針對fel d1 的人源抗體及其使用方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了與貓過敏原Fel d1結(jié)合的抗體、包含所述抗體的組合物、編碼所述抗體的核酸以及所述抗體的使用方法。根據(jù)本發(fā)明的某些實施方式，所述抗體是與Fel d1結(jié)合的全人源單克隆抗體。本發(fā)明的所述抗體可用于在體內(nèi)結(jié)合Fel d1免疫原，從而阻止Fel d1免疫原與在肥大細胞或嗜堿性粒細胞表面上預先形成的IgE結(jié)合。這樣做時，所述抗體起到防止從肥大細胞和/或嗜堿性粒細胞釋放組胺和其他炎性介質(zhì)，從而緩解敏感個體對貓過敏原的不良反應。本發(fā)明的所述抗體還可以用于確定患者是否對Fel d1貓過敏原過敏的診斷目的。
【專利說明】針對FEL D1的人源抗體及其使用方法 發(fā)明領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及能夠與貓過敏原Fel dl特異性地結(jié)合的人源抗體和人源抗體的抗原 結(jié)合片段，包含所述抗體的治療組合物和這些抗體的使用方法。
[0002] 相關(guān)摶術(shù)的聲明
[0003] Fel dl蛋白是分泌型的貓蛋白，其屬于僅在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的小二硫化物 連接的異源二聚體蛋白的分泌球蛋白家族（〖1即，]\6七&1.(2000)，六]111.11￥.六〇&(1· Sci. 923:348-354)。它是在人類中導致貓過敏的主要原因（Platts-Mills，T.A.等， (1997)，J.Allergy Clin. Immunol. 100:S2-S24)。約 90-95%對貓過敏的患者具有針對 Fel dl 蛋白的 IgE 應答（van Ree 等，（1999)，J. Allergy Clin. Immunol. 104:1223-1230)。 經(jīng)受對Fel dl產(chǎn)生過敏應答的患者的癥狀可以從輕微的關(guān)節(jié)炎和結(jié)膜炎到威脅生命的 哮喘反應。Fel dl由皮脂腺和鱗狀腺和鱗狀上皮細胞產(chǎn)生并且通過舔和梳毛轉(zhuǎn)移至毛 皮（Bartholome，K.等，（1985)，J.Allergy Clin.Immunol.76:503-506;Charpin，C.等， (1991)，J.Allergy Clin. Immunol.88:77-82;Dabrowski，A.J· (1990)，等，J. Allergy Clin. Immunol. 86:462-465)。其還存在于唾液腺、肛門腺和淚腺中（Andersen，M.C.等， (1985)，J. Allergy Clin. Immunol. 76:563-569 ;van Milligen，F(xiàn).J. (1992)，等，Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 92(4) :375-378)并且似乎其主要儲存庫為皮膚和毛皮（1&^8，？· 等，（1992)，Ann. Allergy 69(4) :321-322)。
[0004] 天然的Fel dl是約18kDa的異源二聚的糖蛋白。各異源二聚體均包含兩條 多肽鏈，其通過三個鏈間二硫鍵共價連接并且由兩個獨立的基因編碼（Duffort，OA等， (1991), Mol. Immunol. 28:301-309 ；Morgenstern, JP,等（1991)，PNAS 88:9690-9694 ; Griffith，I.J.等，（1992)，Gene 113:263-268;Kristensen，A.K.等，（1997)，81〇1· Chem. 378:899-908)。鏈1包含70個氨基酸殘基和鏈2包含約90-92個氨基酸殘基。兩條 鏈在結(jié)構(gòu)上是相似的，但是僅具有10-15%的序列一致性（Kaiser，L.等，（2003)，181〇1· Chem. 278(39) :37730-37735)。盡管有時將單獨的各條鏈稱為Fel dl，但是對于全蛋白過敏 原而言需要這兩條鏈。
[0005] Fel dl蛋白對動物具有未知的功能，但是導致敏感人群的IgG或IgE反應（稱為 過敏或哮喘反應）。盡管其他貓過敏原是已知的，包括Fel d2(白蛋白）和Fel d3(胱抑 素），但是60%-90%的抗貓IgE是直接針對Feldl產(chǎn)生的（Leitermann，K.等，（1984)，J Allergy Clin. Tmmunol. 74:147-153 ；Lowenstein, Η.等，(1985), Allergy 40:430-441 ； van Ree，R.等，（1999)，J. Allergy Clin. Immunol. 104:1223-1230 ;Ichikawa，K.等， (2011), Clin. Exp. Allergy, 31:1279-1286)〇
[0006] 免疫球蛋白E(IgE)負責I型超敏反應，其表現(xiàn)為過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、花粉 熱、過敏性哮喘、蜂毒過敏和食物過敏。IgE在血液中循環(huán)并且與在嗜堿性和肥大細胞上的 對IgE具有高親和性的Fe eRla受體結(jié)合。在大部分的過敏反應中，過敏原通過吸入、攝 食或通過皮膚進入機體。然后過敏原與預先已經(jīng)與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面上的高親 和性受體結(jié)合的IgE結(jié)合，導致若干IgE分子交聯(lián)并且觸發(fā)導致各種過敏癥狀的組胺和其 他炎性介質(zhì)的釋放。
[0007] 過敏癥的治療包括用于抑制免疫活性的類固醇和用于減輕哮喘癥狀的支氣管擴 張劑。針對嚴重的過敏患者還使用脫敏療法。肽疫苗組合已經(jīng)過測試，用于特定過敏原例 如Fel dl的個體脫敏（參見US2010/0239599A1和EP2380591A2)。已建議將抗體用于過敏 癥的治療，因為其可能能夠阻止過敏原分子進入粘膜組織，或者可以在過敏原有機會與結(jié) 合于肥大細胞或嗜堿性粒細胞表面上的高親和性受體的IgE結(jié)合之前先與過敏原結(jié)合，從 而阻止組胺和其他炎性介質(zhì)從這些細胞中釋放。
[0008] 美國專利號5, 670, 626描述了單克隆抗體通過阻止過敏原與粘膜組織結(jié)合，用于 治療IgE介導的過敏性疾病如過敏性鼻炎、過敏性哮喘和過敏性結(jié)膜炎的用途。美國專 利號6, 849, 259描述了使用過敏原特異性地抗體在過敏癥的體內(nèi)小鼠模型中抑制過敏性 炎癥。已對基于牛奶和基于蛋類的抗體系統(tǒng)進行了描述。例如，US20030003133A1公開了 使用牛奶作為過敏原的載體誘導對貓鱗屑和其他過敏原的口服耐受。在US2010/0143266 中描述了組合物和方法，通過使用抑制過敏原與肥大細胞結(jié)合能力的分子來降低在動物 中對環(huán)境中的過敏原的過敏反應。de Groot等（de Groot等，（1988)，J.Allergy Clin. Immunol. 82:778-786)描述了針對Fel dl的其他抗體。
[0009] 發(fā)明簡沭
[0010] 本發(fā)明提供了一種與貓過敏原Fel dl特異性地結(jié)合的全人源單克隆抗體（mAb) 及其抗原結(jié)合片段。在致敏的患者暴露于貓過敏原后，此類抗體可以用于在體內(nèi)結(jié)合Fel dl過敏原，并且這樣可以發(fā)揮促進Fel dl的清除或阻止所述過敏原與肥大細胞或嗜堿性 粒細胞表面上預先結(jié)合的IgE結(jié)合的作用。通過這樣的作用，本發(fā)明的抗體可以阻止組胺 或其他炎性介質(zhì)從肥大細胞或嗜堿性粒細胞釋放，從而阻止或減輕在對所述貓過敏原敏感 的患者中觀察到的不利作用。在某些實施方式中，所述抗體可能能夠在對所述Fel dl貓過 敏原敏感的患者中減輕、最小化或阻止至少一種癥狀，如噴嚏、充血、鼻塞、咳嗽、氣喘、支氣 管痙攣、鼻炎或結(jié)膜炎。在某些實施方式中，所述抗體可能能夠在敏感個體中阻止甚至更加 嚴重的與暴露于所述貓過敏原相關(guān)的體內(nèi)并發(fā)癥，如哮喘反應、過敏反應或者甚至死亡。 [0011] 本發(fā)明的抗體可以是全長的（例如IgGl或IgG4抗體）或者可以僅包括抗原結(jié)合 部分（例如Fab、F(ab'）2或scFv片段），并且可以被修飾以影響其功能性，例如消除殘留 的效應器功能（Reddy 等，（2000)，J. Immunol. 164:1925-1933)。
[0012] 本發(fā)明的第一個方面提供了一種與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的人源單克隆抗 體或其抗原結(jié)合片段。
[0013] 在一個實施方式中，所述抗體或其抗原結(jié)合片段是不同于IgA同種型的同種型。
[0014] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段具有選自下組的同種 型：IgGl、IgG2 和 IgG4。
[0015] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段以等于或小于KT6M 的Kd與Fel dl特異性地結(jié)合。在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片 段以等于或小于I. 8nM的Kd與Fel dl特異性地結(jié)合。
[0016] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含三個重鏈 CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述重鏈CDR包含在任意一個選自下組的重鏈可變區(qū)（HCVR) 序列中：SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、 274、290、306、322、338、354、370 和 460 ;和三個輕鏈 CDR(LCDR1、LCDR2 和 LCDR3)，所述輕 鏈CDR包含在任意一個選自下組的輕鏈可變區(qū)（LCVR)序列中：SEQ ID N0:10、26、42、58、 74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362、378 和468。用于鑒定HCVR和LCVR氨基酸序列中的CDR的方法和技術(shù)是本領(lǐng)域熟知的并且能 夠用于鑒定在本申請所公開的特定HCVR和/或LCVR氨基酸序列中的CDR。能夠用于標識 ⑶R的邊界的示例性約定包括例如Kabat定義、Chothia定義和AbM定義。概括地說，Kabat 定義是基于序列的變異性、Chothia定義是基于結(jié)構(gòu)環(huán)區(qū)的位置而AbM定義是Kabat和 Chothia 方法之間的折中。參見例如 Kabat, "Sequences of Proteins of Immunological Interest (免疫學關(guān)注的蛋白序列）"National Institutes of Health，Bethesda, Md. (1991) ;A1-Lazikani 等，（1997)，J. Mol. Biol. 273:927-948 和 Martin 等，（1989)，？1"〇。· Natl.Acad. Sci.USA86:9268-9272。還可以利用公共數(shù)據(jù)庫鑒定抗體中的CDR序列。
[0017] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含三個重鏈 CDR(HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述重鏈CDR包含在任意一個選自下組的重鏈可變區(qū)（HCVR) 序列中：SEQ ID NO :18、66、130、162、242、306、322、370 和 460 ;和三個輕鏈 CDR(LCDR1、 IXDR2和IXDR3)，所述輕鏈⑶R包含在任意一個選自下組的輕鏈可變區(qū)（LCVR)序列中：SEQ ID NO :26、74、138、170、250、314、330、378 和 468。
[0018] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的 氨基酸序列的 HCVR :SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、 226、242、258、274、290、306、322、338、354、370 和 460。
[0019] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的 氨基酸序列的 HCVR:SEQ ID 勵：18、66、130、162、242、306、322、370 和 460。
[0020] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的 氨基酸序列的LCVR :SEQ ID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、 234、250、266、282、298、314、330、346、362、378 和 468。
[0021] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的 氨基酸序列的 LCVR:SEQ ID 勵：26、74、138、170、250、314、330、378 和 468。
[0022] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含：(a) HCVR，所述 HCVR 具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、 178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354、370 和 460 ;和（b)LCVR，所述 LCVR 具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、 202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362、378 和 468。
[0023] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含：(a) HCVR，所述 HCVR 具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:18、66、130、162、242、306、322、370 和 460; 和（b)LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:26、74、138、170、250、314、 330、378 和 468。
[0024] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含：
[0025] (a) HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :4、 20、36、52、68、84、100、116、132、148、164、180、196、212、228、244、260、276、292、308、324、 340、356、372 和 462 ;
[0026] (b)HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :6、 22、38、54、70、86、102、118、134、150、166、182、198、214、230、246、262、278、294、310、326、 342、358、374 和 464 ;
[0027] (c)HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :8、 24、40、56、72、88、104、120、136、152、168、184、200、216、232、248、264、280、296、312、328、 344、360、376 和 466 ;
[0028] (d) LCDRl結(jié)構(gòu)域，所述LCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO : 12、 28、44、60、76、92、108、124、140、156、172、188、204、220、236、252、268、284、300、316、332、 348、364、380 和 470 ;
[0029] (e)LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :14、 30、46、62、78、94、110、126、142、158、174、190、206、222、238、254、270、286、302、318、334、 350、366、382 和 472 ;以及
[0030] (f)LCDR3結(jié)構(gòu)域，所述LCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :16、 32、48、64、80、96、112、128、144、160、176、192、208、224、240、256、272、288、304、320、336、 352、368、384 和 474。
[0031] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含：
[0032] (a)HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :20、 68、132、164、244、308、324、372 和 462 ;
[0033] (b)HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :22、 70、134、166、246、310、326、374和 464;
[0034] (c)HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :24、 72、136、168、248、312、328、376 和 466 ;
[0035] (d) LCDRl結(jié)構(gòu)域，所述LCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :28、 76、140、172、252、316、332、380 和 470 ;
[0036] (e)LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :30、 78、142、174、254、318、334、382 和 472 ;和
[0037] (f)LCDR3結(jié)構(gòu)域，所述LCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :32、 80、144、176、256、320、336、384和 474。
[0038] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR/LCVR氨 基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID N0:2/10、18/26、34/42、50/58、66/74、 82/90、98/106、114/122、130/138、146/154、162/170、178/186、194/202、210/218、226/234、 242/250、258/266、274/282、290/298、306/314、322/330、338/346、354/362、370/378 和 460/468。
[0039] 在一個實施方式中，所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR/LCVR氨 基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :18/26、66/74、130/138、162/170、 242/250、306/314、322/330、370/378 和 460/468。
[0040] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :18/26、66/74、130/138 和和 162/170。
[0041] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :18/26和322/330。 [0042] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :18/26和306/314。
[0043] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :18/26和370/378。
[0044] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :242/250和306/314。
[0045] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組：SEQ ID NO :242/250和322/330。
[0046] 在一個實施方式中，與Fel dl特異性地結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合 片段與至少一個選自下組的氨基酸序列相互作用：SEQ ID N0:396的范圍從約位置15至約 位置24的氨基酸殘基；SEQ ID NO: 396的范圍從約位置85至約位置103的氨基酸殘基；SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置104的氨基酸殘基；和SEQ ID NO:396的范圍從約 位置113至約位置116的氨基酸殘基。
[0047] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO:396的范圍從約位置15至約位置24的氨基酸殘基相互作用。
[0048] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置103的氨基酸殘基相互作用。
[0049] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置104的氨基酸殘基相互作用。
[0050] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO:396的范圍從約位置113至約位置116的氨基酸殘基相互作用。
[0051] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與選 自下組的至少一個氨基酸序列相互作用：SEQ ID N0:402、403、404和412。
[0052] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO :402相互作用。
[0053] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO :403相互作用。
[0054] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO :404相互作用。
[0055] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO :426相互作用。
[0056] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段與 SEQ ID NO :412相互作用。
[0057] 在一個實施方式中，與SEQ ID NO :402、403、404和/或426相互作用的所述分離 的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含包含在SEQ ID NO: 18的重鏈可變區(qū)中的三個HCDR和包 含在SEQ ID NO:26的輕鏈可變區(qū)中的三個IXDR。
[0058] 在一個實施方式中，與SEQ ID NO :402、403、404和/或426相互作用的所述分離 的人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :20中的HCDRl ;SEQ ID NO :22中的HCDR2 ; SEQ ID NO :24 中的 HCDR3; SEQ ID NO :28 中的 LCDRl ;SEQ ID NO :30 中的 LCDR2;和 SEQ ID NO :32 中的 LCDR3。
[0059] 在一個實施方式中，與SEQ ID NO :412相互作用的所述分離的人源抗體或其抗原 結(jié)合片段包含包含在SEQ ID NO :306的重鏈可變區(qū)中的三個HCDR和包含在SEQ ID NO :314 的輕鏈可變區(qū)中的三個IXDR。
[0060] 在一個實施方式中，與SEQ ID NO :412相互作用的所述分離的人源抗體或其抗原 結(jié)合片段包含 SEQ ID NO :308 中的 HCDRl ;SEQ ID NO :310 中的 HCDR2 ;SEQ ID NO :312 中 的 HCDR3 ;SEQ ID NO :316 中的 LCDRl ;SEQ ID NO :318 中的 LCDR2 ;和 SEQ ID NO :320 中的 LCDR3。
[0061] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :20、22和24中的HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列以及SEQ ID NO :28、30和32中 的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0062] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :68、70和72中的HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列以及SEQ ID NO :76、78和80中 的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0063] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO : 132、134 和 136 中的 HCDRl、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列以及 SEQ ID NO : 140、142 和 144中的LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列。
[0064] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO : 164、166 和 168 中的 HCDRl、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列以及 SEQ ID NO : 172、174 和 176中的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0065] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :244、246 和 248 中的 HCDR1、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列以及 SEQ ID NO :252、254 和 256中的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0066] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :308、310 和 312 中的 HCDR1、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列以及 SEQ ID NO :316、318 和 320中的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0067] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :324、326 中的 HCDR1、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列和 328 以及 SEQ ID NO :332、334 和 336中的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0068] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含SEQ ID NO :372、374 和 376 中的 HCDR1、HCDR2 和 HCDR3 的氨基酸序列以及 SEQ ID NO :380、382 和 384中的IXDR1、IXDR2和IXDR3的氨基酸序列。
[0069] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種與Fel dl結(jié)合的全人源單克隆抗體或其抗 原結(jié)合片段，其中所述抗體或其抗原結(jié)合片段顯示出一個或多個下述特性：（i)包含HCVR， 所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:18、66、130、162、242、306、322、370和 460,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似 的序列；（ii)包含LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:26、74、138、 170、250、314、330、378和468,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99% 序列一致性的基本上相似的序列；（iii)包含HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下 組的氨基酸序列：SEQ ID勵：24、72、136、168、248、312、328、376和466，或者與其具有至少 90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；和IXDR3結(jié)構(gòu)域， 所述LCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:32、80、144、176、256、320、336、 384和474,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上 相似的序列；（iv)包含HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :20、68、132、164、244、308、324、372 和 462,或者與其具有至少 90%、至少 95%、至少 98 %或至少99 %序列一致性的基本上相似的序列；HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選 自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:22、70、134、166、246、310、326、374和464,或者與其具有 至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；IXDRl結(jié)構(gòu) 域，所述LCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:28、76、140、172、252、316、 332、380和470,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的 基本上相似的序列；和LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :30、78、142、174、254、318、334、382 和 472,或者與其具有至少 90%、至少 95%、至少 98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；（V)以等于或低于KT6的Kd與Fel dl 結(jié)合，并且優(yōu)選地等于或低于1〇_9 ; (vi)在至少一個過敏或炎癥的動物模型中顯示有效性； 或（vii)與對照抗體競爭與Fel dl的結(jié)合。
[0070] 在一個實施方式中，"對照抗體"可以包括例如具有選自下組的重鏈和輕鏈氨 基酸序列對的組合的抗體：18/26、66/74、130/138、162/170、242/250、306/314、322/330、 370/378 和 460/468。
[0071] 在一個實施方式中，與Fel dl結(jié)合的所述全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCDRl 序列，所述序列包含式 X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 (SEQ ID NO: 386)，其中 X1 是 Gly，X2 是 Phe、Tyr 或 Gly，X3 是 Thr 或 Ser，X4 是 Phe 或 lie，X5 是 Ser、Arg、Thr 或 Asn， X6是Asn、Thr、Asp或Ser，X7是Tyr和X8是Asn、Tyr或Ala ;HCDR2序列，所述序列包含式 X1-X2-X3-X4-X5-X 6-X7-X8 (SEQ ID NO: 387)，其中 X1 是 lie，X2 是 Tyr、Ser 或 Asn，X3 是 Tyr、Ser、Gly、Pro 或 Asp，X4 是 Asp、Arg 或 Ser，X5 是 Gly、Val 或 Ser，X6 是 Ser、Gly、 Arg 或 Tyr，X7 是 Tyr、Arg、Thr、Ser 或 Asn，和 X8 是 lie、Thr、Ala、Ser 或無；HCDR3 序列， 所述HCDR3序列包含式父1-父2-父3-父 4-父5-父6-父7-父8-父 9-父1〇-父11-父12-父13-父 14-父15-X16 (SEQ ID NO: 388)，其中 X1 是 Ala，X2 是 Lys 或 Arg，X3 是 Arg、Gly、His、Ser、Asp、Leu 或 Thr，X4 是 Thr、Pro、Arg、Gly 或 Glu，X5 是 Leu、Val、Gly、Lys、Tyr 或 Asn，X6 是 Ser、Arg、 Thr、Ala、Tyr、Phe 或 Trp, X7 是 Tyr、Gly、Arg、Ala、Asn、Asp、His 或 Asn, X8 是 Tyr、Thr、Ser 或 His，X9 是 Val、Ser、Ala、Phe、Pro 或無，X1。是 Met、Gly、Asp、Pro、Val 或無，X11 是 Asp、 Tyr、Ser、Gly、Phe 或無，X12 是 Val、Asp、Phe 或無，X13 是 Phe、Asp 或無，X14 是 Phe、Tyr 或 無，X15是Asp或無，X16是Tyr或無；LCDRl序列，所述LCDRl序列包含式乂 1-#-^^4-X5 - X6 - X7 - X8 - X9 - Xici - X11-X12 (SEQ ID NO: 389)，其中 X1 是 Gln，X2 是 Gly、Ser 或 Asp，X3 是 Ile 或 Val，X4 是 Ser、Leu、Asn 或 Gly，X5 是 Asn、Tyr、Gly 或 Ser，X6 是 Tyr、Ser、Phe 或 Trp，X7是Ser或無，X8是Asn或無，X9是Asn或無，X ltl是Lys或無，X11是Gln或無，X12是 Tyr或無；LCDR2序列，所述序列包含式X1-X2-X3GEQ ID NO: 390)，其中X1是Ala、Trp、 Asp、Tyr、Lys、Gly 或 Ser，X2 是 Ala 或 Thr，和 X3 是 Ser ;和 LCDR3 序列，所述 LCDR3 序列 包含式 X1 - X2 - X3 - X4 - X5 - X6 - X7 - X8 - X9 (SEQ ID NO: 391)，其中 X1 是 GlruLeu 或 His，X2 是 Lys、Gln 或 His, X3 是 Tyr、Ser 或 Leu, X4 是 Tyr、Asn、Gly、Asp 或 Ser, X5 是 Ser、Asp 或 Asn，X6 是 Leu、Ala、Tyr、Thr 或 Phe，X7 是 Pro 或 Arg，X8 是 Leu、Phe、Tyr 或 Thr 并且 X9 是 Thr或無。
[0072] 在一個實施方式中，本發(fā)明涉及特異性地針對Fel dl的人源抗體或其抗原結(jié)合片 段，所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含由來源于VH、Dh和J h種系序列的核苷酸序列編碼 的HCVR，和由來源于Vk和Jk種系序列的核苷酸序列區(qū)段編碼的LCVR，其組合如表2所示。
[0073] 本發(fā)明包含具有經(jīng)修飾的糖基化類型的抗體。在一些應用中，修飾以除去不需要 的糖基化位點可能是有用的，或者例如除去巖藻糖部分以增加抗體依賴性細胞毒性（ADCC) 功能（參見Shield等，（2002) JBC 277:26733)。在其他應用中，可以進行半乳糖苷化修飾 以改變補體依賴性細胞毒性（CDC)。
[0074] 本申請的第二個方面提供了一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗 原結(jié)合片段與含有重鏈可變區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的CDR 的抗體或其抗原結(jié)合片段競爭與Fel dl的特異性的結(jié)合，其中所述HCVR具有選自下組的 氨基酸序列：SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、 258、274、290、306、322、338、354、370和460,其中所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列： SEQ ID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、 298、314、330、346、362、378 和 468。
[0075] 本申請的一個實施方式提供了一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其 抗原結(jié)合片段與含有重鏈可變區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的 CDR的抗體或其抗原結(jié)合片段競爭與Fel dl的特異性的結(jié)合，其中所述HCVR具有選自下組 的氨基酸序列：SEQ ID勵：18、66、130、162、242、306、322、370和460，其中所述1^0^具有選 自下組的氨基酸序列：SEQ ID 勵：26、74、138、170、250、314、330、378 和 468。
[0076] 在一個相關(guān)的實施方式中，本發(fā)明提供了一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段與含有包含在選自下組的重鏈和輕鏈序列對中的重鏈和輕鏈CDR 的抗體或抗原結(jié)合片段競爭與Fel dl的特異性的結(jié)合，其中所述重鏈和輕鏈CDR包含在 選自下組的重鏈和輕鏈序列對中：SEQ ID N0:18/26、66/74、130/138、162/170、242/250、 306/314、322/330、370/378 和 460/468。
[0077] 本申請的第三個方面提供了 一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗 原結(jié)合片段與含有重鏈可變區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的CDR 的抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié)合Fel dl上的相同表位，其中所述HCVR具有選自下組的氨基 酸序列：SEQ ID N0:2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、 274、290、306、322、338、354、370和460，其中所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列 ：SEQID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、 330、346、362、378 和 468。
[0078] 本申請的一個實施方式提供了一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其 抗原結(jié)合片段與含有重鏈可變區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的 CDR的抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié)合Fel dl上的相同表位，其中所述HCVR具有選自下組的氨 基酸序列：SEQ ID N0:18、66、130、162、242、306、322、370 和 460,其中所述 LCVR 具有選自 下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、 234、250、266、282、298、314、330、346、362、378 和 468。
[0079] 在相關(guān)的實施方式中，本發(fā)明提供了一種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段與含有包含在選自下組的重鏈和輕鏈序列對中的重鏈和輕鏈CDR的 抗體或抗原結(jié)合片段結(jié)合Fel dl上的相同表位，其中所述重鏈和輕鏈CDR包含在選自下 組的重鏈和輕鏈序列對中：SEQ ID N0:18/26、66/74、130/138、162/170、242/250、306/314、 322/330、370/378 和 460/468。
[0080] 本申請的第四個方面提供了一種與Fel dl特異性地結(jié)合的雙特異性抗原結(jié)合分 子，所述雙特異性抗原結(jié)合分子包含兩個抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域（兩個臂），所述抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域 包含來自任意兩個或多個本文所述的抗體的HCVR氨基酸序列和LCVR氨基酸序列。
[0081] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子包含第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述 第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 370所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 378 所示的LCVR氨基酸序列，及第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 18所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 378所示的LCVR氨基酸序列。
[0082] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子包含分別由SEQ ID NO :372、374 和376所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由 SEQ ID N0:380、374和376所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈互補性決定區(qū)（LCDRULCDR2 和IXDR3);以及其中所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含分別由SEQ ID NO :20、22和24所示的 氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO : 380、382和384所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈互補性決定區(qū)（IXDRUIXDR2和IXDR3)。 [0083] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子包含第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述 第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 306所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 314 所示的LCVR氨基酸序列，及第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 18所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 314所示的LCVR氨基酸序列。
[0084] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子包含分別由SEQ ID NO :308、310 和312所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由 SEQ ID N0:316、318和320所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈互補性決定區(qū)（LCDRULCDR2 和IXDR3);以及其中所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含分別由SEQ ID N0:20、22和24所示的 氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO : 316、318和320所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈互補性決定區(qū)（IXDRUIXDR2和IXDR3)。
[0085] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的抗體或其 抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段與任意一個本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子競 爭與Fel dl的特異性的結(jié)合。
[0086] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的抗體或其 抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段與任意的本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子結(jié)合 Fel dl上的相同表位。
[0087] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子是與Fel dl特異性地結(jié)合的分離 的人源單克隆抗體。
[0088] 在一個實施方式中，所述雙特異性抗原結(jié)合分子是與Fel dl特異性地結(jié)合的分離 的人源單克隆抗體，其中所述人源單克隆抗體是單特異性抗體或雙特異性抗體。
[0089] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含至少一 種本申請所述的雙特異性抗原結(jié)合分子和藥學上可接受的載體或稀釋劑。
[0090] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種治療對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者對 Feldl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應的患者的方法，或者治療與對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物 或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥的方法，所述方法包 括向有需要的患者給予有效量的本發(fā)明的一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分子；或者含有有 效量的本發(fā)明的一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分子的藥物組合物，其中在給予所述雙特異 性抗原結(jié)合分子后，或給予含有前述本發(fā)明的抗體或雙特異性結(jié)合分子的組合物后，病人 針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感性降低或產(chǎn)生的過敏反應被 阻止,或者針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白不發(fā)生任何敏感或產(chǎn)生過 敏反應，或者針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反 應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥降低，或者針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應的頻率和/或持續(xù)時間降低。
[0091] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了將有效量的第二治療劑與至少一種本發(fā)明的雙 特異性抗原結(jié)合分子聯(lián)用，用于減輕針對貓、貓皮屑、貓毛或者針對Fel dl蛋白產(chǎn)生的過敏 反應。所述第二治療劑可以選自下組：皮質(zhì)類固醇、支氣管擴張劑、抗組胺劑、腎上腺素、減 充血劑、另一種針對Fel dl的不同抗體和肽疫苗。
[0092] 在一個實施方式中，單獨使用一種或多個本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子的治 療，或與第二治療劑聯(lián)用的治療，可以使得患者在暴露于貓、毛皮屑或Fel dl蛋白后的過敏 性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、過敏性哮喘或過敏反應減輕。
[0093] 在第五個方面，本發(fā)明提供了編碼Fel dl抗體或其片段的核酸分子。在本發(fā)明中 還包括攜帶本發(fā)明的核酸的重組表達載體，以及引入了此類載體的宿主細胞，以及在能夠 產(chǎn)生所述抗體的條件下通過培養(yǎng)所述宿主細胞生產(chǎn)所述抗體并且回收所生產(chǎn)的抗體的方 法。
[0094] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了抗體或其片段，所述抗體或其片段包含HCVR，所 述 HCVR 由選自下組的核酸序列所編碼：SEQ ID NO :1、17、33、49、65、81、97、113、129、145、 161、177、193、209、225、241、257、273、289、305、321、337、353、369 和 459,或者與其具有至 少90%、至少95%、至少98%或至少99%的同源性的基本上一致的序列。
[0095] 在一個實施方式中，所述HCVR由選自下組的核酸序列所編碼：SEQ ID NO :17、65、 129、161、241、305、321、369 和 459。
[0096] 在一個實施方式中，所述抗體或其片段還包含LCVR，所述LCVR由選自下組的核 酸序列所編碼：SEQ ID NO :9、25、41、57、73、89、105、121、137、153、169、185、201、217、233、 249、265、281、297、313、329、345、361、377 和 467,或者與其具有至少 90%、至少 95%、至少 98 %或至少99 %的同源性的基本上一致的序列。
[0097] 在一個實施方式中，所述LCVR由選自下組的核酸序列所編碼：SEQ ID NO :25、73、 137、169、249、313、329、377 和 467。
[0098] 在一個實施方式中，本發(fā)明還提供了一種抗體或抗體的抗原結(jié)合片段，所述抗體 或抗體的抗原結(jié)合片段包含HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域由選自下組的核苷酸序列所 編碼：SEQ ID NO :7、23、39、55、71、87、103、119、135、151、167、183、199、215、231、247、263、 279、295、311、327、343、359、375和465,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至 少99%的同源性的基本上相似的序列所編碼；和LCDR3結(jié)構(gòu)域，所述LCDR3結(jié)構(gòu)域由選自 下組的核苷酸序列：SEQ ID NO :15、31、47、63、79、95、111、127、143、159、175、191、207、223、 239、255、271、287、303、319、335、351、367、383 和 473,或者與其具有至少 90%、至少 95%、 至少98%或至少99%的同源性的基本上相似的序列。
[0099] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種抗體或其片段，所述抗體或其片段包含 HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域由選自下組的核苷酸序列所編碼：SEQ ID NO :3、19、35、 51、67、83、99、115、131、147、163、179、195、211、227、243、259、275、291、307、323、339、355、 371和461，或者與其具有至少90 %、至少95 %、至少98 %或至少99 %的同源性的基本上相 似的序列；HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域由選自下組的核苷酸序列所編碼：SEQ ID NO : 5、21、37、53、69、85、101、117、133、149、165、181、197、213、229、245、261、277、293、309、325、 341、357、373和463,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%的同源性的 基本上相似的序列；LCDRl結(jié)構(gòu)域，所述LCDRl結(jié)構(gòu)域由選自下組的核苷酸序列所編碼：SEQ ID NO :11、27、43、59、75、91、107、123、139、155、171、187、203、219、235、251、267、283、299、 315、331、347、363、379和469,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%的 同源性的基本上相似的序列；以及LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域由選自下組的核苷酸序 列所編碼：SEQ ID NO :13、29、45、61、77、93、109、125、141、157、173、189、205、221、237、253、 269、285、301、317、333、349、365、381 和 471，或者與其具有至少 90%、至少 95%、至少 98% 或至少99%的同源性的基本上相似的序列。
[0100] 本申請的第六個方面提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的 一種或多種與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段和一種或多種藥 學上可接受的賦形劑。
[0101] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含治療有效量的兩種或多種與Fel dl特異 性地結(jié)合的分離的人源抗體或其抗原結(jié)合片段和一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
[0102] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0103] a)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有如SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列的HCVR和具有如 SEQ ID NO:26所示的氨基酸序列的LCVR;和
[0104] b)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR，所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO: 66、130、162、306、322、370和460 ;和LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :74、138、170、314、330、378 和 468。
[0105] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0106] a)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有如SEQ ID NO: 242所示的氨基酸序列的HCVR和具有 如SEQ ID NO:250所示的氨基酸序列的LCVR;和
[0107] b)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR，所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO: 306、322和460;和LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:314、330和 468。
[0108] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0109] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述 抗體或其抗原結(jié)合片段包含含有SEQ ID NO: 18/26的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0110] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含選自下組的HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID N0:66/74、 130/138、162/170、306/314、322/330、370/378 和 460/468。
[0111] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0112] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 18/26組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0113] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述 抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 130/138組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0114] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0115] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 18/26組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0116] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述 抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 322/330組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0117] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0118] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 18/26組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0119] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二全人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述 抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID N0:306/314組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0120] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0121] a)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 18/26組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0122] b)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 370/378組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0123] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0124] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 242/250組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0125] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述 抗體或其抗原結(jié)合片段包含選自下組的HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :306/314和 322/330。
[0126] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0127] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 242/250組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0128] 與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗 體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID N0:306/314組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0129] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含：
[0130] a)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 242/250組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對；和
[0131] b)與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含由SEQ ID NO: 322/330組成的HCVR/LCVR氨基酸序列對。
[0132] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含兩種或多種與Fel dl特異性地結(jié)合的 分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含選自下組的 HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NOs : 18/26、66/74、130/138、162/170、242/250、306/314、 322/330、370/378 和 460/468。
[0133] 在一個實施方式中，所述藥物組合物包含四個與Fel dl特異性地結(jié)合的分離的人 源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR/LCVR氨 基酸序列對：SEQ ID NO :18/26、66/74、130/138 和 162/170。
[0134] 在一個實施方式中，本發(fā)明涉及一種組合物，所述組合物是治療有效量的一種或 多種本發(fā)明的抗-Fel dl抗體或其抗原結(jié)合片段和治療有效量的第二種治療劑的組合。
[0135] 所述第二種治療劑可以是小分子藥物、蛋白/多肽、抗體、核酸分子，如反義分子 或SiRNA。所述第二種治療劑可以是合成的或天然來源的。
[0136] 所述第二種治療劑可以是與本發(fā)明的抗體或其片段有利地聯(lián)用的任意藥劑，例如 能夠阻斷Fel dl與肥大細胞或嗜堿性粒細胞上存在的IgE結(jié)合的不同于本發(fā)明所述的那 些的另一種抗體。第二種治療劑還可以是用于作為治療針對任意抗原的過敏反應的標準療 法的任意藥劑。此類第二種治療劑可以是抗組胺劑、腎上腺素、減充血劑、皮質(zhì)類固醇或肽 疫苗。
[0137] 在某些實施方式中，所述第二種治療劑可以是有助于消除或減輕與本發(fā)明所述的 抗體或其抗原結(jié)合片段相關(guān)的任意可能的副作用的藥劑，如果會發(fā)生此類副作用的話。
[0138] 還應理解，本發(fā)明的抗體和藥學上可接受的組合物可以用于聯(lián)合療法中，也就是 說，所述抗體和藥學上可接受的組合物可以與一種或多種其他所需的治療劑或醫(yī)療程序同 時、在其之前或之后施用。在聯(lián)用方案中使用的特定療法（治療劑或程序）的組合將考慮 與所需的療法和/或程序具有相容性并且能夠達到所需的治療效果。還應理解，所使用的 療法針對相同病癥可以達到所需的效果（例如，可以將抗體與用于治療相同病癥的另一種 藥劑同時給予），或其可以達到不同的效果（例如控制任何不良反應）。如本申請中使用 的，在正常情況下給予治療或預防特定疾病或狀況的附加治療劑適用于待治療的所述疾病 或狀況。
[0139] 當同時施用多種療法時，根據(jù)相關(guān)領(lǐng)域的公知常識，可以相應地調(diào)整給藥劑量。
[0140] 本發(fā)明的第七個方面提供了一種治療對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋 白敏感或產(chǎn)生過敏反應的患者的方法，或者治療與對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl 蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥的方法，所述方法包括向有需要的 患者給予有效量的與Fel dl特異性結(jié)合的一種或多種分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié) 合片段；或者含有有效量的與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種分離的人源單克隆抗體 或其片段的藥物組合物；或有效量的一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分子；或者含有有效量 的一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分子的藥物組合物，其中在給予與Fel dl特異性地結(jié)合的 一種或多種所述分離的人源單克隆抗體或其片段后，或給予與Fel dl特異性地結(jié)合的一種 或多種所述雙特異性抗原結(jié)合分子后，或給予含有任意一種或多種前述抗體或雙特異性結(jié) 合分子的組合物后，針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏 反應被阻止，或其嚴重程度和/或持續(xù)時間降低，或者與針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者 針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥被阻止或緩解，或 者針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應的頻率和/ 或持續(xù)時間或嚴重程度降低。
[0141] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物包含與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種本發(fā)明的抗體，或一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分子，所述 藥物組合物用于治療顯示出對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏 反應的患者，或者用于治療與對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏 反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥，其中針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白 的敏感或產(chǎn)生的過敏反應被阻止，或其嚴重程度和/或持續(xù)時間降低，或者與針對貓、貓皮 屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā) 癥被阻止或緩解，或者針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過 敏反應的頻率和/或持續(xù)時間或嚴重程度降低。
[0142] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了使用包含特異性地與Fel dl結(jié)合的一種或多種 本發(fā)明的抗體或一種或多種雙特異性抗原結(jié)合蛋白分子的藥物組合物在制備用于治療顯 示出對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應的患者,或者用于治 療與對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應相關(guān)的至少一種癥 狀或并發(fā)癥的藥物中的用途，其中針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感 或產(chǎn)生的過敏反應被阻止，或其嚴重程度和/或持續(xù)時間降低，或者與針對貓、貓皮屑、貓 毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥被 阻止或緩解,或者針對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反 應的頻率和/或持續(xù)時間或嚴重程度降低。
[0143] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了如上文所述的藥物組合物的用途，其中將所述 組合物與第二種治療劑聯(lián)合給予，用于減輕對貓、貓皮屑、貓毛提取物或者對Fel dl蛋白的 過敏反應。在一個實施方式中，本發(fā)明提供了如上文所述的藥物組合物的用途，其中所述第 二治療劑選自皮質(zhì)類固醇、支氣管擴張劑、抗組胺劑、腎上腺素、減充血劑、針對Fel dl的另 一種不同抗體和肽疫苗。
[0144] 在某些實施方式中，與Fel dl特異性地結(jié)合的本發(fā)明的抗體或雙特異性抗原結(jié)合 分子可能能夠在對Fel dl貓過敏原敏感的患者中減輕、最小化或阻止至少一種癥狀，如噴 嚏、充血、鼻塞、咳嗽、氣喘、支氣管痙攣、鼻炎或結(jié)膜炎。
[0145] 在一個實施方式中，與Fel dl特異性地結(jié)合的本發(fā)明的抗體或雙特異性抗原結(jié)合 分子，或者包含與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種本發(fā)明的抗體或者一種或多種抗原結(jié) 合分子的組合物可以用于預防與對Fel dl過敏相關(guān)的更嚴重的體內(nèi)并發(fā)癥，包括哮喘反 應、過敏性休克或甚至是由過敏反應導致的死亡。
[0146] 在一個實施方式中，所述藥物組合物與第二種治療劑聯(lián)合給予患者。
[0147] 在另一個實施方式中，所述第二種治療劑選自下組：抗組胺劑、腎上腺素、減充血 齊U、皮質(zhì)類固醇、針對Fel dl的另一種不同的抗體、肽疫苗和任意其他的用于減輕過敏反應 的嚴重程度或用于改善與所述過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀的姑息療法。
[0148] 通過對隨后的詳細描述的回顧，其他實施方式會更清楚。
[0149] 皿
[0150] 在對本發(fā)明的方法進行描述以前，應理解本發(fā)明不限于所描述的特定方法和實驗 條件，因為此類方法和條件是可以改變的。應理解本申請中使用的術(shù)語僅用于描述特定實 施方式的目的，并非旨在限定，因為本發(fā)明的范圍將僅由所附的權(quán)利要求進行限定。
[0151] 除非另有定義，本申請中使用的所有技術(shù)和科學術(shù)語均具有與本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng) 域普通技術(shù)人員的通常理解相同的含義。在本申請中使用的術(shù)語"約"當用于指一個特定 列舉的數(shù)值時意味著該值可以在所列舉值的不超過1%的范圍內(nèi)變動。例如，在本申請中使 用的表述"約100"包括99和101以及其間的所有值（例如99. 1、99. 2、99. 3、99. 4等）。
[0152] 盡管與本申請中描述的那些類似或等效的任意方法和材料均可以用于實踐或測 試本發(fā)明，但是現(xiàn)在將描述優(yōu)選的方法和材料。
[0153] 定義
[0154] 在本申請中使用的術(shù)語"Fel dl"或"FELD1"指至少一種Fel dl蛋白，其是自然 /天然形式的，或重組生產(chǎn)的。所述Fel dl蛋白包含或者由Fel dl的鏈1(也稱為鏈A) (SEQ ID N0:392)和 Fel dl 的鏈 2(也稱為鏈 B)(SEQ ID N0:393)組成。天然的 Fel dl 蛋白是約ISkDa的異源二聚體糖蛋白，其由來源于兩個獨立的基因的兩條鏈組成（參見 Duffort，O.A.等，（1991)，Mol. Immunol. 28:301-309 ;Kristensen，A.K.等，（1997) ,Biol. Chem. 378:899-908 ;Kaiser L.等，（2003)，J. Biol. Chem. 278 (39) : 37730-37735)。 重 組生產(chǎn)的Fel dl蛋白還如SEQ ID N0:396所示，其中該序列含有GenBank登錄號為 NP_001041619. 1的Fel dl鏈B的氨基酸殘基18至109 (無信號序列）與GenBank登錄號 為NP_001041618. 1的Fel dl鏈A的氨基酸殘基19-88 (無信號序列并且具有D27G突變， 所述D27G突變對應于SEQ ID NO: 396的101位置的甘氨酸）的融合。本發(fā)明的其他重組 生產(chǎn)的Fel dl構(gòu)建體舉例于SEQ ID NO :385、394、395和397中。
[0155] Fel dl的"鏈1"或"鏈A"是包含或者由SEQ ID N0:392的氨基酸序列或其同 源性序列組成的多肽。在本申請中使用的術(shù)語SEQ ID N0:392的同源性序列指與SEQ ID NO: 392具有高于70 %、優(yōu)選地高于80 %、更優(yōu)選地高于90 %和甚至更優(yōu)選地高于95 %的一 致性的多肽。Fel dl鏈1的氨基酸序列還以登錄號P30438或登錄號NP_001041618. 1提供 在GenBank中，其中還包括了在成熟蛋白中被除去的信號肽。
[0156] Fel dl的"鏈2"或"鏈B"是包含或者替代地由SEQ ID N0:393的氨基酸序列或 其同源性序列組成的多肽。在本申請中使用的術(shù)語SEQ ID N0:393的同源性序列指與SEQ ID NO: 393具有高于70 %、優(yōu)選地高于80 %、更優(yōu)選地高于90 %和甚至更優(yōu)選地高于95 % 的一致性的多肽。Fel dl鏈2的氨基酸序列還以登錄號P30440或登錄號NP_001041619. 1 提供在GenBank中，其中包括了在成熟蛋白中被除去的信號肽。
[0157] 在本申請中使用的術(shù)語"Fel dl片段"指包含或者由Fel dl的至少一個抗原位點 組成的多肽。在一個實施方式中，在本申請中使用的術(shù)語"Fel dl片段"指包含或者由Fel dl的至少兩個抗原位點組成的多肽。在一個實施方式中，所述抗原位點是共價連接的。在 一個實施方式中，所述抗原位點通過至少一個肽鍵連接。在一個實施方式中，所述兩個抗原 位點通過至少一個肽鍵和所述抗原位點之間的間隔區(qū)（spacer)連接。在一個實施方式中， 所述至少兩個抗原位點既來自Fel dl的鏈1和又來自Fel dl的鏈2。在一個實施方式中， 所述至少兩個抗原位點包含GenBank登錄號P30438的氨基酸序列23-92和GenBank登錄 號P30440的氨基酸序列18-109。在一個實施方式中，所述至少兩個抗原位點既來自Fel dl 的鏈1和又來自Fel dl的鏈2。在一個實施方式中，所述至少兩個抗原位點包含GenBank 登錄號NP_001041618. 1的氨基酸序列19-88和GenBank登錄號NP_001041619. 1的氨基酸 序列18-109。在一個實施方式中，所述至少兩個抗原位點包含在SEQ ID NO :385、394、395、 396或397以內(nèi)的任何一個氨基酸序列。在一個實施方式中，任意的所述Fel dl片段均能 夠在體內(nèi)誘導產(chǎn)生與天然存在的Fel dl或者與重組產(chǎn)生的Fel dl特異性地結(jié)合的抗體。
[0158] 在本申請中使用的術(shù)語"抗體"指任意抗原結(jié)合分子或分子復合物，其包含至少一 個與特定抗原（例如Fel dl)特異性地結(jié)合或相互作用的互補性決定區(qū)（CDR)。在本申請 中使用的術(shù)語"抗體"旨在指由兩條重鏈（H)和兩條輕鏈（L)之間通過二硫鍵連接的四條 多肽鏈組成的免疫球蛋白分子（即"全抗體分子"）及其多聚體（例如IgM)或其抗原結(jié)合 片段。各條重鏈由重鏈可變區(qū)（"HCVR"或"V H"）和重鏈恒定區(qū)（由結(jié)構(gòu)域 組成）組成。各條輕鏈由輕鏈可變區(qū)（"LCVR"或"八"）和輕鏈恒定區(qū)（CJ組成。所述Vh 和'區(qū)可以進一步細分為高變區(qū)，也稱為互補性決定區(qū)（CDR)，其分散在稱為框架區(qū)（FR) 的更加保守的區(qū)域中。各Vh和 '由三個CDR和四個FR組成，其從氨基末端到羧基末端按 照下述順序排列：FRl、CDRl、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在本發(fā)明的某些實施方式中，所述 抗體（或其抗原結(jié)合片段）的FR可以與人源種系序列相同，或者可以是天然的或經(jīng)人工修 飾的。可以基于對兩個或多個CDR的并行（side-by-side)分析定義氨基酸的共有序列。
[0159] 也可以取代一個或多個⑶R殘基或去除一個或多個⑶R。在科學文獻中已經(jīng) 描述了一些抗體，其中的一個或兩個⑶R對結(jié)合而言可以去除。Padlan等（1995FASEB J. 9:133-139)基于已發(fā)表的晶體結(jié)構(gòu)分析了抗體與其抗原之間的接觸區(qū)并且得出結(jié)論， 實際上僅有約五分之一至三分之一的⑶R殘基與所述抗原接觸。Padlan還發(fā)現(xiàn)多種抗 體，其中的一個或兩個⑶R中沒有氨基酸與抗原接觸（亦參見Vajdos等，（2002)，J Mol Biol320:415-428)。
[0160] 不接觸抗原的⑶R殘基可以基于此前的研究（例如在⑶RH2中的殘基H60-H65通 常是不需要的）通過分子建模和/或經(jīng)驗從Chothia⑶R以外的Kabat⑶R區(qū)中鑒定。如 果CDR或其殘基被省略，則其通常被在另一個人源抗體序列或此類序列中占據(jù)相應位置的 氨基酸取代。在CDR中的取代位置和取代用的氨基酸也可以根據(jù)經(jīng)驗選擇。經(jīng)驗取代可以 是保守的或非保守的取代。
[0161] 在本申請中所公開的與Fel dl特異性地結(jié)合的全人源單克隆抗體與相應的種系 序列相比，可以在重鏈和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域的框架和/或CDR區(qū)中包含一個或多個氨基酸取 代、插入和/或缺失。通過將本申請所公開的氨基酸序列與從例如公共抗體序列數(shù)據(jù)庫中 獲得的種系序列進行比較能夠容易地確定此類突變。本發(fā)明包括抗體及其抗原結(jié)合片段， 其來源于任意本申請所公開的氨基酸序列，其中在一個或多個框架和/或CDR區(qū)中的一個 或多個氨基酸被突變?yōu)樗隹贵w來源的種系序列的相應殘基，或另一種人源種系序列的相 應的殘基?；蛘咚鱿鄳姆N系殘基的保守的氨基酸取代（在本申請中將此類序列統(tǒng)稱為 "種系突變"）。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員以本申請所公開的重鏈和輕鏈可變區(qū)序列作為起始 能夠容易地生產(chǎn)多種抗體和抗原結(jié)合片段，所述抗體和抗原結(jié)合片段包含一個或多個單獨 的種系突變或其組合。在某些實施方式中，在所述V h和/或' 結(jié)構(gòu)域中的全部框架和/或 CDR殘基均突變回在所述抗體源自的原始種系序列中存在的殘基。在其他實施方式中，僅某 些殘基突變回原始種系序列，例如僅在FRl的前8個氨基酸或在FR4的后8個氨基酸中存 在突變的殘基，或者僅在CDRl、CDR2或CDR3中存在突變的殘基。在其他實施方式中，一個 或多個框架和/或CDR殘基突變?yōu)椴煌N系序列中的相應的殘基（即該種系序列不同于所 述抗體原始來源的種系序列）。而且，本發(fā)明的抗體在框架和/或CDR區(qū)中可以包含兩種 或多種種系突變的任意組合，例如某些個別的殘基突變成特定種系序列的相應殘基，而不 同于原始種系序列的某些其他殘基仍保持不變或突變成不同種系序列的相應殘基。一旦獲 得，能夠針對一個或多個所需的性質(zhì)容易地對含有一個或多個種系突變的抗體和抗原結(jié)合 片段進行檢測，如改善的結(jié)合特異性、增加的結(jié)合親和性、改善的或增加的拮抗或激動的生 物學性質(zhì)（可視情況而定）、降低的免疫原性等。采用這種一般方法獲得的抗體和抗原結(jié)合 片段包含在本發(fā)明中。
[0162] 本發(fā)明還包括全人源單克隆抗體，所述全人源單克隆抗體包含本申請所公開的任 意HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列的具有一個或多個保守的取代的變體。例如，本發(fā)明 包括抗體，所述抗體相對于本申請所公開的任意HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列具有帶 有例如10個或更少的、8個或更少的、6個或更少的、4個或更少的等等保守的氨基酸取代的 HCVR、LCVR和/或CDR氨基酸序列。
[0163] 在本申請中使用的術(shù)語"人源抗體"旨在包括具有來源于人源種系免疫球蛋白序 列的可變區(qū)和恒定區(qū)的抗體。本發(fā)明的人源mAb例如在CDR中和特別是在CDR3中可以包 括不是由人源種系免疫球蛋白序列編碼的氨基酸殘基（例如在體外由隨機或位點特異性 誘變作用或者在體內(nèi)由體細胞突變引入的突變）。然而，在本申請中使用的術(shù)語"人源抗體" 并不旨在包括來源于另一個哺乳動物物種（例如小鼠）種系的CDR序列已被移植上人FR 序列的mAb。
[0164] 在本申請中使用的表述"抗原結(jié)合分子"指蛋白、多肽或分子復合物，包含或由至 少一個互補性決定區(qū)（CDR)組成，其獨自或與一個或多個其他的CDR和/或框架區(qū)（FR)聯(lián) 合后特異性地與特定抗原結(jié)合。在某些實施方式中，抗原結(jié)合分子是根據(jù)本申請其他部分 所定義的那些術(shù)語的抗體或抗體的片段。
[0165] 在本申請中使用的表述"雙特異性抗原結(jié)合分子"指蛋白、多肽或分子復合物，其 至少包含第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域和第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域（即兩個臂）。在所述雙特異性抗 原結(jié)合分子中的各個抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域均包含至少一個CDR，其獨自或者與一個或多個其他 CDR和/或FR聯(lián)合后特異性地結(jié)合特定抗原。在本發(fā)明的上下文中，所述第一抗原結(jié)合結(jié) 構(gòu)域特異性地結(jié)合Fel dl上的第一抗原，以及所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域特異性地結(jié)合Fel dl上的第二個不同的抗原。
[0166] 術(shù)語"特異性地結(jié)合"或"特異性地與……結(jié)合"等類似表達指抗體或其抗原結(jié)合 片段與抗原在生理條件下形成相對穩(wěn)定的復合物。特異性地結(jié)合可表征為平衡解離常數(shù)為 至少約IxKT 6M或更?。ɡ鏚d越小表示結(jié)合越緊密）。用于確定兩個分子是否特異性地 結(jié)合的方法是本領(lǐng)域的公知常識，包括例如平衡透析、表面等離子體共振等。如本申請所公 開的，已通過表面等離子體共振例如BIACORE?對抗體進行了鑒定，其與Fel dl特異性地結(jié) 合。而且，如本申請所使用的，將與Fel dl和一種或多種其他抗原結(jié)合的多特異性抗體或 與Fel dl的兩個不同區(qū)域（例如Fel dl的鏈1和/或鏈2)結(jié)合的雙特異性抗體也認為 是"特異性地結(jié)合"的抗體。
[0167] 術(shù)語"高親和性"抗體指根據(jù)表面等離子體共振例如BIAC0RE?或溶液親和性 ELISA檢測，具有至少KT 8M ;優(yōu)選地KT9M ;更優(yōu)選地KTkiM,甚至更優(yōu)選地KT11M,甚至更優(yōu) 選地KT12M的與Fel dl的結(jié)合親和性（以Kd表示）的mAb。
[0168] 術(shù)語"緩慢解離速率"、"Koff"或"kd"指根據(jù)表面等離子體共振例如BIACORE?的 檢測，以lx KT3S4或更低的，優(yōu)選地Ix ΙΟΛΓ1或更低的速率常數(shù)從Fel dl上解離的抗體。
[0169] 在本申請中使用的術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"、抗體的"抗原結(jié)合片段"等類似表 達包括特異性地與抗原結(jié)合以形成復合物的任意天然存在的、酶促獲得的、合成的或基因 工程改造的多肽或糖蛋白。在本申請中使用的術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"或"抗體片段" 指一個或多個抗體的片段，所述抗體的片段保持了與Fel dl結(jié)合的能力。
[0170] 在特定的實施方式中，本發(fā)明的抗體或抗體的片段可以與治療性部分綴合（"免疫 綴合"），如皮質(zhì)類固醇、第二抗-Fel dl抗體、腎上腺素、疫苗、或者任意其他用于治療針對 Fel dl的過敏反應的治療性部分。
[0171] 在本申請中使用的"分離的抗體"旨在指一種抗體，其基本上不含具有不同抗原特 異性的其他抗體（Ab)(例如特異性地與Fel dl或其片段結(jié)合的分離的抗體，基本上不含特 異性地與Fel dl以外的其他抗原結(jié)合的Ab)。
[0172] 在本申請中使用的"阻斷抗體"或"中和抗體"（或"中和Fel dl活性的抗體"）旨 在指與Fel dl結(jié)合結(jié)果導致Fel dl的至少一種生物活性抑制的抗體或其抗原結(jié)合部分。 例如，本發(fā)明的抗體能夠有助于阻止針對Fel dl的原發(fā)性過敏反應?；蛘?，本發(fā)明的抗體 能夠顯示出阻止針對Fel dl的繼發(fā)性過敏反應,或針對Fel dl的過敏反應的至少一種癥 狀，包括噴嚏、咳嗽、哮喘狀況或由Fel dl導致的過敏性反應的能力。可以通過使用多種標 準的體外或體內(nèi)檢測中的一種或多種（如如本申請所述的被動皮膚過敏反應檢測）或者本 領(lǐng)域公知的其他體內(nèi)檢測（例如，其他動物模型用以觀察在給予一種或多種本發(fā)明的抗體 后對Fel dl攻擊的保護）來測定一個或多個Fel dl生物活性的指示指標，進而評估這種 Fel dl生物活性的抑制。
[0173] 在本申請中使用的術(shù)語"表面等離子體共振"指，通過檢測在生物傳感基質(zhì)中的 蛋白濃度變化能夠分析實時的生物分子相互作用的光學現(xiàn)象，例如使用BIACORE?系統(tǒng) (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, N. J. )〇
[0174] 在本申請中使用的術(shù)語"KD"旨在指特定抗體-抗原相互作用的平衡解離常數(shù)。
[0175] 術(shù)語"表位"指抗原決定簇，其與被稱為互補位的在抗體分子的可變區(qū)中的特異性 抗原結(jié)合位點相互作用。一個抗原可以具有一個以上的表位。因此，不同抗體可以與抗原 上的不同區(qū)域結(jié)合并且可以具有不同的生物效應。術(shù)語"表位"還指B和/或T細胞針對 其產(chǎn)生應答的抗原上的位置。其還指與抗體結(jié)合的抗原上的區(qū)域。表位可以是線形的或具 有構(gòu)象的。線形表位是由多肽鏈中相鄰的氨基酸殘基產(chǎn)生的。具有構(gòu)象的表位是由線形多 肽鏈的不同區(qū)段在空間上靠近的氨基酸產(chǎn)生的。在某些實施方式中，表位可以包括決定簇， 所述決定簇是具有化學活性的表面分子組群，如氨基酸、糖側(cè)鏈、磷酰基或磺?；驮谀?些實施方式中，可以具有特異性的三維結(jié)構(gòu)特征和/或特異性的電荷特征。還可以根據(jù)結(jié) 構(gòu)或功能對表位進行定義。功能性表位通常是結(jié)構(gòu)性表位的一個亞組并且具有與相互作用 的親和性直接相關(guān)的那些殘基。由相鄰的氨基酸形成的表位在暴露于變性溶劑后通常會保 留，而由三級結(jié)構(gòu)折疊形成的表位在使用變性溶劑處理后通常會喪失。表位在獨特的空間 構(gòu)象中通常包括至少3個，更通常地至少5個或8-10個氨基酸。
[0176] 術(shù)語"基本上的一致性"或"基本上一致的"當涉及核酸或其片段時表示，當引入 適當?shù)暮塑账岵迦牖蛉笔б耘c其他核酸（或其互補鏈）進行最佳比對時，核苷酸序列的一 致性至少約90 %，更優(yōu)選地至少約95 %、96 %、97 %、98 %或99 %的核苷酸堿基，由如下文 所討論的任意本領(lǐng)域熟知的序列一致性算法如FASTA、BLAST或GAP對結(jié)果進行測定。在某 些例子中，與對照核酸分子具有基本上的一致性的核酸分子可以編碼一多肽，該多肽與由 所述對照核酸分子編碼的所述多肽具有相同或基本上相似的氨基酸序列。
[0177] 在用于多肽時，術(shù)語"基本上的相似性"或"基本上相似的"指，當通過使用如GAP 或BESTFIT等程序在缺省缺口權(quán)重時對兩條多膚序列進彳丁最佳比對時，具有至少90 %的序 列一致性，甚至更優(yōu)選地至少95%、98%或99%的序列一致性。優(yōu)選地，不相同的殘基位 置的差別為保守性氨基酸取代。"保守性氨基酸取代"是氨基酸殘基被帶有具相似化學性 質(zhì)（例如電荷或疏水性）的側(cè)鏈（R基團）的另一個氨基酸取代。在通常情況下，保守性 氨基酸取代將不會改變蛋白的功能性性質(zhì)。當兩個多個氨基酸序列彼此之間的差別為保 守性取代時，可以對相似性的百分比或程度進行上調(diào)以校正所述取代的保守性性質(zhì)。用于 進行這種調(diào)整的方法是本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的。（參見例如Pearson(1994)Methods Mol. Biol. 24:307-331)。含有具有相似化學性質(zhì)的側(cè)鏈的氨基酸基團的示例包括：1)脂肪族 側(cè)鏈：甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸和異亮氨酸；2)羥基脂肪族側(cè)鏈：絲氨酸和蘇氨酸； 3)含有酰胺的側(cè)鏈：天冬酰胺和谷氨酰胺；4)芳香側(cè)鏈：苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸；5)堿 性側(cè)鏈：賴氨酸、精氨酸和組氨酸；6)酸性側(cè)鏈：天冬氨酸和谷氨酸；和7)含硫側(cè)鏈：半胱 氨酸和甲硫氨酸。優(yōu)選的保守性氨基酸取代基團是：纈氨酸-亮氨酸-異亮氨酸、苯丙氨 酸-酪氨酸、賴氨酸、精氨酸、丙氨酸-纈氨酸、谷氨酸-天冬氨酸和天冬酰胺-谷氨酰胺。 或者，保守性取代是在Gonnet等（（1992) Science 256:144345)所公開的PAM250對數(shù)-似 然性矩陣中具有正值的任意改變。"適度的保守性"取代是在PAM250對數(shù)似然性矩陣中具 有非負值的任意改變。
[0178] 多肽的序列相似性通常使用序列分析軟件測定。蛋白分析軟件對相似序列進行匹 配，針對不同取代、缺失和其他修飾包括保守性氨基酸取代分配相似性的參數(shù)。例如，含有 程序如GAP和BESTFIT的GCG軟件可以使用缺省參數(shù)用于確定密切相關(guān)的多肽之間的序列 同源性或序列一致性，如來自不同物種生物體的或者野生型蛋白與其突變蛋白之間的同源 性多肽。參見例如GCG 6.1版。也可以使用采用缺省或推薦參數(shù)的FASTA(在GCG 6.1版 中的程序）對多肽序列進行比較。FASTA(例如FASTA2和FASTA3)提供了查詢和檢索序列 之間最佳重疊區(qū)域的比對和序列一致性百分率（Pearson (2000)，如上所述）。當將本發(fā)明 的序列與包含來自不同生物體的大量序列的數(shù)據(jù)庫進行比較時，另一種優(yōu)選的算法是計算 機程序BLAST，特別是使用缺省參數(shù)的BLASTP或TBLASTN。（參見例如Altschul等，（1990) J. Mol. Biol. 215:403410 和（1997)Nucleic Acids Res. 25:3389402)。
[0179] 在特定實施方式中，在本發(fā)明的方法中使用的抗體或抗體片段可以是單特異性 的、雙特異性的或多特異性的。多特異性抗體可以特異性地針對一個靶多肽的不同表位或 者可以含有特異性地針對一個以上靶多肽表位的抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域。能夠用于本發(fā)明的上 下文中的一個示例性的雙特異性抗體形式涉及使用第一免疫球蛋白（Ig)C^結(jié)構(gòu)域和第二 Ig CH3結(jié)構(gòu)域，其中所述第一和第二Ig CH3結(jié)構(gòu)域彼此之間至少存在一個氨基酸的差異， 并且其中與不存在氨基酸差異的雙特異性抗體相比，至少一個氨基酸的差異降低了所述雙 特異性抗體與蛋白A的結(jié)合。在一個實施方式中，所述第一 Ig CH3結(jié)構(gòu)域結(jié)合蛋白A和所 述第二Ig CH3結(jié)構(gòu)域含有降低或消除與蛋白A的結(jié)合的突變?nèi)鏗95R修飾（根據(jù)IMGT外 顯子編號；根據(jù)EU編號為H435R)。所述第二C H3還可以包含Y96F突變（根據(jù)MGT ;根據(jù) EU為Y436F)?？梢源嬖谟谒龅诙﨏H3中的其他修飾包括：在IgGlmAb的情況下為D16E、 L18M、N44S、K52N、V57M 和 V82I (根據(jù)頂GT ;根據(jù) EU 為 D356E、L358M、N384S、K392N、V397M 和 V422I);在 IgG2mAb 的情況下為 N44S、K52N 和 V82I(MGT ;根據(jù) EU 為 N384S、K392N 和 V422I);以及在 IgG4mAb 的情況下為 〇151?、財45、1(52隊￥57]\1、1?691(479〇和￥821(根據(jù)頂61'; 根據(jù) EU 為 Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q 和 V422I)。上文所述的雙特異性抗 體形式的變體均包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0180] 短語"治療有效量"指給予后產(chǎn)生所需效果的量。精確的量將取決于治療目的，并 且將由本領(lǐng)域技術(shù)人員使用公知的技術(shù)確定（參見例如Lloyd(1999)The Art，Science and Technology of Pharmaceutical Compounding)〇
[0181] 本發(fā)明的抗體可以用于使對貓敏感的個體"脫敏"。在本申請中將術(shù)語"脫敏"定 義為在暴露于貓、貓皮屑或其產(chǎn)物例如Fel dl后降低對貓敏感的個體的過敏反應性（使其 水平低于貓敏感性個體平時經(jīng)歷的程度）。
[0182] -般性描述
[0183] 家貓是多種室內(nèi)過敏原的來源并且在已證實對貓過敏原敏感的個體中癥狀 嚴重程度的范圍從相對輕微的鼻炎和結(jié)膜炎到可能威脅生命的哮喘狀況（Lau，S.等， (2000)，Lancet356:1392-1397)。盡管已證實對貓具有此類敏感的患者似乎對在貓皮屑 和毛皮中發(fā)現(xiàn)的不同分子均會產(chǎn)生反應，但主要的過敏原似乎是Fel dl (家貓屬過敏原 1)。已發(fā)現(xiàn)80%以上對貓過敏的患者具有針對這種過敏原的IgE抗體（van Ree, R.等， (1999)，J. Allergy Clin. Immunol 104:1223-1230)。
[0184] Fel dl蛋白是約18kDa的異源二聚體酸性糖蛋白，所述蛋白含有約10-20% 的N-連接糖類。每個異源二聚體均包含分別由兩個獨立的基因編碼的兩條多肽鏈 (Duffort，OA 等，（1991)，Mol. Immunol. 28:301-309 ;Morgenstern，JP 等，（1991) ,PNAS 88:9690-9694 !Griffith, LJ.等，（1992) ,Gene 113:263-268)。鏈 1 包含約 70個氨基酸 殘基而鏈2包含約90-92個氨基酸殘基。有人提出，在天然的Fel dl中由三個鏈間二硫 鍵連接兩條鏈（Kristensen，A.K.等，（1997)，Biol. Chem. 378:899-908)，并且這在重組 Fel dl 的晶體結(jié)構(gòu)中得到了確證（Kaiser, L.等，（2003)，J. Biol. Chem. 278:37730-37735; Kaiser, L.等，（2007)，J. Mol. Biol. 370:714-727)。盡管有時單獨將各條鏈稱為"Fel dl"， 但是作為完整的蛋白過敏原需要兼具這兩條鏈。
[0185] Fel dl由皮脂腺、鱗狀腺和鱗狀上皮細胞產(chǎn)生并且通過舔和梳毛轉(zhuǎn)移至毛皮 (Bartholome, K.等，(1985), J. Allergy Clin. Tmmunol. 76: 503-506 ；Charpin, C.等， (1991)，J.Allergy Clin. Immunol.88:77_82 ;Dabrowski, A. J. (1990)，等，J. Allergy Clin. Immunol. 86:462-465)。其還存在于唾液腺、肛門腺和淚腺中（Andersen，M.C.等， (1985), J. Allergy Clin. Immunol. 76:563-569 ;van Milligen, F. J. (1992)，等，Int. Arch. Allergy Appl. Immunol. 92(4) :375-378)并且似乎主要儲存在皮膚和毛皮中（Mata, P.等， (1992)，Ann. Allergy69(4):321-322)。
[0186] Fel dl蛋白對動物具有未知的功能，但是導致敏感人群的IgG或IgE反應（稱為 過敏或哮喘反應）。盡管其他貓過敏原是已知的，包括Fel d2(白蛋白）和Fel d3(胱抑 素），但是60%-90%的抗貓IgE是直接針對Feldl產(chǎn)生的（Leitermann，K.等，（1984)，J Allergy Clin. Tmmunol. 74:147-153 ；Lowenstein, Η.等，(1985), Allergy 40:430-441 ； van Ree，R.等，（1999)，J. Allergy Clin. Immunol. 104:1223-1230 ;Ichikawa，K.等， (2011), Clin. Exp. Allergy, 31:1279-1286)〇
[0187] 免疫球蛋白E(IgE)負責I型超敏反應，其表現(xiàn)為過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、花粉 熱、過敏性哮喘、蜂毒過敏和食物過敏。IgE在血液中循環(huán)并且與在嗜堿性和肥大細胞上針 對IgE的高親和性Fe eRla受體結(jié)合。在大部分的過敏反應中，過敏原通過吸入、攝食或 通過皮膚進入機體。然后過敏原與預先已經(jīng)與肥大細胞和嗜堿性粒細胞表面上的高親和性 受體結(jié)合的IgE結(jié)合，導致若干IgE分子交聯(lián)并且觸發(fā)導致各種過敏癥狀的組胺和其他炎 性介質(zhì)的釋放。
[0188] 對于貓過敏癥的治療包括脫敏療法，所述療法涉及反復注射增加劑量的貓皮屑 粗提物或來源于Fel dl的短肽。使用貓皮屑的粗提物，Lilja等證實了在進行這種治 療三年后，對貓過敏的患者仍顯示出全身癥狀（Lilja，Q.等，（1989)，J.Allergy Clin. Immunol. 83:37-44 和 Hedlin 等，（1991)，J. Allergy Clin. Immunol. 87:955-964)。使 用來源于Fel dl的短肽脫敏后，在肽組和安慰劑對照組之間未產(chǎn)生具有顯著性的差異 (Oldfield, W. L 等，（2002)，Lancet, 360:47-53)。僅當給予患者大量（750ug)短肽時才能觀 察到有效性（Norman，P.S.等，（1996)，Am.J. Respir. Crit. Care Med. 154:1623-1628)。而 且，在給予貓皮屑粗提物的患者中以及在給予短Fel dl肽治療的患者中均有哮喘反應的報 道。因此，在貓過敏癥治療領(lǐng)域中需要一種用于治療對貓過敏原特別是Fel dl敏感的患者 的替代性策略。
[0189] 已建議將抗體作為過敏癥的一般性治療策略，因為其可能能夠阻止過敏原分子進 入粘膜組織，或者可以在過敏原分子有機會與同肥大細胞或嗜堿性粒細胞上的高親和性受 體相結(jié)合的IgE結(jié)合之前與所述過敏原結(jié)合，從而阻止組胺和其他炎性介質(zhì)從這些細胞 中釋放。美國專利號5, 670, 626描述了單克隆抗體通過阻止過敏原與粘膜組織的結(jié)合， 治療IgE介導的過敏性疾病如過敏性鼻炎、過敏性哮喘和過敏性結(jié)膜炎的用途。美國專 利號6, 849, 259描述了使用過敏原特異性地抗體在過敏癥的體內(nèi)小鼠模型中抑制過敏性 炎癥。已對基于牛奶和基于蛋類的抗體系統(tǒng)進行了描述。例如，US20030003133A1公開了 使用牛奶作為過敏原的載體誘導對貓鱗屑和其他過敏原的口服耐受。在US2010/0143266 中描述了通過使用抑制過敏原與肥大細胞結(jié)合能力的分子降低在動物中對環(huán)境中的過 敏原的過敏反應的組合物和方法。de Groot等（de Groot等，（1988)，J.Allergy Clin. Immunol. 82:778-786)描述了針對Fel dl的其他抗體。
[0190] 已證實本申請所述的全人源抗體特異性地與Fel dl結(jié)合并且可以用于治療患有 貓過敏癥的患者，特別是已證實對Fel dl過敏原具有敏感性的患者。此類抗體的該用途可 能是治療患有針對貓皮屑的過敏癥的患者的有效方法，或者可以將其用于阻止再次暴露后 針對Feldl的加強反應，或阻止與所述過敏癥相關(guān)的并發(fā)癥狀，或者可以將其用于減輕與 首次暴露于貓攜帶的Fel dl過敏原相關(guān)的過敏反應或再次暴露后伴隨的癥狀相關(guān)的過敏 反應的嚴重程度和/或持續(xù)時間。其可以單獨使用或者作為本領(lǐng)域公知的用于治療此類過 敏癥的其他治療性部分或形式的輔助療法，例如但不限于使用皮質(zhì)類固醇或腎上腺素的治 療。其可以與第二種或第三種特異性地針對Fel dl的不同抗體聯(lián)用。其可以用于抗原特 異性免疫療法（SIT)。
[0191] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體來自使用初始免疫原免疫的小鼠，如天然的 Fel dl，其可以從商業(yè)上購買獲得（參見例如室內(nèi)生物技術(shù)公司，#NA-FDl-2)或者可以 通過重組生產(chǎn)獲得。在某些實施方式中，所述免疫原可以是順序或同時給予的Fel dl的 鏈1，或Fel dl的鏈2,或者可以是鏈1和鏈2的組合。鏈1的全長氨基酸序列（也稱為 FELDlA)如SEQIDN0:392所示。鏈l的全長氨基酸序列可以在GenBank登錄號P30438和 NP_001041618. 1中找到。鏈2的全長氨基酸序列（也稱為FELD1B)如SEQ ID N0:393所 示。鏈2的全長氨基酸序列可以在GenBank登錄號PP30440和NP_001041619. 1中找到。
[0192] 在某些實施方式中，所述重組生產(chǎn)的Fel dl免疫原可以通過直接將Fel dl的兩 條鏈融合制備，如Kaiser等所述，以生產(chǎn)與天然Fel dl具有相似再折疊類型的融合產(chǎn)物 (Kaiser, L 等，（2003)，J. Bioh Chem. 278 (39) : 37730-37735)。在某些實施方式中，所述免 疫原可以是如在SEQ ID勵：385、394、395、396或397的構(gòu)建體中所示的融合蛋白，隨后再 使用第二免疫原免疫，或使用天然或重組生產(chǎn)的Fel dl具有致免疫活性的片段免疫。
[0193] 所述免疫原可以是天然或重組生產(chǎn)的Fel dl具有生物活性的和/或免疫原性的 片段，或編碼其活性片段的DNA。所述片段可以來源于鏈1或鏈2的N-末端或C-末端，或 者來自于鏈1和鏈2二者的N-末端或C-末端。用于作為制備針對Fel dl的抗體的免疫 原的片段可以來自鏈1或鏈2中的任意位點。
[0194] 在某些實施方式中，所述免疫原可以是包含下述中的任意一個或多個的融合蛋 白：i)通過C末端直接與Fel dl鏈1的氨基酸殘基23-92 (參見GenBank登錄號P30438， 亦參見SEQ ID NO: 392)的N-末端融合的Fel dl鏈2的氨基酸殘基18-109 (SMGenBank 登錄號P30440,亦參見SEQ ID NO: 393) ;ii)通過C末端直接與Fel dl鏈2的氨基酸殘基 18-109(參見GenBank登錄號P30440,亦參見SEQ ID N0:393))的N-末端融合的Fel dl 鏈1的氨基酸殘基23-92(參見GenBank登錄號P30438,亦參見SEQ ID NO: 392) ;iii)通過 C末端直接與Fel dl鏈1的氨基酸殘基19-88 (參見GenBank登錄號NP_001041618. 1)的 N末端融合的Fel dl鏈2的氨基酸殘基18-109 (參見Genbank登錄號NP_001041619. 1)， 例如如SEQ ID NO: 394or 396所示的構(gòu)建體；iv)通過C末端與Fel dl鏈2的氨基酸殘基 18- 109(參見GenBank登錄號NP_001041619. 1)的N末端融合的Fel dl鏈1的氨基酸殘基 19- 88(參見GenBank登錄號NP_001041618.1)。亦參見SEQ ID NO: 395。在某些實施方式 中，所述融合蛋白可以在所述構(gòu)建體的C末端具有標簽，如myc-myc-六聚組氨酸標簽（對 于此類構(gòu)建體參見SEQ ID NO :385、396或397)。在相關(guān)的實施方式中，所述融合蛋白可以 具有偶聯(lián)于所述構(gòu)建體的C末端的小鼠抗體Fc區(qū)（對于此類構(gòu)建體參見SEQ ID NO :394或 395)。在某些實施方式中，鏈1和2通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的接頭偶聯(lián)，例如（G4S) 3(對 于此類構(gòu)建體參見SEQ ID NO :395和397)。
[0195] 在某些實施方式中，可以使用上文所述區(qū)域的片段、或從本申請所述區(qū)域的N或C 末端之一或兩端延伸出指定區(qū)域約5至約20個氨基酸殘基的肽制備特異性地與Fel dl結(jié) 合的抗體。某些實施方式中，上文所述區(qū)域或其片段的任意組合可以用于制備Fel dl特異 性抗體。在某些實施方式中，上文所述Fel dl區(qū)域中的任意一個或多個或其片段可以用于 制備單特異性、雙特異性或多特異性抗體。
[0196] 抗體的抗原結(jié)合片段
[0197] 除非另有特別指明，本申請中使用的術(shù)語"抗體"將被理解為包含兩條免疫球蛋白 重鏈和兩條免疫球蛋白輕鏈的抗體分子（即"全抗體分子"）及其抗原結(jié)合片段。在本申請 中使用的術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"、抗體的"抗原結(jié)合片段"等類似表述包括任意天然存 在的、酶促獲得的、合成的或基因工程改造的多肽或糖蛋白，其特異性地與抗原結(jié)合以形成 復合物。在本申請中使用的術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"或"抗體片段"指一個或多個抗體 的片段，所述抗體的片段保持了與Fel dl的鏈1和/或鏈2特異性地結(jié)合的能力。抗體的 片段可以包括Fab片段、F(ab'）2片段、Fv片段、dAb片段、含有⑶R的片段或分離的⑶R。 抗體的抗原結(jié)合片段可以來源于例如使用任意適宜的標準技術(shù)制備的全抗體分子，如涉及 編碼抗體可變和（任選地）恒定結(jié)構(gòu)域的DNA操作和表達的蛋白水解消化或重組基因工程 技術(shù)。此類DNA是已知的和/或易于從例如商業(yè)來源、DNA文庫（包括例如噬菌體-抗體 文庫）獲得，或者能夠被合成。所述DNA可以被測序和化學操作或通過使用分子生物學技 術(shù)例如以便將一個或多個可變和/或恒定結(jié)構(gòu)域排布成適宜的構(gòu)型，或者引入密碼子，形 成半胱氨酸殘基，修飾、增加或缺失氨基酸等。
[0198] 抗原結(jié)合片段的非限制性示例包括：（i)Fab片段；（ii)F(ab'）2片段；（iii)Fd片 段；（iv) Fv片段；(V)單鏈Fv(scFv)分子；(vi) dAb片段；和（vii)最小識別單位，由模擬 抗體的高變區(qū)（例如分離的互補性決定區(qū)（CDR)如CDR3肽）的氨基酸殘基或受束縛的 FR3-CDR3-FR4肽組成。其他經(jīng)工程改造的分子，如結(jié)構(gòu)域特異性抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、結(jié)構(gòu) 域缺失抗體、嵌合抗體、CDR移植抗體、雙體、三體、四體、微抗體、納米抗體（例如單價納米 抗體、二價納米抗體等）、小型模塊化免疫藥物（SMIP)和鯊魚可變IgNAR結(jié)構(gòu)域也均包括在 本申請所使用的表述"抗原結(jié)合片段"中。
[0199] 抗體的抗原結(jié)合片段將通常包含至少一個可變結(jié)構(gòu)域。所述可變結(jié)構(gòu)域可以是任 意尺寸或氨基酸的組合并且通常包含至少一個CDR，其與一個或多個框架序列鄰近或在框 架中。在具有與 '結(jié)構(gòu)域結(jié)合的Vh結(jié)構(gòu)域的抗原結(jié)合片段中，所述V1^P '結(jié)構(gòu)域所處的 位置可以相對于彼此是任意適宜的排布。例如，所述可變區(qū)可以是二聚化的并且含有VH-V H、 Vh-'或 二聚體?；蛘撸隹贵w的抗原結(jié)合片段可以含有單體V h或 '結(jié)構(gòu)域。
[0200] 在某些實施方式中，抗體的抗原結(jié)合片段可以含有與至少一個恒定結(jié)構(gòu)域共價 連接的至少一個可變結(jié)構(gòu)域?？赡茉诒景l(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段中發(fā)現(xiàn)的可變和恒定結(jié) 構(gòu)域的非限制性、示例性構(gòu)型包括：（i)V H-CHl ;(ii)VH-CH2 ;(iii)VH-CH3 ;(iv)VH-CHl-CH2 ; (v) Vh-ChI-Ch2-Ch3 ； (vi)VH-CH2-CH3 ； (vii) Vh-Cl ； (viii) Vl-ChI ； (ix)VL-CH2 ； (x)VL-CH3 ； (xi) VL-CH1-CH2 ; (xii)VL-CH1-CH2-CH3 ; (xiii)VL-CH2-CH3 ;和（xiv)VL-CL。在包括上文所列出的任 意示例性構(gòu)型的可變和恒定結(jié)構(gòu)域的任意構(gòu)型中，所述可變和恒定結(jié)構(gòu)域可以直接彼此間 連接或者可以通過完全或部分的鉸鏈或接頭區(qū)連接。鉸鏈區(qū)可以含有至少2個（例如5、 10、15、20、40、60個或更多個）氨基酸，這使得在單一多肽分子中相鄰的可變和/或恒定結(jié) 構(gòu)域之間是柔性或半柔性的鍵。而且，本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段可以包含如上文所列的 任意可變和恒定結(jié)構(gòu)域構(gòu)型彼此之間和/或與一個或多個單體Vh或 '結(jié)構(gòu)域非共價結(jié)合 (例如通過二硫鍵）的同型二聚體或異型二聚體（或其他多聚體）。
[0201] 作為全抗體分子，抗原結(jié)合片段可以是單特異性的或多特異性的（例如雙特異性 的）?？贵w的多特異性抗原結(jié)合片段將通常包含至少兩個不同的可變結(jié)構(gòu)域，其中各可變結(jié) 構(gòu)域能夠特異性地結(jié)合單獨的抗原或同一抗原上的不同表位。任何多特異性抗體形式，包 括本申請所公開的示例性雙特異性抗體形式，可以適用于使用本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)獲得的本 發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段的背景下。
[0202] 人源抗體的制備
[0203] 在轉(zhuǎn)基因小鼠中生成人源抗體的方法是本領(lǐng)域所公知的。任何此類公知的方法均 可以用于本發(fā)明的背景下以制備特異性地與Fel dl結(jié)合的人源抗體。
[0204] 使用VEL0CIMMUNE?技術(shù)（參見例如US 6, 596, 541，瑞恩澤制藥公司（Regeneron Pharmaceuticals)，VELOCIMMUNE? )或任意其他公知的用于生成單克隆抗體的方法， 首先分離具有人源可變區(qū)和小鼠恒定區(qū)的高親和性嵌合抗體。所述VELOCIMMUNE?技 術(shù)涉及轉(zhuǎn)基因小鼠的產(chǎn)生，所述小鼠具有含有與內(nèi)源性小鼠恒定區(qū)基因座可操作地連接的 人源重鏈和輕鏈可變區(qū)的基因組，以使得所述小鼠針對抗原的刺激產(chǎn)生包含人源可變區(qū)和 小鼠恒定區(qū)的抗體。編碼所述抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)的DNA被分離并且與編碼人源重鏈 和輕鏈恒定區(qū)的DNA可操作地連接。然后在能夠表達全人源抗體的細胞中表達所述DNA。
[0205] 在通常情況下，使用目標抗原攻擊VELOCIMMUNE?小鼠，并且從表達抗體的小 鼠中回收淋巴細胞（如B細胞）。可以將所述淋巴細胞與骨髓瘤細胞系融合以制備永生化 的雜交瘤細胞系，并且對此類雜交瘤細胞系進行篩選和選擇以鑒定產(chǎn)生對目標抗原具有特 異性的抗體的雜交瘤細胞系?？梢苑蛛x編碼所述重鏈和輕鏈可變區(qū)的DNA并且與所述重鏈 和輕鏈的所需的同種型恒定區(qū)連接?？梢栽诩毎鏑HO細胞中生產(chǎn)此類抗體蛋白?；蛘?， 可以直接從抗原特異性淋巴細胞中分離編碼所述抗原特異性嵌合抗體或所述輕鏈和重鏈 可變結(jié)構(gòu)域的DNA。
[0206] 首先，分離具有人源可變區(qū)和小鼠恒定區(qū)的高親和性嵌合抗體。如在下面的實驗 章節(jié)中，對所述抗體進行表征并對所需的特征進行選擇，包括親和性、選擇性、表位等。使用 所需的人源恒定區(qū)取代所述小鼠的恒定區(qū)以生成本發(fā)明的全人源抗體，例如野生型或經(jīng)修 飾的IgGl或IgG4。盡管可以根據(jù)特定用途改變所選擇的恒定區(qū)，高親和性抗原結(jié)合和靶特 異性特征均保留在可變區(qū)中。
[0207] 在通常情況下，當對與固定在固相上或在溶液相中的抗原的結(jié)合進行檢測時，本 發(fā)明的抗體具有非常高的親和性，通常具有的K d為約KT12至約1(Γ9Μ。使用所需的人源恒 定區(qū)取代所述小鼠的恒定區(qū)以生成本發(fā)明的全人源抗體。盡管可以根據(jù)特定用途改變所選 擇的恒定區(qū)，高親和性抗原結(jié)合和靶特異性特征均保留在可變區(qū)中。
[0208] 生物等價物
[0209] 本發(fā)明的抗-Fel dl抗體和抗體片段包含具有不同于本申請所述抗體的那些的氨 基酸序列但是仍保持了結(jié)合Fel dl的能力的蛋白。此類變體抗體和抗體片段當與母體序 列進行比較時包含一個或多個氨基酸插入、缺失或取代，但是顯示出基本上與所述抗體等 價的生物活性。同樣地，本發(fā)明的編碼抗體的DNA序列與所公開的序列相比包含一個或多 個核苷酸插入、缺失或取代，但是其編碼的抗體或抗體片段基本上是本發(fā)明的抗體或抗體 片段的等價物。
[0210] 如果，例如，兩種抗原結(jié)合蛋白或抗體是藥學等價物或藥學替代物，即在類似的實 驗條件下單劑量或多劑量給予相同摩爾劑量時其吸收速率和程度未顯示出顯著差異，則認 為這兩者是生物等價物。如果一些抗體在其吸收程度上而不是吸收速率上是等價的，仍可 以將其認為是等價物或藥學替代物并且仍可以認為其是生物等價物，因為這種在吸收速率 上的差異是有意的并且已經(jīng)反映在標簽中，其對例如長期使用時達到有效的機體藥物濃度 不是必要的，并且針對所研究的特定藥品認為其在醫(yī)學上是不重要的。
[0211] 在一個實施方式中，如果兩種抗原結(jié)合蛋白在安全性、純度和效能方面不存在具 有臨床意義的差異，則認為其是生物等價物。
[0212] 在一個實施方式中，如果患者能夠在對照產(chǎn)品和生物產(chǎn)品之間進行一次或多次的 轉(zhuǎn)換而在不良反應的風險方面無預期的增加，則認為這兩種抗原結(jié)合蛋白是生物等價物， 所述不良反應包括，與無這種轉(zhuǎn)換的連續(xù)療法相比，免疫原性出現(xiàn)具有臨床意義的改變或 有效性的降低。
[0213] 在一個實施方式中，如果兩種抗原結(jié)合蛋白針對一種或多種病情的使用通過共同 的作用機制發(fā)揮作用并且此類作用機制在公知的范圍內(nèi)，則認為其是生物等價物。
[0214] 生物等效性可以通過體內(nèi)和/或體外方法證明。生物等效性的測定包括，例如（a) 在人和其他哺乳動物中的體內(nèi)檢測，測定在血液、血漿、血清或其他生物液體中的抗體或其 代謝產(chǎn)物的濃度的時間函數(shù)；(b)進行體外檢測，與人體內(nèi)的生物利用度數(shù)據(jù)關(guān)聯(lián)并合理 的預測在人體內(nèi)的生物利用度數(shù)據(jù)；（c)在人或其他哺乳動物中進行體內(nèi)檢測，測定抗體 (或其靶點）的適當?shù)募毙运幚韺W作用的時間函數(shù)；和（d)在對照良好的臨床試驗中確定 抗體的安全性、有效性或者生物利用度或生物等效性。
[0215] 可以通過例如對殘基或序列進行各種取代或者缺失生物活性不需要的末端或中 間的殘基以構(gòu)建本發(fā)明抗體的生物等價物變體。例如，半胱氨酸殘基不是生物活性所必須 的，可以將其缺失或使用其他氨基酸取代以防止在還原過程中形成不必要的或不正確的分 子內(nèi)二硫鍵橋。在其他情況下，生物等價物抗體可以包括包含氨基酸改變的抗體變體，其改 變了所述抗體的糖基化特征，例如消除或除去糖基化的突變。
[0216] 抗體的生物學特征
[0217] 在通常情況下，本發(fā)明的抗體可以通過與Fel dl的鏈1或鏈2,或與Fel dl的鏈 1和鏈2兩者或者鏈1或鏈2的片段結(jié)合而發(fā)揮功能。
[0218] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體可以至少結(jié)合位于Fel dl鏈1或鏈2的C-末 端區(qū)的表位。在一個實施方式中，所述抗體可以與Fel dl鏈1或鏈2的N-末端區(qū)中的表 位結(jié)合。
[0219] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體可以通過阻斷或抑制IgE與對fel dl過敏原敏 感的患者中的肥大細胞或嗜堿性粒細胞的結(jié)合發(fā)揮功能。
[0220] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體可以通過與天然Fel dl蛋白全長鏈1或鏈2 的任意其他區(qū)域或片段結(jié)合而發(fā)揮功能，其氨基酸序列如SEQ ID NO: 392 (鏈1)和SEQ ID NO :393(鏈 2)所示。
[0221] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體可以是雙特異性抗體。本發(fā)明的雙特異性抗體 可以與鏈1中的一個表位結(jié)合，也可以與鏈2中的一個表位結(jié)合。在某些實施方式中，本 發(fā)明的雙特異性抗體可以結(jié)合鏈1中的兩個不同的表位。在某些實施方式中，本發(fā)明的雙 特異性抗體可以結(jié)合鏈2中的兩個不同的表位。在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體可以 結(jié)合鏈1或鏈2之一上相同螺旋中的兩個不同的位點，或者可以結(jié)合鏈1和鏈2二者上 的相同螺旋。在Kaiser等的文章中對Fel dl的結(jié)構(gòu)進行了更加詳細的描述（Kaiser, L. 等，（2003)，J. Bioh Chem. 278 (39) :37730-37735)，作者由此指出 Fel dl 由八個螺旋組成， H1-H4和H5-H8,其分別對應于天然Fel dl中的鏈1和鏈2。
[0222] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了與Fel dl的鏈1和/或鏈2結(jié)合的全人源單 克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體或其片段顯示出一種或多種下述特征：（i)包 含HCVR，所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:2、18、34、50、66、82、98、114、 130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354 和 370,或者與其具 有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；（ii)包 含LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:10、26、42、58、74、90、106、122、 138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378,或者與其具 有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；（iii)包 含HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:8、24、40、56、 72、88、104、120、136、152、168、184、200、216、232、248、264、280、296、312、328、344、360 和 376，或者與其具有至少90 %、至少95 %、至少98 %或至少99 %序列一致性的基本上相似的 序列；和IXDR3結(jié)構(gòu)域，所述IXDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：16、32、48、64、80、 96、112、128、144、160、176、192、208、224、240、256、272、288、304、320、336、352、368 和 384， 或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序 列；（vi)包含HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO : 4、20、36、52、68、84、100、116、132、148、164、180、196、212、228、244、260、276、292、308、324、 340、356和372,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的 基本上相似的序列；HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :6、22、38、54、70、86、102、118、134、150、166、182、198、214、230、246、262、278、294、310、 326、342、358和374,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性 的基本上相似的序列；IXDRl結(jié)構(gòu)域，所述IXDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :12、28、44、60、76、92、108、124、140、156、172、188、204、220、236、252、268、284、300、 316、332、348、364和380，或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列 一致性的基本上相似的序列；和LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸 序列：SEQ ID N0:14、30、46、62、78、94、110、126、142、158、174、190、206、222、238、254、270、 286、302、318、334、350、366和382,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少 99%序列一致性的基本上相似的序列；(V)以等于或小于KT 9的Kd與Fel dl的鏈1和/或 鏈2結(jié)合；(vi)不與子宮球蛋白發(fā)生交叉反應或與之結(jié)合；或者（vii)在使用Fel dl特異 性小鼠 IgE的被動皮膚過敏反應（PCA)小鼠模型中，在體內(nèi)阻止染料外滲。
[0223] 在一個實施方式中，本發(fā)明提供了將本發(fā)明的兩種或多種全人源抗體或其片段組 合用于制備組合物的用途，其中所述抗體與Fel dl的鏈1和/或鏈2結(jié)合，并且其中在所述 組合物中包含的各抗體或其片段顯示出一種或多種下述特征：（i)包含HCVR，所述HCVR具 有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、 210、226、242、258、274、290、306、322、338、354 和 370,或者與其具有至少 90%、至少 95%、 至少98 %或至少99 %序列一致性的基本上相似的序列；（ii)包含LCVR，所述LCVR具有選 自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、 218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378,或者與其具有至少 90%、至少 95%、 至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；（iii)包含HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述 HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:8、24、40、56、72、88、104、120、136、 152、168、184、200、216、232、248、264、280、296、312、328、344、360 和 376,或者與其具有至 少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列；和IXDR3結(jié)構(gòu) 域，所述LCDR3結(jié)構(gòu)域LCDR3具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:16、32、48、64、80、96、 112、128、144、160、176、192、208、224、240、256、272、288、304、320、336、352、368 和 384，或 者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本上相似的序列； (iv)包含HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :4、20、 36、52、68、84、100、116、132、148、164、180、196、212、228、244、260、276、292、308、324、340、 356和372,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的基本 上相似的序列；HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO : 6、22、38、54、70、86、102、118、134、150、166、182、198、214、230、246、262、278、294、310、326、 342、358和374,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一致性的 基本上相似的序列；LCDRl結(jié)構(gòu)域，所述LCDRl結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :12、28、44、60、76、92、108、124、140、156、172、188、204、220、236、252、268、284、300、316、 332、348、364和380，或者與其具有至少90 %、至少95 %、至少98 %或至少99 %序列一致性 的基本上相似的序列；和IXDR2結(jié)構(gòu)域，所述IXDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :14、30、46、62、78、94、110、126、142、158、174、190、206、222、238、254、270、286、302、 318、334、350、366和382,或者與其具有至少90%、至少95%、至少98%或至少99%序列一 致性的基本上相似的序列；(V)以等于或小于KT 9的Kd與Fel dl的鏈1和/或鏈2結(jié)合； (vi)不與子宮球蛋白發(fā)生交叉反應或與之結(jié)合；(vii)在使用Fel dl特異性小鼠 IgE的 被動皮膚過敏反應（PCA)小鼠模型中，在體內(nèi)阻止染料外滲；或（viii)當與本發(fā)明的第二 種抗體或其抗原結(jié)合片段組合時，在受Fel dl攻擊動物的肺中降低粘液分泌細胞的出現(xiàn)頻 率。
[0224] 根據(jù)體外或體內(nèi)檢測，本發(fā)明的某些Fel dl抗體，當單獨或組合使用時，能夠結(jié)合 至或中和Fel dl的至少一種生物學效應。可以采用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的任意標準方法 測定本發(fā)明的抗體結(jié)合至以及中和Fel dl的活性的能力，包括如本申請所述的結(jié)合試驗或 活性中和（例如保護其免于出現(xiàn)過敏反應）試驗。
[0225] 用于測定結(jié)合活性的非限制性的、示例性體外試驗如本申請中的實施例4所示。 在實施例4中，通過表面等離子體共振確定人源抗-Fel dl抗體的結(jié)合親和性和動力學常 數(shù)并且所述檢測在T200Biac〇re儀器上進行。
[0226] 可以對Fel dl蛋白或肽進行修飾以引入用于標記或用于與載體分子如KLH綴合 目的的某些殘基的插入或取代。例如，可以在肽的N末端或C末端加入半胱氨酸，或者可以 加入接頭序列以制備用于綴合至例如KLH以用于免疫的肽。對Fel dl具有特異性的抗體 可以不含有其他標簽或部分，或者其可以含有N-末端或C-末端標簽或部分。在一個實施 方式中，所述標簽或部分是生物素。在結(jié)合試驗中，標簽（如果有的話）的位置可以確定肽 相對于肽所結(jié)合的表面的方向。例如，如果表面涂覆了親和素，則含有N-末端生物素的肽 將被定向，以使得所述肽的C-末端部分將遠離所述表面。
[0227] 表位定位和相關(guān)技術(shù)
[0228] 在本申請中使用的術(shù)語"表位"指與在被稱為互補位的抗體分子的可變區(qū)中的特 異性抗原結(jié)合位點相互作用的抗原決定簇。一個抗原可以具有一個以上的表位。因此，不 同抗體可以與抗原上的不同區(qū)域結(jié)合并且可以具有不同的生物效應。表位可以是線形的或 具有構(gòu)象的。具有構(gòu)象的表位是由線形多肽鏈的不同區(qū)段在空間上靠近的氨基酸產(chǎn)生的。 線形表位是由多肽鏈中相鄰的氨基酸殘基產(chǎn)生的。在某些情況下，在抗原上的表位可以包 括糖類、磷?；蚧酋；糠?。
[0229] 本發(fā)明包括抗-Fel dl抗體，所述抗體與一個或多個氨基酸相互作用，所述一個或 多個氨基酸存在于Fel dl分子的鏈1或鏈2包括例如如SEQ ID NO: 392所示的鏈1(鏈A) 或如SEQ ID NO:393所示的鏈2(鏈B)的一個或多個區(qū)域中，或者在重組產(chǎn)生的Fel dl蛋 白的類似區(qū)域中，如SEQIDN0:385、394、395、396 或 397 任一所示。與抗體結(jié)合的所述表 位可以由在任意上文所述的Fel dl分子的區(qū)域或區(qū)段中的3個或更多個（例如3、4、5、6、 7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20個或更多個）氨基酸的單一連續(xù)序列組成（例 如在鏈1或鏈2中或者在跨鏈1和鏈2二者的區(qū)域中的線形表位）?；蛘?，所述表位可以由 在上文所述的Fel dl分子的區(qū)域或區(qū)段之一或兩者中的多個不連續(xù)的氨基酸（或氨基酸 序列）組成（例如構(gòu)象表位）。
[0230] 本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員公知的各種技術(shù)均可以用于確定是否抗體與多肽或 蛋白中的"一個或多個氨基酸相互作用"。示例性的技術(shù)包括例如常規(guī)的交叉阻斷試 驗，如在 Antibodies (抗體），Harlow and Lane(Cold Spring Harbor PressjCold Spring Harb., NY)中所描述的。其他的方法包括丙氨酸掃描突變分析、肽印跡分析 (Reineke (2004) Methods Mol Biol 248:443-63)、肽切割分析晶體學研究和 NMR 分析。此 夕卜，可以使用方法如表位切除、表位提取和抗原的化學修飾（Tomer (2000) Protein Science 9:487-496)。能夠用于鑒定與抗體相互作用的多肽中的氨基酸的另一種方法是利用質(zhì)譜進 行的氫/氘交換檢測?？偟膩碚f，所述氫/氘交換方法涉及使用氘標記目標蛋白，隨后將所 述抗體與所述氘標記的蛋白結(jié)合。接下來，將所述蛋白/抗體的復合物轉(zhuǎn)移至水中，在被 所述抗體復合物保護的氨基酸中可交換的質(zhì)子由氘向氫的回交換速率慢于不作為界面一 部分的氨基酸中的可交換質(zhì)子。其結(jié)果是，來自蛋白/抗體界面的一部分的氨基酸可以保 留氚，并且因此與沒有包括在所述界面中的氨基酸相比顯示出相對更高的質(zhì)量。在所述抗 體解離后，將所述靶蛋白進行蛋白酶切割并進行質(zhì)譜分析，以揭示氘標記的殘基，所述殘基 對應于與抗體相互作用的特定氨基酸。參見例如Ehring(1999)Analytical Biochemistry 267(2) :252-259 ;Engen 和 Smith (2001) Anal. Chem. 73:256A-265A。還可以將所述抗原 / 抗 體復合物的X-射線晶體學用于表位定位目的。
[0231] 修飾輔助分析（MAP)，也稱為基于抗原結(jié)構(gòu)的抗體分析（ASAP)，這種方法根據(jù)各 抗體與經(jīng)化學或酶促修飾的抗原表面結(jié)合性質(zhì)的相似性，對針對相同抗原的大量單克隆抗 體（mAb)進行分類（US 2004/0101920)。各個分類可以反映獨特的表位，無論是與另一分類 所表示的表位截然不同的還是部分重疊的。這項技術(shù)能夠快速過濾基因相同的抗體，以使 得表征可以集中在基因不同的抗體上。當用于雜交瘤篩選時，MP可以容易地鑒定產(chǎn)生具 有所需特征的mAb的稀有雜交瘤克隆?？梢允褂肕P將本發(fā)明的抗體分選為結(jié)合不同表位 的抗體組。
[0232] 在某些實施方式中，所述抗-Fel dl抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié)合在Fel dl的鏈1 或鏈2中示例的任意一個或多個區(qū)域，其可以是天然形式的，如在SEQ ID N0:392(鏈1)和 SEQIDN0:393(鏈2)中所示例的，或重組生產(chǎn)的，如在任意SEQIDN0:385、394、395、396 和397或其片段中所示例的。在某些實施方式中，如表1所示的本發(fā)明的抗體與選自下組 的至少一個氨基酸序列相互作用：范圍從SEQ ID NO:396的約位置15至約位置24的氨基 酸殘基；范圍從SEQ ID N0:396的約位置85至約位置103的氨基酸殘基；范圍從SEQ ID NO: 396的約位置85至約位置104的氨基酸殘基；范圍從SEQ ID NO: 396的約位置113至約 位置116的氨基酸殘基。這些區(qū)域進一步在SEQ ID NO :402、403、404、412和426中示例。
[0233] 本發(fā)明還包括抗-Fel dl抗體，其與表1中的任意本申請所述的具體示例性抗體、 或具有表1中所述的任意示例性抗體的CDR序列的抗體，結(jié)合相同的表位或結(jié)合所述表位 的一部分。同樣地，本發(fā)明還包括抗-Fel dl抗體，其與表1中的任意本申請所述的具體的 示例性抗體、或具有表1中所述的任意示例性抗體的CDR序列的抗體競爭性地與Fel dl或 Fel dl的片段結(jié)合。
[0234] 通過使用本領(lǐng)域公知的常規(guī)方法能夠容易地確定是否抗體與對照抗-Fel dl抗體 結(jié)合相同的表位，或與對照抗-Fel dl抗體競爭結(jié)合。例如，為確定是否待測抗體與本發(fā)明 的對照抗-Fel dl抗體結(jié)合相同的表位，將所述對照抗體在飽和條件下與Fel dl蛋白或肽 結(jié)合。接下來，評估待測抗體與所述Fel dl分子結(jié)合的能力。如果在使用所述對照抗-Fel dl抗體飽和后所述待測抗體能夠與Fel dl結(jié)合，則能夠得出結(jié)論所述待測抗體與所述對 照抗-Fel dl抗體結(jié)合不同的表位。另一方面，如果在使用所述對照抗-Fel dl抗體飽和 結(jié)合后所述待測抗體不能與所述Fel dl分子結(jié)合，則所述待測抗體可以與本發(fā)明的所述對 照抗-Fel dl抗體結(jié)合相同的表位。
[0235] 為了確定是否抗體與對照抗-Fel dl抗體競爭結(jié)合，在兩個方向上進行上文所述 的結(jié)合方法：在第一個方向上，將所述對照抗體在飽和狀態(tài)下與Fel dl分子結(jié)合，隨后評 估所述待測抗體與所述Fel dl分子的結(jié)合。在第二個方向上，將所述待測抗體在飽和條件 下與Feldl分子結(jié)合，隨后評估所述對照抗體與所述Fel dl分子的結(jié)合。如果在這兩個方 向上都只有第一（飽和）抗體能夠與所述Fel dl分子結(jié)合，則結(jié)論是所述待測抗體與所述 對照抗體競爭與Fel dl的結(jié)合。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以理解的是，與對照抗體競爭結(jié) 合的抗體可以不是必需地與所述對照抗體結(jié)合相同的表位，但是可以通過結(jié)合重疊的或鄰 近的表位在空間上阻斷所述對照抗體的結(jié)合。
[0236] 如果兩個抗體分別競爭性地抑制（阻斷）對方與所述抗原的結(jié)合，則其結(jié)合相同 的或重疊的表位。也就是說，根據(jù)在競爭性結(jié)合試驗中的檢測，1-、5-、10-、20_或100-倍過 量的一個抗體使對方抗體的結(jié)合抑制至少50%，但優(yōu)選地75%、90%或者甚至99% (參見 例如Junghans等，Cancer Res. 199050:1495-1502)?；蛘?，在所述抗原中，如果降低或消除 一種抗體結(jié)合的基本上所有的氨基酸突變都降低或消除對方抗體的結(jié)合，則這兩種抗體具 有相同的表位。如果降低或消除一種抗體結(jié)合的一些氨基酸突變降低或消除其他抗體的結(jié) 合，則兩種抗體具有重疊的表位。
[0237] 然后可以使用其他常規(guī)實驗（例如肽突變和結(jié)合分析）確證是否所觀察到的待測 抗體結(jié)合的缺乏實際上是由于與對照抗體結(jié)合相同的表位造成的，或者是否是由于空間位 阻（或其他現(xiàn)象）造成了所觀察到的結(jié)合的缺乏?？梢允褂肊LISA、RIA、表面等離子體共 振、流式細胞術(shù)或本領(lǐng)域中任意其他的定量或定性的抗體結(jié)合試驗進行這種類型的實驗。
[0238] 免疫綴合物
[0239] 本發(fā)明包括與治療性部分綴合的人源抗-Fel dl單克隆抗體（"免疫綴合物"）， 例如能夠降低針對在貓皮屑或在貓中存在的，或在貓可能居住的環(huán)境區(qū)域中存在的Fel dl 過敏原的過敏反應的嚴重程度，或改善與暴露于貓、貓皮屑或所述Fel dl過敏原相關(guān)的至 少一種癥狀，包括鼻炎、結(jié)膜炎或呼吸困難，或其嚴重程度的藥劑。此類藥劑可以是皮質(zhì)類 固醇、第二種不同的針對Fel dl的抗體、或疫苗。應考慮所治療的病情和所要達到的所需 的治療作用，選擇可以與所述Fel dl抗體綴合的治療性部分的類型。或者，如果所需的治 療作用是治療與暴露于所述Fel dl過敏原相關(guān)的后遺癥或癥狀，或者由于這種暴露導致的 任意其他狀況，例如但不限于鼻炎或結(jié)膜炎，則優(yōu)選與適于治療所述狀況的后遺癥或癥狀， 或者減輕本發(fā)明抗體的任意副作用的藥劑綴合。用于形成免疫綴合物的適宜藥劑的示例是 本領(lǐng)域公知的，參見例如WO 05/103081。
[0240] 多特異性抗體
[0241] 本發(fā)明的抗體可以是單特異性的、雙特異性的或多特異性的。多特異性抗體可以 特異性地針對一個靶多肽的不同表位，或者可以含有特異性地結(jié)合針對一個以上靶多肽表 位的抗原結(jié)構(gòu)域。參見例如 Tutt 等，1991，J. Immunol. 147:60-69 ;Kufer 等，2004, Trends Biotechnol. 22:238-244。本發(fā)明的抗體可以連接至或與另一種具有功能的分子共表達，例 如另一種肽或蛋白。例如，抗體或其片段可以功能性地與一個或多個其他分子實體如另一 種抗體或抗體片段連接（例如通過化學偶聯(lián)、基因融合、非共價結(jié)合或其他方式）以產(chǎn)生具 有另一個結(jié)合特異性的雙特異性或多特異性抗體。例如，本發(fā)明包括雙特異性抗體，其中免 疫球蛋白的一個臂可以對Fel dl的鏈1或其片段具有特異性，而所述免疫球蛋白的另一個 臂可以對Fel dl的鏈2,或第二種治療靶點具有特異性，或者可以與治療性部分綴合。
[0242] 本發(fā)明的某些示例性的實施方式包括雙特異性抗原結(jié)合分子，其是雙特異性抗 體。雙特異性抗體的各抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域均包括重鏈可變結(jié)構(gòu)域（HCVR)和輕鏈可變結(jié)構(gòu)域 (LCVR)。所述HCVR還可以被稱為V h區(qū)，所述LCVR還可以被稱為 '區(qū)。通常地，各HCVR和 LCVR均包含分散在四個FR中的三個⑶R，其從氨基末端到羧基末端以下述順序排列：FR1、 CDRl、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在HCVR中的三個CDR在本申請中可以被稱為HCDRl、HCDR2 和HCDR3 ;而在LCVR中的三個⑶R在本申請中可以被稱為IXDR1、IXDR2和IXDR3。
[0243] 在本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子中，各抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以包含或由全抗體分 子或抗體的抗原結(jié)合片段組成。在本申請中使用的術(shù)語抗體的"抗原結(jié)合部分"、抗體的"抗 原結(jié)合片段"等等包括任意天然存在的、酶促獲得的、合成的或基因工程改造的多肽或糖蛋 白，其特異性地與抗原結(jié)合以形成復合物?？贵w的抗原結(jié)合片段可以來源于例如使用任意 適宜的標準技術(shù)制備的全抗體分子，如涉及編碼抗體可變和任選地恒定結(jié)構(gòu)域的DNA的操 控和表達的蛋白水解消化或重組基因工程技術(shù)。此類DNA是已知的和/或易于從例如商業(yè) 來源、DNA文庫（包括例如噬菌體-抗體文庫）獲得，或者能夠被合成。所述DNA可以被測 序和被化學操控，或通過使用分子生物學技術(shù)例如以便將一個或多個可變和/或恒定結(jié)構(gòu) 域排布成適宜的構(gòu)型，或者引入密碼子，形成半胱氨酸殘基，修飾、增加或缺失氨基酸等。
[0244] 可以包括在本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子中的抗原結(jié)合片段的非限制性示例 包括：（i)Fab 片段；（ii)F(ab'）2 片段；（iii)Fd 片段；（iv)Fv 片段；（V)單鏈 Fv(scFv)分 子；(vi) dAb片段；和（vii)最小識別單位，由模擬抗體的高變區(qū)的氨基酸殘基組成。其他 經(jīng)工程改造的分子，如結(jié)構(gòu)域特異性抗體、單結(jié)構(gòu)域抗體、結(jié)構(gòu)域缺失抗體、嵌合抗體、CDR 移植抗體、雙體、三體、四體、微抗體、納米抗體（例如單價納米抗體、二價納米抗體等）、小 型模塊化免疫藥物（SMIP)和鯊魚可變IgNAR結(jié)構(gòu)域也均包括在本申請所使用的表述"抗原 結(jié)合片段"中。
[0245] 抗體的抗原結(jié)合片段將通常包含至少一個可變結(jié)構(gòu)域。所述可變結(jié)構(gòu)域可以是 任意尺寸或氨基酸的組合并且通常包含至少一個CDR，其與一個或多個框架序列鄰近或在 框架中。在具有與 '結(jié)構(gòu)域結(jié)合的Vh結(jié)構(gòu)域的抗原結(jié)合片段中，所述Vh和 '結(jié)構(gòu)域所處 的位置可以是相對于彼此是任意適宜的排布。例如，所述可變區(qū)可以是二聚化的并且含有 VH-VH、VH-'或 二聚體?；蛘?，所述抗體的抗原結(jié)合片段可以含有單體V h或 '結(jié)構(gòu)域。
[0246] 在某些實施方式中，抗體的抗原結(jié)合片段可以含有與至少一個恒定結(jié)構(gòu)域共價 連接的至少一個可變結(jié)構(gòu)域。可能存在于本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段中的可變和恒定結(jié) 構(gòu)域的非限制性、示例性構(gòu)型包括：（i)V H-CHl ;(ii)VH-CH2 ;(iii)VH-CH3 ;(iv)VH-CHl-CH2 ; (v) Vh-ChI-Ch2-Ch3 ； (vi)VH-CH2-CH3 ； (vii) Vh-Cl ； (viii) Vl-ChI ； (ix)VL-CH2 ； (x)VL-CH3 ； (xi) VL-CH1-CH2 ; (xii)VL-CH1-CH2-CH3 ; (xiii)VL-CH2-CH3 ;和（xiv)VL-CL。在包括上文所列出的任 意示例性構(gòu)型的可變和恒定結(jié)構(gòu)域的任意構(gòu)型中，所述可變和恒定結(jié)構(gòu)域可以直接彼此間 連接或者可以通過完全或部分的鉸鏈或接頭區(qū)連接。鉸鏈區(qū)可以含有至少2個（例如5、 10、15、20、40、60個或更多個）氨基酸，這使得在單一多肽分子中相鄰的可變和/或恒定結(jié) 構(gòu)域之間是柔性或半柔性的鍵。而且，本發(fā)明抗體的抗原結(jié)合片段可以包含如上文所列的 任意可變和恒定結(jié)構(gòu)域構(gòu)型彼此之間和/或與一個或多個單體V h或 '結(jié)構(gòu)域非共價結(jié)合 (例如通過二硫鍵）的同型二聚體或異二聚體（或其他多聚體）。
[0247] 所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域和所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域可以直接或間接地彼此之 間連接以形成雙特異性抗原結(jié)合分子?；蛘?，所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域和所述第二抗原結(jié) 合結(jié)構(gòu)域可以各自與單獨的多聚化結(jié)構(gòu)域連接。一個多聚化結(jié)構(gòu)域與另一個多聚化結(jié)構(gòu) 域的結(jié)合有助于兩個抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域之間的結(jié)合，從而形成雙特異性抗原結(jié)合分子。在本 申請中使用的"多聚化結(jié)構(gòu)域"是任意大分子、蛋白、多肽、肽或氨基酸，其能夠與具有相同 或相似結(jié)構(gòu)或構(gòu)造的另一個多聚化結(jié)構(gòu)域結(jié)合。例如，多聚化結(jié)構(gòu)域可以是包含免疫球蛋 白G3結(jié)構(gòu)域的多肽。多聚化組分的一個非限制性的示例是免疫球蛋白的Fc部分，例如選 自同種型IgGl、IgG2、IgG3和IgG4,以及在各同種型組中的任意同種異型的IgG的Fc結(jié)構(gòu) 域。在某些實施方式中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域可以是Fc片段或含有至少一個半胱氨酸殘基、 在長度上為1至約200個氨基酸的氨基酸序列。在其他實施方式中，所述多聚化結(jié)構(gòu)域可 以是半胱氨酸殘基，或含有半胱氨酸的短肽。其他多聚化結(jié)構(gòu)域包括含有或由亮氨酸拉鏈、 螺旋-環(huán)基序或卷曲螺旋基序組成的肽或多肽。
[0248] 任意雙特異性抗體形式或技術(shù)均可以用于制備本發(fā)明的雙特異性抗原結(jié)合分子。 例如，具有第一抗原結(jié)合特異性的抗體或其片段能夠在功能上與一個或多個其他分子實體 如具有第二抗原結(jié)合特異性的另一種抗體或抗體片段連接（例如通過化學偶聯(lián)、基因融 合、非共價結(jié)合或其他方式）以產(chǎn)生雙特異性抗原結(jié)合分子。
[0249] 能夠用于本發(fā)明背景下的示例性的雙特異性抗體形式涉及使用第一免疫球蛋白 (Ig)C 113結(jié)構(gòu)域和第二Ig Ch3結(jié)構(gòu)域，其中所述第一和第二Ch3結(jié)構(gòu)域彼此之間的差異為至 少一個氨基酸，并且與缺乏所述氨基酸差異的雙特異性抗體相比，其中至少一個氨基酸的 差異降低了所述雙特異性抗體與蛋白A的結(jié)合。在一個實施方式中，所述第一 Ig C03結(jié)構(gòu) 域結(jié)合蛋白A和所述第二Ig Ch3結(jié)構(gòu)域含有降低或消除與蛋白A結(jié)合的突變?nèi)鏗95R修飾 (根據(jù)頂GT外顯子編號；根據(jù)EU編號為H435R)。所述第二C h3還可以包含Y96F修飾（根 據(jù)IMGT ;根據(jù)EU為Y436F)?？梢源嬖谟谒龅诙﨏h3中的修飾還包括：在IgGl抗體的情 況下為 D16E、L18M、N44S、K52N、V57M 和 V82I (根據(jù)頂GT ;根據(jù) EU 為 D356E、L358M、N384S、 K392N、V397M 和 V422I);在 IgG2 抗體的情況下為 N44S、K52N 和 V82I (MGT ;根據(jù) EU 為 N384S、K392N 和 V422I);在 IgG4 抗體的情況下為 Q15R、N44S、K52N、V57M、R69K、E79Q 和 V82I (根據(jù)頂GT ;根據(jù) EU 為 Q355R、N384S、K392N、V397M、R409K、E419Q 和 V422I)。上文所 述的雙特異性抗體形式的變體包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
[0250] 能夠用于本發(fā)明背景下的其他示例性的雙特異性形式包括，但不限于，例如基于 scFv的或雙體雙特異性的形式、IgG-scFv融合、雙可變結(jié)構(gòu)域（DVD)-Ig、四價體雜交瘤、凸 起-進入-孔洞（knob-into-hole)、共有輕鏈（例如具有凸起-進入-孔洞等的共有輕鏈）、 CrossMab、CrossFab、（SEED)體、亮氛酸拉鏈、Duobody、IgGl/IgG2、雙作用 Fab (DAF)-IgG 和 Mab2雙特異性形式（參見例如Klein等，2012, mAbs 4:6, 1-11，并且作為本申請中引用的參 考文獻，其對前述的形式進行了綜述）。也可以使用肽/核酸綴合構(gòu)建雙特異性抗體，例如 其中將具有正交化學反應性的非天然氨基酸用于生成位點特異性抗體-寡核苷酸綴合物， 然后將其自組裝成具有所定義的組分、價態(tài)和幾何形狀的多聚體復合物（參見例如Kazane 等，J. Am. Chem. Soc. [Epub:Dec. 4, 2012])。
[0251] 治療性施用和制劑
[0252] 本發(fā)明提供了包含本發(fā)明的抗-Fel dl抗體或其抗原結(jié)合片段的治療性組合 物。將通過適宜的途徑給予根據(jù)本發(fā)明的治療性組合物，包括但不限于靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、 鼻內(nèi)，使用適宜的載體、賦形劑和其他試劑，所述試劑能夠摻入制劑中以提供改善的轉(zhuǎn)移、 遞送、耐受等。多種適宜的制劑可以見于所有藥物化學家公知的處方集中：Remington's Pharmaceutical Sciences (雷明頓藥物科學），Mack Publishing Company, Easton, PA。這 些制劑包括例如粉劑、糊劑、軟膏、凝膠劑、蠟、油、脂質(zhì)、含有囊泡的脂質(zhì)（陽離子的或陰 離子的）（如LIP0FECTIN?)、DNA綴合物、無水吸收糊劑、水包油和油包水乳劑、乳劑碳蠟 (不同分子量的聚乙二醇）、半固體凝膠和含有碳蠟的半固體混合物。亦參見Powell等， "Compendium of excipients for parenteral formulations(胃腸外制劑用賦形劑綱 要）"PDA(1998)J Pharm Sci Technol 52:238-311.
[0253] 可以根據(jù)待給藥對象的年齡和體型、靶疾病、病情、給藥途徑等改變抗體的劑量。 當使用本發(fā)明的抗體治療在對Fel dl敏感的個體中與暴露于貓或貓皮屑相關(guān)的鼻炎或結(jié) 膜炎，或者用于預防針對貓過敏原的過敏反應，或用于降低所述過敏反應的嚴重程度時，通 常以約0. 01至約30mg/kg體重、更優(yōu)選地約0. 02至約7、約0. 03至約5或者約0. 05至約 3mg/kg體重的單一劑量靜脈內(nèi)給予本發(fā)明的抗體是有利的?？梢愿鶕?jù)所述病情的嚴重程 度調(diào)整治療的頻率和持續(xù)時間。在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體或其抗原結(jié)合片段可以 以至少約0. Img至約800mg、約1至約500mg、約5至約300mg、或者約10至約200mg、至約 IOOmg或至約50mg的初始劑量給予。在某些實施方式中，在初始劑量給予后，可以給予第二 個或多個后續(xù)劑量的抗體或其抗原結(jié)合片段，其用量可以大致與所述初始劑量相同或低于 初始劑量，其中所述后續(xù)劑量間隔至少1天至3天；至少1周、至少2周；至少3周；至少4 周；至少5周；至少6周；至少7周；至少8周；至少9周；至少10周；至少12周；或者至少 14周。
[0254] 各種遞送系統(tǒng)是公知的并且可以用于給予本發(fā)明的藥物組合物，例如包封在脂質(zhì) 體中、微粒、微囊、能夠表達突變型病毒的重組細胞、受體介導的胞吞作用（參見例如Wu等， (1987) J. Biol. Chem. 262:4429-4432)。引入的方法包括但不限于皮內(nèi)、經(jīng)皮、肌內(nèi)、腹腔、靜 脈內(nèi)、皮下、鼻內(nèi)、硬膜外和口服途徑。所述組合物可以通過任意適宜的途徑給予，例如通過 輸注或推注、通過經(jīng)上皮或粘膜層（例如口腔粘膜、直腸和小腸粘膜等）的吸收和可以與其 他生物活性劑一起給予。施用可以是全身性的或局部的。
[0255] 所述藥物組合物還可以在囊泡中遞送，特別是脂質(zhì)體中（參見例如Langer(1990) Science 249:1527-1533)。
[0256] 在某些情況下，所述藥物組合物可以在控釋系統(tǒng)中遞送。在一個實施方式中，可以 使用泵。在另一個實施方式中，可以使用多聚體材料。在又一個實施方式中，可以將控釋系 統(tǒng)置于所述組合物的靶點附近，以使得僅需要遞送全身劑量的一部分。
[0257] 可注射制劑可以包括用于靜脈內(nèi)、皮下、皮內(nèi)和肌內(nèi)注射，點滴輸注等的劑型。這 些可注射制劑可以通過公知的方法制備。例如，可以通過例如在常規(guī)用于注射劑的無菌水 性基質(zhì)或油性基質(zhì)中溶解、混懸或乳化上文所述的抗體或其鹽制備所述可注射制劑。作為 用于注射劑的水性基質(zhì)，例如有生理鹽水、含有葡萄糖和其他助劑的等張溶液等，可以將其 與適宜的增溶劑如醇（例如乙醇）、多元醇（例如丙二醇、聚乙二醇）、非離子表面活性劑 [例如聚山梨醇酯80、氫化蓖麻油的HC0-50(聚氧乙烯（50mol))加合物]等聯(lián)合使用。作 為油性基質(zhì)，使用例如芝麻油、大豆油等，可以將其與增溶劑如苯甲酸芐酯、芐醇等聯(lián)合使 用。因此，優(yōu)選地將所制備的注射劑填充至適宜的安瓿中。
[0258] 可以使用標準針頭和注射器皮下或靜脈內(nèi)遞送本發(fā)明的藥物組合物。此外，對于 皮下遞送，筆遞送裝置能夠容易地用于遞送本發(fā)明的藥物組合物。此類筆遞送裝置可以是 可重復使用的或一次性的。可重復使用的筆遞送裝置通常使用含有藥物組合物的可替換的 藥筒。一旦藥筒中的所有藥物組合物已經(jīng)施用并且所述藥筒是空的時，所述空的藥筒能夠 容易地被棄去并且被含有所述藥物組合物的新藥筒替換。然后可以重新使用所述藥物遞送 裝置。在一次性的藥物遞送裝置中，無可替換的藥筒。相反地，所述一次性筆遞送裝置在所 述裝置中的儲液槽中預充了所述藥物組合物。一旦所述藥物組合物的儲液槽變空，則將整 個裝置棄去。
[0259] 多種可重復使用的筆和自動注射器遞送裝置已應用于本發(fā)明藥物組合物的皮下 遞送。例如包括但不一定限于AUT0PEN?(歐文芒福德公司，伍德斯托克，UK)、DISETR0NIC? 筆（Disetronic 醫(yī)療系統(tǒng)，Burghdorf，瑞士）、HUMALOG MIX 75/25? 筆、HUMAL0G? 筆、 HUMLIN 70/30?筆（禮來公司，印第安納波利斯，IN)、N0V0PEN?I、II和III (諾和諾德，哥 本哈根，丹麥）、N0V0PEN JUNIOR? (諾和諾德，哥本哈根，丹麥）、BD?筆（Becton Dickinson 公司，富蘭克林湖，NJ)、OPTIPEN?、OPTIPEN PRO?、OPTIPENSTARLET? 和 OPTICLIK?(賽 諾菲-安萬特，法蘭克福，德國）僅列舉了其中的幾個。應用于本發(fā)明的藥物組合物皮下 遞送的一次性筆遞送裝置的例子包括但不一定限于S0L0STAR?筆（賽諾菲-安萬特）、 FLEXPEN? (諾和諾德）和KWIKPEN?(禮來）、SURECLICK?自動注射器（安進公司，千橡郡， CA)、PENLET?(Haselmeier，斯圖加特，德國）、EPIPEN(Dey, L. P.)和 HUMIRA? 筆（雅培實驗 室，雅培公園，IL)僅列舉了其中的幾個。
[0260] 有利地，將上文所述的供口服或胃腸外使用的藥物組合物制成在適于一劑量活性 成分的單位劑量中的劑量。在單位劑量中的此類劑量包括例如片劑、丸劑、膠囊、注射劑 (安瓿）、栓劑等。所含的前述抗體的量通常為約5至約500mg每單位劑量的劑型；特別 是在注射劑形式中，優(yōu)選的所含的前述抗體為約5至約lOOmg，在其他劑型中為約10至約 250mg〇
[0261] 抗體的治療用途
[0262] 由于其與Fel dl的相互作用，本發(fā)明的抗體對于治療個體暴露于貓、貓皮屑或含 有所述Fel dl蛋白的環(huán)境后的原發(fā)性反應，或者與所述過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀，如 眼部發(fā)癢、結(jié)膜炎、鼻炎、氣喘、呼吸困難，或者對于預防針對所述Fel dl過敏原的繼發(fā)反 應，包括更加嚴重的過敏性反應，或者對于減輕再次暴露于所述貓過敏原后的癥狀的嚴重 程度、持續(xù)時間和/或頻率是有用的。因此，可以預計本發(fā)明的抗體可以用作預防或治療。
[0263] 在又一個實施方式中，本發(fā)明的抗體用于制備藥物組合物，所述藥物組合物用于 治療患有對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物和/或Fel dl蛋白敏感的患者。在又一個實施方 式中，本發(fā)明的抗體用于制備藥物組合物，所述藥物組合物用于降低初次暴露于Fel dl的 嚴重程度，或者用于降低針對Fel dl的過敏反應的嚴重程度、持續(xù)時間和/或次數(shù)。在又 一個實施方式中，本發(fā)明的抗體用于作為治療貓過敏癥的任意其他藥劑的輔助療法，所述 任意其他藥劑包括皮質(zhì)類固醇、疫苗、過敏原特異性免疫療法（SIT)或者本領(lǐng)域技術(shù)人員 公知的任意其他姑息療法。
[0264] 聯(lián)合療法
[0265] 聯(lián)合療法可以包括本發(fā)明的抗-Fel dl抗體和與本發(fā)明的抗體或本發(fā)明的抗體的 生物活性片段聯(lián)用時可能是有利的任意附加治療劑。
[0266] 例如，可以使用第二種治療劑以輔助降低暴露于貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或 Fel dl，或者暴露于貓居住的環(huán)境后的過敏癥狀，如皮質(zhì)類固醇?？贵w也可以用于與其他療 法聯(lián)用，如特異性針對所述Fel dl過敏原的疫苗。所述附加的治療性活性組分可以在本發(fā) 明的抗-Fel dl抗體給予之前、同時或之后給予。對于本發(fā)明的目的而言，將此類給藥方案 認為是抗-Fel dl抗體與第二種治療性活性劑"聯(lián)合"給予。
[0267] 給藥方案
[0268] 根據(jù)本發(fā)明的某些實施方式，可以在一個規(guī)定的時間段內(nèi)多劑量給予對象一種或 多種抗-Fel dl抗體（抗體的組合）或雙特異性抗原結(jié)合分子。根據(jù)本發(fā)明這個方面的方 法包括順序給予對象多劑量的本發(fā)明的抗體、抗體的組合或雙特異性抗原結(jié)合分子。在本 申請中使用的"順序給予"指在不同的時間點給予對象各劑量的抗體、抗體的組合或雙特異 性抗原結(jié)合分子，例如在由預定的間隔（例如小時、天、周或月）分隔的不同天。本發(fā)明包 括方法，所述方法包括順序給予所述患者單一初始劑量的抗體、抗體的組合或雙特異性抗 原結(jié)合分子，隨后給予一個或多個第二劑量的所述抗體，任選地隨后給予一個或多個第三 劑量的所述抗體。
[0269] 術(shù)語"初始劑量"、"第二劑量"和"第三劑量"指按照時間順序給予本發(fā)明的抗體、 抗體的組合或雙特異性抗原集合分子。因此，所述"初始劑量"是在治療方案開始時給予的 劑量（也稱為"基線劑量；所述"第二劑量"是在初始劑量之后給予的劑量；和所述"第三 劑量"時在所述第二劑量之后給予的劑量。所述初始、第二和第三劑量可以均含有相同量的 抗體、抗體的組合或雙特異性抗原結(jié)合分子，但是在給藥頻率方面其通常可以是彼此不同 的。但是，在某些實施方式中，在初始、第二和/或第三劑量中所含的抗體、抗體的組合或雙 特異性抗原結(jié)合分子的量在治療過程中可以彼此有所不同（例如按需上調(diào)或下調(diào)）。在某 些實施方式中，在治療方案開始時給予兩個或多個（例如2、3、4或5個）劑量作為"負荷劑 量"，隨后降低頻率給予隨后的劑量（例如"維持劑量"）。
[0270] 在本發(fā)明的一個示例性實施方式中，在緊鄰的上一次劑量給藥后的1至26周（例 如 1、172、2、272、3、372、4、472、5、57 2、6、672、7、772、8、872、9、97 2、10、1072、11、1172、 12、1272、13、137 2、14、1472、5、1572、16、1672、17、177 2、18、1872、19、1972、20、2072、21、 21^^22,227223,2372,24,2472,25,25^^26,26 1/;或更多周）給予各第二和 / 或第三劑 量。在本申請中使用的短語"緊鄰的上一次劑量"指，在多次給藥的順序中，在所述順序中 的緊接的下一個劑量給藥之前給予患者的抗體、抗體的組合或雙特異性抗原結(jié)合分子的劑 量，在中間沒有插入劑量。
[0271] 根據(jù)本發(fā)明這一方面的方法可以包括給予患者任意次數(shù)的第二和/或第三劑量 的特異性地與Fel dl結(jié)合的抗體、抗體的組合或雙特異性抗原結(jié)合分子。例如，在某些實 施方式中，僅將單一的第二劑量給予所述患者。在其他實施方式中，將兩個或多個（例如2、 3、4、5、6、7、8或更多個）第二劑量給予所述患者。同樣地，在某些實施方式中，僅將單一的 第三劑量給予所述患者。在其他實施方式中，將兩個或多個（例如2、3、4、5、6、7、8或更多 個）第三劑量給予所述患者。
[0272] 在涉及多個第二劑量的實施方式中，各第二劑量可以以與其他第二劑量相同的頻 率給予。例如，各第二劑量可以在所述緊鄰的上一次劑量給予后1至2周給予患者。類似 地，在涉及多個第三劑量的實施方式中，各第三劑量可以以與其他第三劑量相同的頻率給 予。例如，各第三劑量可以在所述緊鄰的上一次劑量給予后2至4周給予患者?；蛘?，給予 患者的所述第二和/或第三劑量的頻率可以在治療方案的過程中改變。在治療過程中還可 以由醫(yī)師在臨床檢查后根據(jù)個體患者的需要調(diào)整給藥頻率。
[0273] 抗體的診斷用途
[0274] 本發(fā)明的抗-Fel dl抗體還可以用于檢測和/或測定樣品中的Fel dl，例如用于 診斷目的?？梢灶A計可通過使用任意一種或多種本發(fā)明的抗體通過測定Fel dl的存在情 況對認為是由Fel dl導致的過敏反應進行確證。針對Fel dl的示例性的診斷檢測可以包 括，例如，將來自患者的樣品與本發(fā)明的抗-Fel dl抗體接觸，其中所述抗-Fel dl抗體使 用可檢測的標記或報告分子標記，或者作為從患者樣品中選擇性地分離Fel dl蛋白的捕獲 配體使用?；蛘?，在診斷應用中可以將未經(jīng)標記的抗-Fel dl抗體與其本身是可檢測的標 記的第二抗體聯(lián)用。所述可檢測的標記或報告分子可以是放射性同位素，如3H、 14C、32P、35S 或125I ;熒光或化學發(fā)光部分如熒光素異硫氰酸酯或羅丹明；或者酶如堿性磷酸酶、β_半 乳糖苷酶、辣根過氧化物酶或熒光素酶。能夠用于檢測或測定樣品中的Fel dl的特異性的 示例性檢測包括酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)、放射性免疫測定（RIA)和熒光活化的細胞分 選（FACS)。
[0275] 能夠用于根據(jù)本發(fā)明的Fel dl診斷檢測的樣品包括從患者中獲得的任意組織或 液體樣品，在正?；虿±項l件下其中含有可檢測的量的Fel dl蛋白或其片段。通常地，首 先檢測來自健康的/無過敏性的患者（例如不存在與Fel dl的存在相關(guān)的敏感性的患者） 的特定樣品中的Fel dl的水平以建立Fel dl水平的基線或標準。然后將Fel dl的該基 線水平與在來自疑似對貓皮屑中的Fel dl敏感或存在與此狀況相關(guān)癥狀的個體的樣品中 測定的Fel dl水平進行比較。 實施例
[0276] 闡述下述實施例以便向本領(lǐng)域普通技術(shù)人員提供如何制備和使用本發(fā)明的方法 和組合物的完整公開和描述，并且其并非旨在限制發(fā)明人所認為的其發(fā)明的范圍。已作出 努力以確保關(guān)于所使用數(shù)字的準確性（例如數(shù)量、溫度等），但是應對一些實驗誤差和偏差 予以考慮。除非另外指出，份數(shù)以重量份計、分子量是平均分子量、溫度是攝氏度和壓力是 處于或接近大氣壓。
[0277] 實施例1 :針對Fel dl的人源抗體的生成
[0278] 包含下述中任意一個的免疫原可以用于生成針對Fel dl的抗體。在某些實施 方式中，本發(fā)明的抗體來自使用初始免疫原免疫的小鼠，如全長天然Fel dUnFel dl)，其 可以商購獲得（例如來自室內(nèi)生物技術(shù)公司（Indoor Biotechnologies), #LTN-FD1_1)， 或通過多步柱層析從貓毛或皮屑中分離（參見例如Chapman MD等，（1988)，J. Immunol. 140:812-818)，或者其可以重組生產(chǎn)（對于Fel dl鏈1的全長氨基酸序列參見 GenBank登錄號 P30438 或ΝΡ_001041618· 1(也稱為鏈A或FELD1A;亦參見 SEQ ID N0:392) 和對于Fel dl鏈2的全長氨基酸序列參見GenBank登錄號P30440或NP_001041619. 1 (也 稱為鏈B或FELD B ;亦參見SEQ ID NO:393))，或者所述Fel dl蛋白的鏈1或鏈2的片段， 或鏈1和鏈2的片段，隨后使用第二免疫原或使用所述天然蛋白具有免疫活性的片段免疫。 可以僅使用鏈1蛋白或僅使用鏈2蛋白，或者使用鏈1和鏈2蛋白兩者順序或同時給予對 動物進行免疫?？梢允褂面?和鏈2的部分，通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的不同連接或間隔 的策略制備不同的構(gòu)建體。這些構(gòu)建體可以單獨或在各種組合中使用以便在體內(nèi)激發(fā)抗體 應答。例如，可以使用重組的Fel dl構(gòu)建體如SEQ ID勵：385、394、395、396或397中示例 的那些或其片段作為免疫原。
[0279] 在某些實施方式中，本發(fā)明的抗體來自使用初始免疫原免疫的小鼠，如天然Fel dl具有生物活性的和/或免疫原性的片段，或編碼其活性片段的DNA。所述片段可以來源 于Feldl鏈1和/或鏈2的N-末端或C-末端結(jié)構(gòu)域。
[0280] 在某些實施方式中，可以通過直接將Fel dl的兩條鏈融合制備重組生產(chǎn)的Fel dl 免疫原，如Kaiser等所述，以生產(chǎn)與天然Fel dl具有相似折疊類型的融合產(chǎn)物（Kaiser, L. 等，（2003)，J. Biol. Chem. 278 (39): 37730-37735)。在某些實施方式中，所述免疫原可以是 融合蛋白，如在SEQ ID勵：385、394、395、396或397所示的構(gòu)建體中顯示的，隨后使用第二 免疫原或天然的或重組產(chǎn)生的Fel dl的具有免疫活性的片段進行免疫。
[0281] 在某些實施方式中，在本申請所述的研究中使用的重組Fel dl蛋白構(gòu)建體包括： i)由Fel dlB鏈（鏈2)和Fel dlA鏈（鏈1)連接形成的連續(xù)的、串聯(lián)融合（在N-末端具 有Fel dlB鏈）或者ii)在N-末端具有Fel dlA鏈，后接柔性接頭[(Gly4Ser)3]，后接Fel dlB的連續(xù)的、串聯(lián)融合。這些構(gòu)建體還可以包括如下文所示的C-末端標簽（my C-myC-His6 或小鼠 IgG2a Fe區(qū)）。在中國倉鼠卵巢（CHO)細胞中表達該蛋白。用于促進在CHO細胞中 表達的外源性信號序列未包括在序列表中。
[0282] 在某些實施方式中，所述免疫原可以是包含下述中的任意一個或多個的融合蛋 白：i)通過C末端直接與Fel dl鏈1氨基酸殘基23-92(參見GenBank登錄號P30438,亦參 見SEQ ID N0:392)的N末端融合的Fel dl鏈2的氨基酸氨基18-108(參見GenBank登錄號 P30440,亦參見SEQ ID NO: 393) ;ii)通過C末端直接與Fel dl鏈2氨基酸殘基18-109(參 見GenBank登錄號P30440,亦參見SEQ ID NO: 393)的N末端融合的Fel dl鏈1的氨基酸 氨基23-92(參見GenBank登錄號P30438,亦參見SEQ ID N0:392);iii)通過C末端直接 與Fel dl鏈1的氨基酸殘基19-88 (參見GenBank登錄號NP_001041618. 1)的N末端融合 的Fel dl鏈2的氨基酸殘基18-109(參見Genbank登錄號NP_001041619. 1)，例如如SEQ ID NO: 394or 396所示的構(gòu)建體；iv)通過C末端與Fel dl鏈2的氨基酸殘基18-109(參 見GenBank登錄號NP_001041619. 1)的N末端融合的Fel dl鏈1的氨基酸殘基19-88 (參 見GenBank登錄號NP_001041618.1)。亦參見SEQ ID N0:395。在某些實施方式中，所述融 合蛋白可以在所述構(gòu)建體的C末端具有標簽，如myc-myc-六聚組氨酸標簽（對于此類構(gòu)建 體參見SEQ ID NO :385、396或397)。在相關(guān)的實施方式中，所述融合蛋白可以具有偶聯(lián)于 所述構(gòu)建體的C末端的小鼠抗體Fc區(qū)（對于此類構(gòu)建體參見SEQ ID NO :394或395)。在 某些實施方式中，鏈1和2通過本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的接頭偶聯(lián)，例如（G4S) 3 (對于此類構(gòu) 建體參見 SEQ ID NO : 395 和 397)。
[0283] 在某些實施方式中，可以使用上文所述區(qū)域的片段、或從本申請所述區(qū)域的N或C 末端之一或兩端延伸出指定區(qū)域約5至約20個氨基酸殘基的肽制備特異性地與Fel dl結(jié) 合的抗體。某些實施方式中，上文所述區(qū)域或其片段的任意組合可以用于制備Fel dl特異 性抗體。在某些實施方式中，上文所述Fel dl區(qū)域中的任意一個或多個或其片段可以用于 制備單特異性、雙特異性或多特異性抗體。
[0284] 如上文所述的用于作為免疫原的全長蛋白或其片段直接與刺激免疫應答的佐劑 一起給予VELOCIMMUNF/小鼠，所述小鼠包含編碼人源免疫球蛋白重鏈和κ輕鏈可變 區(qū)的DNA。通過Fel dl特異性免疫測定監(jiān)測抗體的免疫應答。當達到所需的免疫應答時， 收集脾細胞并與小鼠骨髓瘤細胞融合，以保持其活力并形成雜交瘤細胞系。篩選并選擇所 述雜交瘤細胞系以鑒定產(chǎn)生Fel dl特異性抗體的細胞系。使用這種技術(shù)以及上文所述的 不同免疫原獲得了若干抗-Fel dl的嵌合抗體（即具有人源可變結(jié)構(gòu)域和小鼠恒定結(jié)構(gòu)域 的抗體）；將使用這種方法生成的某些示例性抗體命名為H1M1230N、H1M1234N、H1M1241N、 H2M1233N、H2M1236N、H2M1237N 和 H2M1242N。
[0285] 還直接從未與骨髓瘤細胞融合的抗原陽性B細胞中分離抗-Fel dl抗體，如 U. S. 2007/0280945A1中所述。使用這種方法，獲得了若干全人源抗-Fel dl抗體（即具有 人源可變結(jié)構(gòu)域和人源恒定結(jié)構(gòu)域的抗體）；將使用這種方法生成的示例性抗體命名為如 下：H4H2574P、H4H2590S、H4H2592B、H4H2594S、H4H2597P、H4H2606B、H4H2607B、H4H2608B、 H4H2636P、H4H2645P、H4H2793P、H4H2797P 和 H4H2864P。
[0286] 在下述實施例中對根據(jù)該實施例的方法生成的示例性抗體的生物學性質(zhì)進行詳 細描述。
[0287] 實施例2 :重鏈和輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列
[0288] 表1中列出了選定的特異性地針對Fel dl的抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)氨基酸 序列對及其相應的抗體標識。本申請中涉及的抗體通常根據(jù)下述命名法：Fc前綴（例如 "財!1"、"!1說、"!121〇，后接數(shù)字標識（例如如表1中所示的"1232"），后接叩"或1"后 綴。因此，根據(jù)這種命名法，可以將抗體稱為例如"H1M1232N"。在本申請抗體命名中使用的 H4H、H1M和H2M前綴標識抗體的特定Fc區(qū)。例如，"H2M"抗體具有小鼠 IgG2Fc，而"H4H"抗 體具有人源IgG4Fc。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將理解，可以將HlM或H2M抗體轉(zhuǎn)化為H4H抗 體，反之亦然，但是在任何情況下，以表1中的數(shù)字標識表示的所述可變結(jié)構(gòu)域（包括CDR) 將仍保持不變。具有相同數(shù)字抗體命名但不同字母后綴N、B、S或P的抗體指重鏈和輕鏈具 有相同的CDR序列但是在所述CDR序列以外的區(qū)域中（即在框架區(qū)中）具有序列差異的抗 體。因此，特定抗體的N、B、S和P變體在其重鏈和輕鏈可變區(qū)中具有相同的CDR序列但是 在其框架區(qū)中彼此存在差異。
[0289] 表 1
[0290]
【權(quán)利要求】
1. 一種分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段與Fel dl特異性地結(jié)合，其中所述抗體或其抗原結(jié)合片段是不同于IgA同種型的同種型。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗 原結(jié)合片段具有選自下組的同種型：IgGl、IgG2和IgG4。
3. 根據(jù)要求1或2所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中通過表面等 離子體共振測得所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段與Fel dl特異性結(jié)合的KD等于或小于 1(T6M。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1-3中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其 中所述抗體包含三個重鏈⑶R (HCDR1、HCDR2和HCDR3)，所述重鏈⑶R包含在任意一個選自 下組的重鏈可變區(qū)（HCVR)序列中：SEQ ID N0:2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、 178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354 和 370 ;和三個輕鏈 CDR(LCDR1、 IXDR2和IXDR3)，所述輕鏈⑶R包含在任意一個選自下組的輕鏈可變區(qū)（LCVR)序列中：SEQ ID NO :10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、 314、330、346、362 和 378。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-4中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的氨基酸序列的HCVR:SEQ ID N0:2、18、34、 50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354和 370。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-5中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含具有選自下組的氨基酸序列的LCVR:SEQ ID N0:10、26、42、 58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1-6中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含：（a)HCVR，所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、 322、338、354和370;和（b)LCVR，所述具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:10、26、42、 58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1-7中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所 述抗體或其抗原結(jié)合片段包含： (a) HCDRl結(jié)構(gòu)域，所述HCDR1結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :4、20、 36、52、68、84、100、116、132、148、164、180、196、212、228、244、260、276、292、308、324、340、 356 和 372 ; (b) HCDR2結(jié)構(gòu)域，所述HCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:6、22、 38、54、70、86、102、118、134、150、166、182、198、214、230、246、262、278、294、310、326、342、 358 和 374 ; (c) HCDR3結(jié)構(gòu)域，所述HCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:8、24、 40、56、72、88、104、120、136、152、168、184、200、216、232、248、264、280、296、312、328、344、 360 和 376 ; (d) IXDRl結(jié)構(gòu)域，所述IXDR1結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:12、28、 44、60、76、92、108、124、140、156、172、188、204、220、236、252、268、284、300、316、332、348、 364 和 380 ; (e) LCDR2結(jié)構(gòu)域，所述LCDR2結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :14、30、 46、62、78、94、110、126、142、158、174、190、206、222、238、254、270、286、302、318、334、350、 366和382 ;以及 (f) LCDR3結(jié)構(gòu)域，所述LCDR3結(jié)構(gòu)域具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:16、32、 48、64、80、96、112、128、144、160、176、192、208、224、240、256、272、288、304、320、336、352、 368 和 384。
9. 根據(jù)權(quán)利要求1-8中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 所述抗體或其抗原結(jié)合片段包含HCVR/LCVR氨基酸序列對，所述氨基酸序列對選自下組： SEQ ID NO :2/10、18/26、34/42、50/58、66/74、82/90、98/106、114/122、130/138、146/154、 162/170、178/186、194/202、210/218、226/234、242/250、258/266、274/282、290/298、 306/314、322/330、338/346、354/362 和 370/378。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1至9中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段， 其中所述抗體或其片段與選自下組的至少一個氨基酸序列相互作用：SEQ ID N0:396的范 圍從約位置15至約位置24的氨基酸殘基；SEQ ID N0:396的范圍從約位置85至約位置103 的氨基酸殘基；SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置104的氨基酸殘基；和SEQ ID NO:396的范圍從約位置113至約位置127的氨基酸殘基。
11. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID NO:396的范圍從約位置15至約位置24的氨基酸殘基相互作用。
12. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置103的氨基酸殘基相互作用。
13. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID NO:396的范圍從約位置85至約位置104的氨基酸殘基相互作用。
14. 根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID NO:396的范圍從約位置113至約位置127的氨基酸殘基相互作用。
15. 根據(jù)權(quán)利要求1至10中任意一項所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片 段，其中所述抗體或其片段與選自下組的至少一個氨基酸序列相互作用：SEQ ID NO :402、 403、404 和 412。
16. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID N0:402相互作用。
17. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID N0:403相互作用。
18. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID N0:404相互作用。
19. 根據(jù)權(quán)利要求15所述的分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述抗體 或其片段與SEQ ID N0:412相互作用。
20. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-19中任意一 項所述的一種或多種分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或抗原結(jié)合片段 特異性地與Fel dl結(jié)合，以及一種或多種藥學上可接受的賦形劑。
21. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含治療有效量的根據(jù)權(quán)利要求1-19中任意一 項所述的特異性地與Fel dl結(jié)合的第一分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，和特異 性地與Fel dl結(jié)合的第二分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，以及一種或多種藥學 上可接受的賦形劑。
22. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含具有如SEQ ID NO: 18所示的氨基酸序列的HCVR和具有如SEQ ID NO: 26所示的氨基酸 序列的LCVR ;并且 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR，所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID勵：66、130、162、306、322和370; 和LCVR，所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:74、138、170、314、330和378。
23. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含具有如SEQ ID NO: 242所示的氨基酸序列的HCVR和具有如SEQ ID NO: 250所示的氨基 酸序列的LCVR ;并且 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含110^，所述110^具有選自下組的氨基酸序列：3￡〇10勵：306和322;和10^，所述10^ 具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO :314和330。
24. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :18/26 ;并且 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含選自下組的 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：66/74、130/138、162/170、306/314、322/330 和 370/378。
25. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :18/26 ;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :130/138。
26. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :18/26 ;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :322/330。
27. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a)所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :18/26 ;和 (b)所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID N0:306/314。
28. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID N0:18/26;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :370/378。
29. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :242/250 ;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含選自下組的HCVR/LCVR氨基酸序列對：SEQ ID NO :306/314和322/330。
30. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :242/250 ;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :306/314。
31. 根據(jù)權(quán)利要求21所述的藥物組合物，其中： (a) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第一人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :242/250 ;和 (b) 所述特異性地與Fel dl結(jié)合的分離的第二人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段包 含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對：SEQ ID NO :322/330。
32. 根據(jù)權(quán)利要求20所述的藥物組合物，所述組合物包含特異性地與Fel dl結(jié)合的 四種分離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段，其中所述人源抗體或其抗原結(jié)合片段包含 HCVR/LCVR 氨基酸序列對 SEQ ID NO :18/26、66/74、130/138 和 162/170。
33. -種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段與含有重鏈可變 區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的CDR的抗體或其抗原結(jié)合片段 競爭與Fel dl的特異性的結(jié)合，其中所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID NO: 2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、 338、354和370,其中所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:10、26、42、58、74、 90、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378。
34. -種分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或其抗原結(jié)合片段與含有重鏈可變 區(qū)（HCVR)的互補性決定區(qū)（CDR)和輕鏈可變區(qū)（LCVR)的CDR的抗體或其抗原結(jié)合片段結(jié) 合Fel dl上的相同表位，其中所述HCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:2、18、34、 50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354 和370,其中所述LCVR具有選自下組的氨基酸序列：SEQ ID N0:10、26、42、58、74、90、106、 122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362 和 378。
35. -種核酸分子，所述核酸分子編碼與Fel dl特異性地結(jié)合的根據(jù)權(quán)利要求1-19中 或權(quán)利要求33-34中任意一項所述的人源單克隆抗體或其片段。
36. -種表達載體，所述表達載體包含根據(jù)權(quán)利要求35所述的編碼與Fel dl特異性地 結(jié)合的人源單克隆抗體或其片段的核酸分子。
37. -種宿主細胞，所述宿主細胞含有根據(jù)權(quán)利要求36所述的表達載體。
38. -種與Fel dl特異性地結(jié)合的雙特異性抗原結(jié)合分子，，所述雙特異性抗原結(jié)合 分子包含第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO:370所示的 HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 378所示的LCVR氨基酸序列，以及第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域， 所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 18所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO:378 所示的LCVR氨基酸序列。
39. 根據(jù)權(quán)利要求38所述的雙特異性抗原結(jié)合分子，其中所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域 包含分別由SEQ ID N0s:372、374和376所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū) (HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO :380、382和384所示的氨基酸序列組成的 三個輕鏈互補性決定區(qū)（IXDRUIXDR2和IXDR3);以及其中所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含 分別由SEQ ID NO :20、22和24所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、 HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO :380、382和384所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈 互補性決定區(qū)（LCDR1、LCDR2和LCDR3)。
40. -種與Fel dl特異性地結(jié)合的雙特異性抗原結(jié)合分子，所述雙特異性抗原結(jié)合分 子包含第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO:306所示的HCVR 氨基酸序列和如SEQ ID NO: 314所示的LCVR氨基酸序列，及第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域，所述第 二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含如SEQ ID NO: 18所示的HCVR氨基酸序列和如SEQ ID NO: 314所示 的LCVR氨基酸序列。
41. 根據(jù)權(quán)利要求40所述的雙特異性抗原結(jié)合分子，其中所述第一抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域 包含分別由SEQ ID NO :308、310和312所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū) (HCDR1、HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO :316、318和320所示的氨基酸序列組成的 三個輕鏈互補性決定區(qū)（IXDRUIXDR2和IXDR3);以及其中所述第二抗原結(jié)合結(jié)構(gòu)域包含 分別由SEQ ID N0:20、22和24所示的氨基酸序列組成的三個重鏈互補性決定區(qū)（HCDR1、 HCDR2和HCDR3)，和分別由SEQ ID NO :316、318和320所示的氨基酸序列組成的三個輕鏈 互補性決定區(qū)（LCDR1、LCDR2和LCDR3)。
42. -種特異性針對Fel dl的分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或抗原結(jié)合片 段與權(quán)利要求38至41中任意一項所述的雙特異性抗原結(jié)合分子競爭與Fel dl的結(jié)合。
43. -種特異性針對Fel dl的分離的抗體或其抗原結(jié)合片段，所述抗體或抗原結(jié)合片 段與權(quán)利要求38至41中任意一項所述的雙特異性抗原結(jié)合分子結(jié)合Fel dl上的相同表 位。
44. 根據(jù)權(quán)利要求42或43所述的分離的抗體，其中所述抗體是單特異性抗體或雙特異 性抗體。
45. -種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求38至41中任意一項所述的雙特異 性抗原結(jié)合分子和藥學上可接受的載體或稀釋劑。
46. -種治療對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應 的患者的方法，或者治療與對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生 過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥的方法，所述方法包括向有需要的患者給予有效量 的與Fel dl特異性結(jié)合的根據(jù)權(quán)利要求1-19或33-34中任意一項所述的一種或多種分 離的人源單克隆抗體或其抗原結(jié)合片段；或者根據(jù)權(quán)利要求20-32中任意一項所述的含有 有效量的與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種分離的人源單克隆抗體或其片段的藥物組 合物；或有效量的根據(jù)權(quán)利要求38-41中任意一項所述的一種或多種雙特異性抗原結(jié)合分 子；或者含有有效量的根據(jù)權(quán)利要求38-41中任意一項所述的一種或多種雙特異性抗原結(jié) 合分子的藥物組合物，其中在給予與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種所述分離的人源單 克隆抗體或其片段后，或給予與Fel dl特異性地結(jié)合的一種或多種所述雙特異性抗原結(jié)合 分子后，或給予含有任意一種或多種前述抗體或雙特異性結(jié)合分子的組合物后，針對貓、貓 皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應被阻止，或其嚴重程 度和/或持續(xù)時間降低，或者與針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏 感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或并發(fā)癥被阻止或緩解，或者針對貓、貓皮屑、貓 毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應的頻率和/或持續(xù)時間或嚴 重程度降低。
47. 根據(jù)權(quán)利要求46所述的方法，所述方法還包括給予有效量的第二治療劑用于減輕 針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白產(chǎn)生的過敏反應。
48. 根據(jù)權(quán)利要求47所述的方法，其中所述第二治療劑選自下組：皮質(zhì)類固醇、支氣管 擴張劑、抗組胺劑、腎上腺素、減充血劑、另一種針對Fel dl的不同抗體和肽疫苗。
49. 根據(jù)權(quán)利要求46至48中任意一項所述的方法，其中所述治療使得患者在與貓、貓 皮屑、貓毛或其提取物或者Fel dl蛋白接觸后產(chǎn)生的過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、過敏性哮 喘或過敏性反應減輕。
50. 根據(jù)權(quán)利要求20-32或45中任意一項所述的藥物組合物用于治療針對貓、貓皮 屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應的患者，或者用于治療與針 對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少 一種癥狀或并發(fā)癥的用途，其中所述針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白 的敏感或產(chǎn)生的過敏反應被阻止，或其嚴重程度和/或持續(xù)時間降低，或者與針對貓、貓皮 屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的至少一種癥狀或 并發(fā)癥被阻止或緩解，或者針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn) 生過敏反應的頻率和/或持續(xù)時間或嚴重程度降低。
51. 根據(jù)權(quán)利要求20-32或45中任意一項所述的藥物組合物用于制備用于治療針對 貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白敏感或產(chǎn)生過敏反應的患者，或者用于治 療與針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān) 的至少一種癥狀或并發(fā)癥的藥物的用途，其中所述針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針 對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生過敏的反應被阻止，或其嚴重程度和/或持續(xù)時間降低，或者 與針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應相關(guān)的 至少一種癥狀或并發(fā)癥被阻止或緩解，或者針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白的敏感或產(chǎn)生的過敏反應的頻率和/或持續(xù)時間或嚴重程度降低。
52. 根據(jù)權(quán)利要求20-32或45中任意一項所述的藥物組合物的用途，其中所述藥物組 合物與第二治療劑聯(lián)用用于減輕針對貓、貓皮屑、貓毛或其提取物或者針對Fel dl蛋白產(chǎn) 生的過敏反應。
53.根據(jù)權(quán)利要求52所述的藥物組合物的用途，其中所述第二治療劑選自皮質(zhì)類固 醇、支氣管擴張劑、抗組胺劑、腎上腺素、減充血劑、另一種針對Fel dl的不同抗體和肽疫 苗。
【文檔編號】C07K16/18GK104411719SQ201380035000
【公開日】2015年3月11日 申請日期:2013年5月2日 優(yōu)先權(quán)日:2012年5月3日
【發(fā)明者】J·歐蘭果, A·J·莫菲 申請人:瑞澤恩制藥公司