專(zhuān)利名稱(chēng)：一種羥基紅花黃色素a的制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及ー種羥基紅花黃色素A的制備方法和應(yīng)用，具體地說(shuō)，涉及從中藥材紅花中提取羥基紅花黃色素A的制備方法。屬于天然藥物化學(xué)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
紅花為菊科紅花屬植物紅花的干燥花，具有活血止痛的功效。紅花活血的有效成分主要集中在水溶性的紅花黃色素。紅花黃色素是三種水溶性成分的混合物，即羥基紅花黃色素A、羥基紅花黃色素B和羥基紅花黃色素C。其中，羥基紅花黃色素A是含量最高的，而且是紅花藥理功效的最有效水溶性成分。

現(xiàn)有技術(shù)中，關(guān)于羥基紅花黃色素A的藥理作用、臨床藥物制劑已有很多報(bào)道。從紅花藥材中提取、分離和純化羥基紅花黃色素A的方法，也有很多報(bào)道。CN1475272公開(kāi)了紅花經(jīng)水提取、柱層析分離、醇沉淀、再經(jīng)柱層析分離、超濾膜除菌和冷凍干燥步驟，制備得到羥基紅花黃色素A干粉。該方法雖然保證了羥基紅花黃色素A的純度，但采用醇沉エ藝，導(dǎo)致羥基紅花黃色素A流失大，最終制備得到羥基紅花黃色素A的收率很低，不到2%，不利于エ業(yè)化生產(chǎn)，エ藝無(wú)生產(chǎn)實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。CN101195647A公開(kāi)了羥基紅花黃色素A的制備方法，藥材紅花經(jīng)水煮提取、大孔吸附樹(shù)脂柱層析分離、葡聚糖凝膠柱層析分離和微孔濾膜過(guò)后，噴霧干燥制得羥基紅花黃色素A干粉。該方法生產(chǎn)羥基紅花黃色素A的純度和收率，整體上而言，比之前現(xiàn)有技術(shù)均大大提高。然而，現(xiàn)有技術(shù)從紅花中生產(chǎn)羥基紅花黃色素A的方法，羥基紅花黃色素A的收率還是不夠理想，其不利于紅花藥材的充分利用，以及造成羥基紅花黃色素A在生產(chǎn)エ藝中被大量流失。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種高純度、高收率的從紅花中提取、分離和純化羥基紅花黃色素A的方法。為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明技術(shù)方案如下本發(fā)明提供了一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其包括紅花藥材的提取、大孔樹(shù)脂分離、葡聚糖凝膠層析分離和超濾的步驟，其特征在于所述的提取是紅花藥材以水為提取溶劑，于40 60°C超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取40-60分鐘；所述的大孔樹(shù)脂分離是用大孔吸附樹(shù)脂HZ801 ；所述的葡聚糖凝膠層析分離是用葡聚糖凝膠LH-20 ；所述的超濾是用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜。上述所述的方法，其中所述的大孔樹(shù)脂分離，大孔吸附樹(shù)脂柱的柱內(nèi)徑與柱高的比值為I : 8 15。上述所述的方法，其中所述的大孔樹(shù)脂分離，以純化水為洗脫劑，洗脫流速10 30ml/mino上述所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為I : 5 10.上述所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，以純化水為洗脫劑，洗脫流速控制線性流速為I lOcm/h。作為優(yōu)選，本發(fā)明提供了一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其特征在于包括如下步驟(I)提取取紅花藥材，粉碎，加水10 15倍，于40 60°C超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取40-60分鐘，得到紅花水提取物；(2)大孔吸附樹(shù)脂分離步驟⑴得到的紅花水提取物用大孔吸附樹(shù)脂HZ801柱分離，大孔吸附樹(shù)脂柱的柱內(nèi)徑與柱高的比值為I : 8 15，以純化水為洗脫劑，洗脫流速10 30ml/min，收集洗脫液，減壓濃縮，得紅花黃色素濃縮液粗品；
(3)葡聚糖凝膠層析分離步驟(2)得到的紅花黃色素濃縮液粗品過(guò)濾或離心后用S印hadex LH-20葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為I : 5 10，以純化水為洗脫齊IJ，洗脫流速控制線性流速為I lOcm/h，收集含羥基紅花黃色素A洗脫液，減壓濃縮得濃縮液；(4)超濾步驟(3)所得濃縮液經(jīng)過(guò)濾或離心后采用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜進(jìn)行超濾得到超濾液；(5)凍干步驟(4)所得超濾液經(jīng)冷凍干燥，即得羥基紅花黃色素A。本發(fā)明通過(guò)對(duì)紅花藥材提取羥基紅花黃色素A的大量提取エ藝研究，令人意外地發(fā)現(xiàn)，采用中藥材超聲波提取技術(shù)，在一定的溫度和超聲波頻率下，即于40 60°C超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取40-60分鐘，能從紅花藥材中最大限度地提取出羥基紅花黃色素A，而且提取時(shí)間短，提取出的雜質(zhì)成分少，不僅提取效率高，而且有利于后續(xù)的分離和純化步驟，大大提高羥基紅花黃色素A的收率和得率水平。表I:超聲頻率對(duì)比表
粉末(過(guò)三號(hào)篩)40で頻率25KHZ40KHZ60KHZ
提取率82.5%90.1%84.2%試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取可以提高提取率。表2:溫度對(duì)比表
權(quán)利要求
1.一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其包括紅花藥材的提取、大孔樹(shù)脂分離、葡聚糖凝膠層析分離和超濾的步驟，其特征在于 所述的提取是紅花藥材以水為提取溶劑，于40 60°C超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取40-60分鐘； 所述的大孔樹(shù)脂分離是用大孔吸附樹(shù)脂HZ801 ； 所述的葡聚糖凝膠層析分離是用葡聚糖凝膠LH-20 ； 所述的超濾是用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的方法，其中所述的大孔樹(shù)脂分離，大孔吸附樹(shù)脂柱的柱內(nèi)徑與柱高的比值為I : 8 15。
3.根據(jù)權(quán)利要求1-2所述的方法，其中所述的大孔樹(shù)脂分離，以純化水為洗脫劑，洗脫流速 10 30ml/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為I : 5 10。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，以純化水為洗脫齊U，洗脫流速控制線性流速為I 10cm/h。
6.一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其特征在于包括如下步驟 (1)提取取紅花藥材，粉碎，加水10 15倍，于40 60°C超聲波頻率40KHZ進(jìn)行超聲波提取40-60分鐘，得到紅花水提取物； (2)大孔吸附樹(shù)脂分離步驟(I)得到的紅花水提取物用大孔吸附樹(shù)脂HZ801柱分離，大孔吸附樹(shù)脂柱的柱內(nèi)徑與柱高的比值為I : 8 15，以純化水為洗脫劑，洗脫流速10 30ml/min,收集洗脫液，減壓濃縮，得紅花黃色素濃縮液粗品； (3)葡聚糖凝膠層析分離步驟(2)得到的紅花黃色素濃縮液粗品過(guò)濾或離心后用Sephadex LH-20葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為I : 5 10，以純化水為洗脫劑，洗脫流速控制線性流速為I 10cm/h，收集含羥基紅花黃色素A洗脫液，減壓濃縮得濃縮液； (4)超濾步驟(3)所得濃縮液經(jīng)過(guò)濾或離心后采用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜進(jìn)行超濾得到超濾液； (5)凍干步驟(4)所得超濾液經(jīng)冷凍干燥，即得羥基紅花黃色素A。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)一種高收率、高純度的從中藥材紅花中提取、分離和純化羥基紅花黃色素A的制備方法，其包括紅花藥材的超聲波水提取、HZ801型大孔吸附樹(shù)脂分離、LH-20型葡聚糖凝膠層析分離、超濾和冷凍干燥的步驟，制得羥基紅花黃色素A干粉，產(chǎn)品含量達(dá)99.8％，羥基紅花黃色素A收率達(dá)到62.7％。
文檔編號(hào)C07D309/10GK102702150SQ20121020226
公開(kāi)日2012年10月3日 申請(qǐng)日期2012年6月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年6月19日
發(fā)明者劉曉波, 盧敏, 葉鳳起, 林德君, 邵圣省 申請(qǐng)人:浙江永寧藥業(yè)股份有限公司