,3′-雙沒食子酸酯(tf-3,3′-g)。茶黃素類多酚類化合物具有體外抗氧化、降低心腦血管疾病、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞功能、抗流感病毒及hiv病毒等獨(dú)特的作用。茶黃素的酶促合成既可以在純水相中進(jìn)行，也可以在酯水雙液相中進(jìn)行。茶多酚酶促氧化在水與水不相混溶的有機(jī)溶劑組成雙液相體系反應(yīng)條件下，可提高茶黃素含量(蕭偉祥,鐘瑾,胡耀武,蕭慧.雙液相系統(tǒng)酶化學(xué)技術(shù)制取茶色素.天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2001,13(5):49-52.||李立祥,蕭偉祥.茶多酚雙液相氧化制取茶色素參數(shù)優(yōu)化.茶葉科學(xué),2002,22(2):119-124.||李立祥,蕭偉祥.茶多酚雙液相氧化制取茶色素工藝研究,南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,27(2):99-104.)。相關(guān)文獻(xiàn)在明確以乙酸乙酯和水組成作為反應(yīng)體系的條件下，進(jìn)行了較為詳細(xì)的參數(shù)優(yōu)化研究。研究結(jié)果均表明，在反應(yīng)體系中加入適量乙酸乙酯，可以提高茶黃素的生成量(鮮殊.茶鮮葉勻漿懸浮發(fā)酵在高茶黃素含量茶色素制備中的應(yīng)用研究.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文,2012.||周潔.茶黃素酶促氧化合成條件的優(yōu)化.西南大學(xué)碩士學(xué)位論文.2013.)。中國專利cn200810023581.5公開了制備茶黃素的新工藝，其制備是從綠茶中以乙酸乙酯提取茶多酚作為原料，并以充分粉碎的新鮮茶葉為發(fā)酵酶，在通入純氧下進(jìn)行攪拌發(fā)酵后，再通過分離、濃縮、水洗、等步驟，得到合格的茶黃素產(chǎn)品。同時(shí)，中國專利cn200910153520.5也公開了一種茶黃素的產(chǎn)業(yè)化制備方法，該專利所采用的以乙酸乙酯和水組成作為反應(yīng)體系中各組份分別為粉碎的茶鮮葉:富含茶多酚的乙酸乙酯溶液：乙酸乙酯：緩沖溶液的用量比等于800kg：600-900kg：15-25l：1-2l。本發(fā)明人在重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)的過程中發(fā)現(xiàn)，以乙酸乙酯和水組成的雙液相作為反應(yīng)體系的條件下，雖然可以較好的合成茶黃素，但是茶兒茶素過度消耗，且雙酯型茶黃素得不到有效合成。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種利用茶樹鮮葉自身所含有的茶兒茶素和茶多酚氧化酶來酶促合成制備茶黃素產(chǎn)品。本發(fā)明的再一個(gè)目的是在提高茶黃素產(chǎn)率的前提下最大程度的保留未被轉(zhuǎn)化的茶兒茶素。本發(fā)明提供的一種富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品，通過如下步驟實(shí)現(xiàn)：(1)將茶樹(camelliasinensis)鮮葉或嫩莖充分研磨粉碎；(2)按一定比例將正已烷或石油醚加入水飽和的乙酸乙酯中，制成特定水飽和的乙酸乙酯混合溶劑；(3)將步驟(1)粉碎的茶樹鮮葉或嫩莖與步驟(2)中的特定水飽和的乙酸乙酯混合溶劑按一定比例混合并水浴振蕩進(jìn)行酶促反應(yīng)；(4)將步驟(3)的反應(yīng)液在減壓條件下用濾紙進(jìn)行過濾，得過濾液；(5)減壓充分濃縮步驟(4)的過濾液，獲得濃縮浸膏；(6)向步驟(5)的濃縮浸膏中加入5%的乙醇水溶液，充分振蕩提取目標(biāo)物，得提取液；(7)濃縮步驟(6)的提取液；和(8)任選地干燥步驟(7)的產(chǎn)品，得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。優(yōu)選地，其中步驟(2)中所述的正已烷或石油醚占特定水飽和的乙酸乙酯混合溶劑的2.5-35%(v/v)。優(yōu)選地，其中步驟(3)中所述的茶樹鮮葉與特定水飽和的乙酸乙酯混合溶劑固液比為1:20～1:40。優(yōu)選地，其中步驟(3)中所述的酶促反應(yīng)時(shí)間在5～120min，水浴溫度在15～50℃。優(yōu)選地，其中步驟(5)和(7)在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行。優(yōu)選地，其中步驟(8)所涉及的富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品中，茶兒茶素是指表兒茶素(ec)、表沒食子兒茶素(egc)、表沒食子兒茶素沒食子酸酯(egcg)和表兒茶素沒食子酸酯(ecg)。優(yōu)選地，其中步驟(8)所涉及的富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品中，茶黃素是指簡單茶黃素(tf)、茶黃素-3-單沒食子酸酯(tf-3-g)、茶黃素-3′-單沒食子酸酯(tf-3′-g)和茶黃素-3,3′-雙沒食子酸酯(tf-3,3′-g)。優(yōu)選地，其中步驟(6)的提取液以iso14502-2:2005(e)或按實(shí)施例中所述調(diào)整過的iso14502-2:2005(e)方法規(guī)定的高效液相色譜檢測的各成分積分面積的關(guān)系中，egcg>tf-3,3′-g，0.7<(tf-3,3′-g/ecg)<1，且tf-3,3′-g大于其余各茶黃素單體間兩者之和。有益效果采用本發(fā)明所實(shí)施的方案，可以一方面降低茶兒茶素的損耗率；另一方面可以提高雙酯型茶黃素的轉(zhuǎn)化生成率，從而可以實(shí)現(xiàn)較好茶兒茶素利用率和較佳的經(jīng)濟(jì)效益。附圖說明圖1是實(shí)施例1-3所分析的高效液相色譜圖。圖2是實(shí)施例4-5所分析的高效液相色譜圖。圖3是實(shí)施例6-7所分析的高效液相色譜圖。圖4是實(shí)施例8-10所分析的高效液相色譜圖。圖5是實(shí)施例11-13所分析的高效液相色譜圖。圖6是實(shí)施例14-16所分析的高效液相色譜圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合實(shí)施例，更進(jìn)一步闡述本發(fā)明的主旨。下述實(shí)施例用來解釋而非限制本發(fā)明，在本發(fā)明的精神和權(quán)利要求前提下，對本發(fā)明作出的任何修改均被認(rèn)為落入本發(fā)明的保護(hù)范圍。下述實(shí)施例中目標(biāo)產(chǎn)物的分析采用高效液相色譜法。waters高效液相色譜儀(1525泵、柱溫箱、2487紫外可見雙通道檢測器、717-plus自動進(jìn)樣器、breeze控制軟件包)，色譜柱為phenomenexluna5μmphenyl-hexyl,250mm×4.6mm，柱溫為35℃，檢測波長為278nm，進(jìn)樣量10μl。高效液相色譜分析采用雙相梯度洗脫的方式，其中a相為水相(含2%的醋酸和9%的乙腈，v/v)，b相為有機(jī)相(含2%的醋酸和80%的乙腈，v/v)。實(shí)施例1～10采用iso14502-2:2005(e)的洗脫的方式；實(shí)施例11～13在iso14502-2:2005(e)的洗脫條件基礎(chǔ)上調(diào)整為0至10min(100%a)→10至21.25min(76%a)→21.25至29min(76%a)→29至29.2min(76%a,1.3mi/min)→29.2至39min(76%a,1.3mi/min)→39至39.2min(100%a)→39.2至45min(100%a)；實(shí)施例14～16在iso14502-2:2005(e)的洗脫條件基礎(chǔ)上調(diào)整為0至10min(100%a)→10至21.25min(76%a)→21.25至39min(76%a)→39至41min(100%a)→41至46min(100%a)。下述實(shí)驗(yàn)例中所采用的茶樹鮮葉或嫩莖采自2015年5月上旬，并放置冰箱中冷凍(-20℃)備用。下述實(shí)驗(yàn)例中所采用的茶樹鮮葉或嫩莖為在研缽中充分粉碎研磨的鮮葉或嫩莖。下述實(shí)驗(yàn)例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。實(shí)施例1準(zhǔn)確稱取0.7257g粉碎研磨的嫩莖置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，常溫(15℃)振蕩5min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖1中實(shí)施例-1和表1)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表1高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積2238262157493137064556072725751913019277150實(shí)施例2準(zhǔn)確稱取0.7023g粉碎研磨的嫩莖置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，水浴(35℃)振蕩120min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖1中實(shí)施例-2和表2)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表2高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積207622243586522939399851418620412256156880實(shí)施例3準(zhǔn)確稱取0.6411g粉碎研磨的嫩莖和0.2170g粉碎研磨的茶樹鮮葉置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，水浴(35℃)振蕩120min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖1中實(shí)施例-3和表3)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表3高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積2749060未檢出140670265097502498556447697563實(shí)施例4準(zhǔn)確稱取0.5g粉碎研磨的茶樹鮮葉，微波高火40秒后，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，振蕩提取后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖2中實(shí)施例-4和表4)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表4高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積28398594821524853479832149218264198143545實(shí)施例5準(zhǔn)確稱取0.5g粉碎研磨的茶樹鮮葉(作為實(shí)施例4的平行樣)，微波高火40秒后，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，振蕩提取后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖2中實(shí)施例-5和表5)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表5高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積29632885378428272401097723761674837587189實(shí)施例6準(zhǔn)確稱取0.5g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，水浴(35℃)振蕩反應(yīng)5min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖3中實(shí)施例-6和表6)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表6高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積281122887151349179600956135093150445393842實(shí)施例7準(zhǔn)確稱取0.5g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖3中實(shí)施例-7和表7)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表7高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積2780535未檢出829488455256123762170850528947實(shí)施例8準(zhǔn)確稱取0.2481g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯，水浴(15℃)振蕩反應(yīng)120min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖4中實(shí)施例-8和表8)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表8高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積1820408未檢出1538888658108142926108894171845實(shí)施例9準(zhǔn)確稱取0.525g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml特定水飽和的乙酸乙酯(水飽和的乙酸乙酯和石油醚體積之比為40:1)，水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖4中實(shí)施例-9和表9)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表9高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積2960583未檢出782014493280134249177667608392實(shí)施例10準(zhǔn)確稱取0.5025g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml特定水飽和的乙酸乙酯(水飽和的乙酸乙酯和石油醚體積之比為20:1)，水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖4中實(shí)施例-10和表10)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表10高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-g+tf-3,3′-g積分面積3253717未檢出742215472706136650192368703953實(shí)施例11準(zhǔn)確稱取0.5115g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml特定水飽和的乙酸乙酯(水飽和的乙酸乙酯和正已烷體積之比為8:1)，水浴(45℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖5中實(shí)施例-11和表11)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表11高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積3383546未檢出717187586483135748197222159649457178實(shí)施例12準(zhǔn)確稱取0.5391g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml特定水飽和的乙酸乙酯(水飽和的乙酸乙酯和石油醚體積之比為8:1)，水浴(18℃)振蕩反應(yīng)60min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖5中實(shí)施例-12和表12)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表12高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積31101592957963873573040133102182781152277441419實(shí)施例13準(zhǔn)確稱取0.5146g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml特定水飽和的乙酸乙酯(水飽和的乙酸乙酯和石油醚體積之比為8:1)，水浴(18℃)振蕩反應(yīng)120min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖5中實(shí)施例-13和表13)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表13高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積3080455未檢出512429486095129237193550153854438713實(shí)施例14準(zhǔn)確稱取0.5082g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯和5ml石油醚，充分混合并水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖6中實(shí)施例-14和表14)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表14高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積3239301未檢出61771224738140088243423193513757353實(shí)施例15準(zhǔn)確稱取0.5261g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入20ml水飽和的乙酸乙酯和10ml石油醚，充分混合并水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖6中實(shí)施例-15和表15)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表15高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分咖啡堿ecegcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積3395020未檢出41575658083387182871130266551148實(shí)施例16準(zhǔn)確稱取0.5479g粉碎研磨的茶樹鮮葉，置于100ml平底三角燒瓶中，加入10ml水飽和的乙酸乙酯和10ml石油醚，充分混合并水浴(35℃)振蕩反應(yīng)30min后，迅速以濾紙減壓過濾，得過濾液，過濾液在真空度-0.07mpa～-0.1mpa和溫度50℃以下進(jìn)行充分濃縮后，加入5%的乙醇水溶液20ml，充分振蕩提取目標(biāo)物并定容于25ml容量瓶中，搖勻后進(jìn)樣10μl進(jìn)行高效液相色譜分析(結(jié)果見圖6中實(shí)施例-16和表16)，其余溶液濃縮干燥得富含茶兒茶素的茶黃素產(chǎn)品。表16高效液相色譜分析圖中各成分積分面積成分egcgecgtftf-3-gtf-3′-gtf-3,3′-g積分面積59107804257955046436421161471當(dāng)前第1頁12