專(zhuān)利名稱(chēng)：異羥肟酸衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及異羥肟酸衍生物。
本發(fā)明提供的異羥肟酸衍生物是通式如下的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽
其中，R1代表1-7個(gè)C的烷基;
R2代表氫、1-6C烷基或化學(xué)式為-(CH2)n-芳基或-(CH2)n-Het的基團(tuán)，其中n代表1-4，Het代表5-或6-元N-雜環(huán)，該環(huán)(a)通過(guò)N原子相連，(b)任選地含有N、O和/或S作為在不與連接N原子相鄰的位置上的額外的雜原子，(c)在與連接N原子相鄰的一個(gè)或兩個(gè)C原子上被氧取代，和(d)任選地在苯并稠合或者任選地在一個(gè)或多個(gè)其它碳原子上被1-6C烷基或氧取代，以及/或在任何額外的N原子上被1-6C烷基取代;
R3代表天然的或非天然的α-氨基酸的特征基團(tuán)，其中存在的任何官能基都可以被保護(hù)，條件是R3不代表氫;
R4代表羧基，(1-6C烷氧基)羰基，氨基甲?；?1-6C烷基)氨基甲酰基;
R5代表天然存在的α-氨基酸的特征基團(tuán)，其中存在的任何官能基均可被保護(hù);
R6代表氫;或者R4、R5和R6各自分別代表氫或1-6C烷基。
式Ⅰ化合物具有價(jià)值的藥理性質(zhì)。特別是，它們是間質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑，可以用來(lái)控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病，例如類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和骨關(guān)節(jié)炎，或者用來(lái)治療侵入性(invasive)腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥。
本發(fā)明的目的是式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽本身以及作為治療活性物質(zhì)的應(yīng)用;制造該化合物及鹽的方法;適用于該方法的中間體;含有該化合物及其鹽的藥物和這些藥物的制造;以及該化合物及鹽在控制或預(yù)防疾病或增進(jìn)健康方面的用途，尤其是在控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療侵入性腫瘤或動(dòng)脈粥樣硬化方面的用途，或者用來(lái)制造藥物，以便控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或者治療侵入性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥。
1-6C或1-7C烷基本身或者在其結(jié)合體(例如烷氧基)中，以含有最多4個(gè)C原子為佳。它可以是直鏈或支鏈。例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基等。(1-6C烷氧基)羰基的實(shí)例有甲氧基羰基、乙氧基羰基、正丙氧基羰基、異丙氧基羰基等，(1-6C烷基)氨基甲?；梢允羌谆被柞；⒁一被柞；?、正丙基氨基甲?；?、異丙基氨基甲?；?。-(CH2)n-芳基的芳基部分可以是苯基或萘基，它們可以任意被取代，例如被鹵素(即氟、氯、溴或碘)、1-6C烷基、1-6C烷氧基、三氟甲基等取代。
天然的或非天然的α-氨基酸的特征基團(tuán)是化學(xué)式為H2N-CH(R)-COOH的天然或非天然α-氨基酸中的R基。來(lái)自天然α-氨基酸的這類(lèi)特征基團(tuán)的實(shí)例如下，在其后的括號(hào)中列出的是對(duì)應(yīng)的天然α-氨基酸氫(甘氨酸)，甲基(丙氨酸)，異丙基(纈氨酸)，異丁基(亮氨酸)，芐基(苯丙氨酸)，對(duì)羥基芐基(酪氨酸)，羥甲基(絲氨酸)，巰基甲基(半胱氨酸)，1-羥乙基(蘇氨酸)，2-甲硫基乙基(甲硫氨酸)，羧甲基(天冬氨酸)、2-羧乙基(谷氨酸)和4-氨基丁基(賴(lài)氨酸)。來(lái)自非天然α-氨基酸的這類(lèi)特征基團(tuán)的實(shí)例如下，在其后的括號(hào)中列出的是相應(yīng)的非天然α-氨基酸乙基(α-氨基正丁酸)，正丙基(α-氨基正丙酸)，正丁基(α-氨基正己酸)，叔丁基(α-氨基新己酸)，新戊基(α-氨基新庚酸)，正庚基(α-氨基正壬酸)，環(huán)己基甲基(環(huán)乙基丙氨酸)，苯基(α-氨基苯基乙酸)，2-苯基乙基(高苯基丙氨酸)，1-萘基(α-氨基-1-萘基乙酸)，2-萘基(α-氨基-2-萘基乙基)，苯乙基(α-氨基-3-苯基丁酸)，α-甲基芐基(β-甲基苯丙氨酸)，α，α-二甲基芐基(β，β-二甲基苯丙氨酸)等。
R3和R5中存在的任何官能基(活性基)均可用肽化學(xué)中已知的方式保護(hù)。例如，氨基可以用叔丁氧基羰基、芐氧基羰基、甲酰基、三苯甲游基、三氟乙?；?-(聯(lián)苯基)異丙氧基羰基或異冰片基氧羰基或者以苯二甲酰亞氨基的形式保護(hù)，羧基可以用例如容易裂解的酯基的形式保護(hù)，例如甲酯、乙酯、叔丁酯、芐酯或類(lèi)似的酯。羥基的保護(hù)可以采用醚的形式，例如甲醚、叔丁醚、芐醚或四氫吡喃醚，或者以酯的形式，例如乙酸酯，巰基可以用例如叔丁基、芐基或類(lèi)似的基團(tuán)保護(hù)。
式Ⅰ化合物與堿，例如與堿金屬氫氧化物(如氫氧化鈉和氫氧化鉀)、堿土金屬氫氧化物(如氫氧化鈣和氫氧化鎂)、氫氧化銨等，形成藥學(xué)上可接受的鹽。堿性的式Ⅰ化合物與酸形成藥學(xué)上可接受的鹽。作為這類(lèi)鹽，不僅考慮與無(wú)機(jī)酸，例如與氫鹵酸(如鹽酸和氫溴酸)、硫酸、硝酸、磷酸等形成的鹽，而且也包括與有機(jī)酸形成的鹽，例如乙酸、酒石酸、丁二酸、富馬酸、馬來(lái)酸、蘋(píng)果酸、水楊酸、檸檬酸、甲磺酸、對(duì)甲苯磺酸等。
式Ⅰ化合物包括至少二個(gè)不對(duì)稱(chēng)的碳原子，因此可以以旋光對(duì)映體、非對(duì)映異構(gòu)體或外消旋物的形式存在。本發(fā)明包括所有這些形式。
在以上的式Ⅰ化合物中，R1最好代表乙基、異丙基、正丁基或正己基，尤其是乙基。
R2最好代表氫，甲基，化學(xué)式-(CH2)n-芳基的基團(tuán)，其中的芳基為苯基，或是化學(xué)式(CH2)n-Het的基團(tuán)，其中n的意義與前面給出的相同，Het代表5-或6-元N-雜環(huán)，它可以任選地含有一個(gè)或二個(gè)N原子、一個(gè)N原子和一個(gè)氧原子或一個(gè)O原子作為額外的雜原子。Het最好代表化學(xué)式如下的一個(gè)基團(tuán)
其中，R7和R8各自代表氫，或者一起代表一個(gè)附加鍵或稠合苯環(huán)的其余部分;
R9代表氫或1-6C烷基;
X代表-CO-、-CH2-、-CH(1-6C烷基)-、-C(1-6C烷基)2-、-NH2-、-N(1-6C烷基)-或-O-;
Y代表-O-、-NH-或-N(1-6C烷基)-。
在一特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，Het代表一個(gè)式(b)基團(tuán)，特別是苯二甲酰亞氨基，或是式(c)基團(tuán)，特別是3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基。
關(guān)于符號(hào)n，當(dāng)R2代表式-(CH2)n-Het基團(tuán)時(shí)它最好是1，當(dāng)R2代表式-(CH2)n-芳基時(shí)它最好是3。
R3最好代表甲基、異丁基、叔丁基、保護(hù)的4-氨基丁基、新戊基、正庚基、環(huán)己基甲基、芐基、α-甲基芐基或α，α-二甲基芐基。4-苯二甲酰亞氨基丁基是優(yōu)選的被保護(hù)的4-氨基丁基。
最好是，R4代表(1-6C烷基)氨基甲?；?，尤其是甲基氨基甲?；一被柞；琑5代表異丁基，R6代表氫，或者R4、R5和R6各自代表氫，或者R4和R5各自代表氫，R6代表叔丁基，或者R4、R5和R6各自代表甲基。
特別優(yōu)選的式Ⅰ化合物是[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)-丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)-丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
其它有意義的式Ⅰ化合物和實(shí)例是[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-(Nε-鄰苯二甲酰)-賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰(nonalyl)-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯基丙氨酸叔丁基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯基丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-蘇-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯基丙氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
根據(jù)本發(fā)明提供的方法，上述的式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽用以下方法制造(a)通式(Ⅱ)化合物催化加氫
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有前面給出的含義，Bz代表芐基;
(b)通式(Ⅲ)的一種酸或其活性酯與通式(Ⅳ)的一種化合物反應(yīng)，若有必要，將反應(yīng)產(chǎn)物中存在的任何二苯基(低級(jí)烷基)甲硅烷基裂解掉，
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有前面給出的含義，
其中Z代表氫、三(1-6C烷基)甲硅烷基或二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基;和如果需要，將式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽。
根據(jù)本方法實(shí)施方案(a)的式Ⅱ化合物的催化加氫可以按本身已知的方式進(jìn)行;例如在惰性有機(jī)溶劑中于貴金屬催化劑存在下用氫進(jìn)行。合適的惰性有機(jī)溶劑有例如1-6C鏈烷醇，如甲醇、乙醇等。關(guān)于催化劑，可以是例如鉑、鈀或銠催化劑，它們可以承載在合適的載體材料上。鈀/碳是優(yōu)選的催化劑，溫度和壓力不很?chē)?yán)格，但為方便起見(jiàn)，最好在室溫和大氣壓下進(jìn)行催化加氫。
根據(jù)本方法實(shí)施方案(b)的式Ⅲ酸或其活性酯與式Ⅳ化合物的反應(yīng)可以按已知方式進(jìn)行。例如，當(dāng)使用酸時(shí)，可以方便地在惰性有機(jī)溶劑(例如二甲基甲酰胺等)中使用羥基苯并三唑在縮合劑(例如1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽)存在和約0℃至室溫下進(jìn)行。當(dāng)使用式Ⅲ酸的酯時(shí)，可以方便地在惰性有機(jī)溶劑(例如四氫呋喃)中于約0℃至室溫下進(jìn)行。優(yōu)選的式Ⅳ化合物是其中的Z代表氫、叔丁基二甲基甲硅烷或叔丁基二苯基甲硅烷基的那些化合物。當(dāng)采用其中的Z代表三(1-6C烷基)甲硅烷基的式Ⅳ化合物時(shí)，此基團(tuán)在反應(yīng)和整理加工期間裂解掉，直接得到式Ⅰ化合物。另一方面，當(dāng)使用其中的Z代表二芳基(1-6C烷基)甲硅烷基的式Ⅳ化合物時(shí)，此基團(tuán)保留在反應(yīng)產(chǎn)物中，無(wú)須隨后按已知方式裂解掉，例如用氟離子。
式Ⅰ化合物可以用堿處理轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽，式Ⅰ的堿性化合物可以用酸處理轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽。這類(lèi)處理可以按常規(guī)方式進(jìn)行。
在本發(fā)明方法中作為起始使用的式Ⅱ和式Ⅲ化合物是新化合物，它們也是本發(fā)明的一個(gè)目的。它們可以用例如以下方法制備將通式Ⅴ的化合物與通式Ⅵ的化合物縮合
其中R1和R2具有前面給出的含義，R10代表一個(gè)保護(hù)基，
其中R6具有前述含義，R30、R40和R50分別具有前述的R3、R4和R5的含義，但是所存在的任何官能基均被保護(hù);
將縮合產(chǎn)物通式Ⅶ中用R10表示的保護(hù)基裂解掉，得到通式Ⅲa化合物
其中R1、R2、R6、R10、R30、R40和R50具有前述含義，
其中R1、R2、R6、R30、R40和R50具有前述含義以及，(ⅰ)當(dāng)需要式Ⅱ化合物時(shí)，可以任選地在裂解掉R30、R40和R50中存在的保護(hù)基之前或以后，用O-芐基羥胺與式Ⅲa化合物縮合，或者(ⅱ)當(dāng)需要其中在R30、R40和R50存在的官能基不被保護(hù)的式Ⅲ化合物時(shí)，將式Ⅲa化合物中存在的保護(hù)基裂解掉。
式Ⅴ中的R10可以代表任何常用的羧基保護(hù)基團(tuán);例如甲基、乙基、芐基，最好是叔丁基。
式Ⅴ化合物與式Ⅵ化合物的縮合可以根據(jù)在肽化學(xué)中本身已知的方法進(jìn)行;例如用?；u、?；B氮、酸酐、活性酰胺、混合碳酸酐或活性酯法進(jìn)行。
從式Ⅶ縮合產(chǎn)物中裂解掉保護(hù)基R10可以按照已知方式進(jìn)行;例如用水解法，或者在叔丁基保護(hù)基的情形用無(wú)水三氟乙酸處理，最好是在R30、R40和R50中存在的保護(hù)基可以伴隨地裂解掉，這取決于這些基團(tuán)的本性。
式Ⅲa化合物與O-芐基羥胺的反應(yīng)可以按常規(guī)方式進(jìn)行;例如象前面就式Ⅴ化合物與式Ⅵ化合物的縮合所述的方法。
在前面關(guān)于式Ⅱ和式Ⅲ起始物制備的說(shuō)明中提到的R30、R40和R50中保護(hù)基的裂解可以根據(jù)肽化學(xué)中的已知方法進(jìn)行;例如根據(jù)保護(hù)基團(tuán)的本性采用皂化法、用無(wú)水三氟乙酸處理或者氫解。
式Ⅲ的酸可以用已知的方式轉(zhuǎn)化成活性酯，例如在二環(huán)己基碳化二亞胺存在下與N-羥基丁二酰亞胺反應(yīng)得到N-羥基丁二酰亞胺酯，這些酯也是新化合物，構(gòu)成了本發(fā)明的另一目的。
上述的式Ⅴ和式Ⅵ化合物，在它們不是已知化合物或已知化合物的類(lèi)似物的情況下，可以按照后面實(shí)施例中所述或以類(lèi)似方法得到。
如上所述，本發(fā)明提供的異羥肟酸衍生物是間質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。采用下面介紹的步驟可以證實(shí)其對(duì)于這類(lèi)酶中的兩個(gè)酶[間質(zhì)細(xì)胞溶素(Stromelysin)和明膠酶]的對(duì)抗活性。
間質(zhì)細(xì)胞溶素(試驗(yàn)A)間質(zhì)細(xì)胞溶素原(Prostromelgsin)由人成纖維細(xì)胞培養(yǎng)介質(zhì)中用間質(zhì)細(xì)胞溶素原抗體親合色譜法純化[Ganja-Smith Z，Nagase H，Woessner J F Jr.，Biochem J.1989，258(1)，PP 115-119]。隱性酶原用胰蛋白酶(5毫克/毫升)在25℃培育2小時(shí)活化，然后用10倍過(guò)量的大豆胰蛋白酶抑制劑使胰蛋白酶失活。上述異羥肟酸衍生物的抑制劑活性用14C乙?；腷-酪蛋白底物測(cè)定。將5nm(納摩爾)的間質(zhì)細(xì)胞溶素加到底物在25nm的Tris(三羥甲基氨基甲烷)鹽酸烷沖液(4毫克/毫升)中，緩沖液的pH為7.5，含有10nm CaCl2和0.05%的Brij。將所得的溶液在37℃培育20小時(shí)。加入45%三氯乙酸使底物的酶消化終止，在10000g下離心0.25小時(shí)使未消化底成團(tuán)。抽吸清液，用液體閃爍光度計(jì)測(cè)定14C活性。IC50是在酶消化中使底物的分解減少到單用酶時(shí)的50%的異羥肟酸衍生物濃度。
間質(zhì)細(xì)胞溶素(試驗(yàn)B)隱性酶原(30微克/毫升)用胰蛋白酶(0.5微克/毫升)在25℃培育30分鐘活化，然后用20倍過(guò)量的胰蛋白酶抑制劑使胰蛋白酶失活。異羥肟衍生物和抑制活性用熒光肽底物(7-甲氧基香豆素-4-基)-乙酰-L-脯氨酰-L-亮氨酰-L-丙氨酰-L-壬基-[3-(2，4-二硝基苯基)-L-2，3-二氨基丙基]-L-精氨酰-L-精氨酸。將間質(zhì)細(xì)胞溶素加到底物(4mM)和不同濃度羥胺衍生物在50mM Tris HCl緩沖液中的溶液里，使最終濃度為35納克/毫升，緩沖液的pH為7.5，含有200mM NaCl，10mM CaCl2、0.05%Brij 35和5%甲醇。將此溶液在37℃培育16小時(shí)。用分光熒光計(jì)測(cè)定產(chǎn)物形成，采用激發(fā)波長(zhǎng)為325納米，發(fā)射波長(zhǎng)為395納米。IC50是將底物分解減小到單用酶時(shí)的50%的羥胺衍生物濃度。
明膠酶(試驗(yàn)C)羥胺衍生物對(duì)由人體中性白細(xì)胞得到的明膠酶B的體外抑制活性可以用以下試驗(yàn)步驟證實(shí)。
從人體中性白細(xì)胞中純化明膠酶B原，先用密度離心和葡聚糖沉降從人血中分離出中性白細(xì)胞。用0.05%TritonX-100和超聲結(jié)合處理，使分離出的中性白細(xì)胞破裂。然后高速離心除掉細(xì)胞碎片。用明膠瓊脂糖親合色譜從清液中將明膠酶B原純化，用10%的二甲基亞砜/緩沖液洗，從親合基質(zhì)上洗脫下結(jié)合的酶原。純化過(guò)的物質(zhì)的十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳分析顯示單獨(dú)的一個(gè)蛋白質(zhì)譜帶，分子量為95000道爾頓。將明膠原B在37℃用1mM對(duì)氨基苯基乙酸汞培育過(guò)夜。用合成的底物N-乙?；?Pro-Gln-Gly-Leu-Leu-Gly乙酯測(cè)定本發(fā)明羥胺衍生物對(duì)這種酶的抑制活性。將明膠酶加到0.25mM的底物在50mM硼酸鹽緩沖液(pH7.5)中，緩沖液中含有1mM氯化鈣和已知濃度的羥胺衍生物。所得的溶液在37℃培育16小時(shí)。加入等體積的濃度為2%(W/V)的碳酸氫鈉在50%甲醇水溶液中的溶液，溶液中含有0.05%(W/V)間三硝基苯基磺酸，從而使酶的活動(dòng)終止。將所得溶液在37℃再培育1小時(shí)，然后用1N鹽酸酸化，使反應(yīng)終止和穩(wěn)定。用分光光度計(jì)在335納米測(cè)定形成的三硝基苯基-Leu-Leu-Gly乙酯的濃度。IC50是將底物的分解減少到單用酶時(shí)的50%的羥胺衍生物的濃度。
用本發(fā)明提供的典型的異羥肟酸進(jìn)行的上述實(shí)驗(yàn)的結(jié)果列在下表中
表
＊號(hào)代表IC50值受到酶的相互消耗的限制。
化合物A[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
化合物B[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
化合物C[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
化合物D[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
化合物E[4-(N-羥氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。
化合物F[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺。
化合物G[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3-(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。
化合物H[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3-(R或S)-(3-苯基丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以作為藥物使用，例如以藥物制劑的形式使用。藥物制劑可以口服，例如以片劑、糖衣片劑、糖衣藥丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳狀液或懸浮液等形式服用。但是它們也可以通過(guò)直腸施藥，例如以栓劑的形式，或是非腸道施藥，例如以注射液的形式。
為了制造藥物制劑，可以將式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與治療上呈惰性的無(wú)機(jī)或有機(jī)形體一起配制。例如，乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽，可以作為片劑、糖衣片劑、糖衣藥丸和硬明膠膠囊的載體。軟明膠膠囊的載體有例如植物油、蠟、脂肪、半固態(tài)和液態(tài)的多元醇等。但是，在軟明膠膠囊的情形一般不需要載體，這取決于活性組分的本性。制造溶液和糖漿用的合適的載體有水、多元醇、蔗糖、轉(zhuǎn)化糖、葡萄糖等。適合制造注射液的載體有水、醇、多元醇、甘油、植物油等。天然油和硬化油、蠟、脂肪、半液態(tài)的多元醇等是制造栓劑的合適載體。
藥物制劑還可以含有防腐劑、穩(wěn)定劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、香味劑、調(diào)節(jié)滲透壓用的鹽、緩沖劑、包衣劑或抗氧化劑。
含有式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽和治療上可接受的載體的藥物以及制造這類(lèi)藥物的方法，也是本發(fā)明的目的。這一方法包括將式Ⅰ化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽與治療上惰性的載體物質(zhì)相混合，并將混合物制成蓋林制劑的施藥形式。
如上所述，式Ⅰ化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以用來(lái)控制或預(yù)防疾病，特別是控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療擴(kuò)散性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥，藥的劑量可以在很廣的范圍內(nèi)變化，當(dāng)然要調(diào)節(jié)到各個(gè)具體情形的個(gè)別需要。一般來(lái)說(shuō)，在對(duì)成年人給藥的情形，日劑量約5至30毫克，最好是約10至15毫克，應(yīng)該是合適的，但是上限可以超過(guò)，如果發(fā)現(xiàn)這樣做有利的話。此日劑量可以單獨(dú)一次服用或分幾次服用。
以下實(shí)施例說(shuō)明了本發(fā)明。產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)用NMR譜及質(zhì)譜證實(shí)。薄層色譜體系的組成如下體系A(chǔ):氯仿:甲醇:乙酸:水120:15:3:2體系B:氯仿:甲醇:乙酸:水240:24:3:2另外，所有溫度均為攝氏度。
實(shí)施例1將0.10克(0.17毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體1)在10毫升甲醇中于0.05克5%鈀/碳存在下氫化1小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物用乙醚洗，真空干燥，得到0.083克(98%)[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色吸濕性固體;Rf(體系A(chǔ))0.54;MS(M+H)+485。
元素分析C25H48H4O50.6H2O計(jì)算值C，60.60;H，10.01;N，11.31%實(shí)驗(yàn)值C，60.62;H，9.75;N，11.39%作為起始物使用的[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制備如下(A)將29.95克(0.15毫摩爾)DL-α-氨基壬酸溶解在900毫升乙酸中，溫?zé)嶂?0℃。在6小時(shí)內(nèi)逐滴加入20.7克(0.3摩爾)亞硝酸鈉，在已經(jīng)加了三分之一亞硝酸鈉后停止加熱。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)，加水，用乙醚萃取所得之油(2×200毫升)。將合并的醚萃取液用無(wú)水硫酸鈉干燥，蒸發(fā)，得到31.9克透明的褐色油狀物。將此油溶解在150毫升甲醇中，加入18克氫氧化鈉在150毫升水中的溶液，將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)走甲醇，加水，用38毫升濃鹽酸將溶液酸化。產(chǎn)物用乙醚萃取(2×150毫升)，萃取液用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)形成固體。從120毫升60-80℃的石油醚中重結(jié)晶得到20.58克(產(chǎn)率79%)2(RS)-羥基壬酸，熔點(diǎn)67-69℃。
(B)將21.4克(0.123摩爾)2(RS)-羥基壬酸溶在240毫升乙酸乙酯中。加入17.3毫升(0.123摩爾)的三乙胺和14.8毫升(0.123摩爾)芐基溴，將混合物加熱回流3小時(shí)?；旌衔锢鋮s，過(guò)濾，用2M鹽酸、水和5%碳酸氫鈉溶液洗，然后用無(wú)水硫酸鎂干燥。蒸發(fā)走溶劑，得到25.4克(78%)2(RS)-羥基壬酸芐酯，為油狀物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.68。
(C)在半小時(shí)內(nèi)于攪拌下將24.3克(92毫摩爾)2(RS)-羥基壬酸芐酯和8.9毫升(110毫摩爾)吡啶在150毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液加到溫度為0℃的18.6毫升(110毫摩爾)三氟甲磺酸酐在200毫升干燥二氯甲烷中的溶液里。將混合物在0℃再攪拌1小時(shí)。加入3.7毫升(46毫摩爾)吡啶和7.7毫升(46毫摩爾)三氟甲磺酸酐在100毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，用水洗(2×100毫升)，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到油狀物。在硅膠柱上用乙酸乙酯/己烷(1∶9)作洗脫液進(jìn)行層析，得到26.7克(73%)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧壬酸芐酯;Rf(己烷/乙酸乙酯3∶1)0.66。
(D)在0℃下將26.5克(67毫摩爾)2(RS)三氟甲烷磺酰氧壬酸芐酯在100毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液逐滴加到2.11克(70毫摩爾)80%的氫化鈉和16.75克(67毫摩爾)芐基叔丁基丙二酸酯在170毫升干燥二甲基甲酰胺中的懸浮液里。將混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)，用二氯甲烷稀釋?zhuān)来斡盟?%碳酸氫鈉溶液和飽和氯化鈉溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到含有3-叔丁氧基羰基-2(RS)-庚基丁二酸二芐酯的油(34.6克);Rf(乙酸乙酯/己烷3∶1)0.49，將此油溶在549毫升異丙醇中，在0.5克5%鈀/碳存在下氫化2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，加入甲苯，將混合物蒸發(fā)除掉痕量的異丙醇。殘余物(27.8克)在400毫升甲苯和9.1毫升(65毫摩爾)三乙胺中回流2小時(shí)，蒸發(fā)，將殘余物溶在乙酸乙酯中。溶液用0.5M鹽酸(2×80毫升)和水洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到17.55克(96%)4-叔丁基2(RS)-庚基丁二酸酯;Rf(乙酸乙酯)0.63;MS∶(M+H)+273。
(E)將1.5克(4毫摩爾)N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙酸酰胺溶解在20毫升4M的HCl/乙酸乙酯溶液中，在室溫下攪拌0.75小時(shí)，殘余物真空干燥。將殘余物置于10毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中，在0℃下依次用0.51毫升(4毫摩爾)N-乙基嗎啉、1.1克(4毫摩爾)4-叔丁基 2(RS)-庚基丁二酸酯在5毫升二氯甲烷中的溶液、0.82克(6毫摩爾)羥基苯并三唑和0.92克(4.4毫摩爾)二環(huán)己基碳化二亞胺處理。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)。加入幾滴2-二甲基氨基乙胺，將懸浮液冷至0℃3小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)。殘余物溶在乙酸乙酯內(nèi)，依次用5%檸檬酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和氯化鈉飽和溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。在硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷(2∶1)作洗脫液，得到1.5克(71%)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(二氯甲烷/甲醇19∶1)0.3;MS∶(M+H)+526。
(F)將0.8克(1.5毫摩爾)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶解在15毫升三氟乙酸中，將溶液攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)。殘余物用甲苯蒸發(fā)三次，然后溶解在10毫升無(wú)水二氯甲烷中，冷卻到0℃。加入0.37毫升(4.5毫摩爾)吡啶和0.64克(1.5毫摩爾)二(1-苯并三唑基)碳酸酯(70%)，將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)。加入0.22毫升(1.8毫摩爾)O-芐基羥胺，混合物在0℃攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)。將形成的懸浮液過(guò)濾，固體依次用二氯甲烷、5%碳酸氫鈉溶液、水、2M鹽酸和水洗，然后真空干燥。在硅膠上層析，用甲醇/二氯甲烷(1∶19)洗脫，得到0.21克(24%)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體1);Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.21;MS;(M+H)+575;高效液相色譜[ODS(十八烷基硅烷/表面多孔硅膠)反相柱，用60%乙腈/三乙胺磷酸鹽緩沖液(pH2.5)洗脫]Rt6.4分。
將二氯甲烷濾液依次用5%碳酸氫鈉溶液、2M鹽酸、5%碳酸氫鈉溶液和氯化鈉飽和溶液洗，在硫酸鎂上干燥，蒸發(fā)。在硅膠上層析，用甲醇/二氯甲烷(1∶40)洗脫，得到0.42克(49%)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為異構(gòu)體的混合物。Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.20;MS(M+H)+575;高效液相色譜(ODS反相柱，用60%乙腈/三乙胺磷酸鹽緩沖液)(pH2.5)洗脫)Rt6.4和11.3分;異構(gòu)體1/異構(gòu)體2之比為1∶3.7。
元素分析C32H54N4O5(547.81)計(jì)算值C，66.87;H，9.47;N，9.75%實(shí)驗(yàn)值C，66.51;H，9.41;N，9.68%實(shí)施例20.5克(1.12毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺在10毫升甲醇中于0.01克5%鈀/炭存在下氫化2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物真空干燥，得到0.36克(90%)[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，為白色粉末，Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.47和0.39;MS∶(M+H)+358。
元素分析C18H35N3O4(357.50)計(jì)算值C，60.48;H，9.87;N，11.75%實(shí)驗(yàn)值C，60.71;H，9.93;N，11.34%起始物制備如下(A)將1.08克芐氧基羰基-L-亮氨酸甲基酰胺在20毫升含3.7毫升1M鹽酸的甲醇中于0.05克5%鈀/炭存在下氫化2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物再用甲苯蒸發(fā)，然后真空干燥。將殘余物溶在10毫升二甲基甲酰胺中，冷卻到0℃，用0.5毫升(3.9毫摩爾)N-乙基嗎啉中和。加入1.01克(3.7毫摩爾)4-叔丁基氫2(RS)-庚基丁二酸酯在20毫升二甲基甲酰胺中的溶液，接著加入0.6克(4.4毫摩爾)羥基苯并三唑和0.84克(4.08毫摩爾)二環(huán)己基碳化二亞胺。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)，然后蒸發(fā)。殘余物溶在二氯甲烷中，過(guò)濾，濾液依次用兩份5%碳酸氫鈉溶液、水、0.5M鹽酸和水洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到油狀物。在硅膠上層析，用甲醇/二氯甲烷(3∶97)洗脫，得到0.99克(67%)[叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，為油狀物;Rf(乙酸乙酯)0.47和0.55;MS(M+H)+399。
(B)將0.96克(2.4毫摩爾)[叔丁氧基2(RS)庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺溶解在20毫升三氟乙酸中，在室溫下攪拌2小時(shí)，蒸發(fā)。將殘余物用甲苯蒸發(fā)三次，然后溶解在10毫升二甲基甲酰胺中，冷卻到0℃。加入0.61毫升(4.8毫摩爾)N-乙基嗎啉將溶液中和。加入0.39克(2.89毫摩爾)羥基苯并三唑和0.57克(2.97毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽。將溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。加入0.35克(2.8毫摩爾)O-芐基羥胺在5毫升二氯甲烷中的溶液，將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌過(guò)夜，然后蒸發(fā)。將油狀物分配在5%碳酸氫鈉溶液的二氯甲烷之間，有機(jī)層依次用水、2M鹽酸和氯化鈉飽和溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)，得到固體。在硅膠上層析，用甲醇/己烷(1∶9)洗脫，得到0.56克(52%)[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，為白色固體;Rf(乙酸乙酯)0.24和0.36;MS(M+H)+448。
實(shí)施例3按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)庚基丁二酰基]-L-亮氨酸新戊基酰胺制備[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，為泡沫狀物;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.52;MS(M+H)+414。
起始物制備如下利用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-亮氨酸新戊基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，為白色泡沫狀物Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.59;MS(M+H)+504。
實(shí)施例4按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，白色固體;MS(M+H)+443。
元素分析C22H42N4O5(442.60)計(jì)算值C，59.70;H，9.57;N，12.66%實(shí)驗(yàn)值C，59.95;H，9.59;N，12.25%起始物制備如下利用與實(shí)施例2(A-B)中所述的類(lèi)似方法，由N-芐氧基羰基-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為玻璃狀固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.25和0.41;MS(M+H)+533。
實(shí)施例5按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-鄰苯二甲酰)賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-鄰苯二甲酰)-賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.30;MS(M+H)+630。
起始物制備如下采用與實(shí)施例2(A-B)中所述的類(lèi)似方法，由Nα-芐氧基羰基-Nε-鄰苯二甲酰-L-賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-鄰苯二甲酰)-賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為泡沫狀體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.41和0.50;MS(M+H)+720。
實(shí)施例60.2克(0.33毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體1)在20毫升甲醇中在0.07克5%鈀/炭催化劑存在下氫化80分鐘。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物真空干燥，得到0.166克(98%)[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(體系B)0.35;MS(M+H)+513。
元素分析C27H52N4O5(512.74)計(jì)算值C，63.25;H，10.22;N，10.93%實(shí)驗(yàn)值C，62.83;H，10.14;N，10.74%起始物制備如下(A)將6.25毫升(25毫摩爾)丙二酸二芐酯在氮?dú)庀氯茉?5毫升干燥的二甲基甲酰胺中，在10分鐘內(nèi)加入0.75克80%氫化鈉。將混合物攪拌0.5小時(shí)，冷卻到0℃，加入4.75毫升(25毫摩爾)1-溴壬烷在10毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液。在0℃下繼續(xù)攪拌1小時(shí)，混合物在室溫下放置64小時(shí)。將溶液蒸發(fā)，殘余物溶在乙醚中。有機(jī)相用水和氯化鈉飽和溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。在硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷(1∶5)洗脫，得到5.85克(56%)油狀的壬基丙二酸二芐酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶3)0.58。
(B)按照(A)中所述的方法，用0.43克(14毫摩爾)80%氫化鈉和2.33毫升(14毫摩爾)溴乙酸叔丁酯處理5.85克(14毫摩爾)壬基丙二酸二芐酯，在硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷(1∶19)洗脫。得到6.24克(83%)芐基4-叔丁基氫(2-壬基-2-芐氧基羰基)丁二酸酯，為油狀物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶19)0.74。
(C)將(B)中的芐基4-叔丁基氨(2-壬基-2-芐氧基羰基)-丁二酸酯溶在80毫升異丙醇中，在0.2克5%鈀-炭存在下氫化1小時(shí)，將懸浮液過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，加入100毫升甲苯，混合物回流3小時(shí)。蒸發(fā)后得到3.5克(97%)油狀4-叔丁基氫2(RS)-壬基丁酸酯;Rf(體系A(chǔ))0.73。
(D)將1.5克(4.0毫摩爾)叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶在20毫升4M的鹽酸/乙酸乙酯溶液中，在室溫下攪拌0.5小時(shí)，蒸發(fā)，用乙醚洗，真空干燥。將固體溶在10毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中，用0.6毫升(4.7毫摩爾)的N-乙基嗎啉、1.2克(4.0毫摩爾)4-叔丁基氫2(RS)-壬基丁二酸酯、0.66克(4.9毫摩爾)羥基苯并三唑和0.78克(4.0毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽處理。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下放置16小時(shí)并蒸發(fā)之。殘余物溶在乙酸乙酯中，依次用5%碳酸氫鈉溶液、水、5%檸檬酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和氯化鈉飽和溶液洗，然后蒸發(fā)，得到固體。在硅膠上層析，用乙酸乙酯洗脫，得到1.9克(86%)白色固體狀[4-叔丁氧基2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.60;MS(M+H)+554。
(E)將0.95克(1.7毫摩爾)[4-叔丁氧基2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺溶在15毫升三氟乙酸中，在室溫下攪拌溶液2小時(shí)，蒸發(fā)之。殘余物用甲苯蒸發(fā)，溶在二氯甲烷中，用水洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。將殘余物在-15℃下溶在10毫升二甲基甲酰胺中，用0.22毫升(1.7毫摩爾)N-乙基嗎啉和0.22毫升(1.7毫摩爾)氯甲酸異丁酯處理。10分鐘后在-15℃下加入0.42毫升(3.4毫摩爾)O-芐基羥胺，混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，在室溫放置過(guò)夜，用水將混合物稀釋?zhuān)瑸V出分離出的固體，依次用5%檸檬酸溶液、水和5%碳酸氫鈉溶液洗，然后真空干燥。殘余物在硅膠上層析，用甲醇/二氯甲烷(3∶97)洗脫，得到0.55克(54%)白色固體狀[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.47;MS(M+H)+603;高效液相色譜(ODS反相柱，用70%乙腈/三甲銨磷酸鹽緩沖液(pH2.5)洗脫)Rt4.7和7.7分。
異構(gòu)體分離如下將1.0克(1.66毫摩爾)混合物溶解在10毫升熱的二氯甲烷中，溶液在室溫下放置2小時(shí)，在4℃下16小時(shí)。濾出固體，用二氯甲烷洗，真空干燥，得到0.41克(41%)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體1)固體;Rf(體系B)0.46高效液相色譜Rt4.6分。
將母液蒸發(fā)，得到0.47克(47%)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體2)固體;Rf(體系B)0.52;高效液相色譜Rt7.5分。
實(shí)施例7按照與實(shí)施例6第一段中所述的類(lèi)似方法，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，為白色泡沫狀物;Rf(體系A(chǔ))0.58和0.64;MS(M+H)+386。
元素分析C20H39N3O40.4CH3OH計(jì)算值C，61.51;H，10.27;N，10.55%實(shí)驗(yàn)值C，61.50;H，10.13;N，10.27%起始物制備如下按照與實(shí)施例6(D-E)中所述的類(lèi)似方式，但是用L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺代替去保護(hù)的叔丁氧基羰基-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺作為起始物，得到泡沫狀的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.27和0.34;MS(EI)M+475。
實(shí)施例8按照與實(shí)施例6第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得泡沫狀的[4-(N-羥氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(體系A(chǔ))0.62和0.66;MS(M+H)+541。
起始物制備如下按照與實(shí)施例6(A-E)中所述的類(lèi)似方式，但是使用1-溴代十一烷代替1-溴代壬烷，得到凝膠狀的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.70;MS(M+H)+631。
實(shí)施例90.3克(0.536毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)在50毫升甲醇中在0.1克5%鈀/炭存在下氫化1.5小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物與乙醚一起研制，得到0.23克[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)，為白色固體;MS499(M+H)+。
元素分析C26H50N4O50.4H2O計(jì)算值C，61.72;H，10.12;N，11.08%實(shí)驗(yàn)值C，61.92;H，10.05;N，10.85%起始物制備如下(A)將2.0克(0.11摩爾)L-乳酸芐基酯和10.8毫升(0.13摩爾)吡啶在220毫升二氯甲烷中的溶液在0.5小時(shí)內(nèi)于0℃下加到三氟甲烷磺酸酐在250毫升二氯甲烷中的溶液里。又過(guò)0.5小時(shí)之后，用水洗溶液兩次，每次250毫升，用250毫升氯化鈉飽和溶液洗，然后在無(wú)水硫酸鎂上干燥。接著在0℃下于0.5小時(shí)內(nèi)將溶液加到鈉代丙二酸二叔丁酯(0.11摩爾，由22.8克丙二酸二叔丁酯和3.48克80%氫化鈉/油制備)在250毫升二甲基甲酰胺中的溶液里。將混合物溫?zé)嶂潦覝胤胖玫剡^(guò)夜，蒸發(fā)掉溶劑。殘余物分配在200毫升乙酸乙酯和200毫升5%碳酸氫鈉溶液之間。用水洗有機(jī)層(2×200毫升)，用無(wú)水硫酸鎂干燥，蒸發(fā)后得到黃色油。在硅膠上用閃色譜分離，用10%乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，得到35.4克(88%)無(wú)色油狀的1-芐基4-叔丁基3(RS)-叔丁氧基羰基-2(S)-甲基丁二酸酯;Rf(30%的乙酸乙酯/己烷溶液)0.63。
(B)將952毫克80%氫化鈉在攪拌下加到10克1-芐基-4-叔丁基3(RS)-叔丁氧基羰基-2(S)-甲基丁二酸酯在100毫升干燥二甲基甲酰胺中的溶液里。將溶液在室溫下攪拌2小時(shí)，然后加入6.23毫升1-溴庚烷。將混合物加熱到60℃4小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。將溶劑蒸發(fā)，殘余物溶在乙酸乙酯中。溶液依次用5%碳酸氫鈉溶液、水和氯化鈉飽和溶液洗，然后在無(wú)水硫酸鎂上干燥。將溶劑蒸發(fā)，殘余物用閃色譜法純化，用5%的乙酸乙酯己烷溶液洗脫，得到6.83克無(wú)色油狀的3，3(RS)-二叔丁氧基羰基-2(S)-甲基癸酸芐酯;Rf(10%乙酸乙酯/己烷)0.5。
(C)將6.8克3，3(RS)-二叔丁氧基羰基-2(S)-甲基癸酸芐酯在20毫升三氟乙酸中于室溫下攪拌1小時(shí)，將溶劑蒸發(fā)，殘余物自甲苯(2×25毫升)中再蒸發(fā)，留下橙色的油狀物。將油重新溶解在100毫升甲苯中，用3.64毫升N-乙基嗎啉處理，回流加熱1小時(shí)。溶液依次用2M鹽酸、水和氯化鈉溶液洗，用無(wú)水硫酸鎂干燥，蒸發(fā)后留下褐色油狀物。用閃色譜法純化，使用2%的甲醇/二氯甲烷溶液洗脫，得到3.02克黃色油狀1-芐基-3(RS)-羧基-2(S)-甲基癸酸酯;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.47，0.52;MS321(M+H)+。
(D)按照與實(shí)施例1(D)-(F)名所述的類(lèi)似方式，由1.5克3(RS)-羧基-2(S)-甲基癸酸芐酯得到0.315克灰白色固體[4-(N-芐氧基氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)。
實(shí)施例100.25克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)在100毫升二甲基甲酰胺中于100毫克10%鈀。炭存在下氫化24小時(shí)。將催化劑濾掉，蒸發(fā)溶劑。殘余物與乙醚一直研制，得到0.17克灰色粉末狀[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.5;MS644(M+H)+。
元素分析C34H53N5O70.8H2O計(jì)算值C，62.04;H，8.36;N，10.64
實(shí)驗(yàn)值C，61.99;H，8.04;N，10.60起始物制備如下(A)按照與實(shí)施例1(A)-(D)中所述的類(lèi)似方法，由20克D-α-氨基壬酸得到10.28克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二芐酯，為淺黃色油狀物;Rf(10%乙酸乙酯/己烷)0.32。
(B)8.2克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二芐酯在100毫升干燥的二甲基甲酰胺中用0.49克80%氫化鈉分散體處理。2小時(shí)后將混合物冷卻到0℃，分批加入4.18克N-溴甲基鄰苯二甲酰亞胺。將混合物在0℃下再攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。蒸走溶劑，將殘余物分配在乙酸乙酯和5%碳酸氫鈉溶液之中。有機(jī)相用水和氯化鈉飽和溶液洗，然后用無(wú)水硫酸鎂干燥。蒸走溶劑，殘余物用閃色譜法在硅膠上純化，用20%乙酸乙酯/己烷洗脫，得到6.42克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酸二芐酯。
(C)3.5克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰二芐酯在50毫升乙醇中于0.35克5%鈀/炭存在下氫化。將催化劑濾掉，溶劑蒸發(fā)。殘余物溶在50毫升甲苯中，用0.58毫升N-乙基嗎啉處理并加熱回流2小時(shí)。將溶液依次用2M鹽酸、水和氯化鈉飽和溶液洗，然后用無(wú)水硫酸鎂干燥。殘余物在硅膠上用閃色譜法純化，用4%甲醇/二氯甲烷溶液洗脫，得到1.54克油狀的4-叔丁基氫2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酸酯;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.3。
(D)按著與實(shí)施例1(E)-(F)中所述的類(lèi)似方式，由0.6克4-叔丁基2(R)-庚基-3(RS)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酸酯得到0.27克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)，為白色固體;MS734(M+H)+。
元素分析C41H59N5O70.6H2O計(jì)算值C，66.12;H，8.15;N，9.4實(shí)驗(yàn)值C，66.08;H，8.08;N，9.53。
實(shí)施例11按照與實(shí)施例2中第一段所述的類(lèi)似方式，從[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.28和0.43;MS(M+H)+519。
元素分析C28H46N4O50.3H2O計(jì)算值C，64.17;H，8.96;N，10.69%實(shí)驗(yàn)值C，64.07;H，8.77;N，10.64%起始物制備如下采用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.64;MS(M+H)+609。
實(shí)施例12按照與實(shí)施例2第一段是所述的類(lèi)似的方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰基-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;MS(M+H)+527。
元素分析C28H54N4O5(526.76)計(jì)算值C，63.84;H，10.33;N，10.64%實(shí)驗(yàn)值C，63.64;H，10.39;N，10.63%起始物制備如下采用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-壬氨?；?L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.55和0.62;MS(M+H)+617。
實(shí)施例13按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，為吸濕性泡沫狀物;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.31;MS(M+H)+434。
起始物制備如下采用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，為白色固體;Rf(乙酸乙酯)0.75;MS(M+H)+524。
實(shí)施例14按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基甲酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.16和0.21;MS(M+H)+392。
起始物制備如下采用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸甲基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.29和0.36。
元素分析C28H39N3O4(481.64)計(jì)算值C，69.83;H，8.16;N，8.72%實(shí)驗(yàn)值C，69.56;H，8.05;N，9.00%實(shí)施例15按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方法，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，為泡沫狀物;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)0.23和0.29;MS(M+H)+358。
元素分析C18H35N3O4·0.3CH3OH
計(jì)算值C，59.87;H，9.94;N，11.45%實(shí)驗(yàn)值C，59.80;H，9.76;N，11.44%起始物制備如下按照與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，但是用L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺代替去保護(hù)的芐氧基羰基-L-亮氨酸甲基酰胺作起始物，制得白色泡沫狀的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.29和0.36;MS(M+H)+448。
實(shí)施例16按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，為白色固體;MS(M+H)+372。
元素分析C13H37N3O4(371.52)計(jì)算值C，61.43;H，10.04;N，11.31%實(shí)驗(yàn)值C，61.04;H，9.93;N，11.13%起始物制備如下采用與實(shí)施例1(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺得到[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，為白色泡沫狀物;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.47和0.55;MS(M+H)+462。
元素分析C26H43N3O4(461.65)計(jì)算值C，67.65;H，9.39;N，9.10%
實(shí)驗(yàn)值C，67.57;H，9.12;N，9.02%實(shí)施例17按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，為白色吸濕性粒狀粉末;MS(M+H)+533。
元素分析C29H48N4O5·0.4H2O計(jì)算值C，64.51;H，9.11;N，10.38%實(shí)驗(yàn)值C，64.59;H，8.94;N，10.14%起始物制備如下采用與實(shí)施例2(A-B)中所述的類(lèi)似方法，由N-芐氧基羰基-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺制得[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮苯丙氨酸-L-亮氨酸乙基酰胺固體;Rf(甲醇/氯仿1∶19)0.55;MS(M+H)+623。
元素分析C36H54N4O5(622.85)計(jì)算值C，69.42;H，8.74;N，9.00%實(shí)驗(yàn)值C，69.02;H，8.85;N，8.87%實(shí)施例18按照與實(shí)施例2第一段中所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-羥氨基)-2(RS)庚基丁二酰]-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺，為白色固體;MS(M+H)+398。
元素分析C21H39N3O4(397.56)計(jì)算值C，63.45;H，9.89;N，10.57%實(shí)驗(yàn)值C，63.24;H，10.04;N，10.33%起始物制備如下采用與實(shí)施例1-(E-F)中所述的類(lèi)似方法，由N-叔丁氧基羰基-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺制得[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺，為白色固體;Rf(甲醇/二氯甲烷1∶9)0.30和0.37;MS(M+H)+488。
實(shí)施例19將0.6克(1.14毫摩爾)[4-叔丁氧基2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺[在實(shí)施例1(E)中制得]溶在10毫升三氟乙酸中，將溶液攪拌3小時(shí)，蒸發(fā)之。殘余物自甲苯中蒸發(fā)四次，然后溶在含有5毫升甲醇的200毫升二氯甲烷中，用水洗兩次，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)之。將殘余物在0℃下溶在1毫升二甲基甲酰胺和10毫升1，2-二甲氧基乙烷中。加入0.135克(1.17毫摩爾)N-羥基丁二酰亞胺和0.243克(1.17毫摩爾)二環(huán)己基碳化二亞胺，混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，4℃下攪拌16小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)，得到粘性固體狀的N-羥基丁二酰亞胺酯粗品。將此酯懸浮在5毫升四氫呋喃中，用0.178克(2.56毫摩爾)羥胺鹽酸鹽和0.094克(2.35毫摩爾)氫氧化鈉在5毫升水中的溶液處理，在室溫下攪拌16小時(shí)，過(guò)濾，蒸發(fā)。用水洗形成的膠狀物，傾析，用甲苯蒸發(fā)干燥。在硅膠上層析，先用1%的甲醇/二氯甲烷。然后用2%、3%和5%的甲醇/二氯甲烷洗脫，蒸發(fā)后得到[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺的異構(gòu)體1和2，為白色固體。Rf(甲醇/二氯甲烷1∶12.5)0.34(異構(gòu)體2)和Rf0.26(異構(gòu)體1)。
將異構(gòu)體1用二氯甲烷和乙酸乙酯洗，然后干燥，得到0.083克(15%)[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(異構(gòu)體1)，與實(shí)施例1中制得的相同。Rf(體系A(chǔ))0.54。MS(M+H)+485。
元素分析C25H48N4O5·0.2H2O計(jì)算值C，61.50;H，9.99;N，11.47%實(shí)驗(yàn)值C，61.41;H，10.09;N，11.48%實(shí)施例200.30克(0.2毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺在200毫升甲醇中于0.1克10%鈀/炭存在下氫化3小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，得到0.20(81%)白色固體狀[4-(N-羥氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺;MS(M+H)+406。
元素分析C22H35N3O4(405.54)計(jì)算值C，65.16;H，8.70;N，10.36%實(shí)驗(yàn)值C，65.04;H，8.75;N，10.20%作為起始物使用的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺制備如下(A)在0.5小時(shí)內(nèi)將13.03(60毫摩爾)乙酰氨基丙二酸二乙酯在50毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中的溶液在氮?dú)夥蘸?℃下加到2.16克(72毫摩爾)80%氫化鈉在50毫升干燥的二甲基甲酰胺中的懸浮液里。將混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。加入15.05克(78毫摩爾)1-溴-6-甲基庚烷在50毫升干燥的二甲基甲酰胺中的溶液，將混合物攪拌64小時(shí)，蒸發(fā)形成油狀物。用乙酸乙酯萃取該油兩次，合并的萃取物用水洗，在硫酸鎂上干燥，蒸發(fā)。殘余物在6M鹽酸(180毫升)中回流4小時(shí)，冷卻，濾出蠟狀固體。將粗產(chǎn)品在120毫升50%乙醇水溶液中過(guò)濾，加入7毫升吡啶，混合物在水中冷卻，得到6.49克(57%)DL-異辛基甘氨酸，為灰白色細(xì)粉。
(B)將6.45克(34.5毫摩爾)DL-異辛基甘氨酸在室溫下懸浮于200毫升乙酸中。在3小時(shí)內(nèi)逐滴加入4.8克(69毫摩爾)亞硝酸鈉。將透明的溶液在室溫下攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)，加水和乙醚，混合物過(guò)濾。將醚溶液用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)得到油。將回收和干燥了的起始物(1.76克)按照上述步驟再循環(huán)，得到可溶于醚的油。將合并的產(chǎn)物(7.43克)溶在16毫升甲醇中。加入3.9克氫氧化鈉在33毫升水中的溶液，將混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。將甲醇蒸發(fā)，加水，溶液用乙醚萃取，并且用濃鹽酸酸化。將產(chǎn)物用乙醚萃取，在蒸發(fā)之后得到5.88克(91%)2(RS)-羥基異辛酸，為透明的油狀物，在放置時(shí)固化。
(C)將5.84克(31.3毫摩爾)2(RS)-羥基異辛酸溶在60毫升乙酸乙酯中。加入4.4毫升(31.3毫摩爾)三乙胺和3.8毫升(31.3毫摩爾)芐基溴，混合物回流加熱3小時(shí)。將混合物冷卻，過(guò)濾，依次用2M鹽酸、水和5%碳酸氫鈉溶液洗，用硫酸鎂干燥并蒸發(fā)之。在硅膠上層析，用乙酸乙酯/己烷(3∶7)洗脫，得到5.55克(64%)2(RS)-羥基異辛酸芐酯，為油狀物，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.50。
(D)在0℃下將5.45克(19.6毫摩爾)2(RS)-羥基異辛酸芐酯和1.91毫升(23.5毫摩爾)吡啶在35毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液于攪拌下在0.5小時(shí)內(nèi)加到4毫升(23.5毫摩爾)三氟甲磺酸酐在40毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液里。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌1小時(shí)。溶液用水洗兩次，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)后得到7.32克(95%)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧異辛酸芐酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶4)0.73。
(E)將7.31克(18.55毫摩爾)2(RS)-三氟甲烷磺酰氧異辛酸芐酯在30毫升無(wú)水二氯甲烷中的溶液在0℃下于1小時(shí)內(nèi)逐滴加到0.58克(19.5毫摩爾)80%氫化鈉和4.64克(18.55毫摩爾)芐基叔丁基丙二酸酯在50毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中的懸浮液里。將混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，室溫下放置16小時(shí)，蒸發(fā)成油狀物。將殘余物在二氯甲烷中用水和氯化鈉飽和溶液洗二次，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。經(jīng)硅膠層析，用乙酸乙酯/己烷(1∶4)洗脫，得到6.08克(64%)淺琥珀色油狀3(RS)-叔丁氧羰基-2(RS)-異辛基丁二酸二芐酯;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶3)0.49。
(F)將(E)中的6.02克(11.8毫摩爾)三酯在90毫升異丙醇中于0.2克10%鈀/炭存在下氫化16小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，加入甲苯，將混合物蒸發(fā)除掉痕量的異丙醇。殘余物在75毫升甲苯和1.65毫升(11.8毫摩爾)三乙胺中回流2小時(shí)，蒸發(fā)，殘余物溶在乙酸乙酯中，溶液用0.5M鹽酸和水洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)后得到3.23克(96%)油狀4-叔丁基氫2(RS)-異辛基丁二酸酯。
(G)將1.25克(4.5毫摩爾)N-叔丁氧基羰基-L-苯丙氨酸甲基酰胺溶解在15毫升4MHCl/乙酸乙酯中，在室溫下攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)并且真空干燥。將殘余物在10毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中冷卻到0℃，用0.6毫升(4.7毫摩爾)N-乙基嗎啉、0.86克(3毫摩爾)4-叔丁基氫2(RS)-異辛基丁二酸酯在15毫升二氯甲烷中的溶液、0.49克(3.6毫摩爾)羥基苯并三唑和0.72克(3.75毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽處理。將混合物在0℃攪拌1小時(shí)，在4℃放置16小時(shí)，蒸發(fā)之。殘余物在二氯甲烷中依次用5%檸檬酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和氯化鈉飽和溶液洗，用硫酸鎂干燥。經(jīng)硅膠層析，用乙酸乙酯洗脫，得到1.17克(87%)[4-叔丁氧基2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺油狀物它在放置時(shí)固化，Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.34和0.44。
(H)1.02克(2.28毫摩爾)[4-叔丁氧基2(RS)-異辛基丁二酰)-L-苯丙氨酸甲基酰胺溶在10毫升三氟乙酸中，將溶液攪拌1.5小時(shí)，蒸發(fā)。殘余物用甲苯蒸發(fā)三次，溶在氯仿中，用水洗二次，干燥，蒸發(fā)后得到固體。將此固體溶在15毫升二甲基甲酰胺中，冷卻至0℃，用0.6毫升(4.6毫摩爾)N-乙基嗎啉、0.37克(2.7毫摩爾)羥基苯并三唑、0.54克(2.8毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽和0.42克(3.4毫摩爾)O-芐基羥胺處理。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)，蒸發(fā)，加水。分離出的固體依次用5%碳酸氫鈉溶液、水、5%檸檬酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和水洗，然后真空干燥。將所得的固體溶在甲醇/氯仿(1∶1)中，在加入乙醚之后，得到0.71克(63%)白色固體的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺;MS(M+H)+496。
元素分析C29H41N3O4·0.2CH3OH計(jì)算值C，69.85;H，8.39;N，8.37%實(shí)驗(yàn)值C，69.81;H，8.34;N，8.40%實(shí)施例211.0克(2.17毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺在50毫升甲醇中于0.33克5%鈀/炭存在下氫1.5小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)。得到0.8克(99%)[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，為白色固體;MS(M+H)+372。
元素分析C19H37N3O4·(371.52)計(jì)算值C，61.43;H，10.04;N，11.31%實(shí)驗(yàn)值C，61.21;H，10.17;N，11.35%作為起始物使用的[4-(N-芐氧基氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺制備如下(A)將5.6克(22.8毫摩爾)叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸在0℃下溶解在50毫升二氯甲烷中。加入1.85毫升(22.8毫摩爾)吡啶和9.67克(22.8毫摩爾)70%二(1-苯并三唑基)碳酸酯，將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)。加入3.94毫升(45.6毫摩爾)40%甲胺水溶液，混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)。溶液依次用5%碳酸氫鈉溶液、水、2M鹽酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。自乙酸乙酯中重結(jié)晶，得到5.26克(89%)白色固體狀叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.47。
(B)將4.84克(18.8毫摩爾)叔丁氧基羰基-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺與50毫升4M的HCl/乙酸乙酯溶液一起在室溫下攪拌1小時(shí)并蒸發(fā)之。加入乙酸乙酯，將溶液蒸發(fā)，殘余物真空干燥。將得到的胺的鹽酸鹽溶解在0℃的15毫升干燥二甲基甲酰胺中，加入3.58毫升(28.2毫摩爾)N-乙基嗎啉中和，再將此溶液加到4.25克(15.6毫摩爾)4-叔丁基氫2R-庚基丁二酸酯(按照與實(shí)施例1(A-D)的類(lèi)似方式由D-α-氨基壬酸制得)、2.87克(18.8毫摩爾)羥基苯并三唑水合物和3.74克(19.5毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽在50毫升無(wú)水二氯甲烷中的冰冷的(0℃)溶液中。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下16小時(shí)，然后蒸發(fā)成油狀物。殘余物在乙酸乙酯中用5%檸檬酸溶液、水、5%碳酸氫鈉溶液和飽和的氯化鈉溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)成油狀物。經(jīng)硅膠層析，用乙酸乙酯/己烷(1∶1)作洗脫液，得到5.13克(80%)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，為油狀物;Rf(乙酸乙酯/己烷1∶1)0.49;MS(M+H)+413。
(C)5.1克(12.4毫摩爾)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基甲酰胺溶在50毫升三氟乙酸中，將溶液攪拌2.5小時(shí)，然后蒸發(fā)。殘余物用甲苯蒸發(fā)兩次，溶解在二氯甲烷中。將溶液用水洗三次，用飽和的氯化鈉溶液洗，在硫酸鎂上干燥并蒸發(fā)之。殘余物在25毫升干燥的二氯甲烷中于0℃下用3.2毫升(25毫摩爾)N-乙基嗎啉、2.28克(14.9毫摩爾)羥基苯并三唑水合物和3.0克(15.6毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽處理，溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。加入3.05克(24.8毫摩爾)O-芐基羥胺，混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)，然后蒸發(fā)。加水，所得的固體依次用2M鹽酸、水、5%碳酸氫鈉溶液、水和己烷洗，真空干燥。將所得的固體與乙醚一起加熱，在加入己烷并且冷卻之后，得到5.2克(91%)吸濕性凝膠狀的[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，將其在真空下干燥;MS(M+H)+462。
元素分析C26H43N3O4·0.6H2O計(jì)算值C，66.10;H，9.43;N，8.89%實(shí)驗(yàn)值C，66.13;H，9.39;N，8.74%實(shí)施例220.09克(0.177毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯基氨酸甲基酰胺(異構(gòu)體1)在10毫升甲醇中于30毫克5%鈀/炭存在下氫化1.5小時(shí)，將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物真空干燥，得到0.075克(100%)[4-(N-羥氨基-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯基丙氨酸甲基酰胺，為白色泡沫狀物;MS(M+H)+420。
元素分析C23H37N3O4·0.4H2O計(jì)算值C，64.73;H，8.93;N，9.85%實(shí)驗(yàn)值C，64.81;H，8.77;N，10.14%作為起始物使用的[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺(異構(gòu)體1)制備如下(A)將2.3克(11.9毫摩爾)DL-β，β-二甲基苯丙氨酸在0℃和攪拌下溶在含有0.48克(12毫摩爾)氫氧化鈉的9毫升水中。在0.3小時(shí)內(nèi)逐滴加入6.0毫升4M氫氧化鈉溶液和3.4毫升(23.8毫摩爾)氯甲酸芐酯。將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下16小時(shí)。用乙醚萃取溶液，用濃鹽酸酸化至pH2，將產(chǎn)物萃取到乙酸乙酯中。用氯化鈉飽和溶液洗此有機(jī)溶液，在硫酸鎂上干燥，蒸發(fā)，得到3.86克(99%)油狀的N-芐氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸;Rf(體系A(chǔ))0.54;MS(M+H)+328。
(B)按照實(shí)施例21(A)中所述的步驟，將3.8克(11.6毫摩爾)N-芐氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸轉(zhuǎn)化成2.45克(62%)N-芐氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.61;MS(M+H)+341。
(C)將2.4克(7.06毫摩爾)N-芐氧基羰基-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺懸浮在30毫升甲醇和3.5毫升2M鹽酸中，在0.24克5%鈀/炭存在下氫化2小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物用甲苯蒸發(fā)三次，然后真空干燥，得到1.75克DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺鹽酸鹽，其中含有痕量的甲苯;Rf(體系A(chǔ))0.31;MS(M+H)+207。
(D)0.485克(2毫摩爾)DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺鹽酸鹽溶在2毫升無(wú)水二甲基甲酰胺中，將溶液冷卻到0℃。加入0.35毫升(2.8毫摩爾)N-乙基嗎啉、0.544克(2毫摩爾)4-叔丁基氫2(R)-庚基丁二酸酯和0.46克(2.4毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)-碳化二亞胺鹽酸鹽，將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，4℃下攪拌64小時(shí)。向懸浮液中加水，濾出白色固體，依次用2M鹽酸、水、5%碳酸氫鈉溶液和水洗，真空干燥，得到0.72克(78%)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺;Rf(乙酸乙酯)0.56和0.61;MS(M+H)+461。
(E)將0.71克(1.54毫摩爾)[4-叔丁氧基2(R)-庚基丁二酰]-DL-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺溶在7毫升三氟乙酸中，攪拌溶液2.5小時(shí)，蒸發(fā)。將殘余物用甲苯蒸發(fā)兩次，溶在30毫升二氯甲烷中。溶液用水洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。殘余物在5毫升二甲基甲酰胺中于0℃下用0.31克(2.02毫摩爾)羥基苯并三唑水合物和0.37克(1.93毫摩爾)1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亞胺處理，溶液在0℃下攪拌1小時(shí)。加入0.38克(3.08毫摩爾)O-芐基羥胺，將混合物在0℃下攪拌1小時(shí)，室溫下攪拌16小時(shí)，然后蒸發(fā)。殘余物在乙酸乙酯中依次用5%碳酸氫鈉溶液、水、2M鹽酸、水、5%碳酸氫鈉溶液和氯化鈉飽和溶液洗，用硫酸鎂干燥，蒸發(fā)。在硅膠上層析，依次用乙酸乙酯/己烷(2∶1)、乙酸乙酯/己烷(3∶1)和乙酸乙酯洗脫，得到[4-(N-芐氧基氨基)2(R)-庚基丁二酰](D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺的兩種異構(gòu)體。異構(gòu)體1(0.18克;23%)Rf(乙酸乙酯/己烷2∶1)0.32;MS(M+H)+510;異構(gòu)體(0.27克;34%)Rf(乙酸乙酯/己烷2∶1)0.22;MS(M+H)+510。
實(shí)施例230.09克(0.18毫摩爾)[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-蘇-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺(異構(gòu)體1)在10毫升甲醇中于0.03克5%鈀/炭存在下氫化4小時(shí)。將混合物過(guò)濾，濾液蒸發(fā)，殘余物真空干燥，得到0.07克(98%)白色吸濕性泡沫狀的[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-蘇-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺。MS(M+H)+406。
元素分析C22H35N3O4·0.15H2O計(jì)算值C，64.73;H，8.72;N，10.29%實(shí)驗(yàn)值C，64.69;H，8.93;N，10.09%作為起始物使用的[4-(N-芐氧基氨基)2(R)-庚基丁二酰](D或L)-蘇-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺(異構(gòu)體1)是根據(jù)實(shí)施例22(A)-(E)中所述的步驟由N-芐氧基羰基-DL-蘇-β-甲基苯丙氨酸制備的。異構(gòu)體用硅膠色譜分離，依次用1%甲醇/二氯甲烷、2%甲醇/二氯甲烷和3%甲醇/二氯甲烷洗脫。異構(gòu)體1的Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)為0.51，MS(M+H)+496;異構(gòu)體2的Rf(甲醇/二氯甲烷1∶19)為0.41;MS(M+H)+496。
實(shí)施例24按照與實(shí)施例22中第一段所述的類(lèi)似方式，由[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺制備[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，為白色吸濕性泡沫狀物;Rf(體系B)0.22和0.29;MS(M+H)+406。
元素分析C22H35N3O4·0.3H2O計(jì)算值C，64.30;H，8.73;N，10.23%實(shí)驗(yàn)值C，64.29;H，8.64;N，10.09%起始物制備如下按照與實(shí)施例22(B-E)中所述的類(lèi)似方式，但是用N-芐氧基羰基-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸作起始物，得到白色固體狀的[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺。Rf(甲醇/二氯甲烷7∶93)0.40和0.45;MS(M+H)+496。
實(shí)施例25將按照與實(shí)施例10(A)-(D)中所述的類(lèi)似方式，制得的0.12克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(鄰苯二甲酰亞胺基甲基)丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)在10毫升甲醇中于50毫克10%鈀/炭存在下氫化16小時(shí)。濾掉催化劑，濾液蒸發(fā)后得到膠狀固體。在硅膠上純化，用5%甲醇/二氯甲烷洗脫，得到0.06克白色固體的[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(鄰苯二甲酰亞氨基甲基)-丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.34;MS(M+H)+517。
實(shí)施例260.17克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)在10毫升甲醇中于55毫克鈀/炭催化劑存在下氫化3小時(shí)。濾掉催化劑，濾液蒸發(fā)后得到0.13克白色固體的[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-2(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.36;MS(M+H)+603。
元素分析C34H58N4O5(602.83)計(jì)算值C，67.74;H，9.70;N，9.30%實(shí)驗(yàn)值C，68.00;H，9.93;N，9.20%起始物制備如下按照與實(shí)施例10(B)-(D)中所述的類(lèi)似方式，由2.0克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二芐酯和0.84克肉桂酰溴得到0.17克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰]-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)，為灰白色固體;Rf(5%甲醇/二氯甲烷)0.47;MS(M+H)+693。
實(shí)施例270.25克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)在25毫升甲醇中于100毫克5%鈀/炭存在下氫化6小時(shí)。濾掉催化劑，濾液蒸發(fā)后得到0.16克[4-(N-羥基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1)，為白色固體;Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.25;MS(M+H)+611。
元素分析C30H54N6O7·0.6H2O計(jì)算值C，57.91;H，8.95;N，13.51%實(shí)驗(yàn)值C，58.17;H，8.99;N，13.23%起始物制備如下按照與實(shí)施例10(B)-(D)中所述的類(lèi)似方式，由2.0克3(RS)-叔丁氧基羰基-2(R)-庚基丁二酸二芐酯和0.88克3-溴甲基-1-甲基乙內(nèi)酰脲得到0.28克[4-(N-芐氧基氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺(非對(duì)映異構(gòu)體1);Rf(10%甲醇/二氯甲烷)0.7;MS(M+H)+701。
以下實(shí)施例說(shuō)明了含有本發(fā)明提供的異羥肟衍生物的藥物制劑
實(shí)施例A含有以下組分的片劑可以按常規(guī)方式制備組分每片異羥肟酸衍生物10.0毫克乳糖125.0毫克玉米淀粉75.0毫克滑石粉4.0毫克硬脂酸鎂1.0毫克總重215.0毫克實(shí)施例B含有以下組分的膠囊可以按常規(guī)方式制備組分每個(gè)膠囊異羥肟酸衍生物10.0毫克乳糖165.0毫克玉米淀粉20.0毫克滑石粉5.0毫克膠囊填充重量200.0毫克
權(quán)利要求
1.通式Ⅰ的化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽
其中，R1代表1-7C烷基；R2代表氫、1-6C烷基或化學(xué)式為-(CH2)n-芳基或-(CH2)n-Het的基團(tuán)，其中n代表1-4，Het表示一個(gè)5元或6元N-雜環(huán)，它(a)通過(guò)N原子相連，(b)任選地含有N、O和/或S作為額外的雜原子，它們處在不與連接N原子相鄰的位置上，(c)在與連接N原子相鄰的一個(gè)或兩個(gè)C原子上被氧取代，和(d)任選地苯并稠合，或者任選地在一個(gè)或多個(gè)其它碳原子上被1-6C烷基或氧取代，以及/或在任何額外的N原子上被1-6C烷基取代；R3代表天然的或非天然的α-氨基酸的特征基團(tuán)，其中存在的任何官能基都可以被保護(hù)，條件是R3不代表氫；R4代表羧基，(1-6C烷氧基)羰基，氨基甲酰基或(1-6C烷基)氨基甲?；籖5代表天然存在的α-氨基酸的特征基團(tuán)，其中存在的任何官能基均可被保護(hù)；R6代表氫；或者R4、R5和R6各自分別代表氫或1-6C烷基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2代表氫、1-6C烷基或是化學(xué)式為-(CH2)n-Het的基團(tuán)，R6代表氫。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R1代表乙基、異丙基、正丁基或正己基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3的化合物，其中R1代表乙基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任何一項(xiàng)的化合物，其中R2代表氫，甲基，一個(gè)化學(xué)式為-(CH2)n-芳基的基團(tuán)，其中芳基為苯基，或是化學(xué)式為-(CH2)n-Het的基團(tuán)，其中Het表示一個(gè)5元或6元N-雜環(huán)，該雜環(huán)任選地還含有一個(gè)或二個(gè)N原子、一個(gè)N原子和一個(gè)O原子或是一個(gè)O原子作為額外的雜原子。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的化合物，其中Het代表以下一組化學(xué)式
其中R7和R8各自代表氫，或者一起代表一個(gè)額外的鍵或一個(gè)稠合苯環(huán)的其余部分;R9代表氫或1-6C烷基;X代表-CO-、-CH2-、-CH(1-6C烷基)-、-C(1-6C烷基)2-、-NH-、-N(1-6C烷基)-或-O-;和Y代表-O-、-NH-或-N(1-6C烷基)-。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的化合物，其中Het代表式(b)或式(c)基團(tuán)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中Het代表鄰苯二甲酰亞氨基或3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任何一項(xiàng)的化合物，其中當(dāng)R1代表式-(CH2)n-Het基團(tuán)時(shí)，n為1;當(dāng)R1代表式-(CH2)n-芳基時(shí)，n為3。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中任何一項(xiàng)的化合物，其中R3代表甲基、異丁基、叔丁基、被保護(hù)的4-氨基丁基、新戊基、正庚基、環(huán)己基甲基、芐基、α-甲基芐基或α，α-二甲基芐基。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的化合物，其中被保護(hù)的4-氨基丁基是4-鄰苯二甲酰亞氨基丁基。
12.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任何一項(xiàng)的化合物，其中R4代表(1-6C烷基)氨基甲酰基，R5代表異丁基，R6代表氫。
13.根據(jù)權(quán)利要求12的化合物，其中R4代表甲基氨基甲?；蛞一被柞；?。
14.根據(jù)權(quán)利要求1至11中任何一項(xiàng)的化合物，其中R4、R5和R6各自代表氫;或者R4和R5各自代表氫，R6代表叔丁基;或者R4、R5及R6均代表甲基。
15.[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
16.[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-壬基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
17.[4-(N-羥氨基)-2(R或S)-庚基-3(S)-甲基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
18.[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(鄰苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
19.[4-(N-羥氨基)-2(RS)-壬基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。
20.[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺。
21.[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(鄰苯二甲酰亞氨基甲基)丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺。
22.[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-(3-苯丙基)丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
23.根據(jù)權(quán)利要求2的化合物，選自[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-亮氨酸新戊基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-(Nε-鄰苯二甲酰)-賴(lài)氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-十一烷基丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，和[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
24.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，選自[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-壬氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-苯丙氨酸叔丁基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-叔丁基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-高苯丙氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-庚基丁二酰]-L-環(huán)己基丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(RS)-異辛基丁二酰]-L-苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-L-新戊基甘氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-β，β-二甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-(D或L)-蘇-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基丁二酰]-DL-赤-β-甲基苯丙氨酸甲基酰胺，和[4-(N-羥氨基)-2(R)-庚基-3(R或S)-[(3-甲基-2，5-二氧代-1-咪唑烷基)甲基]丁二酰]-L-亮氨酰-L-亮氨酸乙基酰胺。
25.通式如下的化合物
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的定義同權(quán)利要求1中定義，Bz代表芐基。
26.通式如下的化合物及其活性酯
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6的定義同權(quán)利要求1中定義。
27.權(quán)利要求1-24中任何一項(xiàng)的化合物，用作治療活性物質(zhì)。
28.權(quán)利要求1-24中任何一項(xiàng)的化合物，用于控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療侵入性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥。
29.權(quán)利要求1-24中任何一項(xiàng)要求授權(quán)的化合物的制造方法，該方法包括(a)將通式(Ⅱ)的化合物催化加氫
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有權(quán)利要求1的定義，Bz代表芐基;或者(b)將通式(Ⅲ)的酸或其活性酯與通式(Ⅳ)的化合物反應(yīng)，若有必要，將反應(yīng)產(chǎn)物中存在的任何二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基裂解掉，
其中R1、R2、R3、R4、R5和R6具有權(quán)利要求1的定義，其中Z代表氫、三(1-6C烷基)甲硅烷基或二苯基(1-6C烷基)甲硅烷基;若有必要，將得到的式Ⅰ化合物轉(zhuǎn)化成藥學(xué)上可接受的鹽。
30.一種藥物，其中含有權(quán)利要求1-24中任何一項(xiàng)的化合物和治療上惰性的載體物質(zhì)。
31.一種用于控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療侵入性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥的藥物，該藥物含有權(quán)利要求1-24中任何一項(xiàng)的化合物和治療上惰性和載體物質(zhì)。
32.權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)的化合物用于控制或預(yù)防疾病。
33.權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)的化合物用于控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療侵入性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥。
34.權(quán)利要求1-24中任一項(xiàng)的化合物用于制造藥物，以用來(lái)控制或預(yù)防關(guān)節(jié)變性病或治療侵入性腫瘤、動(dòng)脈粥樣硬化或多發(fā)性硬化癥。
全文摘要
本發(fā)明涉及化學(xué)式(I)的異羥肟酸及其藥學(xué)上可接受的鹽其中R
文檔編號(hào)C07D239/88GK1082027SQ93107609
公開(kāi)日1994年2月16日 申請(qǐng)日期1993年6月23日 優(yōu)先權(quán)日1992年6月25日
發(fā)明者M·J·布羅德赫斯特, P·A·布朗, W·H·約翰遜, G·勞頓 申請(qǐng)人:霍夫曼-拉羅奇有限公司