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一種基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底及其制備方法與流程

文檔序號:11808884閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底,其特征在于包括粒徑為100-1000nm的殼聚糖納米粒子,連接于殼聚糖納米粒子表面的抗粘附分子以及與所述抗粘附分子連接的CTC親和捕獲分子。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底,其特征在于包括主要由分布在基材表面的復(fù)數(shù)殼聚糖納米粒子組成的三維納米結(jié)構(gòu)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底,其特征在于所述抗粘附分子包括帶有功能基團的聚乙二醇分子,所述功能基團包括氨基和/或羧基。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底,其特征在于所述CTC親和捕獲分子包括EpCAM適配體或EpCAM適配體的修飾化產(chǎn)物。

5.如權(quán)利要求1-4中任一項所述基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底的制法,其特征在于包括:

(1)將分子量為Mw 40000~50000Da的低分子量殼聚糖溶于有機酸體系中形成均相透明殼聚糖溶液;

(2)以靜電紡絲裝置將所述殼聚糖溶液通過電噴方式施加于基材表面,形成殼聚糖納米粒子;

(3)在所述殼聚糖納米粒子表面枝接抗粘附分子;

(4)將CTC親和捕獲分子與連接在所述殼聚糖納米粒子表面的抗粘附分子偶聯(lián),獲得所述CTC捕獲與純化基底。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底的制法,其特征在于步驟(1)包括:將低分子量殼聚糖加入有機酸體系中,于室溫下攪拌4-8h后,獲得均相透明殼聚糖溶液,所述有機酸溶液包括濃度為60v/v%-90v/v%的乙酸或甲酸溶液。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底的制法,其特征在于步驟(3)包括:

將步驟(2)所獲殼聚糖納米粒子在氨水與甲醇的混合溶液中靜置1-4h,而后于40-60℃真空干燥24h以上;

以及,將所述殼聚糖納米粒子置于濃度為2.5v/v%的戊二醛溶液中反應(yīng)2-4h,然后于濃度為0.1wt%-1wt%的氰基硼氫化鈉溶液中浸漬12-24h,之后與濃度為0.1-10mg/mL的NH2-PEG-COOH溶液反應(yīng)8-24h,從而在所述殼聚糖納米粒子表面枝接PEG分子。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底的制法,其特征在于步驟(4)包括:在中性條件下,使CTC親和捕獲分子在具有活化羧基的偶聯(lián)試劑的作用下,與表面枝接有PEG分子的殼聚糖納米粒子進行偶聯(lián)。

9.根據(jù)權(quán)利要求5所述基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底的制法,其特征在于步驟(4)包括:

在中性條件下,使EpCAM適配體在具有活化羧基的偶聯(lián)試劑EDC及NHS的作用下,與NH2-PEG-COOH接枝的殼聚糖納米粒子偶聯(lián);

以及,將所述殼聚糖納米粒子置于濃度為0.1-1M的乙醇胺溶液中反應(yīng)10-60min,以封閉未完全反應(yīng)的NHS基團,獲得所述CTC捕獲與純化基底。

10.如權(quán)利要求1-4中任一項所述的基于殼聚糖納米粒子的CTC捕獲與純化基底在CTC捕獲和純化中的應(yīng)用。

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