技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供一種鼠腎足細(xì)胞分離及培養(yǎng)方法,包括步驟:(a)腹腔注射2%戊巴比妥鈉處死小鼠,酒精消毒后取出小鼠腎臟組織,置于預(yù)冷無菌含雙抗的PBS緩沖液中浸泡洗滌,并剝離除去腎包膜;(b)機(jī)械解離腎臟組織后,預(yù)熱混合酶液消化,混合完全培養(yǎng)液終止消化;(c)采用差異過篩的方法獲得腎足細(xì)胞,將足細(xì)胞接種于處理后的細(xì)胞瓶中培養(yǎng);(d)將培養(yǎng)3d的細(xì)胞經(jīng)胰酶消化后再次篩網(wǎng)過濾,離心棄上清,重懸接種于處理后的細(xì)胞瓶中;(e)細(xì)胞免疫熒光鑒定腎足突細(xì)胞。本發(fā)明提供的小鼠腎足細(xì)胞分離及培養(yǎng)方法重復(fù)性好,操作簡便,而且可獲得產(chǎn)量高、純度高的小鼠腎足細(xì)胞。
技術(shù)研發(fā)人員:張清;張亞洲;蔣敏;齊來俊
受保護(hù)的技術(shù)使用者:江蘇齊氏生物科技有限公司
文檔號(hào)碼:201510906695
技術(shù)研發(fā)日:2015.12.07
技術(shù)公布日:2017.06.13