本發(fā)明涉及化合物的結(jié)晶領(lǐng)域；具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及多西他賽三水合物的新晶型及其制備方法。

背景技術(shù)：

多西他賽(化學(xué)名為：(2R,3S)-3-叔丁氧羰基氨基-2-羥基-3-苯丙酸(4-乙酰氧基-2α-苯甲酰氧基-5β,20-環(huán)氧-1,7β,10β-三羥基-9-氧代紫衫烷-11-烯-13α)酯)是由紅豆杉中主要的紫衫烷核心提取物(稱為10-去乙酰巴卡亭或10-DAB)經(jīng)化學(xué)合成而得到的半合成抗癌藥物，因其優(yōu)良的抗癌性能而為越來(lái)越多的人所認(rèn)知。研究表明，多西他賽的抗癌性能要優(yōu)于紫杉醇，而毒副作用卻要更低，因而多西他賽得到了越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。

多西他賽為白色或類白色固體，目前已經(jīng)報(bào)道了眾多晶型。例如，WO2007109654報(bào)道了9種三水合物或無(wú)水的晶型；CN101282955報(bào)道了新的無(wú)水物晶型；WO2012160568報(bào)道了新的三水合物晶型；TW200906813中報(bào)道了三種新無(wú)水物晶型等。目前的研究結(jié)論認(rèn)為多西他賽的三水合物的穩(wěn)定性要優(yōu)于無(wú)水合物。

然而，現(xiàn)有技術(shù)中的多西他賽三水合物的晶型穩(wěn)定性依然不足，在較長(zhǎng)時(shí)間的保存后，其水分、純度、含量及7-表多西他賽異構(gòu)體的含量會(huì)有改變；同時(shí)，現(xiàn)有技術(shù)中多西他賽三水合物的結(jié)晶方法也存在各種不足，例如固液分離不易；易造成多西他賽降解，特別是結(jié)晶后7-表多西他賽含量增多；干燥過(guò)程復(fù)雜，含水量和有機(jī)溶劑殘留量不符合藥典標(biāo)準(zhǔn)；需要高溫結(jié)晶，或加入晶種誘導(dǎo)；以及，多西他賽三水合物晶體的摩爾收率低。

因此，本領(lǐng)域急需穩(wěn)定的多西他賽三水合物新晶型以及結(jié)晶方法。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種穩(wěn)定的多西他賽三水合物新晶型以及制備該新晶型的方法。

在第一方面，本發(fā)明提供下式所示的多西他賽三水合物的晶體，所述晶體在粉末X射線衍射圖譜中的下述2θ角有特征峰：4.30±0.2°、8.74±0.2°、10.32±0.2°、11.04±0.2°、13.92±0.2°、17.70±0.2°

在具體的實(shí)施方式中，所述晶體在粉末X射線衍射圖譜的下述2θ角還具有特征峰：約4.98±0.2°、7.15±0.2°、11.70±0.2°、12.42±0.2°、15.28±0.2°、18.46±0.2°、19.30±0.2°、19.76±0.2°、22.12±0.2°、27.42±0.2°、36.56±0.2°。

在具體的實(shí)施方式中，所述晶體的粉末X射線衍射圖譜基本上如圖1所示。

在具體的實(shí)施方式中，所述晶體的差示掃描量熱圖(DSC)顯示在87.0℃、168.0℃及225.5℃處有最大峰值。

在具體的實(shí)施方式中，所述晶體的差示掃描量熱圖(DSC)如圖2所示。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述多西他賽三水合物的晶體在25±2℃，相對(duì)濕度60±10％的條件下放置24個(gè)月，其水分、純度、含量及7-表多西他賽異構(gòu)體的含量改變小于10％、優(yōu)選小于5％、更優(yōu)選小于1％。

在第二方面，本發(fā)明提供本發(fā)明第一方面所述的多西他賽三水合物的晶體的制備方法，包括以下步驟：

a)將多西他賽溶解于酮和醇的混合液，從而得到多西他賽的溶液；和

b)將水加入至步驟a)得到的多西他賽溶液中，從而得到多西他賽三水合物的晶體。

在具體的實(shí)施方式中，所述步驟a)包括：

a1)混合多西他賽與酮，從而得到多西他賽的酮溶液；和

a2)向a1)獲得的多西他賽溶液中加入醇，從而得到多西他賽的酮醇混合溶 液；和/或

所述步驟b)包括：

b1)將水加入至步驟a)得到的多西他賽溶液中，從而得到一懸浮液；

b2)將步驟b1)得到的懸浮液過(guò)濾或離心得到固體，真空干燥從而多西他賽三水合物的晶體。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在步驟a1)中，將酮和多西他賽混合物加熱至30～55℃以促使溶解多西他賽。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在步驟a2)中，先將多西他賽與酮的溶液冷卻至25～35℃，再加入醇。

在具體的實(shí)施方式中，所述酮是C_3-5的酮；優(yōu)選丙酮；和/或，所述醇是C_1-3的直鏈或支鏈醇；優(yōu)選甲醇。

在具體的實(shí)施方式中，多西他賽與酮的質(zhì)量體積比為1:7-15g/ml；優(yōu)選1:10g/ml；和/或

醇與酮的體積比為5～20:100；優(yōu)選地，醇與酮的體積比為10～15:100；和/或

水與酮和醇用量之和的體積比為1～4:1；更優(yōu)選地，水與酮和醇用量之和的體積比為1.5～2.5:1；最優(yōu)選地，水與酮和醇用量之和的體積比為2:1。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，冷卻步驟b1)得到的懸浮液；優(yōu)選地，將懸浮液冷卻至10～30℃，更優(yōu)選至約15℃。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在步驟b1)中，在25～35℃，真空-0.096～-0.098MPa下干燥多西他賽三水合物的晶體約15小時(shí)，從而使其含水量在5～7％之間。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述方法包括：

a)將多西他賽與丙酮合并；

b)混合物加熱至30～55℃；

c)將醇加入至步驟b)的混合物中；

d)將水加入至步驟c)的混合物中得到懸浮液；

e)將步驟d)過(guò)濾或離心得到固體，真空干燥以獲得三水多西他賽晶體。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，所述方法獲得的多西他賽三水合物的晶體在25±2℃，相對(duì)濕度60±10％的條件下放置24個(gè)月，其水分、純度、含量及7-表多 西他賽異構(gòu)體的含量改變小于10％、優(yōu)選小于5％、更優(yōu)選小于1％。

在第三方面，本發(fā)明提供本發(fā)明第一方面所述的多西他賽三水合物的晶體在制備用于治療晚期乳腺癌、卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌、頭頸部癌、小細(xì)胞肺癌、胃癌、胰腺癌、黑色素瘤的藥物中的應(yīng)用。

在第四方面，本發(fā)明提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本發(fā)明第一方面所述的多西他賽三水合物的晶體和任選的藥學(xué)上可接受的賦形劑。

應(yīng)理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)中，本發(fā)明的上述各技術(shù)特征和在下文(如實(shí)施例)中具體描述的各技術(shù)特征之間都可以互相組合，從而構(gòu)成新的或優(yōu)選的技術(shù)方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附圖說(shuō)明

圖1顯示了本發(fā)明的三水合多西他賽晶型的X射線衍射圖譜；

圖2顯示了本發(fā)明的三水合多西他賽晶型的DSC圖譜。

圖3顯示了本發(fā)明的三水合多西他賽晶型的紅外圖譜。

具體實(shí)施方式

發(fā)明人經(jīng)過(guò)廣泛而深入的研究，出乎意料地發(fā)現(xiàn)采用酮/醇/水的三元體系使得多西他賽結(jié)晶可以獲得三水合多西他賽的新晶型。本發(fā)明的三水合多西他賽新晶型具有極其優(yōu)異的穩(wěn)定性；而本發(fā)明的結(jié)晶方法不會(huì)造成多西他賽降解，操作簡(jiǎn)便，摩爾收率高。在此基礎(chǔ)上完成了本發(fā)明。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“晶體”是指分子或原子復(fù)合物呈特定排列形式的固體。在本文中，術(shù)語(yǔ)“本發(fā)明晶體”、“三水合多西他賽晶體”、“多西他賽三水合物的晶體”可以互換使用，均是表示通過(guò)本發(fā)明方法獲得的、具備本文所述特征的多西他賽的三水合物的晶體。

本文所用的術(shù)語(yǔ)X射線多晶衍射又稱為X射線粉末衍射，當(dāng)X光透過(guò)晶體可以產(chǎn)生一系列的衍射，在實(shí)驗(yàn)室中使用X射線衍射儀即可獲得X射線衍射圖譜， 在圖譜中，不同的衍射線以及各衍射線的強(qiáng)度是由一定結(jié)構(gòu)的原子團(tuán)所決定的，不同結(jié)構(gòu)的晶體所產(chǎn)生的衍射圖譜各不相同，因此可以使用X射線衍射圖譜來(lái)確定晶體的構(gòu)造，即晶型。

測(cè)定晶體的X-射線衍射圖譜所采用的方法是本領(lǐng)域已知的。例如使用RIGAKU D/max 2550VB/PC型號(hào)的X-射線粉末衍射儀，測(cè)定時(shí)以2°每分鐘的掃描速度獲得圖譜。使用銅輻射靶。

本發(fā)明的三水合多西他賽晶體具有特定的晶體形態(tài)。這種晶體的X-射線衍射圖具有特定的特征峰。具體地說(shuō)，本發(fā)明的三水合多西他賽的晶體在X-射線粉末衍射圖譜中在下述2θ角有特征吸收峰：4.30±0.2°、8.74±0.2°、10.32±0.2°、11.04±0.2°、13.92±0.2°、17.70±0.2°。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的三水合多西他賽的晶體在X-射線粉末衍射圖譜中在下述2θ角還具有特征吸收峰：約4.98±0.2°、7.15±0.2°、11.70±0.2°、12.42±0.2°、15.28±0.2°、18.46±0.2°、19.30±0.2°、19.76±0.2°、22.12±0.2°、27.42±0.2°、36.56±0.2°。更佳地，本發(fā)明的三水合多西他賽晶體具有與圖1基本上一致的X射線衍射圖譜。

本文所用的術(shù)語(yǔ)“示差掃描量熱分析”，又稱“差示量熱掃描分析”(DSC)是在加熱過(guò)程中，測(cè)量被測(cè)物質(zhì)與參比物之間的能量差與溫度之間關(guān)系的一種技術(shù)。DSC圖譜上的峰位置、形狀和峰數(shù)目與物質(zhì)的性質(zhì)有關(guān)，故可以定性地用來(lái)鑒定物質(zhì)。本領(lǐng)域常用該方法來(lái)檢測(cè)物質(zhì)的相變溫度、玻璃化轉(zhuǎn)變溫度、反應(yīng)熱等多種參數(shù)。

DSC測(cè)定方法在本領(lǐng)域中是已知的。例如可使用DSC Q20示差掃描量熱分析儀(NETZSCH DSC204F1)，以10℃每分鐘的升溫速率，從25℃升溫至250℃，獲得晶體的DSC掃描圖譜。

在具體的實(shí)施方式中，采用DSC測(cè)得本發(fā)明的三水合多西他賽晶體在168.0℃和225.5℃具有最大峰值。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的三水合多西他賽晶體具有與圖2基本一致的DSC圖譜，更優(yōu)選在87.0℃具有最大峰值。

也可采用紅外圖譜法(IR)來(lái)確定晶體結(jié)構(gòu)，其測(cè)定方法在本領(lǐng)域中是已知的。例如可采用PE Spectrum One B，以KBr:樣品＝200:1壓片，并在400～4000cm-1范圍掃描。本發(fā)明的三水合多西他賽晶體在以下波數(shù)有特征峰：3451cm^-1、3380 cm^-1、2980cm^-1、1736cm^-1、1712cm^-1、1268cm^-1、1246cm^-1、709cm^-1。優(yōu)選具有與圖3基本一致的紅外圖譜。

本發(fā)明的晶型是三水的，即，晶體中每一分子多西他賽中含有3分子的水。該晶型的含水量用水分滴定儀測(cè)定其結(jié)果為5～7％。

本發(fā)明的三水合多西他賽晶體具備優(yōu)異的穩(wěn)定性。在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明的多西他賽三水合物晶體在25±2℃，相對(duì)濕度60±10％的條件下放置24個(gè)月，其水分、純度、含量及7-表多西他賽異構(gòu)體的含量改變小于10％、優(yōu)選小于5％、更優(yōu)選小于1％。

本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉，多西他賽可用于治療晚期乳腺癌、卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌、頭頸部癌、小細(xì)胞肺癌、胃癌、胰腺癌、黑色素瘤等。因此，本發(fā)明提供的多西他賽三水合物的晶體亦可用于治療晚期乳腺癌、卵巢癌、非小細(xì)胞肺癌、頭頸部癌、小細(xì)胞肺癌、胃癌、胰腺癌、黑色素瘤，即，用于制備治療上述疾病的藥物。

基于本發(fā)明的多西他賽三水合物的晶體，本發(fā)明還提供一種藥物組合物，所述藥物組合物包含本發(fā)明的多西他賽三水合物的晶體和任選的藥學(xué)上可接受的賦形劑。

本發(fā)明的三水合多西他賽晶體是采用酮、醇和水的特定三元體系，通過(guò)本發(fā)明的三水合多西他賽晶體制備方法得到。所述方法包括以下步驟：

a)將多西他賽溶解于酮和醇的混合液，從而得到多西他賽的溶液；和

b)將水加入至步驟a)得到的多西他賽溶液中，從而得到多西他賽三水合物的晶體。

在具體的實(shí)施方式中，所述方法的步驟a)包括：

a1)混合多西他賽與酮，從而得到多西他賽的酮溶液；和，a2)向a1)獲得的多西他賽溶液中加入醇，從而得到多西他賽的酮醇混合溶液；和/或

所述方法的步驟b)包括：

b1)將水加入至步驟a)得到的多西他賽溶液中，從而得到一懸浮液；和

b2)將步驟b1)得到的懸浮液過(guò)濾或離心得到固體，真空干燥從而多西他賽三水合物的晶體。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，在步驟a1)中，將酮和多西他賽混合物加熱至30～55℃以促使溶解多西他賽。在另一優(yōu)選的實(shí)施方式中，在步驟a2)中，先將多西他賽與酮的溶液冷卻至25～35℃，再加入醇。

本發(fā)明方法可以利用低級(jí)的酮或醇。在具體的實(shí)施方式中，本發(fā)明方法利用C_3-5的酮；優(yōu)選丙酮；利用C_1-3的直鏈或支鏈醇；優(yōu)選甲醇。

在本發(fā)明的方法中，多西他賽與酮的質(zhì)量體積比為1:7-15g/ml；優(yōu)選1:10g/ml；和/或

醇與酮的體積比為5～20:100；優(yōu)選地，醇與酮的體積比為10～15:100；和/或

水與酮和醇用量之和的體積比為1～4:1；更優(yōu)選地，水與酮和醇用量之和的體積比為1.5～2.5:1；最優(yōu)選地，水與酮和醇用量之和的體積比為2:1。

為獲得較高產(chǎn)率的多西他賽晶體，可冷卻懸浮液以增加沉淀。在優(yōu)選的實(shí)施方式中，冷卻步驟b1)得到的懸浮液；優(yōu)選地，將懸浮液冷卻至10～30℃，更優(yōu)選至約15℃。

在本發(fā)明中，可通過(guò)簡(jiǎn)單過(guò)濾懸浮液回收晶體多西他賽，更優(yōu)選地，回收的晶體多西他賽用純水洗滌2～3次。可采用各種方法干燥得到的多西他賽晶體。例如，在具體的實(shí)施方式中，在25～35℃，真空-0.096～-0.098MPa下干燥多西他賽三水合物的晶體約15小時(shí)，從而使其含水量在5～7％之間。

在優(yōu)選的實(shí)施方式中，本發(fā)明的多西他賽晶體的制備方法包括：

a)將多西他賽與丙酮合并；

b)混合物加熱至30～55℃；

c)將醇加入至步驟b)的混合物中；

d)將水加入至步驟c)的混合物中得到懸浮液；

e)將步驟d)過(guò)濾或離心得到固體，真空干燥以獲得三水多西他賽晶體。

在一優(yōu)選例中，所述方法獲得的多西他賽三水合物的晶體在25±2℃，相對(duì)濕度60±10％的條件下放置24個(gè)月，其水分、純度、含量及7-表多西他賽異構(gòu)體 的含量改變小于10％、優(yōu)選小于5％、更優(yōu)選小于1％。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：

1.本發(fā)明的三水合多西他賽的新晶型具有極其優(yōu)異的穩(wěn)定性；

2.本發(fā)明的方法易于進(jìn)行固液分離；

3.本發(fā)明的方法不會(huì)造成多西他賽降解，結(jié)晶前后7-表多西他賽的含量不升高；

4.本發(fā)明方法獲得的多西他賽晶體的干燥過(guò)程簡(jiǎn)單，含水量在6.0～6.9％之間，且有機(jī)溶劑殘留量均符合藥典標(biāo)準(zhǔn)；

5.本發(fā)明的方法操作簡(jiǎn)便，無(wú)需高溫結(jié)晶，也無(wú)需加入晶種進(jìn)行誘導(dǎo)，在室溫下滴入水自然析出固體；和

6.本發(fā)明的方法得到的三水合多西他賽晶體的摩爾收率可達(dá)致95％以上。

下面結(jié)合具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，這些實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。除非另外說(shuō)明，否則所有的百分?jǐn)?shù)、比率、比例、或份數(shù)按重量計(jì)。

本發(fā)明中的重量體積百分比中的單位是本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知的，例如是指在100毫升的溶液中溶質(zhì)的重量。

除非另行定義，文中所使用的所有專業(yè)與科學(xué)用語(yǔ)與本領(lǐng)域熟練人員所熟悉的意義相同。此外，任何與所記載內(nèi)容相似或均等的方法及材料皆可應(yīng)用于本發(fā)明方法中。文中所述的較佳實(shí)施方法與材料僅作示范之用。

實(shí)施例1

稱取5g多西他賽(純度99.5％，7-表多西他賽0.07％)，加入50ml丙酮，50℃水浴下加熱至固體溶解清澈，然后使溶液降溫至25℃，加入5ml甲醇，攪拌，滴加純水，至溶液渾濁時(shí)，停止滴加，攪拌約20分鐘使晶體長(zhǎng)出，然后繼續(xù)滴加純水，純水總滴加量為110ml。純水滴加完畢，降溫至15℃，過(guò)濾，用純水洗滌濾餅3次。挖出固體，在25℃，真空-0.097～-0.098MPa下干燥15小時(shí)，得到 5.15g白色固體。測(cè)定其水含量為6.6％，HPLC純度為99.62％，7-表多西他賽為0.07％，摩爾收率為96.6％。

實(shí)施例2

稱取5g多西他賽(純度96.4％，7-表多西他賽0.5％)，加入50ml丙酮，45℃水浴下加熱至固體溶解清澈，然后使溶液降溫至25℃，加入7.5ml甲醇，攪拌，滴加純水，至溶液渾濁時(shí)，停止滴加，攪拌約20分鐘使晶體長(zhǎng)出，然后繼續(xù)滴加純水，純水總滴加量為115ml。純水滴加完畢，降溫至18℃，過(guò)濾，用純水洗滌濾餅2次。挖出固體，在30℃，真空-0.096～-0.097MPa下干燥15小時(shí)，得到5.08g白色固體。測(cè)定其水含量為6.2％，HPLC純度為98.1％，7-表多西他賽為0.46％，摩爾收率為95.3％。

對(duì)比例1.

發(fā)明人根據(jù)CN101415697所述，采用甲醇/水二元體系對(duì)多西他賽進(jìn)行結(jié)晶，具體如下所述：

稱取5g多西他賽(純度99.5％，7-表多西他賽0.07％)，加入55ml甲醇，50℃水浴下加熱至固體溶解清澈，然后使溶液降溫至25℃，攪拌，滴加純水，至溶液渾濁時(shí)，停止滴加，攪拌約20分鐘使晶體長(zhǎng)出，然后繼續(xù)滴加純水，純水總滴加量為110ml。純水滴加完畢，降溫至15℃，過(guò)濾，用純水洗滌濾餅3次。挖出固體，在25℃，真空-0.097～-0.098MPa下干燥15小時(shí)，得到5.1g白色固體。

經(jīng)測(cè)定，所述固體的水含量為6.3％，HPLC純度為98.60％，7-表多西他賽為1.08％，摩爾收率為95.7％。7-表多西他賽含量較高，其為結(jié)晶過(guò)程不穩(wěn)定導(dǎo)致多西他賽降解而產(chǎn)生。

在本發(fā)明提及的所有文獻(xiàn)都在本申請(qǐng)中引用作為參考，就如同每一篇文獻(xiàn)被單獨(dú)引用作為參考那樣。此外應(yīng)理解，在閱讀了本發(fā)明的上述講授內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明作各種改動(dòng)或修改，這些等價(jià)形式同樣落于本申請(qǐng)所附權(quán)利要求書所限定的范圍。