專利名稱：雜環(huán)拓?fù)洚悩?gòu)酶毒物的制作方法
政府資助此處所描述的發(fā)明是在政府資助下做出的，其基金CA-39662由國家癌癥研究學(xué)會提供。美國政府對本發(fā)明擁有一定的權(quán)利。
背景技術(shù)：
DNA-拓?fù)洚悩?gòu)酶是存在于細(xì)胞核中的酶，在那兒它們催化DNA鏈的斷裂和再接合，控制DNA的拓?fù)鋺B(tài)。最近的研究也提出拓?fù)洚悩?gòu)酶在RNA轉(zhuǎn)錄期間參與控制模板的超螺旋?，F(xiàn)有兩類主要的哺乳動物拓?fù)洚悩?gòu)酶。DNA-拓?fù)洚悩?gòu)酶-Ⅰ通過執(zhí)行瞬時的單鏈斷裂-接合周期來催化雙螺旋DNA拓?fù)鋺B(tài)的變化。相反，哺乳動物拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ改變DNA的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)是通過引起瞬時的酶橋連接的雙鏈斷裂，繼以鏈的傳遞和再封閉而實現(xiàn)的。哺乳動物拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ已進(jìn)一步分為Ⅱα型和Ⅱβ型。與作為拓?fù)洚悩?gòu)酶毒物的藥物相關(guān)的抗癌活性是與它們穩(wěn)定酶-DNA可斷裂復(fù)合物的能力相關(guān)的。這種藥物引發(fā)的酶-DNA可斷裂復(fù)合物的穩(wěn)定作用有效地將酶轉(zhuǎn)化為細(xì)胞毒物。
一些臨床中所用的抗腫瘤藥具有很強(qiáng)的作為哺乳動物拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ毒物的活性。這包括阿霉素、放線菌素D、柔紅霉素、VP-16、和VM-26(表鬼臼毒噻吩糖苷或表鬼臼毒素)。
與以拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ毒物形式作用的臨床藥物和實驗藥物的數(shù)量相比，目前僅有限數(shù)量的藥物被鑒定為拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ毒物。喜樹堿與其結(jié)構(gòu)上相關(guān)的類似物是最被廣泛研究的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ毒物。最近，二和四苯并咪唑(Chen等，Cancer Res．1993，53，1332-1335；Sun等，J．Med．Chem．1995，38，3638-3644；Kim等，J．Med．Chem．1996，39，992-998)，某種苯并[c]菲啶和原小檗堿生物堿和它們的合成類似物(Makhey等，Med．Chem．Res．1995，5，1-12；Janin等，J．Med．Chem 1975，18，708-713；Makhey等，Bioorg．&Med．Chem．1996，4，781-791)，以及真菌代謝物、bulgarein(Fujii等，J．Biol．Chem．1993，268，13160-13165)和saintopin(Yamashita等，Biochemistry 1991，30，5838-5845)和indolocarbazoles(Yamashita等，Biochemistry 1992，31，12069-12075)已被鑒定為拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ毒物。
目前，存在著對于新型而又有效的抗癌藥物的需求。特別是還存在著對與現(xiàn)有藥物相比，具有改進(jìn)活性、較少副作用或改進(jìn)選擇性的抗癌藥物的需求。
發(fā)明概述本發(fā)明提供了對拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ顯示抑制活性的化合物，以及作為對癌細(xì)胞、包括抗藥癌細(xì)胞具有有效細(xì)胞毒性的藥物的化合物。因此，提供了一種式Ⅰ所示的本發(fā)明的化合物 其中R1和R2各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基；或R1和R2連在一起為亞甲基二氧基；或R1和R2連在一起為苯并；R3、R4和R5各自獨立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C2-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基和雜芳基(C1-C6)烷基；R6和R7各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基；
R8為羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、鹵代(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基、雜芳氧基、SRc或S(O)nRd；或R8為被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基所取代的(C1-C6)烷基羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基和雜芳氧基；n為1或2；每個Ra和Rb獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基或雜芳基羰基；或Ra和Rb與它們所結(jié)合的氮原子連在一起表示1-吡咯烷基(pyrrolidino)、哌啶子基或嗎啉代。
Rx為(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基或雜芳基羰基；Rd為(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基、-NReRf或雜芳基羰基；以及Re和Rf各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基或雜芳基羰基；其中，R1-R5、R8和Ra-Rf中的任何芳基、雜芳基或苯并可任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基所取代，所述取代基是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明還提供式Ⅰ所示的本發(fā)明的化合物 其中R1和R2各自獨立地為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基；或R1和R2連在一起為亞甲基二氧基；R3、R4和R5各自獨立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C2-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基和雜芳基(C1-C6)烷基；R6和R7各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基；以及R8為氫、(C1-C6)烷基、芳基或雜芳基；其中，R1-R5和R8中的任何芳基或雜芳基可任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基取代，所述取代基是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
本發(fā)明還提供了包含式Ⅰ所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了一種治療方法，該方法包括通過給需要這種治療的哺乳動物(例如人類)服用一定量的能有效地抑制所述癌細(xì)胞的式Ⅰ所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽來抑制癌細(xì)胞。
本發(fā)明還提供了一種方法，該方法包括將所述的癌細(xì)胞在體外或體內(nèi)與一定量的式Ⅰ所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽接觸來抑制癌細(xì)胞，該化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽能有效地抑制所述的癌細(xì)胞，即抑制其活性，諸如其分裂、遷移或繁殖的能力。
本發(fā)明還提供了式Ⅰ所示的化合物在醫(yī)學(xué)治療中的用途(優(yōu)選用于治療癌癥例如實體瘤；或用作抗真菌劑)，以及式Ⅰ所示的化合物在制備用于治療癌癥例如實體瘤的藥物中的用途，和式Ⅰ所示的化合物在制備用于治療真菌感染的藥物中的用途。
本發(fā)明還提供了在此公開的用于制備本發(fā)明化合物的方法和新型中間體。一些式Ⅰ所示的化合物適用于制備式Ⅰ所示的其它化合物。
附圖簡述

圖1表示本發(fā)明的代表性化合物和其它化合物(1、6、9、14、17和19)的結(jié)構(gòu)。
圖2表示式Ⅰ所示的代表性化合物的生物學(xué)數(shù)據(jù)。
發(fā)明詳述除了另有說明，否則使用下列定義鹵素為氟、氯、溴或碘。烷基、烷氧基等是指直鏈和支鏈基團(tuán)；但是，當(dāng)具體地提到支鏈異構(gòu)體諸如“異丙基”時，所提及的諸如“丙基”的單個基團(tuán)僅包括直鏈基團(tuán)。芳基是指苯基或含約9～10個環(huán)原子的鄰位稠合的二碳環(huán)基團(tuán)，其中至少一個環(huán)是芳香性的。雜芳基包括經(jīng)一個含5或6個環(huán)原子的單芳香環(huán)上的環(huán)碳原子相連的基團(tuán)，其中環(huán)原子由碳原子和1～4個雜原子組成，而雜原子選自非過氧化的氧、硫和N(Y)，其中Y或不存在，或為H、O、(C1-C4)烷基、苯基或芐基，雜芳基還包括由其衍生的含約8～10個環(huán)原子的鄰位稠合的二環(huán)雜環(huán)基團(tuán)，特別是苯并-衍生物或衍生自稠合了亞丙基、1，3-亞丙基或四亞甲基雙基的基團(tuán)。
本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的帶有手性中心的化合物可以光學(xué)活性形式和外消旋形式存在并分離。一些化合物可呈現(xiàn)多晶現(xiàn)象。還應(yīng)理解本發(fā)明包括該化合物的任何外消旋、光學(xué)活性、多晶型或立體異構(gòu)的形式或其混合物，其中該化合物擁有此處所描述的有效性質(zhì)。本領(lǐng)域眾所周知如何制備光學(xué)活性形式(例如，通過再結(jié)晶技術(shù)拆分外消旋體、通過光學(xué)活性原料合成、通過手性合成、通過手性固定相的層析分離)以及如何測定拓?fù)洚悩?gòu)酶的毒性活性或細(xì)胞毒性活性，即采用此處所描述的標(biāo)準(zhǔn)試驗，或采用本領(lǐng)域眾所周知的其它類似的試驗。
下面所列出的基團(tuán)、取代基和范圍的具體含義和優(yōu)選含義僅用于說明；它們不排除其它所定義的含義或在基團(tuán)和取代基定義范圍內(nèi)的其它含義。
具體地，(C1-C6)烷基可為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、戊基、3-戊基或己基；(C3-C6)環(huán)烷基可為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基；(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基可為環(huán)丙基甲基、環(huán)丁基甲基、環(huán)戊基甲基、環(huán)己基甲基、2-環(huán)丙基乙基、2-環(huán)丁基乙基、2-環(huán)戊基乙基或2-環(huán)己基乙基；(C1-C6)烷氧基可為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、戊氧基、3-戊氧基或己氧基；(C1-C6)鏈烷酰基可為乙?；⒈；蚨□；?；鹵代(C1-C6)烷基可為碘代甲基、溴代甲基、氯代甲基、氟代甲基、三氟甲基、三氯甲基、一氯二氟甲基、二氯一氟甲基、2-氯乙基、2-氟乙基、2，2，2-三氟乙基或五氟乙基；鹵代(C1-C6)鏈烷?；蔀槿阴；?、一氯二氟乙?；⒍纫环阴；?、3，3，3-三氟丙?；蛉；?；羥基(C1-C6)烷基可為羥甲基、1-羥乙基、2-羥乙基、1-羥丙基、2-羥丙基、3-羥丙基、1-羥丁基、4-羥丁基、1-羥戊基、5-羥戊基、1-羥己基或6-羥己基；(C1-C6)烷氧基羰基可為甲氧基羰基、乙氧基羰基、丙氧基羰基、異丙氧基羰基、丁氧基羰基、戊氧基羰基或己氧基羰基；(C1-C6)烷基硫基可為甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、丁硫基、異丁硫基、戊硫基或己硫基；(C1-C6)鏈烷酰氧基可為甲酰氧基、乙酰氧基、丙酰氧基、丁酰氧基、異丁酰氧基、戊酰氧基或己酰氧基；芳基可為苯基、茚基或萘基；以及雜芳基可為呋喃基、咪唑基、三唑基、三嗪基、噁唑基、異噁唑基、噻唑基、異噻唑基、吡唑基、吡咯基、吡嗪基、四唑基、吡啶基(或其N-氧化物)、噻吩基、嘧啶基(或其N-氧化物)、吲哚基、異喹啉基(或其N-氧化物)或喹啉基(或其N-氧化物)。
R1的一個具體含義是氫。R1的另一個具體含義是鹵素(例如溴)。
R2的一個具體含義是苯基，其任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基取代，所述取代基是(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基。R2的另一個具體含義是苯基。
每個R3、R4和R5的一個具體含義是氫。
R6或R7的一個具體含義是(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。R6或R7的另一個具體含義是氫。
R8的一個具體含義是羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。R8的另一個具體含義是(C1-C6)烷基，其任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基取代，所述取代基是羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基。R8的另一個具體含義是由羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基取代的(C1-C6)烷基。
R8的一個具體含義是羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基或雜芳氧基；或R8是(C1-C6)烷基，其被1、2或3個獨立地選自下列的取代基取代，所述取代基是羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基和雜芳氧基。
Rc的一個具體含義是(C1-C6)烷基。
Rd的一個具體含義是(C1-C6)烷基或-NReRf。
Re或Rf的一個具體含義是氫、(C1-C6)烷基、芳基或芳基(C1-C6)烷基。
R8的一個更具體的含義是三氟甲基、一氯二氟甲基、二氯一氟甲基、2，2，2-三氟乙基、全氟乙基、三氟甲氧基、氰基、鹵素、羧基、(C1-C6)烷氧基羰基、鹵代(C1-C6)鏈烷?；騍(O)nRd。
R1的優(yōu)選含義是氫；R2的優(yōu)選含義是苯；R8的優(yōu)選含義是鹵素或三氟甲基。R8的更優(yōu)選含義是三氟甲基。
一組優(yōu)選的式Ⅰ所示的化合物是其中R1和R2分別為鹵素(例如溴)的化合物。
制備式Ⅰ所示的化合物的方法由下列過程說明，其中一般基團(tuán)的含義均按上面所給出的，除非另有限定。
其中R8是羥基的式Ⅰ所示的化合物的制備可通過將式Ⅱ所示的中間體 用尿素處理，例如采用與實施例1所述條件相似的條件來進(jìn)行。
其中R8是巰基的式Ⅰ所示的化合物的制備可通過將式Ⅱ所示的中間體用乙基黃原酸鉀鹽處理，例如采用與實施例2所述條件相似的條件來進(jìn)行。
其中R8是氨基的式Ⅰ所示的化合物的制備可通過將式Ⅱ所示的中間體用溴化氰處理，例如采用與實施例3所述條件相似的條件來進(jìn)行。
式Ⅰ所示的化合物通常可通過式Ⅲ所示的二胺中間體與式Ⅳ所示的醛中間體反應(yīng)來制備。 該反應(yīng)可在與實施例(例如實施例4)所述條件相似的條件下便利地進(jìn)行。
式Ⅰ所示的化合物通常也可通過式Ⅴ所示的二胺中間體與式Ⅵ所示的醛中間體反應(yīng)來制備。 該反應(yīng)可在與實施例(例如實施例12)所述條件相似的條件下便利地進(jìn)行。
含羥基的式Ⅰ所示的化合物可從相應(yīng)的含甲氧基的式Ⅰ所示的化合物制備，方法是用三溴化硼處理，例如采用與實施例7所述條件相似的條件。
含氨基的式Ⅰ所示的化合物可從相應(yīng)的含乙酰氨基的式Ⅰ所示的化合物制備，方法是采用與實施例8所述條件相似的條件進(jìn)行水解。
式Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ所示的中間體，其中R1-R8具有式Ⅰ所示的化合物中相應(yīng)基團(tuán)在此所定義的任何含義、具體含義或優(yōu)選含義，可特別地用于制備式Ⅰ所示的化合物。
當(dāng)化合物具有足夠強(qiáng)的堿性或酸性以生成穩(wěn)定、無毒的酸或堿鹽時，以鹽的形式服用該化合物可為合適的。藥學(xué)上可接受的鹽的例子為由能生成生理上可接受的陰離子的酸生成的有機(jī)酸加成鹽，例如甲苯磺酸鹽、甲磺酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、抗壞血酸鹽、α-氧代戊二酸鹽和α-甘油磷酸鹽。也可生成合適的無機(jī)鹽，包括鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、碳酸氫鹽和碳酸鹽。
藥學(xué)上可接受的鹽可通過本領(lǐng)域熟知的標(biāo)準(zhǔn)過程來獲得，例如將足夠強(qiáng)堿性的化合物諸如胺與提供生理上可接受的陰離子的合適的酸反應(yīng)。也可制成堿金屬(例如鈉、鉀或鋰)或堿土金屬(例如鈣)的羧酸鹽。
式Ⅰ所示的化合物可制成藥物組合物，并以多種適于所選給藥途徑的劑型給諸如人類患者的哺乳動物主體服用，給藥途徑即口服、或腸胃外給藥、經(jīng)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部或皮下等途徑。
因此，本發(fā)明的化合物可結(jié)合以藥學(xué)上可接受的賦形劑諸如惰性稀釋劑或可吸收食用性載體系統(tǒng)地服用，例如口服。它們可封裝于硬或軟殼的明膠膠囊中、可壓成片劑或可直接摻入病人飲食中的食物服用。為用于口服治療用藥，活性化合物可與一種或多種賦形劑結(jié)合，并以消化片、頰片、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙囊劑等形式使用。這些組合物和制劑應(yīng)含有至少0．1％的活性化合物。組合物和制劑的百分含量當(dāng)然可以變化，并可便利地為給定單位劑型重量的約2～約60％。這種治療用的組合物中活性化合物的含量為能達(dá)到有效的劑量程度。
片劑、錠劑、丸劑、膠囊等還可含下列物質(zhì)粘結(jié)劑諸如西黃蓍膠、金合歡膠、玉米粉或明膠；賦形劑諸如磷酸二鈣；崩解劑諸如玉米粉、馬鈴薯淀粉、藻酸等；潤滑劑諸如硬酯酸鎂；以及可加入甜味劑諸如蔗糖、果糖、乳糖或天冬酰苯丙氨酸甲酯或調(diào)味劑諸如薄荷、冬青油或櫻桃味香料。當(dāng)單位劑型是膠囊時，其除了含有上列各類物質(zhì)之外，還可含有液體載體諸如植物油或聚乙二醇。其它各種材料可以包衣形式存在或者另外改為固體單位劑型的物理形式。例如片劑、丸劑或膠囊可包上明膠、蠟、蟲膠或糖類等。糖漿或酏劑可含有活性化合物、作為甜味劑的蔗糖或果糖、作為防腐劑的對羥基苯甲酸甲酯和對羥基苯甲酸丙酯、染劑和調(diào)味劑諸如櫻桃味或橙味香料。當(dāng)然，制備任何單位劑型所用的任何物質(zhì)應(yīng)為藥學(xué)上可接受的，并在所用量下是基本上無毒的。此外，活性化合物可加入到緩釋制劑或裝置中。
活性化合物還可通過輸注或注射從靜脈內(nèi)或腑膜內(nèi)給藥?；钚曰衔锘蚱潲}的溶液可在水中配制，任選混以無毒性表面活性劑。分散液可在甘油、液體聚乙二醇、甘油三乙酸酯及其混合物以及油類中配制。在正常的貯存和使用條件下，這些制劑中含有防腐劑以阻止微生物的生長。
適于注射或輸注的藥物劑型可包括無菌水溶液或分散液或含活性成分的無菌粉劑，其適于現(xiàn)場配制無菌可注射或可輸注溶液或分散液，任選封裝于脂質(zhì)體中。在所有情況下，最終的劑型在生產(chǎn)和貯存條件下應(yīng)為無菌、流動和穩(wěn)定的。液體載體或賦形劑可為溶劑或液體分散介質(zhì)，包括水、乙醇、多羥基化合物(例如甘油、丙二醇、液體聚乙二醇等)、植物油、無毒性甘油酯及其合適的混合物。合適的流動性可通過例如制成脂質(zhì)體、當(dāng)為分散液時通過保持所需的顆粒大小或通過使用表面活性劑來保持。抑制微生物行為可通過多種抗菌劑和抗真菌劑來產(chǎn)生，例如對羥基苯甲酸酯、氯代丁醇、苯酚、山梨酸、乙基汞硫代水楊酸鈉等。在許多情況下，優(yōu)選包括等滲劑，例如糖類、緩沖液或氯化鈉?？勺⑸浣M合物的延緩吸收可通過在組合物中使用延遲吸收劑，例如單硬脂酸鋁和明膠產(chǎn)生。
無菌可注射溶液的制備是通過將所需量的活性化合物與多種上面所列舉的其它組分(按所需量)一起加入到合適的溶劑中，然后過濾滅菌。在用來制備無菌可注射溶液的無菌粉劑情況下，優(yōu)選的制備方法為真空干燥和冷凍干燥技術(shù)，從而得到存在于預(yù)先無菌過濾的溶液中的活性成分加上任何附加的所需成分的粉末。
為用于局部給藥，本化合物可以純的形式應(yīng)用，即當(dāng)其為液體時。但是，通常期望將它們以組合物或制劑形式施用于皮膚上，并結(jié)合以皮膚病學(xué)上可接受的載體，其可為固體或液體。
有用的固體載體包括細(xì)分的固體諸如滑石、粘土、微晶纖維素、二氧化硅、氧化鋁等。有用的液體載體包括水、醇或二醇或水-醇／二醇混合物，本化合物可以有效量溶解或分散于其中，任選助以無毒表面活性劑。可加入諸如香味劑和附加抗菌劑的輔劑以優(yōu)化給定用途所用的性質(zhì)。所得的液體組合物可從吸收墊施用、可用于浸潤繃帶和其它敷料或采用泵型噴劑或氣霧噴劑噴于感染面上。
增稠劑諸如合成性聚合物、脂肪酸、脂肪酸鹽和酯、脂肪醇、改性纖維素或改性無機(jī)材料也可與液體載體一起使用以生成可敷性糊劑、凝膠、軟膏、藥皂等，從而直接應(yīng)用于使用者的皮膚上。
可用于將式Ⅰ所示的化合物施用到皮膚上的有用的皮膚用組合物的例子是本領(lǐng)域已知的；例如參見Jacquet等(U．S．Pat．No．4，608，392)，Geria(U．S．Pat．No．4，992，478)，Smith等(U．S．Pat．No．4，559，157)和Wortzman(U．S．Pat．No．4，820，508)。
式Ⅰ所示的化合物的有用劑量可通過比較它們在動物模型體外的活性以及在活體內(nèi)的活性來決定。從小鼠和其它動物的有效劑量來推知人類的有效劑量的方法是本領(lǐng)域已知的；例如參見U．S．Pat．No．4，938，949。
通常，式Ⅰ所示的化合物在諸如洗劑的液體組合物中的濃度為約0．1-25wt-％，優(yōu)選約0．5-10wt-％。其在半固態(tài)或固態(tài)組合物，諸如凝膠或粉劑中的濃度為約0．1～5wt-％，優(yōu)選約0．5-2．5wt-％。
用于治療所需的該化合物或其活性鹽或衍生物的量不僅隨所選的具體鹽而變化，而且隨給藥途徑、治療的疾病的性質(zhì)以及患者的年齡和狀況而變化，并最終在于護(hù)理醫(yī)師或臨床醫(yī)師的辨別能力。
但是，通常合適的劑量應(yīng)在約0．5～約100mg／kg范圍內(nèi)，例如每天的劑量為約10～約75mg／kg體重，諸如每天每千克受者體重約3～約50mg，優(yōu)選為6～90mg／kg／天，最優(yōu)選為15～60mg／kg／天。
該化合物以單位劑型便利地服用；例如每單位劑型中含5-1000mg，便利地含10～750mg，最便利地含50-500mg活性成分。
理想地，活性成分服用后應(yīng)能使活性化合物在血漿中的峰值濃度達(dá)到約0．5～約75μm，優(yōu)選為約1～50μm，最優(yōu)選為約2～約30μm。這可通過例如，靜脈注射活性成分任選地在生理鹽水中的0．05～5％溶液或口服含約1-100mg活性成分的大丸劑而實現(xiàn)。所期望的血液濃度可通過連續(xù)輸注以提供約0．01-5．0mg／kg／hr的活性成分或間歇輸注約0．4-15mg／kg活性成分來保持。
所需劑量可方便地存在于單個劑量中或以均分劑量在合適的間隔內(nèi)服用，例如每天為二、三、四或更多個小劑量。小劑量本身可進(jìn)一步均分，例如分為大量間斷的松散施用方式；諸如從吹入器多次吸入或以一系列液滴的形式施用于眼中。
本發(fā)明的化合物影響拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ介導(dǎo)的DNA斷裂的能力可采用本領(lǐng)域熟知的藥理學(xué)模型來確定，例如采用與下述試驗A所相似的模型。
試驗A 拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ斷裂試驗本發(fā)明的代表性化合物由采用重組拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ的斷裂試驗來評定。該試驗如B．Gatto等Cancer Res．，1996，56，2795-2800所述進(jìn)行。人類的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ采用T7表達(dá)系統(tǒng)以重組融合蛋白分離。質(zhì)粒YEpG經(jīng)堿裂解法純化，然后經(jīng)苯酚去蛋白以及CsCl／3，8-二氨基-5-乙基-6-苯基菲啶鎓等密度離心，方法如Maniatis，T．；Fritsch，E．F．；Sambrook，J．Molecular Cloning，a Laboratory Manual；Cold Spring Harbor Laboratory；Cold Spring Harbor，NY 1982；149-185頁所述。質(zhì)粒的末端標(biāo)記是通過限制酶的消化來實現(xiàn)，然后用Klenow聚合酶末端補(bǔ)平，方法如Liu，L．F．；Rower，T．C．；Yang，L．；Tewey，K．M．；Chen，G．L．“哺乳動物拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ引發(fā)的DNA斷裂”J．Biol．Chem．1983，258，15365所述。IC50值在連續(xù)四天暴露于藥劑后計算。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ的斷裂值記為REC，相對有效濃度(即相對于化合物5的濃度，化合物5的值人為地設(shè)為1)，即在人類拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ存在下能在質(zhì)粒DNA上產(chǎn)生相同斷裂的濃度。
本發(fā)明的化合物的細(xì)胞毒效可采用本領(lǐng)域熟知的藥理學(xué)模型來確定，例如采用與下述試驗B所相似的模型。
試驗B 細(xì)胞毒性試驗細(xì)胞毒性通過MTT-微量滴定板上四唑鎓細(xì)胞毒性試驗(MTA)來測定(參見Chen A．Y．等Cancer Res．1993，53，1332；Mosmann，T．J．，J．Immunol．Methods 1983，65，55；以及Carmichael，J．等CancerRes．1987，47，936)。人類淋巴母細(xì)胞RPMI8402及其抗喜樹堿的變異細(xì)胞系，CPT-K5由Dr．Toshiwo Andoh提供(Aichi Cancer CenterResearch Institute，Nagoya，Japan)(參見Andoh，T．；Okada，K．“拓?fù)洚悩?gòu)酶I藥物的抗藥機(jī)理”Adv．in Pharmacology 1994，29B，93)。細(xì)胞毒性試驗采用96-孔微量滴定板進(jìn)行。細(xì)胞在37℃下5％CO2中的懸浮液中生長，并通過RPMI介質(zhì)中的定期控制傳代來保持，介質(zhì)中補(bǔ)充有10％熱失活胎牛血清、L-谷氨酰胺(2mM)、青霉素(100U／ml)和鏈霉素(0．1mg／ml)。為測定IC50，細(xì)胞連續(xù)暴露于不同濃度的藥物中，且MTT試驗在第四天末進(jìn)行。
本發(fā)明的代表性化合物的試驗A和試驗B所得的數(shù)據(jù)列于圖2中。
采用與試驗B相似的原始試驗報告，化合物5和化合物22的細(xì)胞毒性在其它癌細(xì)胞系中評定。數(shù)據(jù)列于表1中。
表1
式Ⅰ所示的化合物為有效的拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ毒物。此外，式Ⅰ所示的化合物已呈現(xiàn)對RPMI 8402癌細(xì)胞、抗喜樹堿的CPT-K5細(xì)胞和多種其它癌細(xì)胞的細(xì)胞毒性。因此，式Ⅰ所示的化合物可作為有用的細(xì)胞毒劑，用于治療癌癥、特別是治療哺乳動物實體瘤或血液性惡性腫瘤。本發(fā)明的化合物也可作為有用的藥理學(xué)工具，用于在體外和活體內(nèi)研究拓?fù)洚悩?gòu)酶的功能和活性。
此處所用術(shù)語“哺乳動物實體瘤”包括頭部和頸部、肺、間皮瘤、縱隔、食管、胃、胰腺、肝膽系統(tǒng)、小腸、結(jié)腸、直腸、肛門、腎、輸尿管、膀胱、前列腺、尿道、陰莖、睪丸、婦科器官、卵巢、乳腺、內(nèi)分泌系統(tǒng)、皮膚中樞神經(jīng)系統(tǒng)等部位的癌癥；軟組織瘤和骨瘤；以及皮膚和眼部的黑素瘤。術(shù)語“血液性惡性腫瘤”包括幼兒白血病和淋巴瘤、Hodgkin氏病、淋巴和皮膚位的淋巴瘤、急性和慢性白血病、血清細(xì)胞瘤和與AIDS相關(guān)的癌癥。優(yōu)選所治療的哺乳動物為人類和家養(yǎng)動物。
該化合物還被期望能呈現(xiàn)一些對拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑所能觀察到的其它生物活性，諸如抗茵、抗真菌、抗原生動物、抗elmintic和／或抗病毒活性。特別是，該化合物可呈現(xiàn)抗真菌活性。因此，本發(fā)明還提供一種治療真菌感染的醫(yī)療方法，包括給受真菌感染困擾的哺乳動物服以有效抗真菌量的式Ⅰ所示的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。
現(xiàn)在，本發(fā)明將由下列非限定實施例說明，除非另有說明，熔點由Thomas-Hoover Unimelt毛細(xì)熔點裝置測定；柱色譜是指快速(flash)色譜，其在SiliTech 32-63μm柱(ICN Biomedicals，Eschwegge。Ger．)上進(jìn)行，采用指明的溶劑系統(tǒng)；紅外光譜數(shù)據(jù)(IR)通過Perkin-Elmer 1600傅立葉變換光譜儀獲得，并記為cm-1；質(zhì)子(1H NMR)和碳(13C NMR)核磁共振由Varian Gemini-200傅立葉變換波譜儀記錄；NMR光譜(200MHZ1H和50MHZ13C)在氘代溶劑中記錄，溶劑的化學(xué)位移位于四甲基硅(TMS)的低場，并記為δ；偶合常數(shù)記為赫茲(Hz)；質(zhì)譜通過華盛頓大學(xué)的資源獲得，即華盛頓大學(xué)，St．Louis，MO化學(xué)系的生物醫(yī)學(xué)和生物有機(jī)質(zhì)譜儀；以及燃燒分析由Atlantic Microlabs，Inc．，Norcross，GA執(zhí)行并在理論值的±0．4％之內(nèi)。
實施例實施例1 5-苯基-2-[2’(2”-羥基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(2)5-苯基-2-[2’(3，4-二氨基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(29．7mg，0．07mmol)和尿素(6mg，O．1mmol)溶解于DMF(0．4ml)中?；旌衔镌?50℃下回流7小時。冷卻后的反應(yīng)混合物經(jīng)真空濃縮并以水洗滌，得到27．6mg(88％)純的黃色固體；mp＞280℃；IR(KBr)3382，3133，1693，1475，1444，1279；1H NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ7．3(d，1H,J=8．14)，7．46-7．80(m，3H)，7．80(d，2H，J=8．1)，7．89-8．01(m,4H)，8．05-8．14(m，2H)，8．32(d，1H，J=8．34)，8．63(s，1H)，11．35(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ108．07，109．55，111．78，114．03，114．57，114．62，115．3，120．21，122．53，125．45，125．82，127．42，128．1，129．26，130．81，131．59，132．66，132．87，135．15，135．33，139．20，139．61，149．32，153．14，155．71；HRMS(FAB)C27H19N6(MH+)的計算值為443．1620，實測值為443．1625。
中間體5-苯基-2-[2’-(3，4-二氨基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-苯基-2-[2’-(3，4-二氨基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑5-苯基-2-[2’-(3，4-二硝基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(75mg，0．16mmol)在乙酸乙酯(50ml)中的溶液在10％Pd／C(15mg)上氫化還原90分鐘。所得的溶液流經(jīng)硅藻土床并除去乙酸乙酯得到二胺，其無需另外進(jìn)行純化即可使用。
5-苯基-2-[2’-(3，4-二硝基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑原料可如J．S．Kim等J．Med．Chem．1997，40，2818-2824所述進(jìn)行制備。
實施例2 5-苯基-2-[2’-(2”-巰基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(3)5-苯基-2-[2’-(3，4-二氨基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(59．4mg，0．14mmol)和乙基黃原酸鉀鹽(25．1mg，0．16mmol)在乙醇(1ml)和蒸餾水(0．1ml)中回流過夜。冷卻后的反應(yīng)混合物用冰醋酸酸化至pH 3，其體積在真空中濃縮并用柱色譜直接純化。以(40-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫得到69％黃色固體；mp＞280℃；IR(KBr)3089，2926，2851，1712，1624，1549，1449，1380，1274，1186，1079；1H NMR (DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ7．33-7．42(m，2H)，7．48-7．63(t，4H)，7．71-7．82(m，4H)，7．89(s，1H)，8．04-8．06(m，1H)，8．1-8．24(m，1H)，8．42(d，1H，J=2．4)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ107．37，107．15，109．2，109．68，111．81，111．73，113．31，113．53，114．57，114．64，114．68，115．56，125．26，127．44，128．16，129．33，131．64，132．93，133．27，139．1，136．61，139．62，149．51，152．94，171．13；HRMS(FAB)C27H19N6S(MH+)的計算值為459．1392，實測值為459．1403。
實施例3 5-苯基-2-[2’-(2”-氨基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(4)5-苯基-2-[2’-(3，4-二氨基苯基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(66mg，0．16mmol)溶解于DMF(0．2ml)和甲醇(1ml)中，并加至溴化氰(10％水溶液，0．33ml，0．63mmol)中。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過夜?；旌衔镌跍p壓下濃縮?；衔锝?jīng)甲醇重結(jié)晶得到47％淡棕色固體；mp＞280℃；IR(KBr)3352，3052，2926，1680，1624，1574，1461，1261，679；1H NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ7．46-7．62(m，3H)，7．79(d，2H，J=7．26)，7．87-7．96(m，2H)，7．99-8．01(m，2H)，8．20-8．26(m，2H)，8．31(s，1H)，8．72(d，2H，J=9．12)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ107．38，110．89，111．75，111．78，114．67，115．13，115．24，115．92，123．59，125．58，126．84，127．5，127．53，127．57，127．76，128．2，129．43，130．86，131．87，133．13，138．74，139．74，150．10，152．14，153．42；HRMS(FAB)C27H20N7(MH+)的計算值為442．1780，實測值為442．1776。
實施例4 5-苯基-2-[2’-(2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(5)5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(0．160g，0．53mmol)與5-甲?；?2-三氟甲基苯并咪唑(0．12g，0．54mmol)一起在硝基苯(4ml)中，于145℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去，該化合物經(jīng)柱色譜純化。以(1-16％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到40％的純的黃色化合物；mp＞280℃；IR(KBr)3047，2927，1698，1626，1543，1440，1287，1158；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．44-7．59(m，3H)，7．79(d，2H，J=7．04)，7．87-8．01(m，2H)，8．05-8．09(m，2H)，8．15-8．19(m，1H)，8．29-8．35(m，2H)，8．70(m，2H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ111．79，114．68，114．92，115．85，117．53，117．58，118．37，118．41，119．58，120．46，124．14，124．79，125．71，125．74，127．47，128．18，129．36，131．73，132．99，134．93，137．44，138．97，139．02，139．07，139．66，140．34，149．81，153．46；HRMS(FAB)C28H18N6F3(MH+)的計算值為495．1545，實測值為495．1543。
中間體5-甲酰基-2-三氟甲基苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．3，4-二氨基芐腈。
4-氨基-3-硝基芐腈(3g，18．4mmol)在乙酸乙酯(120ml)中采用45psi氫氣和10％Pd-C(300mg)氫化還原1．5hr。流經(jīng)硅藻土床后，溶劑在真空中除去，得到2．43g(99％)白色固體；mp144-145℃IR (KBr) 3431，2726，2211，1861，1631，1311，1149，722；1H NMR(CDCl3)δ3.18-3.87(bors，4H)，6.68(d，1H，J=8.06)，6.94 (d，1H，J=1.74)，7.02-7.27(dd，1H，J=1.78，8.06)；13C NMR(CDCl3)δ100.27，115.86，119.52，122.19，125.66，135.94，142.52；所得的粗二胺無需另外純化一般即可使用。
b．5-氰基-2-三氟甲基苯并咪唑。
3，4-二氨基芐腈(200mg，1．5mmol)與三氟乙酸(0．3ml)回流6小時。混合物用2N NaOH中和并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層經(jīng)無水Na2SO4干燥。以(0-10％)乙酸乙酯／正己烷洗脫進(jìn)行柱色譜，得到88％的純的白色化合物；
mp 182-183℃；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．72-7．77(1H，dd，J=1．46，8．56)，7．88(d，1H，8．42)，8．35(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ106．47，106．64，112．36，117．31，118．09，119．44，123．53，123．81，127．47；元素分析C9H4N3F3的計算值為C51．20，H1．91，N19．90，實測值為C51．45，H2．03，N19．68。
c．5-甲?；?2-三氟甲基苯并咪唑。
5-氰基-2-三氟甲基苯并咪唑(196mg，0．93mmol)與HCOOH(14ml)、H2O(5ml)和Ni-Al(0．9g)催化劑一起回流6小時。熱的反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土床過濾并在真空中濃縮。溶液由2N NaOH堿化。經(jīng)乙酸乙酯萃取后用無水硫酸鈉干燥，在真空中濃縮乙酸乙酯得到粗醛。通過柱色譜實現(xiàn)純化。以10／90乙酸乙酯／正己烷洗脫得到41％的純的白色化合物；mp 178-179℃；IR(KBr)3210，2737，1699，1552，1328，1187(d)，986；1HNMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．87-7．95(m，2H)，8．34(s，1H)，10．11(s，1H)．13C NMR(DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ106．63，112．35，116．72，118．08，121．87，123．80，124．04，132．95，192．65；HRMS(EI)C9H5N2OF3m／z計算值為214．0354，實測值為214．0348。
在上面子項a中所用的中間體4-氨基-3-硝基苯并咪唑可市購得到(Aldrich Chemical Company)。
中間體5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
d．5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑。
5-苯基-2-[3，4-硝基苯基]苯并咪唑(580mg，1．6mmol)溶解于100ml乙酸乙酯中，并用10％Pd／C(100mg)進(jìn)行氫化1．5小時。反應(yīng)混合物流經(jīng)硅藻土床后，該床以甲醇洗滌。洗液在真空中濃縮得到(477mg，1．59mmol)粗二胺，收率為98％。該二胺無需定性且無需純化即可使用；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ4．70(brs，2H)，4．96(brs，2H)，6．62(d，1H，8．02)，7．37(m，8H)，7．53(m，2H)。
實施例5 5-苯基-2-[2’-(2”-羥基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(7)5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(178mg，0．6mmol)和5-甲?；?2-羥基甲基苯并咪唑(104．2mg，0．6mmol)在硝基苯(10ml)中145℃下縮合過夜。硝基苯通過Kugelrohr從反應(yīng)混合物中除去，該化合物經(jīng)柱色譜直接純化。以(1-18％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到62％的黃色化合物；mp＞280℃；IR(Nujol)3406，2922，2725，1631，1553，1461，1377；1H NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ5．1(s，2H)，7．45-7．59(m，3H)，7．79(d，2H，J=6．96)，8．23-8．28(m，1H)，8．47(d，1H，J=8．59)，8．68(s，2H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ55．80，111．69，113．68，114．59，115．32，115．77，116．21，118．31，123．77，124．52，125．21，125．61，127．47，127．49，127．54，128．14，129．38，131．64，131．89，132．91，133．54，137．66，138．86，139．68，140．13，150．25，153．37，157．62；HRMS(FAB)C28H21N6O(MH+)計算值為457．1777，實測值為457．1774中間體5-甲?；?2-羥基甲基苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-氰基-2-羥基甲基苯并咪唑。
3，4-二氨基芐腈(0．2g，1．50mmol)與乙醇酸(0．18g，2．37mmol)在HCl(1．5ml，4N)中加熱回流2小時。用2M碳酸鈉中和后，產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中，經(jīng)無水Na2SO4干燥并在真空中濃縮，得到白色固體。該化合物經(jīng)柱色譜純化。以(75-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫得到65．5％(133mg，0．76mmol)的純化合物；mp 172-173℃；IR(Nujol)3350，2928，2219，1621，1536，1302，1217，1036，815；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ4．88(s，2H)，7．52-7．57(dd，1H，J=1．46，8．38)，7．69(d，1H，J=8．36)，7．95(s，1H)，13C NMR(DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ55．81，107．99，115．68，118．64，119．50，129．00，131．50，134．39；HRMS(EI)C9H7N3O(m／z)計算值為173．0590，實測值為173．0590。
b．5-甲?；?2-羥基甲基苯并咪唑?qū)i-Al(1．2g)加到5-氰基-2-羥甲基苯并咪唑(0．17g，0．97mmol)在HCOOH(17ml)和水(1．6ml)的溶液中。反應(yīng)混合物在95℃下加熱5小時。熱的混合物經(jīng)硅藻土床過濾，反應(yīng)瓶和硅藻土床先用水清洗，然后用甲醇洗滌。合并的溶液在真空中濃縮。向該殘余物加入水后生成白色沉淀。該懸浮液的pH值通過滴加2N NaOH調(diào)節(jié)至9。產(chǎn)物經(jīng)乙酸乙酯萃取得到，乙酸乙酯萃取液經(jīng)無水Na2SO4干燥后，在真空中濃縮，得到純的白色產(chǎn)物(61％收率)；mp 189-190℃；IR(KBr)3309，2924，1674，1619，1434，1291，1073，808；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ5．07(s，2H)，7．94(d，1H，J=8．68)，8．04-8．09(dd，1H，J=1．34，8．51)，8．32(s，1H)，10．4(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ55．76，114．95，116．81，126．03，131．45，133．89，135．11，192．31；HRMS(EI)C9H8N2O2m／z計算值為176．0586，實測值為176．0586。
實施例6 5-苯基-2-[2’-[2”-[2-(N-苯甲?；?氨基甲基]苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(8)5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(75mg，0．25mmol)和5-甲?；?2-[(N-苯甲酰基)氨基甲基]苯并咪唑(70mg，0．25mmol)在硝基苯(6ml)中，145℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelohr除去，化合物負(fù)載在柱上。以(2-20％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到45％淡黃色化合物；mp＞280℃；IR(KBr)3204，1637，1542，1442，1384，1292，1026，818；1H NMR(DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ7．46-7．66(m，6H)，7．80(d，2H，J=7．06)，7．87-8．1(m，7H)，8．21-8．25(m，1H)，8．43-8．48(m，1H)，8．67(s，2H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ36．65，107．37，111．73，114．53，114．58，115．26，115．49，116．01，119．47，122．49，124．81，125．56，126．72，127．41，127．83，128．04，128．07，128．54，129．25，131．56，131．87，132．12，132．84，133．17，134．11，136．21，137．76，139．08，139．66，149．67，152．62，155．64，167．60；HRMS(FAB)C35H26N7O(MH+)計算值為560．2199，實測值為560．2209。
中間體5-甲酰基-2-[(N-苯甲酰基)氨基甲基]苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-氰基-2-[(N-苯甲?；?氨基甲基]苯并咪唑
3，4-二氨基芐腈(250mg，1．88mmol)在研缽中，用(0．34g，1．9mmol)苯甲酰氨基乙酸細(xì)細(xì)研磨，然后緊密混合，并仔細(xì)地熔融3小時。當(dāng)水以氣泡形式放出時，將溫度升至160℃。冷卻后，將玻璃狀物溶解于乙酸乙酯中，并用柱色譜純化。以(50-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫得到86％淺米色化合物；mp 131-132℃；IR(Nujol)2826，2221，1635，1313，1019，814；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ4．97(d，2H，J=5．22)，7．52-7．61(m，3H)7．91-7．99(m，4H)，8．37(s,1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ36．80，107．73，115．72，118．81，119．67127．83，128．61，128．64，128．67，128．78，132．15，132．20，13322，135．01，156．13，167．51；HRMS(EI)C16H12N4O m／z計算值為276．1011，實測值為276．1012。
b．5-甲酰基-2-[(N-苯甲?；?氨基甲基]苯并咪唑5-氰基-2-[(N-苯甲?；?氨基甲基]苯并咪唑(0．33g，1．2mmol)溶解于甲酸(18ml)中。將水(5ml)和Ni-Al(1．14g)加入其中。混合物在氮氣下于95℃加熱6小時，趁熱通過硅藻土床。該床用甲醇清洗，且洗液在真空中濃縮。溶液的pH值用2N NaOH調(diào)節(jié)至9．0，并以乙酸乙酯萃取。萃取液用無水Na2SO4干燥，并在真空中濃縮。殘余物以(50-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫，經(jīng)柱色譜純化得到26％的純的乳色產(chǎn)物；mp 108-109℃；IR(KBr)3314，2933，1687，1646，1539，1289，806；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ4．99(d，1H，J=5．12)，7．54-7．63(m，4H)，7．93-8．07(m，3H)，8．34(s，1H)，10．15(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ36．83，115．10，117．18，125．80，127．85，128．71，132．26，132．33，133．2，133．68，155．77，167．54，192．54；HRMS(EI)C16H13N3O2m／z計算值為279．1008，實測值為279．1003。
實施例7 5-苯基-2-[2’-[2”-(2-羥乙基)苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(10)將5-苯基-2-[2’-[2”-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(30mg，0．06mmol，實施例10)懸浮在新蒸餾的乙酸乙酯(30ml)中，在-78℃下向其中加入10當(dāng)量的BBr3(0．62ml，1．0M)。在室溫下攪拌過夜后，加水(10ml)淬滅反應(yīng)。混合物用氫氧化銨堿化至pH9．0，并用乙酸乙酯萃取以及無水Na2SO4干燥。粗混合物在色譜柱上分離，以(0-30％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到10．6mg棕色固體產(chǎn)物，收率為33％。
mp＞280℃；IR(KBr) 3401，3150，2876，1632，1540，1442，1388，1268，1013，823；1H NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ3．35(t，2H)，3．98(t，2H)，7．42-7．56(m，3H)，7．76(d，2H,J=7．7)，7．85-7．98(m，2H)，8．06-8．19(m，3H)，8．33(d，1H，J=8．5)，8．44(d，1H，J=8．8)，8．73(s，2H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ30．75，58．09，111．71，114．36，114．53，115．28，115．98，116．02，118．28，119．43，122．37，124．71，124．76，125．43，125．73，127．40，128．1，129．25，131．55，131．64，132．83，133．95，135．26，137．79，139．06，139．64，149．67，152．63，156．21；HRMS(FAB)C29H23N6O(MH+)計算值為471．1933，實測值為47．1935。
實施例8 5-苯基-2-[2’-[2”-(2-氨乙基)苯并咪唑-5-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(11)5-苯基-2-[2’-[2”-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(35mg，0．07mmol，實施例9)用2N HCl(5ml)在110℃下水解3小時。冷卻后的反應(yīng)混合物用氫氧化銨堿化至pH9．0，并用柱色譜純化。以50∶50甲醇／乙酸乙酯洗脫得到75％的黃色固體；mp＞280℃；IR(Nujol)3375，2719，1553，1461，1377；1HNMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ3．45-3．52(m，4H)，7．45-7．56(m，2H)，7．79(d，2H，J=7．04)，7．88-8．00(m，2H)，8．07-8．27(m，5H)，8．42(d，1H，J=8．92)，8．68(d，2H，J=4．76)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ25．52，36．36，111．74，113．77，114．62，115．33，115．76，116．17，118．33，123．75，123．94，124．75，125．61，127．48，128．16，129．39，131．71，132．98，133．11，134．77，137．73，138．84，139．71，140．12，150．34，153．43，153．61；HRMS(FAB)C27H19N6O(MH+)計算值為470．2093，實測值為470．2089。
實施例9 5-苯基-2-[2’-[2”-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’基]苯并咪唑(12)5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(124mg，0．41mmol)和5-甲?；?2-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑(95mg，0．41mmol)在硝基苯(7ml)中，145℃下縮合過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去，化合物通過快速柱色譜直接純化。以(1-15％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到69％的黃色固體；mp＞280℃；IR(KBr)3064，2954，2862，1654，1556，1442，1286；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ1．81(s，3H)，3．18-3．35(m，2H)，3．61-3．64(m，2H)，7．45-7．6(m，3H)，7．79(d，2H，J=7．04)，7．87-8．00(m,2H)，8．07-8．30(m，4H)，8．46(d，1H，J=8．5)，8．71(s,2H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ22．59，27．89，36．41，111．73，113．66，114．59，115．22，115．69，116．17，118．61，124．04，125．22，125．66，127．47，127．56，128．14，128．18，129．36，131．62，131．84，132．89，133．69，137．10，138．94，139．54，139．68，150．16，153．24，155．40，158．47，170．27；HRMS(FAB)C31H25N7O(MH+)計算值為512．2199，實測值為512．2201。
中間體5-甲酰基-2-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-氰基-2-(2-氨基乙基)苯并咪唑3，4-二氨基芐腈(1g，7．52mmol)和β-丙氨酸(1．0g，11．3mmol)在HCl(8ml，6N)中的溶液回流24小時。此時二胺僅能通過TLC檢測到。用2N NaOH中和后，化合物直接負(fù)載在柱上。以(75-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫，并進(jìn)一步用(1-25％)甲醇／乙酸乙酯洗脫后得到46％(0．65g)的純的黃色化合物；mp 105-106℃；IR(KBr)3438，2855，2734，2212，1625，1569，1483，1457，1385，1222，1153；1H NMR(CD3OD)δ3．09-3．13(m，4H)，7．49-7．66(m，2H)，7．91(d，1H，J=1．46)；13C NMR(CD3OD)δ33．13，40．99，106．27，116．57，121．04，121．19，127．08，140．40，142．59，158．82；HRMS(EI)C10H10N4m／z計算值為186．0905，實測值為186．0906。
b．5-氰基-2-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑5-氰基-2-(2-氨基乙基)苯并咪唑(0．4g，2．15mmol)在干燥的THF(10ml)、乙酸酐(0．4ml)和三乙胺(0．4ml)中回流4小時?；旌衔镉?N NaOH中和，并以乙酸乙酯萃取得到粗乙酰胺。乙酰胺用快速柱色譜純化。以(0-15％)甲醇／乙酸乙酯洗脫后得到70％的純的白色化合物；mp 218-219℃；IR(KBr)3233，3053，2225，1653，1573，1442，1374，1303，1058，815；1H NMR (DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ1．78(s，3H)，3．26(t，2H)，3．53-3．62(2H，J=6．45，12．38)，7．89-7．95(dd，1H,J=1．42，8．48)，8．00(d，J=8．22,1H)，8．19(t，1H)，8．45(d，1H，J=1．42)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ22．57，27．82，36．71，108．06，115．52，118．62，119．33，129．02，131．29，134．26，156．23，170．18；元素分析C12H12N4O．1／4H2O計算值為C61．92，H5．41，N24．07，實測值為C62．60，H5．41，N23．82。
c．5-甲?；?2-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑5-氰基-2-(2-乙酰氨基乙基)苯并咪唑(94．6mg，0．41mmol)在HCOOH(5．9ml)、水(0．5ml)和Ni-Al(0．4g)催化劑中回流6小時。混合物經(jīng)硅藻土床熱過濾，并用甲醇洗滌該床。洗液在真空中濃縮。濃縮液用2N NaOH堿化至pH 9，并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層用無水Na2SO4干燥，并通過快速柱色譜純化。以(0-15％)甲醇／乙酸乙酯得到80％(70．10mg)的純的白色產(chǎn)物；mp 220-221℃；IR(KBr)3222，3047，1656，1575，1439，1289，1110，1058，816；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ1．79(s，3H)，3．29(t，2H)，3．54-3．64(q，J=6．66，12．64，2H)，7．97-8．09(m，2H)，8．19(t，1H)，8．38(s，1H)，10．17(s，1H)；13C(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ22．69，27．91，36．75，114．89，116．86，125．84，131．67，133．81，135．33，155．88，170．13，192．47；元素分析C12H13N3O2計算值為C62．32，H5．67，N18．17，實測值為C62．10，H5．7，N17．92。
實施例10 5-苯基-2-[2’-[2”-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(13)5-苯基-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(0．17mg，0．58mmol)和5-甲?；?2-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑(120mg，0．59mmol)在硝基苯(5ml)中于145℃下一起加熱15小時。硝基苯通過Kugelrohr除去，化合物直接負(fù)載在柱上。以(1-12％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到80％的純的淡黃色產(chǎn)物；mp＞280℃；IR(KBr)3157，2933，1629，1551，1441，1385，1288，1108，818，760，698；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ3．33(s，3H)，3．45(t，2H)，3．89(t，2H)，7．45-7．59(m，3H)，7．79(d，2H，J=7．04)，7．86-7．99(m，2H)，8．06-8．14(m，3H)，8．26-8．31(dd，1H，J=1．34，8．4)，8．44-8．49(dd，1H，J=1．02，8．82)，8．72(s，2H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ27．71，58．30，68．17，111．7，113．69，114．57，115．22，115．72，116．19，118．51，123．94，124．21，125．26，125．61，127．46，128．14，129．36，131．65，131．71，132．91，133．49，137．24，138．72，139．68，150．15，153．24，155．27；HRMS(FAB)C30H25N6O(MH+)計算值為485．2089，實測值為485．2089。
中間體5-甲?；?2-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-氰基-2-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑3，4-二氨基芐腈(0．2g，1．5mmol)和(0．22g，2．25mmol)2-甲氧基丙酸在4N HCl(2．5ml)中回流7小時。用2N NaOH中和后，混合物用乙酸乙酯萃取，并以無水Na2SO4干燥且在真空下濃縮。產(chǎn)物以(7-100％)乙酸乙酯／正己烷洗脫在柱色譜上純化，得到50％收率的純的白色化合物；mp122-123℃；IR(KBr)2875，2225，1624，1544，1454，1288，1215，1106，824；1H NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ3．29(s，3H)，3．42(t，2H)，3．84(t，2H)，7．87-8．00(m，2H)，8．40(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ27．65，58．18，68．02，106．79，115．56，118．28，119．37，128．95，131．31，134．26，156．12；元素分析C11H11N3·1／2H2O計算值為C62．84，H5．75，N19．97，實測值為C62．71，H5．70，N18．83。
b．5-甲酰基-2-(2’-甲氧基乙基)苯并咪唑5-氰基-2-(2-甲氧基乙基)苯并咪唑(0．12g，0．61mmol)混合在HCOOH(9ml)和水(1ml)中，并向其中加入Ni-Al(0．6g)?；旌衔镌?5℃加熱5．5小時。混合物趁熱經(jīng)硅藻土床過濾，并用甲醇洗滌該床，濃縮濾液。經(jīng)2N NaOH中和并用CHCl3萃取后，萃取液用無水Na2SO4干燥并在真空中濃縮。殘余物以15-100％乙酸乙酯／正己烷梯度洗脫，在柱色譜上純化，得到65％收率的白色產(chǎn)物；mp83-84℃；IR(Nujol) 2846，2728，1692，1290，1109，816；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ3．31(s，3H)，3．44(t，2H)，3．86(t，2H)，7．79-8．09(m，2H)，8．36(s，1H)，10．16(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ27．73，58．28，68．08，114．92，116．86，125．92，131．55，133．85，135．19，155．8，192．43；元素分析C11H12N2O2·1／4H2O計算值為C64．69，H5．92，N13．71，實測值為C64．76，H6．02，N13．60。
實施例11 5-溴-2-[2’-[2”-羥基苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(18)5-溴-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑(33．3mg，0．11mmo1)和5-甲?；?2-羥基苯并咪唑(17．7mg，0．11mmol)在硝基苯(3ml)中，145℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去，該化合物用快速柱色譜純化。以(5-15％)甲醇／乙酸乙酯洗脫后得到23．5mg(0．05mmol)黃色化合物，收率為48％；mp＞280℃；IR(KBr)3409，3211，1698，1558，1482，1384，1279；1H NMR(DMSO-D6+3 滴CF3COOH)δ7．30(d，1H，J=8．34)，7．69(dd，1H，J=1．80，8．71)，7．82(s，1H)，7．86-7．99(m，2H)，8．09-8．13(m，2H)，8．32(dd，1H，J=1．36，8．69)，8．61(s，1H)，11．38(s，1H)；13C(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ108．01，10．55，113．92，115．16，115．27，116．25，117．19，117．86，121．06，122．41，125．24，128．70，130．78，132．66，133．16，134．85，134．89，135．62，150．42，153．09，155．69；HRMS(FAB)C21H14BrN6O(MH+)計算值為445．0412，實測值為445．0408。
中間體5-溴-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．4-溴-鄰苯二胺600mg 4-溴-2-硝基苯胺(2．76mmol)溶解于25ml無水乙醇中，并加入2．72g(14mmol)SnCl2?；旌衔锘亓鬟^夜。乙醇在真空中除去，混合物用2N NaOH堿化至pH。乙醚萃取，用無水Na2SO4干燥醚層，并在真空中濃縮后得到486mg(2．6mmol，94％收率)的粗4-溴-鄰苯二胺，其無需定性即可用于下一步。
b．5-溴-2-[3，4-硝基苯基]苯并咪唑4-溴-鄰苯二胺(275mg，1．5mmol)和3，4-二硝基苯甲醛(300mg，15mmol)在2ml硝基苯中，145℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去。柱色譜純化(1-10％乙酸乙酯／正己烷)得到209mg(0．57mmol，39％收率)純產(chǎn)物；1H NMR(DMSO+3 滴 CF3COOH)δ7．48(dd，1H，J=1．82，8．76)，7．7(d，1H，8．76)，7．96(d，1H，1．46)，8．45(d，1H，8．5)，8．68(dd，1H，J=1．84，8．5)，8．93(d，1H，1．84)；13C NMR(DMSO+3 滴 CF3COOH)δ116．36，117．48，118．66，123．74，127．05，132．07，134．49，137．59，140．23，142．39，142．81，148．45．c．5-溴-2-[3，4-二氨基苯基]苯并咪唑5-溴-2-[3，4-二硝基苯基]苯并咪唑(140mg，0．38mmol)溶解于8ml無水乙醇中，并加入0．8g(4．2mmol)SnCl2?；旌衔锘亓鬟^夜。乙醇在真空中除去，混合物用2N NaOH堿化至pH 11。用乙醚重復(fù)萃取，醚層經(jīng)無水Na2SO4干燥后，在真空中濃縮得到98％收率(0．11g0．37mmol)的粗二胺，其無需另外純化即可使用。1H NMR(DMSO-d6)δ6．63(d，1H，J=8．1)，7．26(m，2H)，7．39(m，2H)，6．65(d，1H，J=1．76)．中間體5-甲?；?2-羥基苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
d．5-氰基-2-羥基苯并咪唑。
3，4-二氨基芐腈(0．5g，3．8mmol)和尿素(0．25g，4．2mmol)在1ml DMF中145～150℃下一起加熱9小時。DMF在真空中濃縮，混合物懸浮于水中并用乙酸乙酯萃取。柱色譜純化(以60／40乙酸乙酯／正己烷洗脫)得到(0．53g，3．3mmol)89％收率的產(chǎn)物；IR(KBr)3533，3209，2224，1732，1482，1281；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)o 7．1(d，1H，J=8．06)，7．09-7．41(m，2H)，11．06(s，1H)，11．19(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ102．52，109．36，111．61，120．04，126．03，130．18，133．93，155．41．e．5-甲?；?2-羥基苯并咪唑5-氰基-2-羥基苯并咪唑(0．5g，3．14mmol)與Ni-Al催化劑(3g)、HCOOH(45ml)和水(3ml)混合，加熱回流12小時。熱的混合物經(jīng)硅藻土床過濾。濾液在真空中濃縮?；旌衔锏膒H值用2N NaOH調(diào)節(jié)至9，并用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯層經(jīng)無水Na2SO4干燥后在真空下濃縮。柱色譜純化，以65／35乙酸乙酯／正己烷洗脫得到0．4g(2．4mmol，76％收率)的終產(chǎn)物；IR(KBr)3261，3160，1677，1631，1477，1282，711；1HNMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．11(d，1H，J=8．0)，7．41(s，1H)，7．57(dd，1H，J=1．54，8．0)，9．86(s，1H)，10．99(s，1H)，11．17(s,1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ108．15，108．67，125．37，130．1，130．42，135．64，155．68，191．99．實施例12 5，6-二溴-2-[2’-(2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(22)4，5-二溴-鄰-苯二胺(60mg，0．22mmol)和5-甲?；?2-(2’-三氟甲基苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(73mg，0．22mmol)在10ml硝基苯中于150℃下加熱過夜。硝基苯以Kugelrohr除去，混合物負(fù)載在柱上。以90／10乙酸乙酯／正己烷洗脫得到25mg(20％收率，0．05mmol)的化合物；
mp＞260℃；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ8．02-8．09(m，2H)，8．14(s，2H)，826-8．29(m，2H)，8．57(s，1H)，8．69(s，1H)．中間體5-甲酰基-2-(2’-三氟甲基苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．5-氰基-2-(2’-三氟甲基苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑5-甲酰基-2-三氟甲基苯并咪唑(1．5g，7mmol)和0．93g 3，4-二氨基芐腈(7mmol)、15ml硝基苯混合?；旌衔镌?45℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去，該混合物負(fù)載在柱上。以40／60乙酸乙酯／正己烷洗脫得到0．9g(2．75mmol)化合物，收率為40％；mp＞260℃；IR(KBr)3254，2916，2223，1614，1175；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．74(dd，1H，J=1．38，8．4)，7．88(d，1H，J=8．14)，7．98(d，1H，J=8．78)，8．25-8．03(m，2H)，8．63(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ105．62，115．78，116．35，120．26，123．06，123．82，127．18，137．35，139．65，142．17，142．96，154．13b．5-甲酰基-2-(2’-三氟甲基苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑5-氰基-2-(2’-三氟甲基苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(0．18g，0．54mmol)在8ml HCOOH、2．5ml水和0．6gNi-Al催化劑中于110℃下回流7小時。熱的混合物經(jīng)硅藻土床過濾，濃縮濾液并以2N NaOH調(diào)節(jié)pH值為9．0。用乙酸乙酯重復(fù)萃取，以無水Na2SO4干燥有機(jī)層，并在真空中濃縮后得到粗產(chǎn)物。用柱色譜(1％甲醇／乙酸乙酯洗脫)得到87mg(0．26mmol，49％收率)的純?nèi)?；mp＞260℃；IR(KBr)3411，2966，1679，1310，1153；1H NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ7．96-8．06(m，3H)，8．30-8．32(m，2H)，8．57(s，1H)，10．15(s，1H)；13CNMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ106．77，112．51，113．28，117．79，117．84，118．28，121．78，123．96，125．02，132．98，135．79，139．62，142．48，153．51，192．65。
中間體4，5-二溴-1，2-苯二胺如下進(jìn)行制備，采用的是美國專利4，264，600所描述過程的改進(jìn)。
c．3，4-二溴苯胺3-溴苯胺(3g，17．4mmol)溶解于15ml CH2Cl2中，反應(yīng)混合物在冰鹽浴中冷卻至-10℃。2，4，4，6-四溴-2，5-環(huán)己二烯酮(9．29g，0．02mmol)在連續(xù)攪拌下分批加入。反應(yīng)混合物在0℃攪拌7小時，然后用2N NaOH(10ml)淬滅反應(yīng)。水層用CH2Cl2萃取，有機(jī)層用無水Na2SO4干燥。CH2Cl2層在真空中濃縮并用柱色譜純化。以0-3％乙酸乙酯／正己烷洗脫后得到3．2g(12．7mmol，73％)的純產(chǎn)物；mp 80-81℃；IR(KBr)3406，3318，3210，1583，1464，1287，1108，860，668；1H NMR(CDCl3)δ6．49(dd，1H，J=2．7，8．6．)6．7(d，1H，J=2．64)，7．32(d，1H，J=8．6)；13CNMR(CDCl3)δ112．6，116，120．1，125．45，134．26，147．08．d．3，4-二溴N-乙酰苯胺3，4-二溴苯胺(3．2g，12．7mmol)與13ml乙酸酐混合，并在110℃加熱2小時，然后倒入冰冷的水中。水層用乙酸乙酯、0．1N HCl和1N NaOH萃取，有機(jī)層用無水Na2SO4干燥。有機(jī)層在真空中濃縮并用柱色譜純化。以1-50％乙酸乙酯／正己烷洗脫后得到2．6g(9mmol，71％收率)的所述N-乙酰苯胺；mp 91-93℃；IR(KBr)3293，3172，1668，1589，1552，1522，1373，813；1H NMR(CDCl3)δ2．17(s，3H)，7．33(dd，1H，J=2．4，8．66)，7．52(d，1H，J=8．68)，7．87(d，1H,J=2．4)；13C NMR(CDCl3)δ25．07，119．64，120．35，125．04，125．38，134．13，138．40，168．96。
e．3，4-二溴-6-硝基N-乙酰苯胺將3，4-二溴N-乙酰苯胺(2．64g，9mmol)在0℃下溶解于8ml濃H2SO4(在冰鹽浴中冷卻)。向該溶液中加入1ml冰冷的硝化混合物(等體積的濃H2SO4和發(fā)煙硝酸)，混合物攪拌20分鐘。反應(yīng)混合物倒入冰水中并用氫氧化銨中和至pH9．0。過濾黃色沉淀并用柱色譜純化。以1-4％乙酸乙酯／正己烷洗脫后得到2．1g(6．15mmol，68％)的3，4-二溴-6-硝基N-乙酰苯胺；mp 141-142℃；IR(KBr)3340，3128，1693，1569，1479，1332，1268；1H NMR(CDCl3)δ2.3(s，3H)，8.46(s，1H)，9.22(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ26.14，118.67，126.86，130.86，134.51，134.59，136.98，169.40。
f．3，4-二-溴-6-硝基苯胺3，4-二溴-6-硝基N-乙酰苯胺(2．1g，6．15mmol)與40ml 6N HCl加熱至回流溫度2小時。然后將反應(yīng)混合物倒入冰水混合物中并攪拌。溶液的pH值用NaOH調(diào)節(jié)至9．0。所得的亮黃色沉淀經(jīng)過濾、冷水洗滌和干燥，得到(1．78g，6mmol，98％)純產(chǎn)物；mp 204-205 ℃； IR(KBr)3475，3355，3097，1612，1478，1241，1122，914；1H NMR(CDCl3)δ6.05 (brs，2H)，7.18(s,1H)，8.37(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ111.23，123.22，129.34，130.59，133.61，142.36。
g．4，5-二溴-1，2-苯二胺3，4-二溴-6-硝基苯胺(189mg，0．64mmol)溶解于8ml無水乙醇中，乙醇中加入約400mg阮內(nèi)鎳。氫化裝置的氫氣壓力為50psi。45分鐘后，最先出現(xiàn)的深黃色完全消失，表示硝基完全還原為氨基。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土床過濾，且該床用甲醇清洗。甲醇在真空中濃縮，以82％收率得到135mg粗二胺。粗二胺無需進(jìn)一步純化即可使用；1HNMR(CDCl3)δ3．37(br，4H)，6．93(s，2H)；13C NMR(CDCl3)δ113．98，120．95，135．84。
實施例13 5-苯基-6-甲氧基-2-[2’-(苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(15)4-甲氧基-5-苯基-1，2-苯二胺(139mg，0．65mmol)和5-甲?；?2-(苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(170mg，0．65mmol)在硝基苯(5ml)中于145℃下一起加熱過夜。硝基苯以Kugelrohr除去，化合物負(fù)載在柱上。以(1-10％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到120mg(41％)的純產(chǎn)物；mp＞280℃；IR(KBr)3298，3050，2987，1630，1541，1438，1283；1H NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ3．92(s，3H)，7．39-7．57(m，6H)，7．72(s，1H)，8．11-8．15(m，1H)，8．19-8．27(m，2H)，8．47(dd，1H，J=1．46，8．07)，8．64(s，1H)，8．76(s，1H)，9．75(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ56．40，95．73，114．62，115．18，116．02，116．15，119．03，119．07，125．59，126．29，127．63，127．67，128．34，129．79，130．69，131．54，132．42，133．38，137．59，148．81，152．84，156．82；HRMS(FAB)C28H21N6O(MH+)計算值為457．1777，實測值為457．1770。
中間體4-甲氧基-5-苯基-1，2-苯二胺如下進(jìn)行制備a．4-甲氧基-2-硝基-5-苯基苯胺3-溴-4-甲氧基-6-硝基苯胺(400mg，1．62mmol)溶解在DME(20ml)中。四三苯基膦鈀(94mg，0．08mmol)用作催化劑。向該混合物中加入苯基硼酸(300mg，1．01mmol)和2M Na2CO3(1．8ml)，混合物在90℃回流過夜。反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并用快速柱色譜純化。以(1-10％)乙酸乙酯／正己烷洗脫得到280mg(1．14mmol)的純產(chǎn)物，收率為71％；IR(KBr)3435，3328，2933，1570，1480，1227，1029，692；1H NMR(CDCl3)δ3．80(s，3H)，5．94(br，H)，6．79(s，1H)，7．39-7．64(m，5H)，7．64(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ56．63，106．76，121．26，128．69，128．72，128．76，128．79，128．92，129．71，136．69，140．24，141．42，148．65；HRMS(FAB)C13H12N2O3計算值為244．0848，實測值為244．0847。
b．4-甲氧基-5-苯基-1，2-苯二胺4-甲氧基-2-硝基-5-苯基苯胺(165mg，0．68mmol)在乙酸乙酯(20ml)中以20mg 10％Pd／C作為催化劑還原過夜。混合物經(jīng)硅藻土床過濾，且該床用甲醇清洗。所有洗液在真空中濃縮得到139mg(96％收率)的粗二胺，其無需進(jìn)一步純化即可使用；
1HNMR(CDCl3)δ3.49(brs，4H)，3.71(s，3H)，6.42 (s，1H)，6.74 (s，1H)，7.26-7.52 (m，5H)；13C NMR(CDCl3)δ56.81，101.77，120.93，127.53，128.39，128.45，128.49，129.82，129.96，136.64，139.17，142.37，153.73。
在子項a中所用的中間體3-溴-4-甲氧基-6-硝基苯胺可通過市購得到(Aldrich Chemical Company)。
中間體5-甲酰基-2-(苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑可按Sun等在J．Med．Chem．1995，38，3638-3644中所述的方法進(jìn)行制備。
實施例14 5，6-二苯基-2-[2’(苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(16)4，5-二苯基-1，2-苯二胺(151mg，0．58mmol)和5-甲?；?2-(苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(152mg，0．58mmol)在硝基苯(4ml)中于N2下在145℃下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去，化合物經(jīng)快速柱色譜純化。以(2-10％)甲醇／乙酸乙酯洗脫后，得到108mg(0．22mmol)的純的黃色化合物，收率為37％；mp＞280℃；IR(KBr)3399，3059，1629，1551，1441，1292；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ7．17-7．33(m，10H)，7．84(s，2H)，8．06-8．25(m，3H)，8．49(dd,1H,J=1．18，8．89)，8．66(s，1H)，8．75(s，1H)，9．69(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ113．94，115．24，115．84，116．15，116．32，117．89，123．34，126．32，126．66，127．86，128．38，128．42，128．46，130．05，131．77，131．89，133．03，138．87，138．97，140．62，141．19，160．97，153．71；HRMS(FAB)C33H23N6(MH+)計算值為503．1984，實測值為503．1989。
中間體4，5-二苯基-1，2-苯二胺如下進(jìn)行制備a．4，5-二苯基-2-硝基苯胺3，4-二溴-6-硝基苯胺(332mg，1．12mmol)溶解在DME(20ml)中。將四(三苯基膦)鈀(65mg，0．06mmol)、苯基硼酸(200mg，1．64mmol)和2M Na2CO3(10ml)加入到反應(yīng)混合物中，并在90℃下回流過夜。反應(yīng)混合物在真空中濃縮，并負(fù)載到柱上。以(1-3％)乙酸乙酯／正己烷洗脫得到259mg純的黃色化合物，收率為80％；
mp 139-141℃；IR(KBr)3476，3363，2924，1621，1476，1263，1089；1H NMR(CDCl3)δ56.11(brs，2H)，6.86(s，1H)，7.04-7.09(m，5H)，7.15-7.26(m，5H)，8.21(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ120.56，127.22，127.66，128.20，128.26，128.52，128.53，129.31，129.39，129.47，129.77，130.14，130.93，131.79，139.85，139.94，144.08, 149.03。
b．4，5-二苯基-1，2-苯二胺4，5-二苯基-2-硝基苯胺(200mg，0．69mmol)在乙醇(50ml)中用40mg 10％Pd／C還原。氫化反應(yīng)在40psi下進(jìn)行10小時?；旌衔锝?jīng)硅藻土床過濾，且該床用甲醇清洗。甲醇層在真空中濃縮得到151mg粗二胺，收率為84％。該粗二胺無需純化即可使用。1H NMR(CD3OD)δ6．78(s，2H)，7．01-7．16(m，10H)；13C NMR(CD3OD)δ118．08，121．23，127．17，127．66，130．44，131．76，138．32。
實施例15 5，6-二溴-2-[2’-(苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(20)4，5-二溴-1，2-苯二胺(128mg，0．48mmol)和5-甲?；?2-(苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(126mg，0．48mmol)在硝基苯(6ml)中于145℃下加熱過夜。硝基苯以Kugelrohr除去，混合物負(fù)載在柱上以純化。以(1-10％)甲醇／乙酸乙酯洗脫得到0．1gm(41％)的純化合物；mp＞260℃；IR(KSr)3405，3198，1626，1544，1385，1292；1H NMR (DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ8．03-8．13(m，2H)，8．17(s，2H)，8．25(d，1H，J=9．16)，8．42(d，1H，J=8．64)，8．59(s，1H)，8．74(s，1H)，9．75(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ114．73，114．96，115．77，115．99，118．93，119,61，120．73，123．29，124．47，125．56，131．49，133．47，134．77，135．79，137．95，151．93，152．31；HRMS(FAB)C21H13Br2N6(MH+)計算值為506．9568，實測值為506．9574。
中間體4，5-二溴-1，2-苯二胺按實施例12c-g所述方法制備。
實施例16 5-溴-6-甲氧基-2-[2’-(苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(21)
在硝基苯(4ml)中，4-溴-5-甲氧基-1，2-苯二胺(123mg，0．57mmol)和5-甲?；?2-(苯并咪唑-5’-基)苯并咪唑(150mg，0．57mmol)在145℃于氮氣下加熱過夜。硝基苯通過Kugelrohr除去。以(1-10％)甲醇／乙酸乙酯洗脫進(jìn)行色譜(柱)分離得到104mg(40％)的標(biāo)題化合物；mp＞280℃；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ3．91(s，3H)，7．17-7．29(m，1H)，7．78(d，1H，J=8．84)，8．00-8．13(m，3H)，8．49-8．53(m，1H)，8．66(s，1H)，8．79(s，1H)，9．69(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3滴 CF3COOH)δ56．16，96．43，114．06，114．97，115．55，115．79，115．89，116．35，117．97，118．42，123．11，125．30，125．58，126．33，127．43，131．85，133．05，133．11，138．39，140．84，149．04，153．44；HRMS(FAB)C22H16BrN6O(MH+)計算值。
中間體4-溴-5-甲氧基-1，2-苯二胺如下進(jìn)行制備。
a．4-溴-5-甲氧基-1，2-苯二胺3-溴-4-甲氧基-6-硝基苯胺(150mg，0．61mmol)(AldrichChemical Company)溶解于乙醇(10ml)中。使用350mg阮內(nèi)鎳進(jìn)行氫化30分鐘。反應(yīng)混合物經(jīng)硅藻土床過濾，并用甲醇清洗。甲醇層在真空中干燥，得到127mg粗二胺，收率為97．40％，其無需進(jìn)一步純化即可使用；1H NMR(CDCl3)δ3．20(brs，2H)，3．39(brs，2H)，3．8(s，3H)，8．36(s，1H)，6．89(s，1H)；13C NMR(CDCl3)δ57．35，100．38，102．27，122．52，128．69，136．68，150．94。
實施例17 5-(4-氯苯基)-2-[2’-[2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基]苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑(23)2-(3，4-二氨基苯基)-5-(4-氯苯基)苯并咪唑(65mg)和5-甲酰基-2-三氟甲基苯并咪唑(43mg)在硝基苯(4ml)中于150℃下一起加熱。硝基苯通過Kugelrohr除去，粗混合物負(fù)載在柱上。以(10-90％)乙酸乙酯／己烷洗脫后，得到(32mg，0．006mmol)的標(biāo)題化合物，收率為30％；
mp＞260℃；IR(KBr)3153，2965，1546，1444，1162，810；UV(MeOH)335，240nm(logε=4．45，4．40)；1H NMR(DMSO-d6+3滴CF3COOH)δ7．56-7．64(m，2H)，7．73-8．06(m，6H)，8．17-8．25(m，2H)，8．33(dd，1H，J=1．46，8．81)，8．67(d，1H，J=1．40)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴CF3COOH)δ114．76，115．49，116．00，117．32，117．45，123．28，123．89，124．11，125．13，125．19，127．45，127．49，129．25，129．36，129．42，132．49，133．06，133．53，136．94，137．04，138．23，138．62，140．56，150．64，150．84，154．37；HRMS(FAB)C28H17ClF3N6(MH+)計算值為529．1155，實測值為529．1156。
中間體2-(3，4-二氨基苯基)-5-(4-氯苯基)-苯并咪唑如下進(jìn)行制備。
a．4-(4-氯苯基)-1，2-苯二胺4-(4-氯苯基)-2-硝基苯胺(0．79g)在甲醇∶乙酸乙酯(1∶1，40ml)中的混合物用115mg的10％Pd／C還原。氫化反應(yīng)在40psi下進(jìn)行10小時。混合物經(jīng)硅藻土床過濾，且該床用甲醇洗滌。甲醇層在真空中濃縮得到0．71g二胺，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
b．2-(3，4-二硝基苯基)-5-(4-氯苯基)苯并咪唑4-(4-氯苯基)-1，2-苯二胺(0．7g)和3，4-二硝基苯甲醛(0．63g)在硝基苯(13ml)中的攪拌的溶液在150℃于氮氣下加熱16小時。溶劑通過Kugelrohr除去，混合物通過快速色譜純化。以乙酸乙酯∶己烷(1-10％)洗脫后得到苯并咪唑，為亮黃色-紅色化合物(0．55g，44％)；mp 75-766℃。
c．2-(3，4-二氨基苯基)-5-(4-氯苯基)苯并咪唑2-(3，4-二硝基苯基)-5-(4-氯苯基)苯并咪唑(125mg)溶解在乙酸乙酯(25ml)中，并用Pd／C 10％(25mg)作為催化劑氫化還原12小時。經(jīng)硅藻土床過濾后，蒸發(fā)溶劑得到二胺；1H NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ6．92(d，1H，J=8．42)，7．57-7．62(m，4H)，7．65-7．81(m，4H)，7．92(s，1H)；13C NMR(DMSO-d6+3 滴 CF3COOH)δ110．15，111．28，114．09，115．29，117．73，128．18，129．22，129．33，129．34，131．87，132．89，132．97，136．69，138．68，143．70，150．78。
實施例18 下面描述了用于人類治療或預(yù)防用途的代表性藥物劑型，其含有式Ⅰ所示的化合物(‘化合物X’)。
(i)片劑1 mg／片‘化合物X’100．0乳糖 77．5聚乙烯吡咯烷酮(Povidone) 15．0Croscarmellose鈉 12．0微晶纖維素92．5硬脂酸鎂 3．0300．0(ⅱ)片劑2 mg／片‘化合物X’ 20．0微晶纖維素410．0淀粉 50．0乙醇酸淀粉鈉 15．0硬脂酸鎂 5．0500．0(ⅲ)膠囊 Mg／膠囊‘化合物X’10．0膠體二氧化硅 1．5乳糖 465．5預(yù)凝膠化淀粉 120．0硬脂酸鎂 3．0600．0(iv)注射劑1(1mg／ml) mg／ml‘化合物X’(游離酸形式) 1．0磷酸氫二鈉12．0
磷酸二氫鈉 0．7氯化鈉 4．51．0N氫氧化鈉溶液(pH值調(diào)節(jié)至7．0-7．5) 適量注射用水 適量加至1ml(ⅴ)注射劑2(10mg／ml) mg／ml‘化合物X’(游離酸形式)10．0磷酸二氫鈉 0．3磷酸氫二鈉 1．1聚乙二醇400200．00．1N氫氧化鈉溶液(pH調(diào)節(jié)至7．0-7．5)適量注射用水 適量加至1ml(ⅵ)氣霧劑 mg／罐‘化合物X’ 20．0油酸 10．0三氯一氟甲烷 5，000．0二氯二氟甲烷 10，000．0二氯四氟乙烷 5，000．0上述制劑可通過藥學(xué)領(lǐng)域眾所周知的常規(guī)方法獲得。
盡管單獨引入作為參考，但所有的出版物、專利和專利文獻(xiàn)均在此引作參考。本發(fā)明根據(jù)多個具體的和優(yōu)選的實施方案和技術(shù)來描述。但是，應(yīng)當(dāng)理解，只要保持在本發(fā)明的精神和范圍之內(nèi)，就可以進(jìn)行各種變通和修改。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ所示的化合物 其中R1和R2各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基；或R1和R2連在一起為亞甲基二氧基；或R1和R2連在一起為苯并；R3、R4和R5各自獨立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C2-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基和雜芳基(C1-C6)烷基；R6和R7各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基；R8為羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、鹵代(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基、雜芳氧基、SRc或S(O)nRd；或R8為被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基所取代的(C1-C6)烷基羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基和雜芳氧基；n為1或2；每個Ra和Rb獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基或雜芳基羰基；或Ra和Rb與它們所結(jié)合的氮原子連在一起表示1-吡咯烷基、哌啶子基或嗎啉代。Rc為(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基或雜芳基羰基；Rd為(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基、-NReRf或雜芳基羰基；以及Re和Rf各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C1-C6)鏈烷酰基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基、雜芳基(C1-C6)烷基、芳基羰基、鹵代(C1-C6)烷基或雜芳基羰基；其中，R1-R5、R8和Ra-Rf中的任何芳基、雜芳基或苯并可任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基所取代，所述取代基是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2為苯基，任選被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基取代(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基。
3．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2為苯基。
4．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為氫。
5．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1為鹵素。
6．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2分別為鹵素。
7．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1和R2分別為溴。
8．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R3、R4和R5分別為氫。
9．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R6和R7分別為氫。
10．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R6為(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。
11．根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R7為(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。
12．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基或雜芳氧基；或R8為被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基取代的(C1-C6)烷基羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳氧基和雜芳氧基。
13．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。
14．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為被1、2或3個羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基取代的(C1-C6)烷基。
15．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為被羥基、硝基、氰基、巰基、羧基、(C1-C6)烷氧基、-NRaRb、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基取代的(C1-C6)烷基。
16．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為三氟甲基、一氯二氟甲基、二氯一氟甲基、2，2，2-三氟乙基、全氟乙基、三氟甲氧基、氰基、鹵素、羧基、(C1-C6)烷氧基羰基、鹵代(C1-C6)鏈烷酰基或S(O)nRd。
17．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為鹵素或三氟甲基。
18．根據(jù)權(quán)利要求1～11任一項的化合物，其中R8為三氟甲基。
19．化合物5-苯基-2-[2’-(2”-巰基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑；5-苯基-2-[2’-(2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑或5，6-二溴-2-[2’(2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑或其藥學(xué)上可接受的鹽。
20．化合物5-苯基-2-[2’-(2”-三氟甲基苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑或其藥學(xué)上可接受的鹽。
21．含有權(quán)利要求1～20任一項所述的化合物并結(jié)合以藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。
22．一種治療癌癥的方法，該方法包括給需要這種治療的哺乳動物服用有效量的權(quán)利要求1～20任一項所述的化合物。
23．一種抑制癌細(xì)胞的方法，包括將所述的癌細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求1-20任一項所述的化合物接觸。
24．式Ⅰ所示的化合物 其中R1和R2各自獨立地為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C5)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基、(C1-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基或雜芳基(C1-C6)烷基；或R1和R2連在一起為亞甲基二氧基；R3、R4和R5各自獨立地選自氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C2-C6)鏈烷酰氧基、芳基、雜芳基、芳基(C1-C6)烷基和雜芳基(C1-C6)烷基；R6和R7各自獨立地為氫、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基；以及R8為氫、(C1-C6)烷基、芳基或雜芳基；其中，R1-R5和R8中的任何芳基或雜芳基可任選地被1、2或3個獨立地選自下列的取代基取代，所述取代基是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基；或其藥學(xué)上可接受的鹽。
25．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R1和R2各自獨立地為(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基或芳基。
26．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R1和R2連在一起為亞甲基二氧基。
27．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R1和R2分別為鹵素。
28．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R1和R2分別為溴。
29．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R1和R2各自獨立地為苯基或甲氧基。
30．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R3、R4和R5分別為氫。
31．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R6為(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷酰基、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。
32．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R7為(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基或(C1-C6)鏈烷酰氧基。
33．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R8為氫。
34．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R8為(C1-C6)烷基。
35．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R8為芳基，任選被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基取代(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基，鹵素，硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基。
36．根據(jù)權(quán)利要求24的化合物，其中R8為雜芳基，任選被1、2或3個獨立地選自下列基團(tuán)的取代基取代(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基、(C3-C6)環(huán)烷基(C1-C6)烷氧基、羥基、鹵素、硝基、氰基、巰基、羧基、羥基(C1-C6)烷基、鹵代(C1-C6)烷基、三氟甲氧基、(C1-C6)鏈烷?；?、(C1-C6)烷氧基羰基、(C1-C6)烷基硫基和(C1-C6)鏈烷酰氧基。
37．化合物5，6-二溴-2-[2’-(苯并咪唑-5”-基)苯并咪唑-5’-基]苯并咪唑或其藥學(xué)上可接受的鹽。
38．含有權(quán)利要求24～37任一項所述的化合物并結(jié)合以藥學(xué)可接受的載體的藥物組合物。
39．一種治療癌癥的方法，該方法包括給需要這種治療的哺乳動物服用有效量的權(quán)利要求24所述的化合物。
40．一種抑制癌細(xì)胞的方法，包括將所述的癌細(xì)胞與有效量的權(quán)利要求24所述的化合物接觸。
41．一種治療真菌感染的方法，該方法包括給受真菌感染折磨的哺乳動物服用有效抗真菌量的權(quán)利要求1或權(quán)利要求24所述的化合物。
42．用于醫(yī)學(xué)治療的權(quán)利要求1～20或24-37任一項所述的化合物。
43．根據(jù)權(quán)利要求42的化合物，其中醫(yī)學(xué)治療為治療癌癥。
44．權(quán)利要求1～20或24～37任一項所述的化合物在制備用于治療癌癥的藥物中的用途。
45．權(quán)利要求1～20或24～37任一項所述的化合物在制備用于治療真菌感染的藥物中的用途。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種其中R
文檔編號C07D491/04GK1290253SQ99802929
公開日2001年4月4日 申請日期1999年2月12日 優(yōu)先權(quán)日1998年2月12日
發(fā)明者E·J·拉沃伊, J·S·金, M·蘭加拉延, L·F·劉 申請人:新澤西州州立大學(xué)(拉特格斯)