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一種奎寧酮還原酶RrQR的制備方法及其在制備(R)-3-奎寧醇中應(yīng)用與流程

文檔序號:12346318閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.D1-D4中任一種的應(yīng)用:

D1)RrQR在作為奎寧酮還原酶中的應(yīng)用;

D2)所述RrQR相關(guān)的生物材料在制備奎寧酮還原酶中的應(yīng)用;

D3)RrQR在合成R-3-奎寧醇中的應(yīng)用;

D4)所述RrQR相關(guān)的生物材料在合成R-3-奎寧醇中的應(yīng)用;

所述RrQR是如下a)或b)或c)的蛋白質(zhì):

a)氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白質(zhì);

b)在SEQ ID No.2所示的蛋白質(zhì)的N端或/和C端連接標簽得到的融合蛋白質(zhì);

c)將SEQ ID No.2所示的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加得到的具有奎寧酮還原酶活性的蛋白質(zhì);

所述RrQR相關(guān)的生物材料,為下述A1)至A8)中的任一種:

A1)編碼所述RrQR的核酸分子;

A2)含有A1)所述核酸分子的表達盒;

A3)含有A1)所述核酸分子的重組載體;

A4)含有A2)所述表達盒的重組載體;

A5)含有A1)所述核酸分子的重組微生物;

A6)含有A2)所述表達盒的重組微生物;

A7)含有A3)所述重組載體的重組微生物;

A8)含有A4)所述重組載體的重組微生物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用,其特征在于:A1)所述核酸分子為如下a1)或a2)或a3)所示的基因:

a1)核苷酸序列是SEQ ID No.1的cDNA分子或DNA分子;

a2)與a1)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子;

a3)在嚴格條件下與a1)限定的核苷酸序列雜交,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的應(yīng)用,其特征在于:A2)所述表達盒和/或A3)所述重組載體含有如下b1)或b2)或b3)所示的基因:

b1)其編碼序列是SEQ ID No.5的cDNA分子或DNA分子;

b2)與b1)限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性,且編碼葡萄糖脫氫酶的cDNA分子或基因組DNA分子;

b3)在嚴格條件下與b1)或b2)限定的核苷酸序列雜交,且編碼葡萄糖脫氫酶的cDNA分子或基因組DNA分子。

4.R-3-奎寧醇的制備方法,包括用葡萄糖脫氫酶和權(quán)利要求1所述RrQR將3-奎寧酮轉(zhuǎn)化為R-3-奎寧醇。

5.權(quán)利要求1所述RrQR的制備方法,包括將在生物細胞中表達權(quán)利要求1所述RrQR的編碼基因,得到所述RrQR。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備方法,其特征在于:所述RrQR的編碼基因為如下⑴或⑵或⑶所示的核酸分子:

⑴核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的cDNA分子或DNA分子;

⑵與⑴限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子;

⑶在嚴格條件下與⑴限定的核苷酸序列雜交,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的方法,其特征在于:所述生物細胞為微生物細胞、植物細胞或非人動物細胞。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法,其特征在于:所述微生物為酵母、細菌、藻或真菌。

9.RrQR基因;所述RrQR基因為如下⑴或⑵或⑶所示的基因:

⑴核苷酸序列是序列表中SEQ ID No.1的cDNA分子或DNA分子;

⑵與⑴限定的核苷酸序列具有75%或75%以上同一性,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子;

⑶在嚴格條件下與⑴限定的核苷酸序列雜交,且編碼氨基酸序列為SEQ ID No.2的蛋白質(zhì)的cDNA分子或基因組DNA分子。

10.與權(quán)利要求9所述RrQR基因相關(guān)的生物材料,為下述B1)至B8)中的任一種:

B1)編碼權(quán)利要求9所述RrQR基因的核酸分子;

B2)含有B1)所述核酸分子的表達盒;

B3)含有B1)所述核酸分子的重組載體;

B4)含有B2)所述表達盒的重組載體;

B5)含有B1)所述核酸分子的重組微生物;

B6)含有B2)所述表達盒的重組微生物;

B7)含有B3)所述重組載體的重組微生物;

B8)含有B4)所述重組載體的重組微生物。

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