技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及一種豬圓環(huán)病毒2型(PCV2)雙拷貝感染性克隆的病毒拯救方法及其在間接ELISA檢測(cè)方法中的應(yīng)用，通過(guò)采用適當(dāng)?shù)幕蚬こ碳夹g(shù)方法，基于臨床分離得到的PCV2基因組DNA，設(shè)計(jì)特異性引物，經(jīng)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)獲得全長(zhǎng)基因，將兩個(gè)拷貝的PCV2全長(zhǎng)基因以首尾相連的方式串聯(lián)連到pEGFP-N1載體上，形成PCV2雙拷貝全基因重組質(zhì)粒，轉(zhuǎn)染ST細(xì)胞后連續(xù)盲傳60代，借助PCR檢測(cè)方法以及間接免疫熒光實(shí)驗(yàn)技術(shù)(IFA)對(duì)其在ST細(xì)胞上的感染性以及病毒增殖穩(wěn)定性進(jìn)行鑒定，為進(jìn)一步開展圓環(huán)病毒的致病機(jī)理及診斷技術(shù)研究打下基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：唐志玲;林旭埜;林德銳;齊冬梅;胡美容;周燕芬;謝少霞;陳丹
受保護(hù)的技術(shù)使用者：廣東永順生物制藥股份有限公司
文檔號(hào)碼：201510794434
技術(shù)研發(fā)日：2015.11.13
技術(shù)公布日：2017.05.24