一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其是通過將紅豆杉枝葉烘干后粉碎，向該粉末中加入粉末重量3-4倍的乙酸乙酯和丙酮混合液得混合物，將該混合物投入回流提取器中提取4-5次得提取液，將提取液過濾后過大孔吸附樹脂柱，并將得到的紫杉醇段用清水和乙醇洗脫，再將得到的紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷混合后烘干，將干燥后的混合物與硅膠按混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫，將得到的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在乙醇和水中，靜止冷卻后再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。采用本發(fā)明的方法提取紫杉醇，提取率可達(dá)96-99％，產(chǎn)品中紫杉醇的純度達(dá)94-96％，能夠取得顯著的經(jīng)濟(jì)效益。
【專利說明】一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及從植物中分離提取有機(jī)化合物的【技術(shù)領(lǐng)域】，尤其是涉及一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]紅豆杉又名三尖杉、桃松、山榧樹、廣泛分布于世界各地，植物全株富含三尖杉堿、表二尖杉喊、去甲基二尖杉喊、乙酸二尖杉喊、二尖杉酮喊、二尖杉新喊以及紫杉醇，運(yùn)用紅豆杉極其同屬植物短葉紫衫提取物的紫衫膏中含有多種成分:紫衫堿、紫杉醇、紫衫素、紫衫寧、蛇皮留酮、金松雙簧酮，某些有毒物質(zhì)，糖苷色素等。其中紫杉醇的抗Ca、抗TB活性最佳，是紫衫浸膏中的主要抗Ca、抗TB成分和主要要用成分。
[0003]紫杉醇別名泰素、紫素、特素，化學(xué)名稱為5 β，分子式為C47H51N014。紫杉醇主要適用于卵巢癌和乳腺癌，對肺癌、大腸癌、黑色素瘤、頭頸部癌、淋巴瘤和腦瘤。用途廣泛，市場需求量大。目前，從紅豆杉中提取紫杉醇常用的工藝為:將紅豆杉樹皮粉碎，用85%?95%酒精在35?55°C熱回流浸提三次，50?70°C真空減壓濃縮至熱測比重1.1?1.2g/ml，再用氯仿萃取，萃取液濃縮成膏狀，得紫杉醇含量1 %氯仿膏，將紫杉醇含量1 %氯仿膏加氯仿溶解完全，加硅膠攪拌均勻，涼干，過篩，填裝到層析柱中，氯仿和甲醇梯度洗脫，TLC檢測，分段合并濃縮，得紫杉醇含量5?8%半成品，將紫杉醇含量5?8%半成品加丙酮溶解完全，加硅膠攪拌均勻，涼干，過篩，填裝到層析柱中，丙酮和石油醚梯度洗脫，TLC檢測，分段合并濃縮，得紫杉醇含量20?25%半成品，用丙酮和石油醚系統(tǒng)結(jié)晶3?4次，抽濾，50°C真空減壓干燥，得紫杉醇含量75?80%半成品，16Mpa壓力層析分離，TLC檢測，分段合并濃縮，目標(biāo)段濃縮物用丙酮?石油醚經(jīng)結(jié)晶、抽濾、干燥后得紫杉醇。該工藝制得的紫杉醇純度較高，但其工藝步驟繁瑣，生產(chǎn)成本較高，且紫杉醇的提取率較低。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]有鑒于此，本發(fā)明的目的是提供一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)工藝復(fù)雜、生產(chǎn)成本高以及紫杉醇的提取率低存在的不足。
[0005]本發(fā)明通過以下技術(shù)方案解決上述技術(shù)問題:
[0006]一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步驟:
[0007](1)原料預(yù)處理:將紅豆杉枝葉用40_50°C的溫度烘干至水分含量為8-12%，然后將其粉碎為60-200目的粉末；
[0008](2)提取紫杉醇:向步驟⑴制得的粉末中加入粉末重量3-4倍的溶劑，攪拌使粉末充分溶解，然后將粉末與溶劑的混合物投入設(shè)有超聲波振蕩器的回流提取器中，在超聲頻率為28-32KHZ，功率為1400-1500kw的超聲波作用下，加熱回流提取4_5次，每次提取時間為24_30min,得提取液；
[0009](3)吸附:將步驟⑵中的提取液進(jìn)行過濾，將濾液過大孔吸附樹脂柱，大孔吸附樹脂柱的用量為紅豆杉粉末重量的10-12倍；
[0010](4)制備紫杉醇粗品:將紫杉醇段用清水洗脫，再用乙醇洗脫，乙醇的體積為紫砂醇段體積的4-6倍，獲得乙醇洗脫液，將該洗脫液減壓蒸干即得紫杉醇粗品；
[0011](5)層析:將紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷按照重量比為1: (1.8-2.2): (2.5-2.8)混合，然后采用文火烘干，將干燥后的混合物與硅膠按1:(3-4)混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫3-5次，收集紫杉醇段；
[0012](6)結(jié)晶:將步驟(5)中的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段體積與水的體積比為(4-6):1:(10-12)，攪拌10-15min使其混合均勻，然后靜止冷卻45-50h，再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0013]優(yōu)選地，所述步驟(1)中，將紅豆杉枝葉用45°C的溫度烘干至水分含量為10%，然后將其粉碎為80目的粉末。
[0014]優(yōu)選地，所述步驟(2)中，溶劑是乙醇乙酯和丙酮的混合物。
[0015]優(yōu)選地，所述乙醇乙酯和丙酮的重量比為10:8_12。
[0016]優(yōu)選地，所述步驟⑵中，溶劑是甲醇和二氯甲烷的混合物
[0017]優(yōu)選地，所述甲醇和二氯甲烷的重量比為10:12_16。
[0018]優(yōu)選地，所述步驟(2)中，通過加熱調(diào)節(jié)回流提取器內(nèi)的溫度為30_35°C。
[0019]優(yōu)選地，所述乙醇的濃度為80-90%。
[0020]本發(fā)明的有益效果為:采用本發(fā)明的方法提取紫杉醇，提取率可達(dá)96-99%，產(chǎn)品中紫杉醇的純度達(dá)94-96%，能夠取得顯著的經(jīng)濟(jì)效益。同時，本發(fā)明的溶劑使用量少，利用率較高，可有效降低生產(chǎn)成本。

【具體實(shí)施方式】
[0021]為了方便本領(lǐng)域的技術(shù)人員理解，下面將結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的描述。實(shí)施例僅僅是對該發(fā)明的舉例說明，不是對本發(fā)明的限定，實(shí)施例中未作具體說明的步驟均是已有技術(shù)，在此不做詳細(xì)描述。
[0022]實(shí)施例一
[0023]一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步驟:
[0024](1)原料預(yù)處理:將紅豆杉枝葉用40°C的溫度烘干至水分含量為8%，然后將其粉碎為60目的粉末；
[0025](2)提取紫杉醇:向步驟(1)制得的紅豆杉枝葉的粉末中加入粉末重量3倍的溶齊U，該溶劑是乙醇乙酯和丙酮按重量比為10:8混合而成，攪拌使粉末充分溶解，然后將粉末與溶劑的混合物投入設(shè)有超聲波振蕩器的回流提取器中，在超聲頻率為28KHz，功率為1400kw的超聲波作用下，加熱至溫度為30°C并保持恒溫回流提取4次，每次提取時間為24min，得提取液；
[0026](3)吸附:將步驟(2)中的提取液進(jìn)行過濾，將濾液過大孔吸附樹脂柱，大孔吸附樹脂柱的用量為紅豆杉粉末重量的10倍；
[0027](4)制備紫杉醇粗品:將紫杉醇段用清水洗脫，再用濃度為80%乙醇洗脫，乙醇的體積為紫砂醇段體積的4倍，獲得乙醇洗脫液，將該洗脫液減壓蒸干即得紫杉醇粗品；
[0028](5)層析:將紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷按照重量比為1:1.8:2.5混合，然后采用文火烘干，將干燥后的混合物與硅膠按1:3混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫3次，收集紫杉醇段；
[0029](6)結(jié)晶:將步驟(5)中的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在濃度為80%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段體積與水的體積比為4:1:10，攪拌lOmin使其混合均勻，然后靜止冷卻45h，再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0030]采用本發(fā)明的方法提取紫杉醇，提取率可達(dá)96%以上，產(chǎn)品中紫杉醇的純度達(dá)94%以上。
[0031]實(shí)施例二
[0032]一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步驟:
[0033](1)原料預(yù)處理:將紅豆杉枝葉用50°C的溫度烘干至水分含量為12%，然后將其粉碎為200目的粉末；
[0034](2)提取紫杉醇:向步驟(1)制得的紅豆杉枝葉的粉末中加入粉末重量3倍的溶齊U，該溶劑是乙醇乙酯和丙酮按重量比為10:12混合而成，攪拌使粉末充分溶解，然后將粉末與溶劑的混合物投入設(shè)有超聲波振蕩器的回流提取器中，在超聲頻率為32KHz，功率為1500kw的超聲波作用下，加熱至溫度為35°C并保持恒溫回流提取5次，每次提取時間為30min,得提取液；
[0035](3)吸附:將步驟(2)中的提取液進(jìn)行過濾，將濾液過大孔吸附樹脂柱，大孔吸附樹脂柱的用量為紅豆杉粉末重量的12倍；
[0036](4)制備紫杉醇粗品:將紫杉醇段用清水洗脫，再用濃度為90%乙醇洗脫，乙醇的體積為紫砂醇段體積的6倍，獲得乙醇洗脫液，將該洗脫液減壓蒸干即得紫杉醇粗品；
[0037](5)層析:將紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷按照重量比為1:2.2:2.8混合，然后采用文火烘干，將干燥后的混合物與硅膠按1:4混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫5次，收集紫杉醇段；
[0038](6)結(jié)晶:將步驟(5)中的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在濃度為90%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段體積與水的體積比為6:1:12，攪拌15min使其混合均勻，然后靜止冷卻50h，再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0039]采用本發(fā)明的方法提取紫杉醇，提取率可達(dá)97%以上，產(chǎn)品中紫杉醇的純度達(dá)95%以上。
[0040]實(shí)施例三
[0041]一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，包括以下步驟:
[0042](1)原料預(yù)處理:將紅豆杉枝葉用45°C的溫度烘干至水分含量為10%，然后將其粉碎為80目的粉末；
[0043](2)提取紫杉醇:向步驟(1)制得的紅豆杉枝葉的粉末中加入粉末重量3.5倍的溶劑，該溶劑是乙醇乙酯和丙酮按重量比為10:10混合而成，攪拌使粉末充分溶解，然后將粉末與溶劑的混合物投入設(shè)有超聲波振蕩器的回流提取器中，在超聲頻率為30KHZ，功率為1450kw的超聲波作用下，加熱至溫度為32°C并保持恒溫回流提取4次，每次提取時間為28min，得提取液；
[0044](3)吸附:將步驟(2)中的提取液進(jìn)行過濾，將濾液過大孔吸附樹脂柱，大孔吸附樹脂柱的用量為紅豆杉粉末重量的11倍；
[0045](4)制備紫杉醇粗品:將紫杉醇段用清水洗脫，再用濃度為85%乙醇洗脫，乙醇的體積為紫砂醇段體積的5倍，獲得乙醇洗脫液，將該洗脫液減壓蒸干即得紫杉醇粗品；
[0046](5)層析:將紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷按照重量比為1:2:2.6混合，然后采用文火烘干，將干燥后的混合物與硅膠按1:3混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫4次，收集紫杉醇段；
[0047](6)結(jié)晶:將步驟(5)中的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在濃度為85%乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段體積與水的體積比為5:1:11，攪拌12min使其混合均勻，然后靜止冷卻50h，再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
[0048]采用本發(fā)明的方法提取紫杉醇，提取率可達(dá)99%，產(chǎn)品中紫杉醇的純度達(dá)96%。
[0049]以上所述，僅是本發(fā)明的較好實(shí)例，并非對本發(fā)明作任何形式上的限制，任何未脫離本發(fā)明技術(shù)方案內(nèi)容，依據(jù)本發(fā)明的技術(shù)實(shí)質(zhì)對以上實(shí)例所作的任何簡單修改、變換材料等同變化與修飾，均仍屬于本發(fā)明技術(shù)方案的范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:包括以下步驟: (1)原料預(yù)處理:將紅豆杉枝葉用40-50°C的溫度烘干至水分含量為8-12%，然后將其粉碎為60-200目的粉末； (2)提取紫杉醇:向步驟(I)制得的粉末中加入粉末重量3-4倍的溶劑，攪拌使粉末充分溶解，然后將粉末與溶劑的混合物投入設(shè)有超聲波振蕩器的回流提取器中，在超聲頻率為28-32KHZ，功率為1400-1500kw的超聲波作用下，加熱回流提取4_5次，每次提取時間為24-30min，得提取液； (3)吸附:將步驟(2)中的提取液進(jìn)行過濾，將濾液過大孔吸附樹脂柱，大孔吸附樹脂柱的用量為紅豆杉粉末重量的10-12倍； (4)制備紫杉醇粗品:將紫杉醇段用清水洗脫，再用乙醇洗脫，乙醇的體積為紫砂醇段體積的4-6倍，獲得乙醇洗脫液，將該洗脫液減壓蒸干即得紫杉醇粗品； (5)層析:將紫杉醇粗品、硅膠與二氯甲烷按照重量比為1:(1.8-2.2):(2.5-2.8)混合，然后采用文火烘干，將干燥后的混合物與硅膠按1:(3-4)混合后裝入層析柱，采用乙酸乙酯和丙酮體系洗脫3-5次，收集紫杉醇段； (6)結(jié)晶:將步驟(5)中的紫杉醇段濃縮蒸干，然后將其溶解在乙醇和水中，乙醇、紫砂醇段體積與水的體積比為(4-6):1:(10-12)，攪拌10-15!^11使其混合均勻，然后靜止冷卻45-50h，再過濾結(jié)晶以及烘干，即得紫杉醇成品。
2.如權(quán)利要求1所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步驟(I)中，將紅豆杉枝葉用45°C的溫度烘干至水分含量為10%，然后將其粉碎為80目的粉末。
3.如權(quán)利要求1所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步驟(2)中，溶劑是乙醇乙酯和丙酮的混合物。
4.如權(quán)利要求3所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述乙醇乙酯和丙酮的重量比為10:8-12。
5.如權(quán)利要求1所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步驟(2)中，溶劑是甲醇和二氯甲烷的混合物。
6.如權(quán)利要求5所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述甲醇和二氯甲烷的重量比為10:12-16。
7.如權(quán)利要求1所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述步驟(2)中，通過加熱調(diào)節(jié)回流提取器內(nèi)的溫度為30-35°C。
8.如權(quán)利要求1所述的利用超聲波從紅豆杉中提取紫杉醇的方法，其特征在于:所述乙醇的濃度為80-90%。
【文檔編號】C07D305/14GK104402845SQ201410676291
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】朱艷玲, 盧連偉 申請人:朱艷玲